白花泡桐无毒种苗的培育方法与流程

文档序号:12084558阅读:来源:国知局

技术特征:

1.白花泡桐无毒种苗的培育方法,包括以下步骤:

1)以白花泡桐带腋芽的茎段为外植体,消毒后接种于初代培养基中,光照培养,直至外植体上的腋芽发育生长形成初代幼苗;

2)将所得幼苗剪成带有1或2个以上腋芽的茎段,转入脱毒培养基中,在36-39℃结合蓝光照射的条件下进行脱毒培养,得到脱毒材料;

3)将所得脱毒材料剪成带有1或2个以上腋芽的茎段,交替接入高浓度植物激素继代培养基和低浓度植物激素继代培养基中光照培养,得到丛生苗;其中:

所述的高浓度植物激素继代培养基配方为:MS+6-BA 3.5-4.5mg·L-1+IBA 0.35-0.45mg·L-1+蔗糖25-35g·L-1+琼脂3.0-4.0g·L-1,pH5.6-6.0;

所述的低浓度植物激素继代培养基配方为:MS+6-BA 0.2-0.6mg·L-1+IBA 0.02-0.06mg·L-1+蔗糖25-35g·L-1+琼脂3.0-4.0g·L-1,pH5.6-6.0;

4)将所得丛生苗分株,转入生根培养基中,光照培养,得到生根苗;所述的生根培养基配方为:1/2MS+NAA 0.1-0.4mg·L-1+蔗糖15-25g·L-1+卡拉胶3.2-3.6g·L-1,pH 5.6-6.0。

2.根据权利要求1所述的培育方法,其特征在于:步骤1)中,所述的初代培养基配方为:MS+6-BA 1.0-4.0mg·L-1+IBA 0.1-0.4mg·L-1+蔗糖25-35g·L-1+琼脂3.0-4.0g·L-1,pH 5.6-6.0。

3.根据权利要求1所述的培育方法,其特征在于:步骤1)中,所述的初代培养基配方为:MS+6-BA 2.0mg·L-1+IBA 0.2mg·L-1+蔗糖30g·L-1+琼脂3.5g·L-1,pH 5.8。

4.根据权利要求1所述的培育方法,其特征在于:步骤2)中,所述的脱毒培养基配方为:MS+6-BA3.5-4.5mg·L-1+IBA0.35-0.45mg·L-1+蔗糖25-35g·L-1+琼脂3.0-4.0g·L-1,pH 5.6-6.0。

5.根据权利要求1所述的培育方法,其特征在于:步骤2)中,所述的脱毒培养基为:MS+6-BA4.0mg·L-1+IBA0.4mg·L-1+蔗糖30g·L-1+琼脂3.5g·L-1,pH 5.8。

6.根据权利要求1所述的培育方法,其特征在于:步骤3)中,所述的高浓度植物激素继代培养基配方为:MS+6-BA 4.0mg·L-1+IBA 0.4mg·L-1+蔗糖30g·L-1+琼脂3.5g·L-1,pH 5.8;

所述的低浓度植物激素继代培养基配方为:MS+6-BA 0.5mg·L-1+IBA0.05mg·L-1+蔗糖30g·L-1+琼脂3.5g·L-1,pH 5.8。

7.根据权利要求1所述的培育方法,其特征在于:步骤4)中,所述的生根培养基配方为:1/2MS+NAA0.2mg·L-1+蔗糖20g·L-1+卡拉胶3.4g·L-1,pH 5.8。

8.根据权利要求1-7中任一项所述的培育方法,其特征在于:步骤2)中,蓝光的照射时间为10-15h/d,光照强度为40±5μmol·m-2·s-1

9.根据权利要求1-7中任一项所述的培育方法,其特征在于:步骤1)、步骤3)和步骤4)中,所述光照培养的培养条件为:温度为27±5℃,光照时间为10-15h/d,光照强度为40±5μmol·m-2·s-1

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