一种提高澳洲坚果杂交授粉效率的方法
【专利摘要】本发明提供一种提高澳洲坚果杂交授粉效率的方法，属于果树杂交育种【技术领域】。它包括搭防虫网、采集花粉和人工授粉三大步骤。本发明根据澳洲坚果大部分品种自交亲和性程度低的特性，利用网室可对大量花序进行授粉，以满足大规模杂交育种的需求，免去常规杂交方法中去雄、采集花粉、套袋等复杂程序，能节省用工，避免了对花朵自然结构的损伤。本发明操作简单，省时省力，不损伤花朵的自然结构，杂交授粉成功率高。本发明对澳洲坚果杂交育种的关键步骤进行优化，获得优化的技术方法体系，提高澳洲坚果杂交育种效率，同时降低了澳洲坚果杂交育种的成本。
【专利说明】一种提高澳洲坚果杂交授粉效率的方法
【技术领域】
[0001]本发明属于果树杂交育种【技术领域】，具体涉及一种提高澳洲坚果杂交授粉效率的方法。
【背景技术】
[0002]澳洲坚果(Macadamia spp.),又称澳洲胡桃、夏威夷果等，为山龙眼科(Proteaceae)澳洲坚果属(Macadamia F.Muell)多年生常绿乔木果树。澳洲坚果可食部分为果仁，脂肪含量高达65~83%，还富含蛋白质、钙、磷、铁和维生素，营养丰富，美味可口，是世界坚果类食品中最高级的一种，也是近年来我国热区栽培面积较大的果树树种。但是目前，我国尚无自己选育的品种，生产上所用品种全部来自国外育成品种，由于气候环境的差异，大多数品种的平均株产只有选育地的1/3~1/2。虽然我国科研工作者针对部分引进品种的环境适应性及其他特征进行了 20多年的研究，也筛选出了一批相对较好的澳洲坚果品种，如Hinde、0wn Choice、HAES900等，但总体说来，这些品种的产量与其选育地尚存一定的距离，且数量还 十分有限，不能满足我国各种小气候环境的需要，另外，随着我国加入WT0，世界贸易竞争的加剧和澳洲坚果主要育成国对新品种保护力度的加大，今后从国外直接引进育成品种的难度将变得越来越大。只有坚持自力更生，选育适合我国气候环境的、具有自主知识产权的新品种，才能在未来的竞争中，立于不败之地，这也是解决我国澳洲坚果品种问题的根本途径和我国澳洲坚果产业良种化的必由之路。
[0003]虽然澳洲坚果新品种的培育可以采取杂交育种、实生选种、芽变选种、辐射诱变等多种途径和方法，但杂交育种仍然是澳洲坚果新品种选育的最主要方法，是澳洲坚果育种最重要和最有效的途径，也是目前使用最广泛的方法。澳洲坚果杂交子代苗及子代果实的评价筛选方法步骤繁杂，每一个步骤的处理不当都会影响育种效率。一般从杂交到选育出一个澳洲坚果新品种最少需要20年时间。目前，澳洲坚果杂交育种程序复杂，经常对花朵自然结构造成损伤，授粉效率较低，杂交结实成功率也较低，因此，如何克服现有技术的不足是目前杂交育种【技术领域】亟需解决的问题。
【发明内容】
[0004]为了克服现有技术的不足，本发明提供一种工作效率更高，杂交结实成功率更高的澳洲坚果杂交授粉方法。
[0005]为实现上述目的，本发明采用如下技术方案:
一种提高澳洲坚果杂交授粉效率的方法，包括如下步骤:
步骤(1)，搭防虫网:根据育种目标选择亲本组合，在初花期的父母本坚果树上方搭授粉棚架，将防虫网直接覆盖并固定在棚架上，棚架四周下方留0.5-lm的防虫网堆在树四周的地上并压实，以防授粉昆虫进入；
步骤(2)，采集花粉:当父母本树进入盛花期时，在父本树上选择24小时之内开放的花序，把花序放入干净的试管内，左右各螺旋式旋转试管3-5下，上下移动试管2-3下，让花粉尽可能多的粘到试管内壁上，待试管内壁上能够明显的看到一层花粉时即可，采集完花粉的试管标上标签，用湿毛巾包裹，试管口包在湿毛巾内，湿毛巾以不滴水为宜，得到授粉试管；
步骤(3)，人工授粉:将步骤(2)得到的授粉试管拿到母本树的棚架内，选择母本24小时之内开放的花序，把花序上还未开放的小花抹去，并把超过试管长度的花朵去除，手戴上纯棉白纱线手套从上到下轻轻的抹1-2下柱头，把抹好的花序放入步骤(2)得到的授粉试管内，左右各螺旋式旋转试管2-3下，上下移动试管1-2下即可完成授粉，授粉后标上标签，注明父母本，IOd后拆去防虫网。
[0006]步骤(1)中选用的防虫网为80-100目。
[0007]步骤(1)中选用的防虫网为尼龙防虫网。
[0008]步骤(2)中所述的采集花粉选择晴天或阴天早上8:00-11:00进行采集花粉。
[0009]步骤(2)中所述的试管规格为25X200mm，且为透明材质内壁光滑的试管。
[0010]步骤(3)中所述的人工授粉选择晴天或阴天早上9:00-12:00进行人工授粉。
[0011]每支步骤(2)得到的授粉试管可对3-5个花序进行人工授粉。
[0012]步骤(3)人工授粉的环境条件为温度18_21°C，相对湿度60-70%，无风或微风的天气。 [0013]步骤(3)人工授粉后24小时内降中到大雨，需重新人工授粉。
[0014]所述的步骤(3)所述的人工授粉时期为I月下旬至2月下旬或盛花期，盛花期为父母本树上开花数量在25%-75%之间时。
[0015]本发明与现有技术相比，其有益效果为:(I)本发明根据澳洲坚果大部分品种自交亲和性程度低的特性，利用网室可对大量花序进行授粉，以满足大规模杂交育种的需求，免去常规杂交方法中去雄、采集花粉、套袋等复杂程序，能节省用工，避免了对花朵自然结构的损伤；(2)本发明操作简单，省时省力，不损伤花朵的自然结构，杂交授粉成功率高；(3 )本发明对澳洲坚果杂交育种的关键步骤进行优化，获得优化的技术方法体系，提高澳洲坚果杂交育种效率。具体实施例
下面结合实施例对本发明作进一步的详细描述。
[0016]以下实施例用于说明本发明，但不用来限制本发明的范围。在不背离本发明精神和实质的情况下，对本发明方法、步骤或条件所作的修改或替换，均属于本发明的保护范围。若未特别指明，实施例中所用的技术手段为本领域技术人员所熟知的常规手段。
[0017]实施例1
一种提高澳洲坚果杂交授粉效率的方法，其中，澳洲坚果品种D4为母本，品种HAES900为父本，母本选7株，父本选5株，包括如下步骤:
步骤(1)，搭防虫网:根据育种目标选择亲本组合，在初花期的父母本坚果树上方搭授粉棚架，将80目尼龙防虫网直接覆盖并固定在棚架上，棚架四周下方留0.5m的防虫网堆在树四周的地上并压实，以防授粉昆虫进入；
步骤(2)，采集花粉:当父母本树进入盛花期时，晴天或阴天早上8:00-10:00，在父本树上选择24小时之内开放的花序，用规格为25 X 200mm、透明材质内壁光滑的试管取花粉，把花序放入干净的试管内，左右各螺旋式旋转试管3下，上下移动试管2下，让花粉尽可能多的粘到试管内壁上，待试管内壁上能够明显的看到一层花粉时即可，采集完花粉的试管标上标签，用湿毛巾包裹，试管口包在湿毛巾内，湿毛巾以不滴水为宜，得到授粉试管；
步骤(3)，人工授粉:晴天或阴天早上8:00-12:00，将步骤(2)得到的授粉试管拿到母本树的棚架内，选择母本24小时之内开放的花序，把花序上还未开放的小花抹去，并把超过试管长度的花朵去除，手戴上纯棉白纱线手套从上到下轻轻的抹I下柱头，把抹好的花序放入步骤(2)得到的授粉试管内，左右各螺旋式旋转试管2下，上下移动试管I下即可完成授粉，授粉后标上标签，注明父母本，IOd后拆去防虫网。
[0018]每支步骤(2)得到的授粉试管对3个花序进行人工授粉；
步骤(3)人工授粉的环境条件为温度18-21°C，相对湿度60-70%，无风；人工授粉时期为I月下旬
授粉后5个月调查最终坐果数，平均每个花序的坐果率为0.69%, 200个花序收获种子307粒，自然授粉的平均每个花序的坐果率为0.12%，200个花序收获种子52粒。
[0019]实施例2
一种提高澳洲坚果杂交授粉效率的方法，其中，以澳洲坚果品种HAES951为母本，品种D为父本，各选择5株，包括如下步骤:
步骤(1)，搭防虫网:根据育种目标选择亲本组合，在初花期的父母本坚果树上方搭授粉棚架，将90目尼龙防虫网直接覆盖并固定在棚架上，棚架四周下方留0.75m的防虫网堆在树四周的地上并压实，以防授粉昆虫进入；
步骤(2)，采集花粉 :当父母本树进入盛花期时，晴天或阴天早上8:00-10:00，在父本树上选择24小时之内开放的花序，用规格为25 X 200mm、透明材质内壁光滑的试管取花粉，把花序放入干净的试管内，左右各螺旋式旋转试管5下，上下移动试管3下，让花粉尽可能多的粘到试管内壁上，待试管内壁上能够明显的看到一层花粉时即可，采集完花粉的试管标上标签，用湿毛巾包裹，试管口包在湿毛巾内，湿毛巾以不滴水为宜，得到授粉试管；
步骤(3)，人工授粉:晴天或阴天早上8:00-12:00，将步骤(2)得到的授粉试管拿到母本树的棚架内，选择母本24小时之内开放的花序，把花序上还未开放的小花抹去，并把超过试管长度的花朵去除，手戴上纯棉白纱线手套从上到下轻轻的抹2下柱头，把抹好的花序放入步骤(2)得到的授粉试管内，左右各螺旋式旋转试管3下，上下移动试管2下即可完成授粉，授粉后标上标签，注明父母本，IOd后拆去防虫网。
[0020]每支步骤(2)得到的授粉试管可对5个花序进行人工授粉；
步骤(3)人工授粉的环境条件为温度18-21°C，相对湿度60-70%，微风；人工授粉时期为2月下旬。
[0021]授粉后5个月调查最终坐果数，平均每个花序的坐果率为0.78%, 200个花序收获种子数为224粒，自然授粉的平均每个花序的坐果率为0.22%，200个花序收获种子62粒。
[0022]实施例3
一种提高澳洲坚果杂交授粉效率的方法，其中，以澳洲坚果品种HAES842为母本，品种816为父本，各选择5株，包括如下步骤:
步骤(1)，搭防虫网:根据育种目标选择亲本组合，在初花期的父母本坚果树上方搭授粉棚架，将100目尼龙防虫网直接覆盖并固定在棚架上，棚架四周下方留Im的防虫网堆在树四周的地上并压实，以防授粉昆虫进入；
步骤(2)，采集花粉:当父母本树进入盛花期时，晴天或阴天早上8:00-10:00，在父本树上选择24小时之内开放的花序，用规格为25 X 200mm、透明材质内壁光滑的试管取花粉，把花序放入干净的试管内，左右各螺旋式旋转试管4下，上下移动试管3下，让花粉尽可能多的粘到试管内壁上，待试管内壁上能够明显的看到一层花粉时即可，采集完花粉的试管标上标签，用湿毛巾包裹，试管口包在湿毛巾内，湿毛巾以不滴水为宜，得到授粉试管；
步骤(3)，人工授粉:晴天或阴天早上8:00-12:00，将步骤(2)得到的授粉试管拿到母本树的棚架内，选择母本24小时之内开放的花序，把花序上还未开放的小花抹去，并把超过试管长度的花朵去除，手戴上纯棉白纱线手套从上到下轻轻的抹2下柱头，把抹好的花序放入步骤(2)得到的授粉试管内，左右各螺旋式旋转试管2下，上下移动试管2下即可完成授粉，授粉后标上标签，注明父母本，IOd后拆去防虫网。
[0023]每支步骤(2)得到的授粉试管可对4个花序进行人工授粉；
步骤(3)人工授粉的环境条件为温度18-21°C，相对湿度60-70%，无风；人工授粉时期为2月上旬。
[0024]授粉后5个月调查最终坐果数，平均每个花序的坐果率为2.16%, 200个花序收获种子数为820粒，自然授粉的平均每个花序的坐果率为1.00%，200个花序收获种子380粒。
[0025]实施例4
本实施例提高澳洲坚果杂交授粉效率的方法，以澳洲坚果品种D为母本，品种0.C、HAES951为父本，各选择5株，具体步骤同实例1，人工授粉时期为盛花期。授粉后5个月调查最终坐果数，组合DX0.C.DXHAES951平均每个花序的坐果率分别为1.08%、1.05%，每个组合授粉200个花序，收获种子数分别为311、303粒；自然授粉的平均每个花序的坐果率为
0.40%, 200个花序收获种子115粒。
[0026]实施例5
本实施例提高澳洲坚果杂交授粉效率的方法，以澳洲坚果品种0.C为母本，品种HAES816、HAES294、HAES344、HAES951为父本，各选择5株，具体步骤同实例1，授粉后5个月调查最终坐果数，组合 0.CXHAES344、0.CXHAES816、0.CXHAES95U0.CXHAES294 平均每个花序的坐果率分别为0.80%,0.80%,0.65%,0.61%，每个组合授粉300个花序，收获种子数分别为426、424、345、323粒；自然授粉的平均每个花序的坐果率为0.21%，300个花序收获种子111粒。
【权利要求】
1.一种提高澳洲坚果杂交授粉效率的方法，其特征在于包括如下步骤: 步骤(1)，搭防虫网:根据育种目标选择亲本组合，在初花期的父母本坚果树上方搭授粉棚架，将防虫网直接覆盖并固定在棚架上，棚架四周下方留0.5-lm的防虫网堆在树四周的地上并压实； 步骤(2)，采集花粉:当父母本树进入盛花期时，在父本树上选择24小时之内开放的花序，把花序放入干净的试管内，左右各螺旋式旋转试管3-5下，上下移动试管2-3下，采集完花粉的试管用湿毛巾包裹，得到授粉试管； 步骤(3)，人工授粉:将步骤(2)得到的授粉试管拿到母本树的棚架内，选择母本24小时之内开放的花序，把花序上还未开放的小花抹去，并把超过试管长度的花朵去除，手戴上纯棉白纱线手套从上到下轻轻的抹1-2下柱头，把抹好的花序放入步骤(2)得到的授粉试管内，左右各螺旋式旋转试管2-3下，上下移动试管1-2下即可完成授粉，IOd后拆去防虫网。
2.根据权利要求1所述的提高澳洲坚果杂交授粉效率的方法，其特征在于:步骤(1)中选用的防虫网为80-100目。
3.根据权利要求1所述的提高澳洲坚果杂交授粉效率的方法，其特征在于:步骤(1)中选用的防虫网为尼龙防虫网。
4.根据权利要求1所述的提高澳洲坚果杂交授粉效率的方法，其特征在于:步骤(2)中所述的采集花粉选择晴 天或阴天早上8:00-11:00进行采集花粉。
5.根据权利要求1所述的提高澳洲坚果杂交授粉效率的方法，其特征在于:步骤(2)中所述的试管规格为25 X 200mm,且为透明材质内壁光滑的试管。
6.根据权利要求1所述的提高澳洲坚果杂交授粉效率的方法，其特征在于:步骤(3)中所述的人工授粉选择晴天或阴天早上9:00-12:00进行人工授粉。
7.根据权利要求1所述的提高澳洲坚果杂交授粉效率的方法，其特征在于:每支步骤(2)得到的授粉试管可对3-5个花序进行人工授粉。
8.根据权利要求1所述的提高澳洲坚果杂交授粉效率的方法，其特征在于步骤(3)人工授粉的环境条件为温度18-21°C，相对湿度60-70%，无风或微风的天气。
9.根据权利要求1所述的提高澳洲坚果杂交授粉效率的方法，其特征在于步骤(3)人工授粉后24小时内降中到大雨，需重新人工授粉。
10.根据权利要求1所述的提高澳洲坚果杂交授粉效率的方法，其特征在于所述的步骤(3)所述的人工授粉时期为I月下旬至2月下旬或盛花期。
【文档编号】A01H1/02GK103999764SQ201410233516
【公开日】2014年8月27日 申请日期:2014年5月29日 优先权日:2014年5月29日
【发明者】陶丽, 贺熙勇, 倪书邦, 陈丽兰, 肖晓明, 陈国云, 孔广红 申请人:云南省热带作物科学研究所