本发明涉及植物组织培养技术领域，尤其涉及一种紫玉兰组织培养工艺。
背景技术：
紫玉兰又名木兰、辛夷，为中国特有植物，分布在中国云南、福建、湖北、四川等地，生长于海拔300米至1600米的地区，一般生长在山坡林缘；紫玉兰花朵艳丽怡人，芳香淡雅，孤植或丛植都很美观，树形婀娜，枝繁花茂，是优良的庭园、街道绿化植物，为中国有2000多年历史的传统花卉和中药；且不易移植和养护，是非常珍贵的花木。
现在随着技术的发展，很多地区都在开展紫玉兰培养的方法，想在本地区培育种植紫玉兰；传统的紫玉兰一般采用播种、扦插、嫁接、压条和分株繁殖等培养方式；这些培养方式的耗时长，而且繁育不易成活；现有的一些紫玉兰组织培养方式是在封闭的无菌条件下进行的，所需成本较大，而且还存在着组织培养中外植体容易褐化，成活率不高的问题，不能用于紫玉兰的大量繁殖。
申请号为201310730707.3的专利文件公开了一种紫玉兰组织培养方法，用于提供一种在开放式条件下进行，不用置备一个封闭式无菌环境，节约了成本；对紫玉兰灭菌处理，保证了外植体无菌污染，提高其培养成活率高；用2％PVP浸泡外植体以及在培养基中加入2％PVP，减轻了外植体的褐化，提高了外植体的成活率的紫玉兰组织培养方法；该紫玉兰组织培养方法操作简单，时间短，成本低廉，成活率高、生根率高，并能实现短期内的出瓶移栽，且能够保持原品种的优良性状，为良种繁育和产业化生产奠定基础；但是，其不能够大幅度提高紫玉兰组织培养的生根率和成活率，且不能够提高组织培养的紫玉兰的质量。
因此，我们提出了一种紫玉兰组织培养工艺用于解决上述问题。
技术实现要素：
基于背景技术存在的技术问题，本发明提出了一种紫玉兰组织培养工艺。
本发明提出的一种紫玉兰组织培养工艺，包括以下步骤：
S1：对进行紫玉兰组织培养的场地做灭菌抑菌处理；
S2：在生长健壮、无病虫害的紫玉兰母本植株上选择直径为1-3cm带有腋芽的紫玉兰枝条作为外植体；
S3：将外植体先用自来水冲洗10-12min，然后用浓度为0.1-0.3％的升汞和吐温混合物浸泡8-12min，最后用无菌水冲洗4-7min；
S4：准备以下重量份的原料：乙醇20-25份，吲哚丁酸钾21-24份，滑石粉15-20份，黏土12-16份，萘乙酸钠25-30份，草木灰18-22份，火土灰17-21份，然后将乙醇、吲哚丁酸钾、滑石粉、黏土、萘乙酸钠、草木灰和火土灰混合，制得试剂；
S5：将无菌水冲洗后的外植体浸入试剂内，浸泡5-8h；
S6：将浸泡后的外植体插入基本培养基中进行培养，至新芽长出后，将长出新芽的外植体转插入伸长培养基中进行新芽的伸长培养，至新芽伸长到0.3-0.5cm后，将外植体接入含有生长调节物质的基本培养基中，培养20-25天后，将外植体在5-8℃下冷藏12-16天，然后转接到基本培养基中继续培养25-30天，生根后将生根苗移接到室外进行培养。
优选地，所述S2中，在生长健壮、无病虫害的紫玉兰母本植株上选择直径为2-3cm带有腋芽的紫玉兰枝条作为外植体。
优选地，所述S3中，将外植体先用自来水冲洗11-12min，然后用浓度为0.2-0.3％的升汞和吐温混合物浸泡9-11min，最后用无菌水冲洗5-6min。
优选地，所述S4中，准备以下重量份的原料：乙醇21-24份，吲哚丁酸钾22-23份，滑石粉16-19份，黏土13-15份，萘乙酸钠26-29份，草木灰19-21份，火土灰18-20份，然后将乙醇、吲哚丁酸钾、滑石粉、黏土、萘乙酸钠、草木灰和火土灰混合，制得试剂。
优选地，所述S5中，将无菌水冲洗后的外植体浸入试剂内，浸泡6-7h。
优选地，所述S6中，将浸泡后的外植体插入基本培养基中进行培养，至新芽长出后，将长出新芽的外植体转插入伸长培养基中进行新芽的伸长培养，至新芽伸长到0.4-0.5cm后，将外植体接入含有生长调节物质的基本培养基中，培养21-24天后，将外植体在6-7℃下冷藏13-15天，然后转接到基本培养基中继续培养26-29天，生根后将生根苗移接到室外进行培养。
本发明中，所述一种紫玉兰组织培养工艺通过在生长健壮、无病虫害的紫玉兰母本植株上选择紫玉兰枝条作为外植体能够保证外植体的质量优良，通过用自来水冲洗、用浓度为0.1-0.3％的升汞和吐温混合物浸泡、用无菌水冲洗能够进行消毒，避免外植体感染病菌，通过将外植体浸入试剂内能够大幅度提高外植体的生根率和成活率，且能够提高外植体的质量，本发明能够保证组织培养的紫玉兰的质量优良，且能够大幅度提高紫玉兰组织培养的生根率和成活率，更能够提高组织培养的紫玉兰的质量，工艺简单，使用方便。
具体实施方式
下面结合具体实施例对本发明作进一步解说。
实施例一
本实施例提出了一种紫玉兰组织培养工艺，包括以下步骤：
S1：对进行紫玉兰组织培养的场地做灭菌抑菌处理；
S2：在生长健壮、无病虫害的紫玉兰母本植株上选择直径为1cm带有腋芽的紫玉兰枝条作为外植体；
S3：将外植体先用自来水冲洗10min，然后用浓度为0.1％的升汞和吐温混合物浸泡8min，最后用无菌水冲洗4min；
S4：准备以下重量份的原料：乙醇20份，吲哚丁酸钾21份，滑石粉15份，黏土12份，萘乙酸钠25份，草木灰18份，火土灰17份，然后将乙醇、吲哚丁酸钾、滑石粉、黏土、萘乙酸钠、草木灰和火土灰混合，制得试剂；
S5：将无菌水冲洗后的外植体浸入试剂内，浸泡5h；
S6：将浸泡后的外植体插入基本培养基中进行培养，至新芽长出后，将长出新芽的外植体转插入伸长培养基中进行新芽的伸长培养，至新芽伸长到0.3cm后，将外植体接入含有生长调节物质的基本培养基中，培养20天后，将外植体在5℃下冷藏12天，然后转接到基本培养基中继续培养25天，生根后将生根苗移接到室外进行培养。
实施例二
本实施例提出了一种紫玉兰组织培养工艺，包括以下步骤：
S1：对进行紫玉兰组织培养的场地做灭菌抑菌处理；
S2：在生长健壮、无病虫害的紫玉兰母本植株上选择直径为2cm带有腋芽的紫玉兰枝条作为外植体；
S3：将外植体先用自来水冲洗11min，然后用浓度为0.2％的升汞和吐温混合物浸泡10min，最后用无菌水冲洗5min；
S4：准备以下重量份的原料：乙醇23份，吲哚丁酸钾22份，滑石粉18份，黏土14份，萘乙酸钠28份，草木灰20份，火土灰19份，然后将乙醇、吲哚丁酸钾、滑石粉、黏土、萘乙酸钠、草木灰和火土灰混合，制得试剂；
S5：将无菌水冲洗后的外植体浸入试剂内，浸泡6h；
S6：将浸泡后的外植体插入基本培养基中进行培养，至新芽长出后，将长出新芽的外植体转插入伸长培养基中进行新芽的伸长培养，至新芽伸长到0.4cm后，将外植体接入含有生长调节物质的基本培养基中，培养23天后，将外植体在6℃下冷藏14天，然后转接到基本培养基中继续培养28天，生根后将生根苗移接到室外进行培养。
实施例三
本实施例提出了一种紫玉兰组织培养工艺，包括以下步骤：
S1：对进行紫玉兰组织培养的场地做灭菌抑菌处理；
S2：在生长健壮、无病虫害的紫玉兰母本植株上选择直径为3cm带有腋芽的紫玉兰枝条作为外植体；
S3：将外植体先用自来水冲洗12min，然后用浓度为0.3％的升汞和吐温混合物浸泡12min，最后用无菌水冲洗7min；
S4：准备以下重量份的原料：乙醇25份，吲哚丁酸钾24份，滑石粉20份，黏土16份，萘乙酸钠30份，草木灰22份，火土灰21份，然后将乙醇、吲哚丁酸钾、滑石粉、黏土、萘乙酸钠、草木灰和火土灰混合，制得试剂；
S5：将无菌水冲洗后的外植体浸入试剂内，浸泡8h；
S6：将浸泡后的外植体插入基本培养基中进行培养，至新芽长出后，将长出新芽的外植体转插入伸长培养基中进行新芽的伸长培养，至新芽伸长到0.5cm后，将外植体接入含有生长调节物质的基本培养基中，培养25天后，将外植体在8℃下冷藏16天，然后转接到基本培养基中继续培养30天，生根后将生根苗移接到室外进行培养。
对实施例一、实施例二、实施例三和常规组织培养工艺培养的紫玉兰进行测试，测试结果表明：实施例一、实施例二和实施例三的组织培养工艺培养的紫玉兰的质量比较常规组织培养工艺培养的紫玉兰的质量提高百分比分别为4.3％、4.8％和5.6％，实施例一、实施例二、实施例三和常规组织培养工艺培养的紫玉兰的生根率分别为69％、73％、84％和56％，由此可知，实施例一、实施例二和实施例三的组织培养工艺培养的紫玉兰的质量和生根率比较常规组织培养工艺培养的紫玉兰的质量和生根率具有明显提高，且实施例三为最佳实施例。
以上所述，仅为本发明较佳的具体实施方式，但本发明的保护范围并不局限于此，任何熟悉本技术领域的技术人员在本发明揭露的技术范围内，根据本发明的技术方案及其发明构思加以等同替换或改变，都应涵盖在本发明的保护范围之内。