黑枸杞组培方法与流程

本发明属于黑枸杞种植技术领域，具体涉及一种黑枸杞的组培方法。

背景技术：

枸杞在全国各地都有种植，宁夏、新疆、内蒙古、河北等省区种植面积较大。宁夏地 理气候条件独特，是枸杞生长的最佳生态区，是中国及世界上人工种植枸杞的发源地。宁夏从南到北都有种植，集中分布在引黄灌区，目前栽植面积达 38 万亩，约占全国的 30％；干果年产量达 5000 万公斤，约占全国总产量的 50％左右，出口量约占全国出口总额的 60％以上。宁夏枸杞的各项有效成分均高于其它产区的枸杞，最重要的成分枸杞多糖含量是其它产区所产枸杞多糖含量的 2.7 ～ 4 倍，是最好的药用枸杞。国家医药管理局将宁夏枸杞定 为全国唯一的药用枸杞产地，列入全国10大药材生产基地之一。国家科技部已将宁夏枸杞列入国家《中药现代化研究与产业开发》项目。枸杞产业已经成为宁夏回族自治区国民经 济发展的支柱产业之一。黑枸杞味道略甜，属于中性食物，富含蛋白质、脂肪、糖类和各种有机酸、维生素、 矿物质、微量元素等营养成分，与红枸杞相比，黑枸杞的维生素、矿物质等营养成分的含量 更为丰富，尤其是黑枸杞还含有能清除自由基、具有抗氧化功能的天然花色甙素，药用、保 健价值远远高于普通的红枸杞，被誉为“软黄金”。申请号为 201410578546.5 的发明专利公开了一种利用黑果枸杞地下垂直茎为接穗与枸杞嫁接的方法，该方法包括以下四个步骤 ：一、黑果枸杞地下垂直茎接穗的采制 ； 二、枸杞砧木的接前处理 ；三、嫁接 ；四、嫁接后的管理。利用黑果枸杞地下垂直茎的特性， 提供了一种以黑果枸杞地下垂直茎为接穗、以枸杞为砧木的嫁接方法，不仅填补黑果枸杞 与枸杞嫁接技术的空白，而且还创造性地使用地下垂直茎为接穗进行嫁接，对接穗材质也进行了创新，丰富了黑果枸杞接穗的种类，具有操作简便、成活率高、挂果早等显著的特点。但是针对于野生黑枸杞或者嫁接技术掌握不好的工人而言，该方法的使用有着极大的局限性，且难以形成产业化种植黑枸杞。

技术实现要素：

本发明为了解决现有黑枸杞的种植方法存在极大的局限性，难以形成产业化种植 技术的问题，提供了一种黑枸杞的组培方法。

本发明由如下技术方案实现 ：一种黑枸杞的组培方法，先进行容器栽培，然后田间移栽裸根苗，具体包括如下步骤 ：

1）、选取黑枸杞一年生棚栽苗幼嫩枝条；

2）、外植体消毒：将嫩茎剪下流水半个小时，再用蒸馏水冲洗三次，然后75%的酒精冲洗30s，无菌水冲洗3次，再用0.1%的升汞灭菌2min，无菌水迅速冲洗3-5次；

3）、初代培养：将消过毒的嫩茎剪成1.5-2cm的茎段，分别接种于培养基MS+6-BA0.4mg/l+IBA0.01mg/l,MS+6-BA0.5mg/l+IBA0.01mg/和MS+6-BA0.6mg/l+IBA0.01mg/l上进行初代培养；蔗糖和琼脂含量分别是30g/l和7.5g/l,ph5.6-6.0；一星期后观察萌芽情况，一个月后观察其高度及分化状况。MS+6-BA0.5mg/l+ IBA0.01mg/l培养效果最好；

4）、增殖培养：选初代培养一个月后的组培苗，以MS为基本培养基，添加6-BA(0.10、0.15、0.20mg/l),IBA(0.01、0.015、0.02mg/l),每种培养基接种15瓶，每瓶接5个茎段；一周后观察萌芽情况，一个月后观察其增殖倍数及生长情况；当6-BA为0.10mg/l，IBA为0.02mg/l增殖系数最高；

5）、生根培养：选取生长健壮的组培苗，截成2cm长的茎段接种在MS培养基上，添加IBA(0.10、0.15、0.20mg/l),蔗糖30g,琼脂7.5g,每种培养基接种15瓶，两星期后观察其生根情况，一个月后统计其生根率及根数，IBA为0.1mg/l生根率达100%，效果最好；

6）、炼苗及移栽

当培养基中的苗长到根长5-6cm,根数4-5条、株高4-6cm时，进行炼苗先将培养瓶移到自然光下1-2天，然后松瓶口注入无菌水，水量是苗高的1/4在自然光下2-3天，之后打开瓶盖在自然光下2-3天，洗去培养，在2000倍多菌灵溶液中浸泡半个小时然后移栽；炼苗基质：草炭：蛭石：珍珠岩比例为1：1:1；正午要遮光，前一星期每天浇透水，之后2-3天浇一次水在基质中生长三个月移栽；成活率90%；炼苗时基质的灭菌分两种，高锰酸钾加多菌灵喷洒基质法和高压灭菌法经试验过两种方法成活率基本相同，高压灭菌法成活率90%，高锰酸钾法成活率86%多其中一少部分放在人工气候室，大多数放置栋温室中，两个月后观察在人工气候室中的成活率100%长势较好。

本发明采用容器栽培与田间栽培相结合，完成对黑枸杞的栽培管理，容器苗便于管理。比如根据苗木的生长状况，可随时调节苗木间的距离；便于整形修剪等；在一年四季均可移栽，且不影响苗木的品质和生长保持原来的树形，节约成本、节省资源，使得黑枸杞的种植栽培包括后期的管理都能够做到产业化种植，同时也便于及时反馈黑枸杞苗木的生长状况。

附图说明

图1为本发明接种状态图。

图2为本发明培养状态图。

图3为本发明增殖状态图。

图4为本发明一星期时状态图。

图5为本发明二星期时状态图。

图6为本发明一个月时状态图。

图7为本发明二个月时状态图。

图8为本发明炼苗时期观察图。

图9为本发明炼苗基质配置图。

图10为本发明炼苗基质灭菌图。

图11为本发明高锰酸钾灭菌图。

图12为本发明人工气候室内成活状态图。

具体实施方式

一种黑枸杞的组培方法，先进行容器栽培，然后田间移栽裸根苗，具体包括如下步骤 ：

1）、选取黑枸杞一年生棚栽苗幼嫩枝条；

2）、外植体消毒：将嫩茎剪下流水半个小时，再用蒸馏水冲洗三次，然后75%的酒精冲洗30s，无菌水冲洗3次，再用0.1%的升汞灭菌2min，无菌水迅速冲洗3-5次；

3）、初代培养：将消过毒的嫩茎剪成1.5-2cm的茎段，分别接种于培养基MS+6-BA0.4mg/l+IBA0.01mg/l,MS+6-BA0.5mg/l+IBA0.01mg/和MS+6-BA0.6mg/l+IBA0.01mg/l上进行初代培养；蔗糖和琼脂含量分别是30g/l和7.5g/l,ph5.6-6.0；一星期后观察萌芽情况，一个月后观察其高度及分化状况。MS+6-BA0.5mg/l+ IBA0.01mg/l培养效果最好；

4）、增殖培养：选初代培养一个月后的组培苗，以MS为基本培养基，添加6-BA(0.10、0.15、0.20mg/l),IBA(0.01、0.015、0.02mg/l),每种培养基接种15瓶，每瓶接5个茎段；一周后观察萌芽情况，一个月后观察其增殖倍数及生长情况；当6-BA为0.10mg/l，IBA为0.02mg/l增殖系数最高；

5）、生根培养：选取生长健壮的组培苗，截成2cm长的茎段接种在MS培养基上，添加IBA(0.10、0.15、0.20mg/l),蔗糖30g,琼脂7.5g,每种培养基接种15瓶，两星期后观察其生根情况，一个月后统计其生根率及根数，IBA为0.1mg/l生根率达100%，效果最好；

6）、炼苗及移栽

当培养基中的苗长到根长5-6cm,根数4-5条、株高4-6cm时，进行炼苗先将培养瓶移到自然光下1-2天，然后松瓶口注入无菌水，水量是苗高的1/4在自然光下2-3天，之后打开瓶盖在自然光下2-3天，洗去培养，在2000倍多菌灵溶液中浸泡半个小时然后移栽；炼苗基质：草炭：蛭石：珍珠岩比例为1：1:1；正午要遮光，前一星期每天浇透水，之后2-3天浇一次水在基质中生长三个月移栽；成活率90%；炼苗时基质的灭菌分两种，高锰酸钾加多菌灵喷洒基质法和高压灭菌法经试验过两种方法成活率基本相同，高压灭菌法成活率90%，高锰酸钾法成活率86%多其中一少部分放在人工气候室，大多数放置栋温室中，两个月后观察在人工气候室中的成活率100%长势较好。

以上对本发明的一个实施例进行了详细说明，但所述内容仅为本发明型的较佳实施例，不能被认为用于限定本发明的实施范围。凡依本发明申请范围所作的等同变化与改进，均应归于本发明的涵盖范围之内。