一种应用于运输试管苗时覆盖培养基的方法与流程

文档序号:12084555阅读:646来源:国知局

本发明涉及一种应用于运输试管苗时覆盖培养基的方法。



背景技术:

利用植物组织培养的方法可对植物进行快速繁殖,这种快速繁殖技术已广泛用于多种(类)植物的大批量生产。试管苗在运输过程中其培养基易损坏,污染损毁试管苗。原因是起到固定作用的一般培养基琼脂的浓度在10g/L~25g/L之间,在这个范围内可以满足凝固要求,对微生物生长没有太大影响,但其琼脂浓度高,培养基会比较硬,不易接苗。



技术实现要素:

本发明是要解决现有的试管苗在运输过程中其培养基易损坏,污染损毁试管苗的技术问题,而提供一种应用于运输试管苗时覆盖培养基的方法。

本发明的一种应用于运输试管苗时覆盖培养基的方法是按以下步骤进行的:

将MS培养基、蔗糖和焦磷酸盐放入蒸馏水中混合,加热至完全溶解,用10mol/L的NaOH溶液调节至pH值为6.0~8.0,得到混合液;将琼脂放入混合液中,然后放入灭菌锅内在温度为121℃的条件下灭菌20min,取出后置于室温自然降温至45℃,得到液态的凝固剂,然后在超净工作台上将液态的凝固剂用玻璃漏斗注入温度为8℃且装有试管苗和固体培养基的三角瓶中至液态的凝固剂覆盖在固体培养基的上方且厚度为1cm为止,注入液态的凝固剂时要贴着三角瓶的内壁注入避免接触到试管苗的茎和叶,在室温下凝固后即可运输试管苗;所述的三角瓶的容量为150mL;

所述的混合液中MS培养基的浓度为4.74g/L,蔗糖的浓度为30g/L,焦磷酸盐的浓度为3g/L;所述的琼脂的质量与混合液的体积比为(20g~25g):1L。

本发明的凝固剂需放置在三角瓶中配合试管苗的培养基使用,当凝固剂凝固后,在运输的过程中倒置放置三角瓶时,由于三角瓶的开口处尺寸越来越小,所以凝固剂会卡在瓶中使得试管苗会保持在原处。

本发明的凝固剂具有无毒、低残留、无污染、无抗药性、高选择性、材料来源广泛、与试管苗的原培养基无不利反应;

本发明的方法工艺简单,成本低,与其它凝固剂相比,增加了琼脂的浓度和pH值并没有改变培养基的成分,不会造成原培养基失水和营养成分的流失。

具体实施方式

具体实施方式一:本实施方式为一种应用于运输试管苗时覆盖培养基的方法,具体是按以下步骤进行的:

将MS培养基、蔗糖和焦磷酸盐放入蒸馏水中混合,加热至完全溶解,用10mol/L的NaOH溶液调节至pH值为6.0~8.0,得到混合液;将琼脂放入混合液中,然后放入灭菌锅内在温度为121℃的条件下灭菌20min,取出后置于室温自然降温至45℃,得到液态的凝固剂,然后在超净工作台上将液态的凝固剂用玻璃漏斗注入温度为8℃且装有试管苗和固体培养基的三角瓶中至液态的凝固剂覆盖在固体培养基的上方且厚度为1cm为止,注入液态的凝固剂时要贴着三角瓶的内壁注入避免接触到试管苗的茎和叶,在室温下凝固后即可运输试管苗;所述的三角瓶的容量为150mL;

所述的混合液中MS培养基的浓度为4.74g/L,蔗糖的浓度为30g/L,焦磷酸盐的浓度为3g/L;所述的琼脂的质量与混合液的体积比为(20g~25g):1L。

具体实施方式二:本实施方式与具体实施方式一不同的是:所述的焦磷酸盐为焦磷酸钠或酸式焦磷酸钠。其他与具体实施方一相同。

具体实施方式三:本实施方式与具体实施方式一不同的是:所述的温度为8℃且装有试管苗的三角瓶放置在冰箱中。其它与具体实施方式一相同。

具体实施方式四:本实施方式与具体实施方式一不同的是:所述的琼脂的质量与混合液的体积比为20g:1L。其它与具体实施方式一相同。

具体实施方式五:本实施方式与具体实施方式一不同的是:所述的琼脂的质量与混合液的体积比为25g:1L。其它与具体实施方式一相同。

具体实施方式一中的MS培养基的配方如下:

通过以下试验验证发明效果:

试验一:本试验为一种应用于运输试管苗时覆盖培养基的方法,具体是按以下步骤进行的:

将MS培养基、蔗糖和焦磷酸盐放入蒸馏水中混合,加热至完全溶解,用10mol/L的NaOH溶液调节至pH值为7.0,得到混合液;将琼脂放入混合液中,然后放入灭菌锅内在温度为121℃的条件下灭菌20min,取出后置于室温自然降温至45℃,得到液态的凝固剂,然后在超净工作台上将液态的凝固剂用玻璃漏斗注入温度为8℃且装有试管苗和固体培养基的三角瓶中至液态的凝固剂覆盖在固体培养基的上方且厚度为1cm为止,注入液态的凝固剂时要贴着三角瓶的内壁注入避免接触到试管苗的茎和叶,在室温下凝固后即可运输试管苗;所述的三角瓶的容量为150mL;

所述的混合液中MS培养基的浓度为4.74g/L,蔗糖的浓度为30g/L,焦磷酸盐的浓度为3g/L;

所述的焦磷酸盐为焦磷酸钠或酸式焦磷酸钠;

所述的温度为8℃且装有试管苗的三角瓶放置在冰箱中;

所述的琼脂的质量与混合液的体积比为20g:1L。

本试验的凝固剂需放置在三角瓶中配合试管苗的培养基使用,当凝固剂凝固后,在运输的过程中倒置放置三角瓶时,由于三角瓶的开口处尺寸越来越小,所以凝固剂会卡在瓶中使得试管苗会保持在原处。

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