一种提前打破大百合休眠的方法与流程

文档序号:11070976阅读:来源:国知局

技术特征:

1.一种提前打破大百合休眠的方法,其特征在于:包括外植体获取、外植体消毒、外植体低温处理和芽诱导培养工序,采集秋季生长发育成熟大百合小球作为外植体,通过对外植体无菌消毒、低温处理后,置于适宜的温度、湿度和光照强度条件下进行培养,诱导芽的萌发;其主要操作步骤为:

(1)外植体获取:采集秋季生长发育成熟的大百合小球作为外植体,将采集得到的大百合小球放入封口袋,立即带回室内;

(2)外植体消毒:对大百合小球进行洗涤预处理后,再用化学试剂进行消毒处理;

(3)外植体低温处理:将消毒后的大百合小球用无菌吸水纸吸干表面水分,然后再将大百合小球放入温度为3-5℃的冰箱或冷库中低温处理,放置40-50天;

(4)芽诱导培养:将步骤(3)低温处理的大百合小球接种于诱导培养基中,再置于适宜的条件下进行室内培养,诱导芽萌发。

2.根据权利要求1所述的一种提前打破大百合休眠的方法,其特征在于:步骤(2)中所述的洗涤预处理的方法是将得到的大百合小球及时用自来水冲洗2-3遍,再用脱脂棉蘸低浓度的洗洁精溶液擦拭大百合小球,最后将大百合小球装入纱布袋内并置于流水中,冲洗15-20min。

3.根据权利要求2所述的一种提前打破大百合休眠的方法,其特征在于:所述的低浓度的洗洁精溶液是体积浓度为1.5-3.0%的洗洁精水溶液。

4.根据权利要求1所述的提前打破大百合休眠的方法,其特征在于:步骤(2)中所述的消毒处理的方法是将洗涤预处理后的大百合小球置于干净烧杯内,用无菌水清洗2-3次,然后将大百合小球转到超净工作台上,置入灭菌过的广口三角瓶,迅速向瓶内倒入福尔马林溶液灭菌液进行灭菌消毒,充分浸没大百合小球后加盖盖好瓶口,轻轻晃动三角瓶3-5min,然后将灭菌液倒出,然后立即将大百合小球倒入无菌水轻搅漂洗3次,每次不少于2min。

5.根据权利要求1所述的提前打破大百合休眠的方法,其特征在于:步骤(3)中所述的低温处理在将大百合小球放入冰箱或冷库的过程中,必须保证每个大百合小球之间不发生接触。

6.根据权利要求1所述的一种提前打破大百合休眠的方法,其特征在于:步骤(4)中所述的诱导培养基为MS培养基+30g/L蔗糖+6g/L琼脂+1.5-2.0 mg/L 6-BA+10mg/L维生素C+0.05mg/LNAA。

7.根据权利要求1所述的一种提前打破大百合休眠的方法,其特征在于:步骤(4)中所述的室内培养条件为白天温度20 ±2℃,夜间温度 14 ±2 ℃,采用日光灯培养,光照强度1600-1800lx,光照时数10h•d- 1

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