采用糟渣类原料发酵生产富dha饲料添加剂的工艺的制作方法
【专利摘要】本发明公开了一种以糟渣类原料为培养基，以微生物发酵法生产富多不饱和脂肪酸(DHA)、蛋白质和木寡糖的动物饲料添加剂的工艺方法。具体包括：(1)将糟渣原料与水混合制成一定固液质量比的物料；(2)水热抽提法预处理混合后糟渣原料；(3)酶解预处理后糟渣；(4)以酶解糟渣培养产DHA微生物；(5)浓缩或干燥裂殖壶菌发酵液，制成液态或固态饲料。本发明所述的方法可以充分利用糟渣含有的丰富半纤维素和纤维素可以用来制备具有益生作用的木寡糖和纤维寡糖，利用可溶性木质素制备多酚类抗氧化剂；而降解后的纤维素和淀粉可被用微生物生长的碳源，蛋白质可用作细胞生长的氮源，从而降低了微生物发酵用的碳源和氮源成本。
【专利说明】采用糟渣类原料发酵生产富DHA饲料添加剂的工艺
【技术领域】
[0001] 本发明涉及饲料添加剂的生产工艺，具体涉及一种以糟渣类物料为原料生产富 DHA饲料添加剂的工艺方法。
【背景技术】
[0002] DHA(二十二碳六烯酸）是一种极其重要的高度不饱和脂肪酸，是人体细胞膜和神 经组织的重要组成物质。DHA在预防心血管疾病、抑制和治疗癌症以及保证胎儿的正常发育 和促进婴幼儿发育生长方面具有重要作用。然而，中国民众每日从食物中摄取的DHA仅为 40mg，而推荐最低标准摄入量为160mg)，属于严重缺乏状态。发明专利201210385417. 5公 开了"一种富含DHA微藻粉及其制备方法"，该专利将富含DHA的发酵液直接加工成微藻粉， 然后将其作为饲料添加剂用于畜牧、水产养殖中并有效富集于动物体内，再通过"富含DHA 的微藻粉一动物体一人"的食物传递路线，使人类从日常饮食中摄入足够量的DHA。然而， 现有技术中，DHA藻粉的生产成本很高，难以通过这种方法实现民众DHA摄取量的增加。因 此为降低发酵生产DHA藻粉的原料成本，需要寻找廉价微生物培养碳源和氮源，而糟渣类 资源为解决这一问题提供了途径。糟渣是将原料中的可利用碳水化合物提取之后剩余的多 水分残渣物质，其含有大量粗纤维、粗蛋白质和粗脂肪等营养成分。我国糟渣类物料资源丰 富，仅酿造、淀粉、果品加工每年可生产糟渣约一亿吨，是一种可利用的宝贵再生资源。
[0003] 现有多种利用糟渣制备畜禽饲料的工艺方法，主要包括将糟渣直接干燥后制成 干饲料以及生物发酵法制备菌体蛋白饲料。例如以玉米酒糟制备DDGS，这种方法不但成 本高、能耗高，而且没有充分利用糟渣内的各营养成分。生物发酵法制备菌体蛋白饲料是 另一种利用糟渣物料的工艺路线，目前，多数以简单的直接培养酿酒酵母或其他微生物为 主。发明专利201210276611. X公开了 "一种啤酒糟生物改性生产饲料的方法"，发明专利 201010525743. 2公开了"利用木薯酒糟生产生物饲料的方法"，发明专利200510019848. X 公开了"一种白酒酒糟生产菌体饲料的方法"。然而，生物发酵法只能利用糟渣内的残留淀 粉和单糖，而纤维素和半纤维素依然没有得到进一步利用。CN201210420826公开了一种酒 糟的再利用方法，具体为：将酒糟烘干后，粉碎并加入水介质充分浸泡，并进行蒸汽爆破预 处理，得蒸汽爆破预处理料；将所述蒸汽爆破预处理料作固体培养基，加入益生菌进行固体 发酵，得发酵饲料。该方法虽然可以部分利用酒糟中的纤维素和半纤维素，其解决的技术问 题是生产含益生菌的生物饲料，而且需要先将原料干燥，导致耗能过大。
[0004] 水热抽提法已经被广泛应用于木质纤维素的预处理，以提高纤维素的酶解效率。 水热抽提法具备以下优点：（1)无需酸碱或氨等化学物质的参与，不会对反应设备造成腐 蚀；水是环境友好资源，不但降低了成本，而且不会造成严重的环境问题；（2)高压热水可 以打破木质素的结构，无需预处理前的物料粉碎过程，降低了生产能耗；(3)在优化条件 下，可以使半纤维素最大程度的以低聚糖形式溶解，并且控制单糖的生成以防止其继续降 解生成糠醛等发酵抑制物。应用水热法处理糟渣可将糟渣中的淀粉、半纤维素和部分纤维 素转化为单糖（葡萄糖、木糖和阿拉伯糖）和具有益生功能的木寡糖和纤维寡糖；同时又可 以提取浓缩糟渣中的蛋白质、脂肪及微量元素，并且经酶解后抽提物中的淀粉和纤维寡糖 以及蛋白质可以作为微生物生长的优质而廉价碳源和氮源。
[0005] 综上所述，结合富DHA产品的高附加值优势和糟渣类原料的低成本特点，利用水 热预处理结合酶解的工艺方法对糟渣进行处理，然后应用处理后抽提物中的营养物质作为 产DHA微生物生长的碳源和氮源来生产富DHA的饲料添加剂，一方面可以实现糟渣类原料 营养成分的最大化利用，另一方面又降低了发酵法生产DHA的成本，因此是一种可行的高 效利用糟渣类农业副产物的方法。
[0006] 专利EP 2520608 Al公开了一种应用连续水热法预处理木质纤维素以提高纤维素 的酶解效率和乙醇产量的方法。然而，该方法只解决了木质纤维素材料的降解问题，没有解 决高蛋白质、高淀粉和高含水量的糟渣类物料的处理问题。专利CN 103221518 A将水热碳 化法应用于处理酿造渣，但在其工艺条件下生物材料发生了水热碳化，此方法将酿造渣最 终转化为高碳产物（生物煤和腐殖质）。
【发明内容】
[0007] 基于现有技术在糟渣利用和富DHA饲料生产方面的问题，本发明提供了一种以糟 渣类原料为培养基，采用微生物发酵法生产富DHA、蛋白质和木寡糖的饲料添加剂的工艺方 法。
[0008] 本发明的技术方案：采用糟渣类物料生产富含DHA的畜禽饲料添加剂的工艺，包 括以下步骤：
[0009] ①物料预处理：将待处理的糟渣类物料与水混合均匀得到混合物料，调整混合物 料的pH值为3-8 ;所述糟渣类物料中的干糟渣与水的质量比为1:3-1:50 ;所述糟渣类物料 为酿造渣、淀粉渣和果渣中的任意一种或任意多种的组合；所述步骤①中糟渣类物料中的 干糟渣与水的质量比优选1:3-1:10,最优选1:3-1:8。
[0010] 所述酿造渣是指以含淀粉植物性材料为发酵原料，以植物秸杆和籽实外壳为填充 辅料的微生物发酵生产含乙醇及乙酸产物的生产过程所产生的糟渣类副产物，例如白酒酒 糟和醋糟。所述含淀粉植物性材料包括含淀粉材料的块茎、根、整谷粒以及它们的任意组 合。所述含淀粉材料包括玉米、小麦、高梁、大麦、木薯、红薯、马铃薯、黑麦、豌豆、黄豆或上 述材料的任意组合。填充辅料所用的植物秸杆优选为大麦杆、小麦杆和玉米杆；填充辅料所 用的籽实外壳优选为稻壳。这类糟渣类副产物含有：(a)来自淀粉原料的纤维、壳、胚、油、 蛋白以及未完全发酵的淀粉、菌体；(b)以及来自填充辅料稻壳和秸杆的木质素、纤维素和 半纤维素。
[0011]所述淀粉渣是指采用含淀粉材料制备淀粉过程所产生的淀粉渣。所述含淀粉材料 包括玉米、小麦、高梁、大麦、木薯、红薯、马铃薯、黑麦、豌豆、黄豆或上述材料的任意组合。 优选的淀粉渣包括玉米淀粉渣、红薯淀粉渣、木薯淀粉渣、马铃薯淀粉渣。淀粉渣含有来自 淀粉原料的纤维、壳、胚、油和蛋白成分以及残余的淀粉。
[0012] 所述果渣是指水果榨汁后得到的副产物。所述水果包括苹果、葡萄和柑橘。所述 果渣含有来自果皮、果核和果梗的纤维素、半纤维素、木质素、蛋白质和脂肪。
[0013] ②水热法处理：将步骤①制备的混合物料转入容器内，在搅拌条件下缓慢加热至 温度达到Tl ;在Tl温度条件下保温1-180分钟，然后快速降温至T2,得到水热糟渣；所述 Tl为120-230°c，所述T2为20-80°C。水热法处理后，糟渣内的淀粉降解为糊精，半纤维素 降解为低聚合度的木聚糖和木寡糖以及木糖，部分纤维素溶解并降解为纤维寡糖、糟渣内 的难消化蛋白一醇溶蛋白可变为易酶解的蛋白质。糟渣的物理化学性质发生了巨大变化， 更容易被酶水解。
[0014] ③酶水解处理：（a)批式酶解：将水热糟渣的温度调整为20-90°C，pH值调整为 3-8 ;然后向水热糟渣中加入葡萄糖淀粉酶、木聚糖酶、纤维素酶，反应48-72小时后，再加 入蛋白酶反应2-24小时，得到酶解物料；或（b)补料分批：将水热糟渣分批加入酶溶液中， 所述酶溶液为葡萄糖淀粉酶、木聚糖酶和纤维素酶的混合酶溶液，反应48-72小时后，再加 入蛋白酶反应2-24小时，得到酶解物料。经酶水解后淀粉和部分纤维寡糖降解为葡萄糖， 木聚糖降解为木寡糖，蛋白质降解为短肽和氨基酸。
[0015] 所述葡萄糖淀粉酶（α-1,4-葡萄糖水解酶，EC. 3. 2. 1.3)可使用一种或多种 葡萄糖淀粉酶，添加量为每克干糟渣固体添加〇. 02-200AGU的酶。所述的木聚糖酶为内 切-1，4-β木聚糖酶（3. 2. 1.8)，优选GHlO或GHll的内切-1，4-β木聚糖酶；所述木聚糖 酶的添加量为每IX IO2-IX IO5克干糟渣加入Ig木聚糖酶或者总酶活IX IO6IU的木聚糖 酶。所述纤维素酶为具有纤维二糖水解酶活性（E.C. 3. 2. 1.91)的酶以及具有内切葡聚糖 酶（E. C. 3. 2. 1. 91)活性和β -葡聚糖苷酶（E. C. 3. 2. 1. 21)活性的酶，所述具有纤维二糖 水解酶活性（E. C. 3. 2. 1. 91)的酶包括纤维二糖水解酶I和纤维二糖水解酶II ;所述纤维 素酶的添加量为每克干糟渣固体加入0. 1-100FPU的酶。所述蛋白酶为酸性蛋白酶，其添加 量为每克干酒糟固体IX KT4-IX IO2LAPU的酶。
[0016] ④液固分离：将酶解物料中的固体从液体中分离，所述分离方式为离心、压制或者 过滤；优选的实施方式包括板框式滤压机、带式滤压机、螺旋压制机和蝶式离心机。固相成 分主要是纤维素、木质素和矿物质；液相成分包括葡萄糖、纤维寡糖、木寡糖、蛋白质、多肽、 氨基酸和酚类物质以及少量乙酸。
[0017] ⑤微生物发酵：调节液固分离后液相中碳源和氮源的浓度和比例，加入必需营养 成分（酵母抽提物、维生素、金属离子、磷酸盐等），然后接种入产DHA的微生物，进行微 生物发酵，得到微生物发酵液。所述的产DHA的微生物为裂殖壶菌属（Schizochytrium/ Aurantiochytrium sp)、破囊壶菌属（Thraustochytrium)、隐甲藻属（Crypthecodinium)、 吾肯氏壶菌属（Ulkenia)和被孢霉属（Mortierella)中的任意一种或者任意多种的混合群 体。
[0018] ⑥干燥粉碎：(a)将多种微生物发酵培养液的混合液进行干燥、粉碎，得到固态饲 料添加剂；或（b)将单一的微生物发酵液干燥、粉碎后混合，得到固态饲料添加剂。所述干 燥的方法为冷冻干燥、真空干燥、热风干燥或喷雾干燥。优选冷冻干燥，因为低温和真空条 件下进行干燥有效保护了易氧化且热敏的DHA。同时水热抽提糟渣木质素所产生的多酚类 抗氧化剂也可发挥对DHA的保护作用。
[0019] 采用上述方法制备的畜禽饲料添加剂的用途，用作畜禽、水产养殖动物和伴侣性 动物的饲料添加剂；所述畜禽包括牛、猪、鸡、鸭和鹅，所述水产养殖动物包括虾和鱼；所述 伴侣性动物为猫和狗。
[0020] 本发明的有益效果：
[0021] (1)本发明所述的方法可以充分利用糟渣含有的丰富半纤维素和纤维素可以用来 制备具有益生作用的木寡糖和纤维寡糖，利用可溶性木质素制备多酚类抗氧化剂；而降解 后的纤维素和淀粉可被用微生物生长的碳源，蛋白质可用作细胞生长的氮源，从而降低了 微生物发酵用的碳源和氮源成本。
[0022] (2)本发明将水热法处理后的糟渣用于产DHA的微生物发酵，充分利用了物料含 水量高的特点，可以直接不另加水或少加水的情况下直接处理，降低了水的消耗量；糟渣物 料的本身含有的弱酸性物质可以作为水热处理中的自催化剂，无需添加外源酸性催化剂；
[0023] (3)水热法的高温条件可以将淀粉液化，不但使淀粉类物质更易与其他固态物质 分离，而且降低了酶解步骤中淀粉酶的用量；水热处理后的纤维素和糊精更易被酶解为葡 萄糖，降低纤维素酶和葡萄糖淀粉酶的用量；
[0024] (4)水热处理后，糟渣内的半纤维素大部分转化为木寡糖和木聚糖而溶于水中； 木质纤维素含有的多酚类抗氧化剂被抽提出，有利于含DHA藻粉的稳定；非可消化蛋白质 (主要是醇溶蛋白）的酶解率可显著提高。
【具体实施方式】
[0025] 下面结合实施例对本发明做进一步的说明。
[0026] 实施例1 :
[0027] 白酒酒糟是酿酒业的副产品。据统计，我国2013年产白酒1千万吨，而白酒酒糟 达3000余万吨。如果不及时加以处理，就会腐败变质，不仅浪费了宝贵的资源，还会严重污 染周围环境。
[0028] 取含水量70%的新鲜白酒酒糟IOOg,加入20ml水，充分搅拌混匀后，制成固液质 量比为1: 3、pH值为3的混合物料。将混合后物料置于水热反应器内，搅拌速度200rpm，加 热180°C，保持此温度10分钟。处理完成后停止加热并迅速降温至55°C。调节pH值为3， 加入总活性为3000AGU的葡萄糖淀粉酶，20000IU的木聚糖酶、2000FPU的纤维素酶反应72 小时。72小时后添加2000LAPU的酸性蛋白酶并作用9小时。200目纱网过滤后，取滤液测 定葡萄糖浓度和氨离子浓度。以葡萄糖和水调节滤液葡萄糖浓度。发酵培养基主要成分为 葡萄糖60g/L，酵母提取物10g/L，磷酸二氢钾5g/L，硫酸镁3g/L，柠檬酸钠3g/L，维生素 B 150mg/L，维生素 B6 310mg/L，维生素 B12 20mg/L，生物素20mg/L。培养基ρΗ6·8、培养温 度25°C。产DHA的微生物采用裂殖壶菌Aurantiochy trium sp.SD116(保藏于中国微生物 菌种保藏管理委员会普通微生物中心，其保藏编号为CGMCC No :6208)。初始接种量为每升 0. 5g(0. 1-0. 6g)干重，摇床培养72小时，转速200rpm。培养结束后，真空冷冻干燥发酵培 养液并粉碎干燥后固体，得到富DHA畜禽饲料添加剂。
[0029] 实施例2 :
[0030] 取含水量90 %的新鲜醋糟100g，加入410ml水，充分搅拌混匀后，制成固液质量 比为1 :50和pH值为8的混合物料。将混合后物料置于水热反应器内，搅拌速度300rpm， 加热至230°C，保持此温度1分钟。处理完成后停止加热并迅速降温至80°C。调节温度为 90°C、pH值为8,加入总活性为IAGU的葡萄糖淀粉酶，1000IU的木聚糖酶、1000FPU的纤维 素酶反应48小时。48小时后添加1000LAPU的酸性蛋白酶并作用2小时。200目纱网过滤 后，取滤液测定葡萄糖浓度和氨离子浓度。以葡萄糖和水调节滤液葡萄糖浓度。发酵培养 基主要成分为葡萄糖60g/L，酵母提取物10g/L，磷酸二氢钾5g/L，硫酸镁3g/L，柠檬酸钠 3g/L，维生素 B 150mg/L，维生素 B6 310mg/L，维生素 B12 20mg/L，生物素20mg/L。培养基 ρΗ6· 8、培养温度25°C。产DHA的微生物采用破囊壶菌Thraustochytrium(购自American Type Culture Collection，编号 ATCC 28210)。初始接种量为每升 0.5g(0. 1-0. 6g)干重， 摇床培养72小时，转速200rpm。培养结束后，真空冷冻干燥发酵培养液并粉碎干燥后固体， 得到富DHA畜禽饲料添加剂。
[0031] 实施例3:
[0032] 取含水量80%的玉米淀粉渣100g，加入420ml 7jC，充分搅拌混匀后，制成固液质量 比为1:25、pH值为5的混合物料。将混合后物料置于水热反应器内，搅拌速度150rpm，力口 热至120°C，保持此温度180分钟。处理完成后停止加热并迅速降温至20°C。调节pH值为 5,加入总活性为1000AGU的葡萄糖淀粉酶，2500IU的木聚糖酶、2FPU的纤维素酶反应68小 时。68小时后添加0. 002LAPU的酸性蛋白酶并作用24小时。200目纱网过滤后，取滤液测 定葡萄糖浓度和氨离子浓度。以葡萄糖和水调节滤液葡萄糖浓度。发酵培养基主要成分 为葡萄糖60g/L，酵母提取物10g/L，磷酸二氢钾5g/L，硫酸镁3g/L，柠檬酸钠3g/L，维生 素 B150mg/L，维生素 B6 310mg/L，维生素 B12 20mg/L，生物素20mg/L。培养基ρΗ6·8、培养 温度 25°C。产 DHA 的微生物采用隐甲藻 Crypthecodinium(购自 American Type Culture Collection，编号ATCC 30556)。初始接种量为每升0. 5g(0. 1-0. 6g)干重，摇床培养72小 时，转速200rpm。培养结束后，真空冷冻干燥发酵培养液并粉碎干燥后固体，得到富DHA畜 禽饲料添加剂。
[0033] 实施例4 :
[0034] 取含水量70%的柑橘渣100g，加入230ml 7jC，充分搅拌混匀后，制成固液质量比为 1:10、pH值为4的混合物料。将混合后物料置于水热反应器内，搅拌速度150rpm，加热至 140°C，保持此温度120分钟。处理完成后停止加热并迅速降温至30°C。调节pH值为4,加 入总活性为30AGU的葡萄糖淀粉酶，1000IU的木聚糖酶、900FPU的纤维素酶反应54小时。 54小时后添加300LAPU的酸性蛋白酶并作用8小时。200目纱网过滤后，取滤液测定葡萄 糖浓度和氨离子浓度。以葡萄糖和水调节滤液葡萄糖浓度。发酵培养基主要成分为葡萄糖 6〇g/L,酵母提取物10g/L,磷酸二氢钾5g/L，硫酸镁3g/L，朽 1檬酸钠3g/L，维生素 B 150mg/ L，维生素 B6 310mg/L，维生素 B12 20mg/L，生物素20mg/L。培养基ρΗ6·8、培养温度25°C。 产DHA的微生物米用吾肯氏壶菌Ulkenia sp (购自American Type Culture Collection，编 号ATCC 28207)。初始接种量为每升0. 5g (0. 1-0. 6g)干重，摇床培养72小时，转速200rpm。 培养结束后，真空冷冻干燥发酵培养液并粉碎干燥后固体，得到富DHA畜禽饲料添加剂。
[0035] 实施例5 :
[0036] 取含水量80%的白酒酒糟100g，加入80ml水，充分搅拌混匀后，制成固液质量比 为1:8、ρΗ值为6的混合物料。将混合后物料置于水热反应器内，搅拌速度150rpm，加热至 180°C，保持此温度90分钟。处理完成后停止加热并迅速降温至50°C。调节pH值为6,加入 总活性为500A⑶的葡萄糖淀粉酶，5000IU的木聚糖酶、20FPU的纤维素酶反应58小时。58 小时后添加20LAPU的酸性蛋白酶并作用16小时。200目纱网过滤后，取滤液测定葡萄糖浓 度和氨离子浓度。以葡萄糖和水调节滤液葡萄糖浓度。发酵培养基主要成分为葡萄糖60g/ L,酵母提取物10g/L,磷酸二氢钾5g/L，硫酸镁3g/L，朽1檬酸钠3g/L，维生素 B 150mg/L，维 生素 B6 310mg/L，维生素 B12 20mg/L，生物素20mg/L。培养基ρΗ6·8、培养温度25°C。产DHA 的微生物采用裂殖壶菌Aurantiochy trium sp.SD116(保藏于中国微生物菌种保藏管理委 员会普通微生物中心，其保藏编号为CGMCC No :6208)。初始接种量为每升0. 5g(0. 1-0. 6g) 干重，摇床培养72小时，转速200rpm。培养结束后，真空冷冻干燥发酵培养液并粉碎干燥后 固体，得到富DHA畜禽饲料添加剂。
[0037] 实施例6 :
[0038] 取含水量60%的苹果渣100g，加入140ml水，充分搅拌混匀后，制成固液质量比 为1:5、ρΗ值为8的混合物料。将混合后物料置于水热反应器内，搅拌速度150rpm，加热至 200°C，保持此温度60分钟。处理完成后停止加热并迅速降温至65°C。调节pH值为8,加入 总活性为8000AGU的葡萄糖淀粉酶，5000IU的木聚糖酶、200FPU的纤维素酶反应60小时。 60小时后添加4LAPU的酸性蛋白酶并作用20小时。200目纱网过滤后，取滤液测定葡萄糖 浓度和氨离子浓度。以葡萄糖和水调节滤液葡萄糖浓度。发酵培养基主要成分为葡萄糖 6〇g/L,酵母提取物10g/L,磷酸二氢钾5g/L，硫酸镁3g/L，朽 1檬酸钠3g/L，维生素 B 150mg/ L，维生素 B6 310mg/L，维生素 B12 20mg/L，生物素20mg/L。培养基ρΗ6· 8、培养温度25°C。 产DHA 的微生物米用被抱霉Mortierella sp (购自 American Type Culture Collection，编 号ATCC 32222)。初始接种量为每升0. 5g (0. 1-0. 6g)干重，摇床培养72小时，转速200rpm。 培养结束后，真空冷冻干燥发酵培养液并粉碎干燥后固体，得到富DHA畜禽饲料添加剂。
[0039] 实施例7 :
[0040] 取含水量50%的马铃薯淀粉渣100g，加入300ml 7jC，充分搅拌混匀后，制成固液质 量比为1:7、ρΗ值为5的混合物料。将混合后物料置于水热反应器内，搅拌速度150rpm，加 热至220°C，保持此温度10分钟。处理完成后停止加热并迅速降温至75°C。调节pH值为 5,加入总活性为500AGU的葡萄糖淀粉酶，1000IU的木聚糖酶、500FPU的纤维素酶反应62 小时。62小时后添加0. 5LAPU的酸性蛋白酶并作用5小时。200目纱网过滤后，取滤液测 定葡萄糖浓度和氨离子浓度。以葡萄糖和水调节滤液葡萄糖浓度。发酵培养基主要成分为 葡萄糖60g/L，酵母提取物10g/L，磷酸二氢钾5g/L，硫酸镁3g/L，柠檬酸钠3g/L，维生素 B 150mg/L，维生素 B6 310mg/L，维生素 B12 20mg/L，生物素20mg/L。培养基ρΗ6·8、培养温 度25°C。产DHA的微生物采用裂殖壶菌Aurantiochy trium sp.SD116(保藏于中国微生物 菌种保藏管理委员会普通微生物中心，其保藏编号为CGMCC No :6208)。初始接种量为每升 0. 5g(0. 1-0. 6g)干重，摇床培养72小时，转速200rpm。培养结束后，真空冷冻干燥发酵培 养液并粉碎干燥后固体，得到富DHA畜禽饲料添加剂。
[0041] 表1本发明所得富DHA饲料的营养成分表（wt% )
【权利要求】
1. 采用糟渣类物料生产富含DHA的畜禽饲料添加剂的工艺，其特征在于：包括以下步 骤： ① 物料预处理：将待处理的糟渣类物料与水混合均匀得到混合物料，调整混合物料的 pH值为3-8 ;所述糟渣类物料中的干糟渣与水的质量比为1:3-1:50 ; ② 水热法处理：将步骤①制备的混合物料转入容器内，在搅拌条件下缓慢加热至温度 达到T1 ;在T1温度条件下保温1-180分钟，然后快速降温至T2,得到水热糟渣；所述T1为 120-230°C，所述 T2 为 20-80°C ; ③ 酶水解处理：将水热糟渣的温度调整为20-90°C，pH值调整为3-8 ;然后向水热糟渣 中加入葡萄糖淀粉酶、木聚糖酶、纤维素酶，反应48-72小时后，再加入蛋白酶，反应2-24小 时，得到酶解物料； ④ 液固分离：将酶解物料中的固体从液体中分离，所述分离方式为离心、压制或者过 滤； ⑤ DHA发酵：调节液固分离后液相中碳源和氮源的浓度和比例，加入必需营养成分，然 后接种入产DHA的微生物，进行微生物发酵，得到微生物发酵液； ⑥ 干燥粉碎：将微生物发酵培养液进行干燥、粉碎，得到固态饲料添加剂。
2. 根据权利要求1所述的采用糟渣类物料生产富含DHA的畜禽饲料添加剂的工艺，其 特征在于：所述步骤③的酶水解处理方式为将水热糟渣分批加入酶溶液中，所述酶溶液为 葡萄糖淀粉酶、木聚糖酶和纤维素酶混合酶溶液，反应48-72小时后，再加入蛋白酶，反应 2-24小时，得到酶解物料。
3. 根据权利要求1所述的采用糟渣类物料生产富含DHA的畜禽饲料添加剂的工艺，其 特征在于：步骤⑤所述的产DHA的微生物为裂殖壶菌属、破囊壶菌属、隐甲藻属吾肯氏壶菌 属、希瓦氏菌属和被孢霉属中的任意一种或者任意多种的混合群体。
4. 根据权利要求1-3中任意一项所述的采用糟渣类物料生产富含DHA的畜禽饲料 添加剂的工艺，其特征在于：步骤③所述葡萄糖淀粉酶的添加量为每克干糟渣固体添加 0. 02-200AGU的酶；所述的木聚糖酶为内切-1，4-β木聚糖酶，所述木聚糖酶的添加量为每 克干糟渣加入10-1X 104IU的木聚糖酶；所述纤维素酶为具有纤维二糖水解酶活性的酶以 及具有内切葡聚糖酶活性和β-葡聚糖苷酶活性的酶，所述纤维素酶的添加量为每克干糟 渣固体加入〇. 1-100FPU的酶；所述蛋白酶的添加量为每克干酒糟固体1X 10_4-1 X 102LAPU 的酶。
5. 根据权利要求4所述的采用糟渣类物料生产富含DHA的畜禽饲料添加剂的工艺，其 特征在于：步骤③所述的葡萄糖淀粉酶为α -1，4-葡萄糖水解酶；所述的木聚糖酶为GH10 或GH11的内切-1，4-β木聚糖酶；所述具有纤维二糖水解酶活性的酶包括纤维二糖水解酶 I和纤维二糖水解酶II ;所述蛋白酶为酸性蛋白酶。
6. 根据权利要求1所述的采用糟渣类物料生产畜禽饲料添加剂的工艺，其特征在于： 所述糟渣类物料为酿造渣、淀粉渣和果渣中的任意一种或任意多种的组合；所述步骤①中 糟渣类物料与水的质量比为1:3-1:10,优选为1:3-1:8。
7. 根据权利要求2所述的采用糟渣类物料生产畜禽饲料添加剂的工艺，其特征在于： 所述步骤⑥中的微生物发酵液为多种微生物发酵液的混合液；所述干燥的方法为冷冻干 燥、真空干燥、热风干燥或喷雾干燥。
8. 根据权利要求2所述的采用糟渣类物料生产畜禽饲料添加剂的工艺，其特征在于： 所述步骤⑥中将单一的微生物发酵液干燥、粉碎后混合，得到固态饲料添加剂；所述干燥的 方法为冷冻干燥、真空干燥、热风干燥或喷雾干燥。
9. 采用权利要求1所述的方法制备的畜禽饲料添加剂，其特征在于：按质量分数计，包 括40-55份蛋白质、20-30份DHA、8-10份木寡糖和1-5份纤维寡糖。
10. 采用权利要求1所述的方法制备的畜禽饲料添加剂的用途，其特征在于：用作畜 禽、水产养殖动物和伴侣性动物的饲料添加剂；所述畜禽包括牛、猪、鸡、鸭和鹅，所述水产 养殖动物包括虾和鱼；所述伴侣性动物为猫和狗。
【文档编号】A23K1/00GK104256086SQ201410469204
【公开日】2015年1月7日 申请日期:2014年9月15日 优先权日:2014年9月15日
【发明者】崔球, 孙志杰, 王立英 申请人:中国科学院青岛生物能源与过程研究所