一种罗汉果组培苗壮苗生根的方法
【专利摘要】本发明公开了一种罗汉果组培苗壮苗生根的方法，涉及农业繁殖方法领域。该方法包括以下步骤：组培苗诱导培养、组培苗增殖继代培养、罗汉果组培苗壮苗生根培养、壮苗生根组培苗炼苗并移栽成活。本发明采用的壮苗生根培养基配方具有较好的协同作用，很好达到壮苗生根的目的，达到移栽要求，外部环境适应性强，以提高移栽的成活率。本发明方法得到的组培苗粗壮、抗病性强、木质化程度高，定植移栽成活率达到98%以上。
【专利说明】一种罗汉果组培苗壮苗生根的方法 【技术领域】
[〇〇〇1] 本发明涉及农业繁殖方法领域，具体为罗汉果的繁殖方法领域，尤其涉及一种罗 汉果组培苗壮苗生根的方法。 【背景技术】
[0002] 罗汉果（Siraitia grosvenorii)是葫芦科多年生藤本植物。罗汉果具有清热润 肺、消暑生津、滑肠通便，清咽止咳之功效，也是饮料和调味佳果。罗汉果含有丰富的纯蛋 白、粗蛋白、多种维生素、果糖以及20多种微量元素，还具有抗衰老，防肺结核作用。
[0003] 罗汉果雌雄异株，幼苗期难分雌雄，因此生产上一直以压蔓法进行繁殖。压蔓繁殖 的罗汉果种薯苗，繁殖率低，易感染病虫。自1980年林荣等进行罗汉果组织培养获成功后， 用罗汉果的叶组织、带芽茎段、顶芽成功诱导丛生芽，培养成完整植株的研究陆续有报道。 罗汉果组培苗繁殖系数高，去病毒效果好，短期内可大量培育优良种苗。近几年推广种植罗 汉果组培苗，在生产上已显示巨大优势。在已开展的罗汉果组培苗研究中，主要报道了罗汉 果丛生芽诱导与培养条件，而对其壮苗生根培养还没有详细报道。
[0004] 罗汉果组培苗相对于传统压蔓繁殖的薯苗表现了繁殖系数高、不携带病生长势、 适应性较广等优势，但由于很多出现了组培苗纤细易脆易断，易失水萎蔫等现象，导致定植 成活率低、开花结果率低，因此造成经济损失，也增加了种植风险。组培苗生根质量直接决 定了后期移栽的成活率，因此亟需对罗汉果组培苗壮苗生根进行深入研究，进而提高组培 苗移栽成活率。
【发明内容】
[0005] 本发明的目的在于：针对上述存在的问题，提供一种罗汉果组培苗壮苗生根的方 法，解决罗汉果组培苗纤细易脆易断，易失水萎蔫等现象，提高罗汉果组培苗生根诱导率， 达到根多且粗壮，以提高开花结果率，并提高移栽定植成活率。
[0006] 本发明采用的技术方案为：
[0007] -种罗汉果组培苗壮苗生根的方法，包括以下步骤：
[0008] (1)组培苗诱导培养：取灭菌好的三年生以上罗汉果雌株的带芽茎段，接种在诱 导培养基上诱导产生丛生芽；
[〇〇〇9] (2)组培苗增殖继代培养：将丛生芽接种于增殖继代培养基中培养4次以上；
[〇〇1〇] (3)罗汉果组培苗壮苗生根培养：将无菌增殖继代培养组培苗的单芽茎段，接种 在壮苗生根培养基中进行培养，培养温度为22?26°C，光照强度1500?2000Lx，光照6? 10h/d，培养周期为40?50d，所述壮苗生根培养基为MS+NAA 0. 01?0. 05mg/L+活性炭 0· 2 ?0· 3g/L+ 蔗糖 2. 5 ?3%，pH 值为 5. 6 ;
[0011] (4)壮苗生根组培苗移栽炼苗：将长至5cm的无菌壮苗生根组培苗从培养室移入 温室大棚炼苗15?20d，然后取出炼苗后的组培苗并洗净，移栽至由泥炭土、煤渣和山泥组 成并按2:1:1的比例混合而成的栽培基质中，温度控制在25?28°C，移栽30d后统计移栽 成活率。
[0012] 步骤（1)中诱导培养基的配方为MS+BA 0· 7?0· 9mg/L+NAA 0· 08?0· 10mg/L+ 蔗糖2%，pH值为5. 8。
[0013] 步骤（2)中增值继代培养基为MS+BA 0· 2?0· 3mg/L+NAA 0· 05?0· 08mg/L+蔗 糖2%，pH值为5.7。
[0014] 综上所述，由于采用了上述技术方案，本发明的有益效果是：
[0015] 1、本发明采用的壮苗生根培养基配方具有协同作用，很好达到壮苗生根的目的， 达到移栽要求，外部环境适应性强，因此以提高移栽成活率。
[0016] 2、利用大棚代替培养室对组培苗进行壮苗生根培养，节约培养室的空间，组培苗 炼苗时接受自然光以及大棚温度的锻炼，有助于组培苗的木质化程度增高，已达到适应外 部温度和湿度，以提高移栽的成活率。
[0017] 3、本发明栽培基质富含有机质，结构疏松，具有良好的透气性，组培苗根部吸水 强，提高组培苗的移栽成活率。
[0018] 4、本发明方法得到的组培苗粗壮、抗病性强、木质化程度高，定植移栽成活率达到 98%以上。 【具体实施方式】
[0019] 下面结合【具体实施方式】对本发明的上述
【发明内容】
作进一步的详细描述，但不应将 此理解为本发明上述主题的范围仅限于下述实施例。
[0020] 实施例1
[0021] 一种罗汉果组培苗壮苗生根的方法，包括以下步骤：
[0022] (1)组培苗诱导培养：取灭菌好的三年生以上罗汉果雌株的带芽茎段，接种在诱 导培养基上诱导产生丛生芽，其中诱导培养基的配方为MS+BA 0. 8mg/L+NAA 0. 08mg/L+蔗 糖2%，pH值为5.8。
[0023] (2)组培苗增殖继代培养：将丛生芽接种于增殖继代培养基中培养4次以上，其中 增值继代培养基为MS+BA 0· 2mg/L+NAA 0· 06mg/L+蔗糖2%，pH值为5. 7 ;
[0024] (3)罗汉果组培苗壮苗生根培养：将无菌增殖继代培养组培苗的单芽茎段，接种 在壮苗生根培养基中进行培养，培养温度为25°C，光照强度2000Lx，光照10h/d，培养周 期为40d，所述壮苗生根培养基为MS+NAA 0. 03mg/L+活性炭0. 2g/L+蔗糖2. 5 %，pH值为 5. 6 ；
[0025] (4)壮苗生根组培苗炼苗并移栽成活：将长至5cm的无菌壮苗生根组培苗从培养 室移入温室大棚炼苗15d，然后取出炼苗后的组培苗并洗净，移栽至由泥炭土、煤渣和山泥 组成并按2:1:1的比例混合而成的栽培基质中，温度控制在25°C，移栽30d后统计移栽成活 率。
[0026] 实施例2
[0027] 一种罗汉果组培苗壮苗生根的方法，包括以下步骤：
[0028] (1)组培苗诱导培养：取灭菌好的三年生以上罗汉果雌株的带芽茎段，接种在诱 导培养基上诱导产生丛生芽，其中诱导培养基的配方为MS+BA 0. 8mg/L+NAA 0. 08mg/L+蔗 糖2%，pH值为5.8。
[0029] (2)组培苗增殖继代培养：将丛生芽接种于增殖继代培养基中培养4次以上，其中 增值继代培养基为MS+BA 0· 2mg/L+NAA 0· 06mg/L+蔗糖2%，pH值为5. 7 ;
[0030] (3)罗汉果组培苗壮苗生根培养：将无菌增殖继代培养组培苗的单芽茎段，接种 在壮苗生根培养基中进行培养，培养温度为25°C，光照强度2000Lx，光照10h/d，培养周 期为40d，所述壮苗生根培养基为MS+NAA 0. 01mg/L+活性炭0. 2g/L+蔗糖2. 5%，pH值为 5. 6 ；
[0031] (4)壮苗生根组培苗炼苗并移栽成活：将长至5cm的无菌壮苗生根组培苗从培养 室移入温室大棚炼苗15d，然后取出炼苗后的组培苗并洗净，移栽至由泥炭土、煤渣和山泥 组成并按2:1:1的比例混合而成的栽培基质中，温度控制在25°C，移栽30d后统计移栽成活 率。实施例3
[0032] 一种罗汉果组培苗壮苗生根的方法，包括以下步骤：
[0033] (1)组培苗诱导培养：取灭菌好的三年生以上罗汉果雌株的带芽茎段，接种在诱 导培养基上诱导产生丛生芽，其中诱导培养基的配方为MS+BA 0. 8mg/L+NAA 0. 08mg/L+蔗 糖2%，pH值为5.8。
[0034] (2)组培苗增殖继代培养：将丛生芽接种于增殖继代培养基中培养4次以上，其中 增值继代培养基为MS+BA 0· 2mg/L+NAA 0· 06mg/L+蔗糖2%，pH值为5. 7 ;
[0035] (3)罗汉果组培苗壮苗生根培养：将无菌增殖继代培养组培苗的单芽茎段，接种 在壮苗生根培养基中进行培养，培养温度为25°C，光照强度2000Lx，光照10h/d，培养周期 为40?50d，所述壮苗生根培养基为MS+NAA 0. 05mg/L+活性炭0. 2g/L+蔗糖2. 5 %，pH值 为 5.6 ;
[0036] (4)壮苗生根组培苗炼苗并移栽成活：将长至5cm的无菌壮苗生根组培苗从培养 室移入温室大棚炼苗15d，然后取出炼苗后的组培苗并洗净，移栽至由泥炭土、煤渣和山泥 组成并按2:1:1的比例混合而成的栽培基质中，温度控制在25 °C，移栽30d后统计移栽成活 率。
[0037] 实施例4
[0038] 本实施例4与上述实施例不同之处在于：步骤（3)中壮苗生根培养基的活性炭浓 度为0. 2g/L，其他条件不变。
[0039] 实施例5
[0040] 本实施例5与上述实施例不同之处在于：步骤（1)中诱导培养基的细胞分裂素 BA 的浓度为〇. 7或0. 9mg/L，其他条件不变。
[0041] 实施例5
[0042] 本实施例5与上述实施例不同之处在于：步骤（1)中诱导培养基的生长素 NAA的 浓度为〇. 09或0. 10mg/L，其他条件不变。
[0043] 实施例6
[0044] 本实施例6与上述实施例不同之处在于：步骤（2)增值继代培养基的细胞分裂素 BA的浓度为0. 3mg/L，其他条件不变。
[0045] 实施例7
[0046] 本实施例7与上述实施例不同之处在于：步骤（2)增值继代培养基的生长素 NAA 的浓度为〇. 05或0. 08mg/L，其他条件不变。
[0047] 现做以下处理，试验设7组壮苗生根培养基，每组30棵，并以实施例1?3的壮苗 生根培养基分别作为组1、组2、组3,组4 :MS+NAA 0. 08mg/L+活性炭0. 2g/L+蔗糖2. 5% ; 组 5: MS+NAA 0· 03mg/L+ 活性炭 0· 3g/L+ 蔗糖 2. 5 %;组 6 :MS+ 活性炭 0· 2g/L+ 蔗糖 2. 5 %; 组7 :MS+NAA 0. 03mg/L+蔗糖2. 5%，其他条件不变，以对罗汉果组培苗生根诱导，以上6组 组培苗同一天进行移栽，30d后统计移栽成活率，统计数据如表1 :
[〇〇48] 表1不同壮苗生根培养基对罗汉果组培苗的影响以及成活率
[0049]
【权利要求】
1. 一种罗汉果组培苗壮苗生根的方法，其特征在于包括以下步骤： (1) 组培苗诱导培养：取灭菌好的三年生以上罗汉果雌株的带芽茎段，接种在诱导培 养基上诱导产生丛生芽； (2) 组培苗增殖继代培养：将丛生芽接种于增殖继代培养基中培养4次以上； (3) 罗汉果组培苗壮苗生根培养：将无菌增殖继代培养组培苗的单芽茎段，接种在壮 苗生根培养基中进行培养，培养温度为22?26°C，光照强度1500?2000Lx，光照6?10h/ d，培养周期为40?50d，所述壮苗生根培养基为MS+NAA 0. 01?0. 05mg/L+活性炭0. 2? 〇· 3g/L+ 蔗糖 2. 5 ?3%，pH 值为 5. 6 ; (4) 壮苗生根组培苗炼苗并移栽成活：将长至5cm的无菌壮苗生根组培苗从培养室移 入温室大棚炼苗15?20d，然后取出炼苗后的组培苗并洗净，移栽至由泥炭土、煤渣和山泥 组成并按2:1:1的比例混合而成的栽培基质中，温度控制在25?28°C，移栽30d后统计移 栽成活率。
2. 如权利要求1所述的一种罗汉果组培苗壮苗生根的方法，其特征在于：步骤（1)中 诱导培养基的配方为MS+BA 0· 7?0· 9mg/L+NAA0. 08?0· 10mg/L+蔗糖2%，pH值为5. 8。
3. 如权利要求1所述的一种罗汉果组培苗壮苗生根的方法，其特征在于：步骤（2)中 增值继代培养基为MS+BA 0· 2?0· 3mg/L+NAA 0· 05?0· 08mg/L+蔗糖2%，pH值为5. 7。
【文档编号】A01H4/00GK104094846SQ201410307288
【公开日】2014年10月15日 申请日期:2014年6月30日 优先权日:2014年6月30日
【发明者】袁红娟 申请人:广西大学