包含I2SCN-离子和/或I(SCN)2-离子的组合物的制作方法

文档序号:15569853发布日期:2018-09-29 04:12阅读:549来源:国知局
更精确地,本发明涉及通过在存在卤素的情况下氧化硫氰酸根离子产生的抗微生物化合物的领域,所述氧化由称为氧化还原酶、更准确地过氧化物酶的特定酶催化,优选的酶是乳过氧化物酶(lp)。在本申请的上下文中,在元素周期表的第17列(以前称为vii或viia族)的化学元素中,术语“卤素”特别地表示氯(cl)、溴(br)和碘(i)。卤素可以形成称为“卤离子”的“x-”型离子:氯离子(cl-)、溴离子(br-)和碘离子(i-)。一般来说,术语“拟卤素(pseudo-halogène)”表示“mn”形式的无机二元化合物,其中:-m是氰根(cn-)、氰酸根(ocn-)或硫氰酸根(scn-);并且-n是这些相同基团中的一种或如上限定的真卤素。在本申请的上下文中,术语“拟卤素”应理解为优选表示硫氰酸根离子(scn-)。在本申请的上下文中,术语“互卤素(interhalogène)”表示由数个如上限定的卤素形成的化合物,所述卤素可以是相同的或不同的。作为一个实例,我们可以列举三碘化物离子i3-(相同卤素)或式icl的一氯化碘(不同卤素)。在本申请的上下文中,术语“拟互卤素(interpseudohalogène)”表示由至少一个如上限定的卤素和硫氰酸根(scn-)形成的化合物。作为一个实例,我们可以列举以下物质:i2scn-、iscn和i(scn)2-。一般来说,已知卤化物(cl-、br-或i-)或拟卤化物(scn-)可以被氧化,例如在存在过氧化氢(h2o2)(或h2o2供体体系)的情况下。反应式为如下:h2o2+x-(cl-、br-或i-)→ox-+h2oh2o2+scn-→oscn-+h2o这些氧化反应也可以在存在特定酶的情况下进行。这些氧化反应也可以在同时存在卤离子(x-)和scn-的情况下(使用或不使用酶)进行。这些氧化反应也可以在存在特定酶的情况下进行。在生物化学中,氧化还原酶类别的酶明确分为不同的组群:氧化酶、还原酶、过氧化物酶、加氧酶、氢化酶、脱氢酶等。更特别地,过氧化物酶是在自然界中非常普遍存在的酶。在生物体中,其显著地分解毒性过氧化物化合物。在实验室中,过氧化物酶被非常广泛地使用,例如,尤其是辣根过氧化物酶(hrp)作为免疫测定中的检测试剂在生物技术中广泛使用。在过氧化物酶组群中,显著区分血红素过氧化物酶。血红素过氧化物酶存在于植物和哺乳动物中。其在植物中的作用是多重的:生长素代谢、细胞外防御、木质素的生物合成和降解、过氧化氢的降解,以及毒性还原剂的氧化。植物的过氧化物酶由应激诱导,例如在被病原体、损伤、热、冷、干燥或uv光攻击之后。对于哺乳动物的过氧化物酶,其在甲状腺激素的产生中、过氧化氢的解毒中发挥作用,并且还用作针对病原体的天然防御系统。在过氧化物酶组群中,特别地发现乳过氧化物酶(lp)、甲状腺过氧化物酶(tpo)、髓过氧化物酶(mpo)、唾液过氧化物酶(spo)和嗜酸性粒细胞过氧化物酶(epo)。在存在特定底物的情况下,过氧化物酶将催化氧化反应并产生负责例如抗微生物活性的氧化物质。底物的特异性是过氧化物酶类型的特征。乳过氧化物酶(lp)以约30mg/l的浓度存在于牛乳中,所述浓度根据季节、牛饲料而变化,但是尤其根据泌乳阶段而变化(在产犊后3至5天浓度最大)。其一种生物功能由在存在过氧化氢(h2o2)和硫氰酸根(scn-)的情况下的抑菌/杀菌作用组成。乳过氧化物酶(lp)也可以氧化某些卤化物,例如碘离子(i)。由乳过氧化物酶(lp)催化的氧化反应可以总结如下:h2o2+x-(cl-、br-或i-)+lp→ox-+h2o+lph2o2+scn-+lp→oscn-+h2o+lp在现有技术中,已知次碘酸根(oi-)和次硫氰酸根(oscn-)种类具有抑菌作用。这些种类例如与病原体代谢的必需酶的基团nh2或巯基(-sh)反应。在现有技术中,已经进行一些尝试以在与过氧化氢和乳过氧化物酶(lp)接触之前混合i-和scn-离子。包含乳过氧化物酶(lp)和硫氰酸根离子的以名称销售的产品是已知的。该产品对某些细菌和病毒具有活性。抗微生物活性是由于次硫氰酸根离子(oscn)。在出版物bosh等“thelactoperoxidasesystem:theinfluenceofiodideandthechemicalandantimicrobialstabilityovertheperiodofabout18months”(journalofappliedmicrobiology2000,89,215-224)中,对包含乳过氧化物酶(lp)、硫氰酸根离子(scn)-和碘离子(i-)的体系关于杀细菌和杀真菌特性以及持续时间进行了研究。从第217页的图表中可以推断,碘离子提高乳过氧化物酶(lp)体系的效力。从图4和图5可以推断,当在存在氧的情况下储存体系时,杀菌活性降低,特别是当组合物储存超过200天时。作者指出,形成的离子是由于其杀菌/抑菌活性而已知的oi-和oscn-离子。指出,这些离子的浓度在约1个月内保持稳定。氧化反应在scn-和i-离子之间“并行”发生。在出版物bafort等“modeofactionoflactoperoxidaseasrelatedtoitsantimicrobialactivity:areview”(hindawipublishingcorporationenzymeresearch,第2014卷,文章id517164,13页)中,研究了由硫氰酸根离子或碘离子通过乳过氧化物酶(lp)体系获得的活性化学种类。文章最后指出,关于乳过氧化物酶-碘化物-硫氰酸盐体系的抗微生物活性,根据细菌菌株获得相互矛盾的结果。因此,在现有技术的方法中,当乳过氧化物酶(lp)体系与scn-和i-一起操作时,后者竞争结合至乳过氧化物酶(lp)的结合位点,从而在存在过氧化氢(h2o2)的情况下联合产生oscn-和oi-。现有技术中描述的反应方案如下:h2o2+scn-+i-+乳过氧化物酶(lp)→h2o+oscn-+oi-+乳过氧化物酶(lp)。令人惊讶的是,已经观察到在存在h2o2、存在乳过氧化物酶(lp)(经有限的持续时间)并且在4至8的ph的情况下,通过i-和scn-离子的联合氧化所获得的组合物具有显著提高的抗微生物活性,即大于包含oscn-和oi-离子的现有技术组合物。在特定条件下,已经证明形成了除oscn-和oi-离子之外的种类,并且甚至更令人惊讶的是,已经表明甚至未形成任何oscn-离子。已经证明,由此形成的种类不仅具有高活性,而且与包含oscn-和oi-离子的传统组合物相比远远更加稳定。所获得的溶液不含oscn-离子并且包含以下“拟互卤化物”型离子的混合物:i2scn-和i(scn)2-。在现有技术中,这两个种类i2scn-和i(scn)2-被lewis,c.&skoog,d.a.,1962.spectrophotometricstudyofathiocyanatecomplexofiodine,journaloftheamericanchemicalsociety,84(7),第1101-1106页记录。通过卤化物/硫氰酸盐混合物的化学氧化获得的组合物已经在现有技术中描述,特别是已在lewis,c.&skoog,d.a.,1962.spectrophotometricstudyofathiocyanatecomplexofiodine,journaloftheamericanchemicalsociety,84(7),第1101-1106页和wo2016/026946中描述。由于形成动力学极其缓慢,因此这些组合物不能获得包含选自i2scn-和/或i(scn)2-离子的离子作为源自卤化物硫氰酸盐混合物氧化的主要化学种类,如wo2016/026946所附的质谱证明的。因此,如一些实施例中所证明的,所得组合物的抗微生物活性与根据本发明的组合物的抗微生物活性不相当。通过卤化物/硫氰酸盐混合物的酶促氧化获得的组合物在现有技术中已经描述,特别是在ep1349457或wo2016026946中已经描述。这些组合物包含永久保留在组合物中的酶。如实施例中证明的,酶与i2scn-和/或i(scn)2-离子伴随存在超过60分钟的时间使得降解i2scn-和/或i(scn)2-并且使i2scn-和/或i(scn)2-在联合存在48小时后完全消失。本发明涉及包含选自i2scn-离子和i(scn)2-离子的至少一种离子的稳定组合物,所述组合物不含次硫氰酸根离子(oscn-)。所述组合物通过卤化物硫氰酸盐混合物的酶促氧化获得。在所述组合物中,源自卤化物硫氰酸盐混合物的氧化的主要化学种类是选自i2scn-和/或i(scn)2-离子的离子。在一个实施方案中,根据本发明的稳定组合物的特征在于,其包含组合的i2scn-和i(scn)2-离子,所述组合物不含次硫氰酸根离子(oscn-)。在一个实施方案中,根据本发明的稳定组合物的特征在于,其包含i2scn-离子。在一个实施方案中,根据本发明的稳定组合物的特征在于,其包含i(scn)2-离子。在一个实施方案中,根据本发明的稳定组合物的特征在于,其还包含硫氰酸碘iscn。在一个实施方案中,根据本发明的稳定组合物的特征在于,其还包含选自乳铁蛋白、溶菌酶、免疫球蛋白、生长因子、及其混合物的至少一种化合物。在一个实施方案中,根据本发明的稳定组合物的特征在于,其还包含选自乳铁蛋白、溶菌酶、免疫球蛋白、一种或更多种生长因子、及其混合物的至少一种化合物。在一个实施方案中,根据本发明的稳定组合物的特征在于,其还包含选自乳铁蛋白、溶菌酶、免疫球蛋白、一种或更多种生长因子、及其混合物的至少一种化合物,其特征在于,至少一种生长因子选自血小板衍生生长因子(plateletderivedgrowthfactor,pdgf)、成纤维细胞生长因子(fibroblastgrowthfactor,fgf)、转化生长因子(transforminggrowthfactor,tgf)、血管生成素、表皮生长因子(epidermalgrowthfactor,egf)、或其混合物。在一个实施方案中,根据本发明的稳定组合物的特征在于,其还包含选自乳铁蛋白、溶菌酶、免疫球蛋白、一种或更多种生长因子、及其混合物的至少一种化合物,其特征在于,至少一种生长因子由营养源供应,所述营养源是脱脂或未脱脂的乳清初乳、或者脱脂或未脱脂的初乳。在一个实施方案中,根据本发明的稳定组合物的特征在于,其还包含至少乳铁蛋白。在一个实施方案中,根据本发明的稳定组合物的特征在于,其还包含至少溶菌酶。在一个实施方案中,根据本发明的稳定组合物的特征在于,其还包含至少一种免疫球蛋白。在一个实施方案中,根据本发明的稳定组合物的特征在于,其还包含至少一种生长因子。在一个实施方案中,根据本发明的稳定组合物的特征在于,其还包含选自乳铁蛋白、溶菌酶、免疫球蛋白和至少一种生长因子的至少一种化合物。在一个实施方案中,根据本发明的稳定组合物的特征在于,其还包含选自油、铺展剂、乳化剂、润滑剂、黏合剂、及其混合物的至少一种化合物。在一个实施方案中,根据本发明的稳定组合物的特征在于,其还包含选自以下的至少一种化合物:月桂基硫酸钠、硬脂酸镁、卵磷脂、乙氧基化醇、植物油、矿物油、动物油、聚氧乙烯山梨醇六油酸酯、羧甲基纤维素(cmc)、黄原胶、阿拉伯胶、淀粉、及其混合物。在一个实施方案中,根据本发明的稳定组合物的特征在于,其还包含选自以下的至少一种化合物:月桂基硫酸钠、硬脂酸镁、卵磷脂、乙氧基化醇、植物油、磷脂酰植物油、矿物油、动物油、聚氧乙烯山梨醇六油酸酯、羧甲基纤维素(cmc)、黄原胶、阿拉伯胶、淀粉、及其混合物,这使得能够在某些应用中增强例如黏附稳定性。本发明还涉及包含含有碘原子的化学实体的稳定组合物,其中以最大数目存在并且包含至少一个碘原子的实体选自:i2scn-、i(scn)2-离子、及其混合物。本发明还涉及包含含有碘原子的化学实体的稳定组合物,其中所述组合物的至少50%的碘原子涉及选自离子i2scn-、i(scn)2-、及其混合物的离子。本发明还涉及用于制备根据本发明的组合物的方法,其包括:-步骤a:制备包含至少两种底物、至少一种氧化剂、和催化剂的反应介质,所述催化剂和所述氧化剂的合并取决于所述两种底物的合并;-反应步骤b:开始于所述氧化剂和所述催化剂的合并;-步骤c:除去所述催化剂并回收包含至少i2scn-离子和/或i(scn)2-离子的根据本发明的组合物;所述底物是卤化物(x-)和硫氰酸根(scn-)离子,所述氧化剂是过氧化氢(h2o2)生成体系和/或过氧化氢,所述催化剂是至少一种过氧化物酶,所述方法的特征在于,所述反应步骤的持续时间为30至1800秒,并且特征在于,其不导致形成次硫氰酸根离子(oscn-)。在一个实施方案中,所述底物的所述合并是同时的。在一个实施方案中,所述底物的所述合并是依次的。在一个实施方案中,卤离子是碘离子。在一个实施方案中,根据本发明的方法的特征在于,在步骤c结束后回收的根据本发明的组合物包含i2scn-离子和/或i(scn)2-离子。在一个实施方案中,根据本发明的方法的特征在于,反应介质是水溶液。在一个实施方案中,根据本发明的方法的特征在于,所述卤化物(x-)和硫氰酸根(scn-)离子以粉末形式或以溶液形式添加到所述反应介质中。在一个实施方案中,根据本发明的方法的特征在于,所述卤化物(x-)和硫氰酸根(scn-)离子以粉末形式添加到所述反应介质中。在一个实施方案中,根据本发明的方法的特征在于,所述卤化物(x-)和硫氰酸根(scn-)离子以溶液形式添加到所述反应介质中。在一个实施方案中,根据本发明的方法的特征在于,所述卤化物(x-)和硫氰酸根(scn-)离子以分别粉末和溶液的形式、或以分别溶液和粉末的形式添加到所述反应介质中。在一个实施方案中,根据本发明的方法的特征在于,在步骤c结束后获得的所述介质是稳定的根据本发明的组合物。在一个具体实施方案中,用于制备抗微生物组合物的方法至少包括以下步骤:-步骤1:制备包含至少一种卤离子(x-)的溶液a1;-步骤2:制备包含至少一种硫氰酸根离子(scn-)的溶液a2;-步骤3:制备由在水溶液中的过氧化氢(h2o2)生成体系或过氧化氢组成的组分b;-步骤4:将过氧化物酶浸入水溶液或缓冲溶液中;-步骤5:使组分a1和a2在包含过氧化物酶的溶液中接触;-步骤6:使化合物b在步骤5中获得的溶液中接触并维持接触30至1800秒的时间;-步骤7:去除过氧化物酶,并回收包含至少x2scn-离子和/或x(scn)2-离子的根据本发明的组合物,其中所述方法不导致形成次硫氰酸根离子(oscn-)。步骤1、2、3、4和5可以以任意顺序或同时进行。在一个实施方案中,卤离子是碘离子。在一个具体实施方案中,用于制备抗微生物组合物的方法至少包括以下步骤:-步骤1:制备包含至少一种碘离子(i-)的溶液a1;-步骤2:制备包含至少一种硫氰酸根离子(scn-)的溶液a2;-步骤3:制备由在水溶液中的过氧化氢(h2o2)生成体系或过氧化氢组成的化合物b;-步骤4:将过氧化物酶浸入水溶液或缓冲溶液中;-步骤5:使化合物a1和a2在包含过氧化物酶的溶液中接触;-步骤6:使组分b在步骤5中获得的溶液中接触并维持接触30至1800秒的时间;-步骤7:去除过氧化物酶,并回收包含至少i2scn-离子和/或i(scn)2-离子的根据本发明的组合物,其中所述方法不导致形成次硫氰酸根离子(oscn-)。步骤1、2、3、4和5可以以任意顺序或同时进行。在该方法结束后,可以对根据本发明的组合物进行冻干步骤,在所述冻干步骤结束后获得冻干物,所述冻干物在重溶解期间使得可以重构包含x2scn-离子和/或x(scn)2-离子且不含次硫氰酸根离子(oscn-)的根据本发明的抗微生物组合物。在该方法结束后,可以对根据本发明的组合物进行冻干步骤,在所述冻干步骤结束后获得冻干物,所述冻干物在重溶解期间使得可以重构包含i2scn-离子和/或i(scn)2-离子且不含次硫氰酸根离子(oscn-)的根据本发明的抗微生物组合物。在该方法结束后,可以对根据本发明的组合物进行冻干步骤,在所述冻干步骤结束后获得冻干物,所述冻干物使得能够在重溶解期间重构包含组合的i2scn-离子和i(scn)2-离子且不含次硫氰酸根离子(oscn-)的所述组合物。硫氰酸根离子(scn-)可以以任何形式供应,例如以硫氰酸钾(kscn)或硫氰酸钠(nascn)的形式供应。碘离子(i-)可以以任何形式供应,例如以碘化钾(ki)或碘化钠(nai)的形式或者以二碘(i2)的形式供应。在一个实施方案中,碘离子(i-)以碘化钾(ki)的形式提供。在一个实施方案中,碘离子(i-)以二碘(i2)的形式提供。表述“不导致形成次硫氰酸根离子(oscn-)”或“不含次硫氰酸根离子(oscn-)的组合物”应理解为意指在分析组合物期间在nmr和阴离子色谱法中未观察到指示次硫氰酸根离子(oscn-)形成的峰。所获得的抗微生物组合物是稳定的;“稳定的”应理解为意指随时间仅在很小的程度上丧失其特性的组合物。例如,其可以是这样的抗微生物组合物,当将其在4℃下避光保存在密闭容器中时在5个月内其活性损失低于20%。在一个实施方案中,用于制备根据本发明的稳定组合物的方法的特征在于,卤离子(x-)选自碘离子(i-)、溴离子(br-)和氯离子(cl-)。在一个实施方案中,用于制备根据本发明的稳定组合物的方法的特征在于,卤离子(x-)是碘离子(i-)。在一个实施方案中,用于制备根据本发明的稳定组合物的方法的特征在于,碘离子(i-)为碘化钾(ki)或碘化钠(nai)或二碘的形式。在一个实施方案中,用于制备根据本发明的稳定组合物的方法的特征在于,碘离子(i-)为碘化钾(ki)的形式。在一个实施方案中,用于制备根据本发明的稳定组合物的方法的特征在于,碘离子(i-)为碘化钠(nai)的形式。在一个实施方案中,用于制备根据本发明的稳定组合物的方法的特征在于,碘离子(i-)为二碘的形式。在一个实施方案中,用于制备根据本发明的稳定组合物的方法的特征在于,卤离子(x-)以0.1mm至1m的摩尔浓度存在。在一个实施方案中,用于制备根据本发明的稳定组合物的方法的特征在于,卤离子(x-)以0.1mm至500mm的摩尔浓度存在。在一个实施方案中,用于制备根据本发明的稳定组合物的方法的特征在于,卤离子(x-)以0.1mm至100mm的摩尔浓度存在。在一个实施方案中,用于制备根据本发明的稳定组合物的方法的特征在于,卤离子(x-)以0.1mm至10mm的摩尔浓度存在。在一个实施方案中,用于制备根据本发明的稳定组合物的方法的特征在于,卤离子(x-)是碘离子(i-)并且以0.1mm至10mm的摩尔浓度存在。在一个实施方案中,用于制备根据本发明的稳定组合物的方法的特征在于,硫氰酸根离子(scn-)以0.1mm至1m的摩尔浓度存在。在一个实施方案中,用于制备根据本发明的稳定组合物的方法的特征在于,硫氰酸根离子(scn-)以0.1mm至500mm的摩尔浓度存在。在一个实施方案中,用于制备根据本发明的稳定组合物的方法的特征在于,硫氰酸根离子(scn-)以0.1mm至100mm的摩尔浓度存在。在一个实施方案中,用于制备根据本发明的稳定组合物的方法的特征在于,硫氰酸根离子(scn-)以0.1mm至10mm的摩尔浓度存在。在一个实施方案中,用于制备根据本发明的稳定组合物的方法的特征在于,卤离子(x-)是碘离子(i-),碘离子(i-)的浓度大于所述硫氰酸根离子(scn-)的浓度,并且溶液的ph为4至8。在一个实施方案中,用于制备根据本发明的稳定组合物的方法的特征在于,碘离子(i-)的摩尔浓度与硫氰酸根(scn-)的摩尔浓度之间的比严格地大于1。在一个实施方案中,用于制备根据本发明的稳定组合物的方法的特征在于,碘离子(i-)的摩尔浓度与硫氰酸根(scn-)的摩尔浓度之间的比为1.5至40。在一个实施方案中,用于制备根据本发明的稳定组合物的方法的特征在于,碘离子(i-)的摩尔浓度与硫氰酸根(scn-)的摩尔浓度之间的比为1.5至20。在一个实施方案中,用于制备根据本发明的稳定组合物的方法的特征在于,碘离子(i-)的摩尔浓度与硫氰酸根(scn-)的摩尔浓度之间的比为1.5至20。在一个实施方案中,用于制备根据本发明的稳定组合物的方法的特征在于,碘离子(i-)的摩尔浓度与硫氰酸根(scn-)的摩尔浓度之间的比为4至5。在一个实施方案中,用于制备根据本发明的稳定组合物的方法的特征在于,所述溶液的ph为4至8。在一个实施方案中,用于制备根据本发明的稳定组合物的方法的特征在于,所述溶液的ph为4.4至7.5。在一个实施方案中,用于制备根据本发明的稳定组合物的方法的特征在于,所述介质由选自柠檬酸盐缓冲液、磷酸盐缓冲液或乙酸盐缓冲液的缓冲液进行缓冲。在一个实施方案中,用于制备根据本发明的稳定组合物的方法的特征在于,所述硫氰酸根离子(scn-)为硫氰酸钾(kscn)或硫氰酸钠(nascn)的形式。在一个实施方案中,用于制备根据本发明的稳定组合物的方法的特征在于,所述组分b由过氧化氢(h2o2)生成体系组成。在一个实施方案中,用于制备根据本发明的稳定组合物的方法的特征在于,所述组分b由过氧化氢(h2o2)生成体系组成,所述体系是葡糖氧化酶(god)/葡萄糖(glc)体系。在一个实施方案中,用于制备根据本发明的稳定组合物的方法的特征在于,过氧化氢的摩尔浓度基本上等于硫氰酸根离子(scn-)和卤离子(x-)的浓度之和。在一个实施方案中,用于制备根据本发明的稳定组合物的方法的特征在于,过氧化氢的摩尔浓度基本上等于硫氰酸根离子(scn-)和卤离子(x-)的浓度之和,所述卤离子(x-)是碘离子(i-)。在一个实施方案中,用于制备根据本发明的稳定组合物的方法的特征在于,氧化剂和催化剂在存在底物的情况下接触的时间或反应时间(步骤b或步骤6)为30至1800秒;在一个实施方案中,用于制备根据本发明的稳定组合物的方法的特征在于,氧化剂和催化剂在存在底物的情况下接触的时间或反应时间(步骤b或步骤6)为30至900秒。在一个实施方案中,用于制备根据本发明的稳定组合物的方法的特征在于,氧化剂和催化剂在存在底物的情况下接触的时间或反应时间(步骤b或步骤6)为30至200秒。在一个实施方案中,用于制备根据本发明的稳定组合物的方法的特征在于,氧化剂和催化剂在存在底物的情况下接触的时间或反应时间(步骤b或步骤6)为30至100秒。在一个实施方案中,用于制备根据本发明的稳定组合物的方法的特征在于,氧化剂和催化剂在存在底物的情况下接触的时间或反应时间(步骤b或步骤6)为50至100秒。在一个实施方案中,用于制备根据本发明的稳定组合物的方法的特征在于,所述过氧化物酶的所述去除通过选自以下的方法进行:使用“茶袋(sachetdethé)”,离心,絮凝,与接枝过氧化物酶的支持物例如纤维、织物、聚合物树脂、颗粒等接触。在一个实施方案中,用于制备根据本发明的稳定组合物的方法的特征在于,所述过氧化物酶的所述去除通过使用“茶袋”进行。在一个实施方案中,用于制备根据本发明的稳定组合物的方法的特征在于,所述过氧化物酶选自乳过氧化物酶(lp)、甲状腺过氧化物酶(tpo)、髓过氧化物酶(mpo)、唾液过氧化物酶(spo)和嗜酸性粒细胞过氧化物酶(epo)。在一个实施方案中,用于制备根据本发明的稳定组合物的方法的特征在于,过氧化物酶是乳过氧化物酶(lp)。乳过氧化物酶是粉末,其可以例如与膨润土混合或在液体溶液中固定在由阳离子树脂珠制成的珠上。这些支持物可以放置在“茶袋”中。对于lpo在阳离子树脂珠上的固定,某些珠每ml树脂固定+/-40mg的lpo。在一个实施方案中,用于制备根据本发明的稳定组合物的方法的特征在于,所述过氧化物酶的浓度为1mg/l至500mg/l。在一个实施方案中,用于制备根据本发明的稳定组合物的方法的特征在于,所述过氧化物酶的浓度为50mg/l至250mg/l。在一个实施方案中,用于制备根据本发明的稳定组合物的方法的特征在于,其还包括至少一个将根据本发明的组合物固定在固定用基底上的步骤。在本申请的上下文中,“固定用基底”是能够在处理期间保持所述组合物的材料,所述组合物是液体形式或干燥形式(根据本发明的组合物在蒸发后或在冻干后获得的干燥残余物)。在一个实施方案中,固定用基底是纤维材料。在一个实施方案中,固定用基底是织物。在一个实施方案中,固定用基底是浸渍织物。在重溶解期间或当施用于微生物时,固定用基底使得可以重构根据本发明的抗微生物组合物。本发明还涉及包含根据本发明的组合物的固定用基底。本发明还涉及根据本发明的稳定组合物用于预防和/或治疗目的的用途。在一个实施方案中,根据本发明的稳定组合物的特征在于,其用于治疗感染。在一个实施方案中,根据本发明的稳定组合物的特征在于,其用作抗菌剂。在一个实施方案中,根据本发明的稳定组合物的特征在于,其用作抗病毒剂。在一个实施方案中,根据本发明的稳定组合物的特征在于,其用作抗真菌剂。在一个实施方案中,根据本发明的稳定组合物的特征在于,其用于破坏选自以下的微生物:菜豆炭疽菌(colletotrichumlindemuthanium)、燕麦镰孢霉(fusariumavenaceum)、小麦壳针孢(septoriatritici)、大丽轮枝菌(verticilliumdahliae)、致病疫霉(phytophthorainfestans)、终极腐霉(pythiumultimum)、芭蕉炭疽菌(colletotrichummusae)、意大利青霉(pencilliumitalicum)、指状青霉(penicilliumdigitatum)、灰葡萄孢菌(botrytiscinerea)、扩展青霉(penicilliumexpansum)、黑腐果胶杆菌(pectobacteriumatroseptica)、丁香假单胞菌丁香致病变种(pseudomonassyringaepvsyringae)、胡萝卜果胶杆菌(pectobacteriumcarotovorum)、解淀粉欧文氏菌(erwyniaamylovora)、丁香假单胞菌番茄致病变种(pseudomonassyringaepv.tomato)、密执岁棍状杆菌密执岁亚种(clavibactermichiganensissubsp.michiganensis)、嗜根考克氏菌(kocuriarhizolia)、金黄色葡萄球菌(staphylococcusaureus)、日勾维肠杆菌(enterobactergergoviae)、大肠杆菌(escherichiacoli)、肺炎克雷伯菌(klebsiellapneumoniae)、铜绿假单胞菌(pseudomonasaeruginosa)、荧光假单胞菌(pseudomonasfluorescent)、普氏假单胞菌(pseudomonasputita)、黑曲霉(aspergillusniger)、嗜松青霉(penicilliumpinophilum)、白色念珠菌(candidaalbicans)、洋葱伯克氏菌(burkholderiacepacia)、铜绿假单胞菌、金黄色葡萄球菌、产酸克雷伯菌(klebsiellaoxytoca)、多噬伯克氏菌(burkholderiamultivorans)、反硝化无色杆菌(achromobacterdenitrificans)、铜绿假单胞菌、嗜麦芽寡养单胞菌(stenotrophomonasmaltophilia)、马红球菌(rhodococcusequi)、马链球菌(streptococcusequi)、突变链球菌(streptococcusmutans)和兽疫链球菌(streptococcuszooepidemicus)。在一个实施方案中,根据本发明的稳定组合物的特征在于,其用于破坏选自以下的微生物:菜豆炭疽菌、燕麦镰孢霉、小麦壳针孢、大丽轮枝菌、致病疫霉、终极腐霉、芭蕉炭疽菌、意大利青霉、指状青霉、灰葡萄孢菌、扩展青霉、胡萝卜果胶杆菌、丁香假单胞菌丁香致病变种、黑腐果胶杆菌、解淀粉欧文氏菌、丁香假单胞菌番茄致病变种、密执岁棍状杆菌密执岁亚种、嗜根考克氏菌、金黄色葡萄球菌、日勾维肠杆菌、大肠杆菌、肺炎克雷伯菌、铜绿假单胞菌、荧光假单胞菌、普氏假单胞菌、黑曲霉、嗜松青霉和白色念珠菌。在一个实施方案中,根据本发明的稳定组合物的特征在于,其用于破坏苛养木杆菌(xylellafastidiosa)。在一个实施方案中,根据本发明的稳定组合物的特征在于,其用于破坏选自以下的微生物:产碱韦荣球菌(veillonellaalcalescens)、核粒梭菌(fusobacteriumnucleatum)、黏性放线菌(actinomycesviscosus)、嗜酸乳杆菌(lactobacillusacidophilus)、突变链球菌(streptococcusmutans)、牙龈卟啉菌(porphyromonasgingivalis)、中间普雷沃菌(prevotellaintermedia)、弯曲杆菌属(campylobacter)物种、索氏密螺旋体(treponemasocranskii)物种、链球菌属(streptococcus)物种、埃肯菌属(eikenella)、嗜二氧化碳噬细胞菌属(capnocytophaga)物种和月形单胞菌属(selenomonas)物种。在一个实施方案中,根据本发明的稳定组合物的特征在于,其用于破坏选自以下的微生物:产碱韦荣球菌、核粒梭菌、黏性放线菌、嗜酸乳杆菌和突变链球菌。在一个实施方案中,根据本发明的稳定组合物的特征在于,其用于破坏至少一种选自以生物膜形式组织的细菌的微生物。在一个实施方案中,根据本发明的稳定组合物的特征在于,其用于破坏至少一种导致牙周炎的选自以生物膜形式组织的细菌的微生物,所述微生物选自产碱韦荣球菌、核粒梭菌、黏性放线菌、嗜酸乳杆菌和突变链球菌。在一个实施方案中,根据本发明的稳定组合物的特征在于,其用于破坏至少一种以生物膜形式或以分离形式组织的例如白色念珠菌的以下微生物,所述微生物导致舌炎、鹅口疮、义齿性口炎、唇炎、口角唇炎、足和甲的霉菌病。在一个实施方案中,根据本发明的稳定组合物的特征在于,其对唾液链球菌(streptococcussalivarius)不具有作用。在一个实施方案中,根据本发明的稳定组合物的特征在于,其用作人和/或动物的药物。在一个实施方案中,根据本发明的稳定组合物的特征在于,其用作人的药物。在一个实施方案中,根据本发明的稳定组合物的特征在于,其用作动物的药物。在一个实施方案中,根据本发明的稳定组合物的特征在于,其用于治疗和/或预防人和/或动物的感染。在一个实施方案中,根据本发明的稳定组合物的特征在于,其用于治疗人的感染。在一个实施方案中,根据本发明的稳定组合物的特征在于,其用于治疗动物的感染。在一个实施方案中,根据本发明的稳定组合物的特征在于,其用于预防人的感染。在一个实施方案中,根据本发明的稳定组合物的特征在于,其用于预防动物的感染。在一个实施方案中,根据本发明的稳定组合物的特征在于,其用于治疗人/或动物中由至少一种微生物引起的感染。在一个实施方案中,根据本发明的稳定组合物的特征在于,其用于治疗马中由至少一种微生物引起的感染。在一个实施方案中,根据本发明的稳定组合物的特征在于,其用于治疗和/或预防由形成生物膜和/或所谓“浮游”形式的微生物引起的感染。在一个实施方案中,根据本发明的稳定组合物的特征在于,其用于治疗和/或预防由在人细胞表面上形成生物膜的微生物引起的感染,所述人细胞选自皮肤细胞、口腔黏膜细胞、来自耳鼻喉球体(sphère)的细胞、来自胃肠球体的细胞和来自泌尿生殖器球体的细胞。在一个实施方案中,根据本发明的稳定组合物的特征在于,其用于治疗和/或预防由选自以下的微生物引起的感染:细菌、病毒、原生动物、酵母、霉菌、真菌、寄生物等。在一个实施方案中,根据本发明的稳定组合物的特征在于,其用于治疗和/或预防由微生物引起的感染,所述微生物是细菌。在一个实施方案中,根据本发明的稳定组合物的特征在于,其用于治疗和/或预防由微生物引起的感染,所述微生物是选自以下的细菌:志贺菌属(shigella)、沙门氏菌属(salmonella)、大肠杆菌(e.coli)、霍乱弧菌(vibreocolera)、假单胞菌属(pseudomonas)(绿脓假单胞菌(ps.pyocyanea))、葡萄球菌属(staphylococcus)(白色葡萄球菌(staph.albus)、金黄色葡萄球菌(staph.aureus))、链球菌属(streptococcus)(草绿色链球菌(strep.viridans)、乳酸粪链球菌(strep.faecalis)、b群链球菌(bstreptococcus))、变形杆菌属(proteus)、幽门螺杆菌(helicobacterpylori)等,优选幽门螺杆菌(h.pylori)。在一个实施方案中,根据本发明的稳定组合物的特征在于,其用于治疗和/或预防由微生物引起的感染,所述微生物是病毒。在一个实施方案中,根据本发明的稳定组合物的特征在于,其用于治疗和/或预防由微生物引起的感染,所述微生物是包膜病毒。在一个实施方案中,根据本发明的稳定组合物的特征在于,其用于治疗和/或预防由微生物引起的感染,所述微生物是选自以下的包膜病毒:疱疹引发病毒(优选单纯疱疹副黏病毒,例如如副流感病毒)、正黏病毒(例如如甲型流感病毒和乙型流感病毒)、轮状病毒、冠状病毒、疱疹病毒(例如如vzv病毒、巨细胞病毒、埃巴病毒(epstein-barrvirus)和hhv6病毒)和逆转录病毒(例如如人t淋巴细胞白血病病毒1、牛白血病病毒和猿免疫缺陷病毒(simianimmunodeficiencyvirus,siv))。在一个实施方案中,根据本发明的稳定组合物的特征在于,其用于治疗牙斑、牙周病、幽门螺杆菌溃疡、以“旅游腹泻(tourista)”名称已知的感染、细菌性阴道炎、阴道炎(vaginose)、膀胱炎、衣原体感染、胃肠感染、腹泻、龋齿、牙龈炎、黏膜炎、疱疹、痤疮和传染性软疣。在一个实施方案中,根据本发明的稳定组合物的特征在于,其用于治疗牙斑、牙周病、溃疡、以“旅游腹泻”名称已知的感染、细菌性阴道炎、阴道炎、膀胱炎和衣原体感染。在一个实施方案中,根据本发明的稳定组合物的特征在于,其用于治疗牙斑,并且特征在于,存在于齿颊球体中的所述微生物是白色念珠菌。在一个实施方案中,根据本发明的稳定组合物的特征在于,其用于治疗黏液黏稠病,并且存在的微生物选自洋葱伯克氏菌、铜绿假单胞菌和金黄色葡萄球菌。在一个实施方案中,根据本发明的稳定组合物的特征在于,其通过经口、表面或可注射途径施用。在一个实施方案中,根据本发明的稳定组合物的特征在于,其通过经口途径施用。在一个实施方案中,根据本发明的稳定组合物的特征在于,其通过表面途径施用。在一个实施方案中,根据本发明的稳定组合物的特征在于,其通过可注射途径施用。在一个实施方案中,根据本发明的稳定组合物的特征在于,其以以下形式施用:凝胶、漱口剂产品、牙膏、片剂、软凝胶胶囊剂、丸粒、散剂、散剂混合物、浸渍织物等。除上述化合物之外,根据本发明的组合物还可以包含本领域技术人员已知的任何可药用赋形剂。这样的材料应是无毒的。赋形剂的确切性质可以取决于一定数量的因素,包括施用途径。在治疗情况下,即当期望治疗效果时,施用的剂量对应于“治疗剂量”,这取决于本领域技术人员已知的数个因素(施用途径、患者年龄、性别等),其中本领域技术人员可以确定所述剂量。在一个实施方案中,根据本发明的稳定组合物的特征在于,其用于以下领域:农业、园艺、旨在用于消费的植物的栽培、旨在作为观赏植物展示的植物的栽培、水果植物栽培、球茎栽培、盆栽栽培、森林维护、所收获果实或种子的处理、分离根的处理等。在一个实施方案中,根据本发明的稳定组合物的特征在于,其用于在针对由至少一种植物致病性微生物引起的植物病理的治疗中破坏微生物。在一个实施方案中,根据本发明的稳定组合物的特征在于,其用于破坏选自细菌、病毒和真菌等的植物致病性微生物。在一个实施方案中,根据本发明的稳定组合物的特征在于,其用于在收获之前或之后处理被至少一种植物致病性微生物污染的植物。在一个实施方案中,根据本发明的稳定组合物的特征在于,其用于处理被至少一种植物致病性微生物污染的植物,所述植物致病性微生物是细菌或病毒。在一个实施方案中,根据本发明的稳定组合物的特征在于,其用于处理被至少一种植物致病性微生物污染的植物,所述植物致病性微生物是细菌。在一个实施方案中,根据本发明的稳定组合物的特征在于,其用于处理被至少一种植物致病性微生物污染的植物,所述植物致病性微生物是选自以下的细菌:菊欧文氏菌(erwiniachrvsanthemi)、丁香假单胞菌(pseudomonassyringae)、野油菜黄单胞菌(xanthomonascamtestrise)和萎蔫短小杆菌(curtobactriumflaccumfaciens)。在一个实施方案中,根据本发明的稳定组合物的特征在于,其用于处理被至少一种植物致病性微生物污染的植物,所述植物致病性微生物选自:解淀粉欧文氏菌、胡萝卜果胶杆菌胡萝卜亚种(pectobacteriumcarotovorumsubsp.carotovorum)、黑腐果胶杆菌(pectobacteriumatrosepticum)、丁香假单胞菌丁香致病变种、丁香假单胞菌番茄致病变种和密执岁棍状杆菌密执岁亚种。在一个实施方案中,根据本发明的稳定组合物的特征在于,其用于处理被至少一种植物致病性微生物污染的植物,所述植物致病性微生物是真菌。在一个实施方案中,根据本发明的稳定组合物的特征在于,其用于处理被至少一种植物致病性微生物污染的植物,所述植物致病性微生物选自:青霉属(penicilliumspp.);葡萄孢属(botryotiniaspp.),例如如灰葡萄孢菌;亚隔孢壳属(didymellaspp.),例如如番茄亚隔孢壳(didymellalycopersici)或泻根亚隔孢壳(didymellabryonia);腐霉属(pythiumspp.);单轴霉属(plasmoparaspp.);霜霉属(peronosporaspp.);指梗霜霉属(sclerosporaspp.);单丝壳属(sphaerothecaspp.),例如如蔷微单丝壳(sphaerothecapannose)和瓜类单丝壳(sphaerothecafulisinea);秆锈菌属(puccuniaspp.),例如如puccuniahoriana;白粉菌属(erysiphespp.);卵状菌属(oidiumspp.);内丝白粉菌属(leveillulaspp.),例如如鞑靼内丝白粉菌(leveillulataurica);镰孢霉属(fusariumspp.);疫霉属(phytophthoraspp.);丝核菌属(rhizoctoniaspp.);轮枝菌属(verticilliumspp.);核盘菌属(sclerotiniaspp.);根霉属(rhizopusspp.);和venturaspp.。在一个实施方案中,根据本发明的稳定组合物的特征在于,其用于处理被至少一种植物致病性微生物污染的植物,所述植物致病性微生物选自:菜豆炭疽菌、燕麦镰孢霉、小麦壳针孢、大丽轮枝菌、致病疫霉、终极腐霉、芭蕉炭疽菌、意大利青霉、指状青霉、灰葡萄孢菌和扩展青霉。在一个实施方案中,根据本发明的稳定组合物的特征在于,其用于处理被至少一种植物致病性微生物污染的植物,所述植物致病性微生物选自:菜豆炭疽菌、小麦壳针孢、大丽轮枝菌、致病疫霉、终极腐霉、芭蕉炭疽菌、意大利青霉、指状青霉、灰葡萄孢菌和扩展青霉。在一个实施方案中,根据本发明的稳定组合物的特征在于,其用于处理被至少一种植物致病性微生物污染的植物,所述植物致病性微生物选自:灰葡萄孢菌、扩展青霉、意大利青霉、指状青霉、燕麦镰孢霉、致病疫霉、大丽轮枝菌、菜豆炭疽菌、芭蕉炭疽菌、终极腐霉,苹果黑星菌(venturiainaequalis)、葡萄单轴霉(plasmoparaviticola)、葡萄白粉菌(erysiphenecator)、胡萝卜果胶杆菌、黑腐果胶杆菌、密执岁棍状杆菌密执岁亚种、丁香假单胞菌番茄致病变种、丁香假单胞菌丁香致病变种、解淀粉欧文氏菌、稻黄单胞菌(xanthomonasorizae)和苛养木杆菌。在一个实施方案中,根据本发明的稳定组合物的特征在于,其用于处理被至少一种致病性微生物污染的物体,所述致病性微生物选自:嗜根考克氏菌、金黄色葡萄球菌、日勾维肠杆菌、大肠杆菌、肺炎克雷伯菌、铜绿假单胞菌、荧光假单胞菌、普氏假单胞菌、黑曲霉、嗜松青霉和白色念珠菌。在一个实施方案中,根据本发明的稳定组合物的特征在于,其与另一种被认为抵抗至少一种植物致病性微生物的化合物组合使用以补救潜在的抗性问题。在一个实施方案中,根据本发明的稳定组合物的特征在于,其用于根据选自以下的方法对植物进行处理:喷雾、灌溉、雾化、空中喷雾、喷洒、浸没、滴灌、淋浴等。在一个实施方案中,根据本发明的稳定组合物的特征在于,其用于滴灌系统的消毒。在一个实施方案中,根据本发明的稳定组合物的特征在于,其以选自液体形式和固体形式的形式使用。在一个实施方案中,根据本发明的稳定组合物的特征在于,其为液体形式。在一个实施方案中,根据本发明的稳定组合物的特征在于,其为固体形式。附图说明图1:在无碘化物的情况下的对照组合物的nmr谱图1是对应于表1中测试2(条件:2.4mmkscn+2.4mmh2o2+lp;磷酸盐缓冲液100mmph7.4)在无碘化物的情况下的对照组合物的13cnmr谱。在该谱中,观察到几个非常明显的峰:133.48ppm,该峰对应于硫氰酸根离子(scn-);和127.71ppm,该峰对应于次硫氰酸根离子(oscn-)。在50ppm附近没有峰。图2:根据本发明的组合物的nmr谱图2是对应于表1中测试20(条件:5.4mmki+1.2mmkscn+6.6mmh2o2+lp;磷酸盐缓冲液100mmph7.4)的组合物的13cnmr谱。在该谱中,观察到该测试的位于50.36ppm的峰,其对应于i2scn-和i(scn)2-离子。在没有ki的对照中未观察到该峰(测试2,参见图1)。不能观察到对应于硫氰酸根离子(scn-)或次硫氰酸根离子(oscn-)的峰。图3:根据本发明的组合物的nmr谱图3a是对应于表2中测试35(条件:5.4mmki+1.2mmkscn+6.6mmh2o2+lp;乙酸钠缓冲液100mmph4.5)的组合物的13cnmr谱。如上所述,h2o2的浓度等于ki浓度和ksn浓度之和。在该谱中,观察到该测试的位于49.6ppm的峰,其对应于i2scn-和i(scn)2-离子。不能观察到对应于硫氰酸根离子(scn-)或次硫氰酸根离子(oscn-)的峰。图3b是对应于表2中测试33(条件:1.2mmki+1.2mmkscn+2.4mmh2o2+lp;乙酸钠缓冲液100mmph4.4)的组合物的13cnmr谱。如上所述,h2o2的浓度等于ki浓度和ksn浓度之和。在该谱中,未观察到该测试的对应于i2scn-和i(scn)2-离子的在49.6ppm处的峰。在另一方面,可观察到对应于其他种类的峰。图3c是对应于表2中测试30(条件:5.4mmki+0.6mmkscn+6.0mmh2o2+lp;乙酸钠缓冲液100mmph4.4)的组合物的13cnmr谱。如上所述,h2o2的浓度等于ki浓度和ksn浓度之和。在该谱中,观察到该测试的位于49.6ppm的峰,其对应于i2scn-和i(scn)2-离子。不能观察到对应于硫氰酸根离子(scn-)或次硫氰酸根离子(oscn-)的峰。图4a:根据本发明的组合物的质谱图4a是用12c制备的根据本发明的组合物的质谱(条件:5.4mmki+5.4mmh2o2+lp;乙酸铵缓冲液100mmph4.5-测试的kscn浓度1.2-2.4-4.8-5.4-7.2-10.6-0)。在311.78处的片段对应于形成的i2s12cn-离子。图4b:根据本发明的组合物的质谱图4b是用13c制备的根据本发明的组合物的质谱(条件:5.4mmki+5.4mmh2o2+lp;乙酸铵缓冲液100mmph4.5-测试的kscn浓度1.2-2.4-4.8-5.4-7.2-10.6)。在312.78处的片段对应于形成的i2s13cn-离子。图5:作为时间的函数的白色念珠菌的存活率变化图5示出了在6个月的时间内评价的作为时间之函数的白色念珠菌的存活率变化。图6:5分钟或30分钟之后接触后与对照的培养基的照片图6由接触后与对照的培养基的照片组成。无论接触时间是30分钟(附图的左侧部分)还是5分钟(附图的右侧部分),视觉结果是相同的:没有白色念珠菌的菌落抵抗根据本发明的组合物。图7:在不同浓度下接触后与对照的培养基的照片图7由在不同浓度下接触后与对照的培养基的照片组成。观察到,即使在25μm的浓度下,与对照相比,形成的菌落的数目也大大减少。图8:根据本发明的组合物的选择性图8是与突变链球菌(致龋细菌)(图8a)和唾液链球菌(共生细菌)(图8b)接触后的培养基的照片:由此可以推断,根据本发明的组合物对突变链球菌具有杀菌作用(图8a),而对唾液链球菌没有杀菌作用(图8b)。图9:对苛养木杆菌苛养亚种(xylellafastidiosasubsp.fastidiosa)的活性图9由与苛养木杆菌苛养亚种接触后的培养基的照片组成:由此可以推断,根据本发明的组合物对苛养木杆菌苛养亚种具有杀菌作用(附图的右侧部分),而对照不具有作用(附图的左侧部分)。图10:对苛养木杆菌multiplex亚种(xylellafastidiosasubsp.multiplex)的活性。图10由与苛养木杆菌multiplex亚种接触后的培养基的照片组成:由此可以推断,根据本发明的组合物对苛养木杆菌multiplex亚种具有杀菌作用(附图的右侧部分),而对照不具有作用(附图的左侧部分)。图11:对苛养木杆菌pauca亚种(xylellafastidiosasubsp.pauca)的活性图11由与苛养木杆菌pauca亚种接触后的培养基的照片组成:由此可以推断,根据本发明的组合物对苛养木杆菌pauca亚种具有杀菌作用(附图的右侧部分),而对照不具有作用(附图的左侧部分)。图12:现有技术中不存在i2scn-和/或i(scn)2-离子(实施例1;水性基质)在现有技术中已经描述了通过卤化物硫氰酸盐混合物的酶促氧化获得的组合物,特别是在ep1349457或wo2016026946中。根据这些专利申请中描述的操作程序在水中制备的混合物不能获得选自i2scn-和/或i(scn)2-离子的离子。图13:现有技术中不存在i2scn-和/或i(scn)2-离子(实施例2;酸缓冲基质)在现有技术中已经描述了通过卤化物硫氰酸盐混合物的酶促氧化获得的组合物,特别是在ep1349457或wo2016026946中。根据这些专利申请中描述的操作程序在柠檬酸盐缓冲液100mmph5.5中制备的混合物不能获得选自i2scn-和/或i(scn)2-离子的离子。为了更清楚起见,已从谱图中消除了对应于柠檬酸钠的碳的信号(参见图14)。图14:柠檬酸钠和硫氰酸盐的nmr谱柠檬酸钠包含以以下化学位移在nmr中可见的4个碳:c1出现在180.45ppm,c2出现在175.94ppm,c3出现在73.43ppm,c4出现在44.64ppm。硫氰酸盐含有1个碳,其可见于133.48ppm的化学位移。图15:现有技术中不存在i2scn-和/或i(scn)2-离子(实施例3;中性缓冲基质)在现有技术中已经描述了通过卤化物硫氰酸盐混合物的酶促氧化获得的组合物,特别是在ep1349457或wo2016026946中。根据这些专利申请中描述的操作程序在磷酸盐缓冲液100mmph7.4中制备的混合物不能获得选自i2scn-和/或i(scn)2-离子的离子。图16:基质对i2scn-和/或i(scn)2-离子的出现的重要性通过在水性基质(微矿化泉水、中度矿化泉水、高度矿化泉水或自来水)中以(ki相对于kscn的)4.5的理想比对卤化物硫氰酸盐混合物进行酶促氧化获得的组合物(不管水性基质的矿物质组成如何)都不能获得选自i2scn-和/或i(scn)2-离子的离子。图17:现有技术中存在oscn-离子(实施例1;水性基质)通过卤化物硫氰酸盐混合物的酶促氧化获得的组合物已经在现有技术中描述,特别是在ep1349457或wo2016026946中。根据这些专利申请中描述的操作程序在水中制备的混合物包含次硫氰酸根离子。图18:现有技术中存在oscn-离子(实施例2;酸缓冲基质)在现有技术中已经描述了通过卤化物硫氰酸盐混合物的酶促氧化获得的组合物,特别是在ep1349457或wo2016026946中。根据这些专利申请中描述的操作程序在柠檬酸盐缓冲液100mmph5.5中制备的混合物包含次硫氰酸根离子。图19:i2scn-和/或i(scn)2-离子的酶促氧化lp与i2scn-和/或i(scn)2-离子的伴随存在引起i2scn-和/或i(scn)2-x离子的降解,其中在孵育1小时(略微降低)、3小时(信号显著降低)后在49ppm处的信号降低,在48小时后信号完全消失。图20:根据本发明的组合物与乳铁蛋白之间的协同作用图20示出了与未添加乳铁蛋白的相同溶液相比,通过添加乳铁蛋白(>2.5mg/ml)将根据本发明的组合物稀释10倍时对扩展青霉(p.expansum)(106孢子/ml)的抗微生物活性的协同作用。图21:根据本发明的组合物对生物膜的作用图21示出了根据本发明的组合物(“溶液b”;三角形形式的点)对以生物膜形式组织的不同细菌的作用。明显的是,即使接触时间缩短(5分钟),生物膜群也极其显著地减小。用2%葡萄糖酸氯己定的商业化组合物(“溶液a”;方形形式的点)未观察到这种情况。图21的附图标记:-圆形点:对照-方形点:对应于商业化产品(2%葡萄糖酸氯己定)的溶液a-三角形点:固定在涂布物上的对应于根据本发明的组合物的溶液b从处理24小时时最接近0atp/cfu的曲线向上到由圆形点限定的对照曲线,对应于1个atp/cfu:-在存在溶液b的情况下的嗜酸乳杆菌-在存在溶液b的情况下的产碱韦荣球菌-在存在溶液b的情况下的核粒梭菌-在存在溶液b的情况下的突变链球菌-在存在溶液b的情况下的黏性放线菌-在存在溶液a的情况下的突变链球菌-在存在溶液a的情况下的黏性放线菌-在存在溶液a的情况下的核粒梭菌-在存在溶液a的情况下的产碱韦荣球菌-在存在溶液a的情况下的嗜酸乳杆菌图22:i2scn-的溶液对生物膜(树脂)的作用。树脂是通过有机化合物的聚合获得的用于制备牙齿假体的材料。图22是显示在浸入i2scn-溶液中后对被白色念珠菌atcc10231污染的树脂条带的灭菌的照片。在环境温度下接触30分钟后,在树脂上形成的生物膜被完全破坏。在左侧示出了对照,其是无菌的树脂条带,中间是被白色念珠菌污染的条带,右侧是被污染且用含有250μmi2scn-离子的溶液消毒的条带。图23:固定在织物上的根据本发明的组合物的作用如下制备根据本发明的组合物:将5.4mm碘化钾(ki)、1.2mm硫氰酸钾(kscn)、6.6mm过氧化氢(h2o2)在存在50mg/l乳过氧化物酶(lp)(1000个abts单位/mg)的情况下在柠檬酸钠缓冲液100mmph6.2(图23b)或磷酸盐缓冲液100mmph7.4(图23c)或柠檬酸钠缓冲液100mmph6.2中合并,在制备后冻干,并在水中重构(23d)。将这些组合物固定在织物上,并测试这些用组合物浸渍的织物对大肠杆菌的抗菌活性(图23b、23c和23d)。图23示出了根据本发明的组合物对大肠杆菌(109cfu/ml)的作用。显然,将100μl的109cfu/ml大肠杆菌在培养皿中的培养基中在37℃下孵育24小时后,固定在织物上的组合物阻止细菌的发展(明显的光圈)。可以看出,冻干组合物保持与其他非冻干组合物等效的杀菌作用。“对照”织物用无菌水浸渍。实施例实施例1:根据本发明的组合物的制备一般来说,在以下不同条件下制备一定数量的根据本发明的组合物:-缓冲液/缓冲液浓度/ph;-在不存在缓冲液的情况下的ph(在水中);-i-/scn-比;-过氧化物酶的浓度。根据本发明的组合物根据下述通用方案制备,所述方案对于本领域技术人员而言无需进一步解释即可获得。制备包含合适摩尔浓度的碘离子(i-)的第一溶液。平行地,制备包含合适摩尔浓度的硫氰酸根(scn-)离子的第二溶液。平行地,制备合适摩尔浓度(即前两个摩尔浓度的总和)的过氧化氢的第三溶液。平行地,制备包含乳过氧化物酶(lp)的“茶袋”。将“茶袋”浸入水或缓冲水溶液中。将前两种溶液(分别包含碘离子和硫氰酸根离子)添加到包含“茶袋”的水或水溶液中。将第三溶液(包含过氧化氢)添加到混合物中。在三种溶液(分别包含碘离子、硫氰酸根离子和h2o2)同时存在约60秒后,通过茶袋去除乳过氧化物酶(lp)。在去除乳过氧化物酶(lp)后,可以对氧化反应的产物进行几种分析:-13cnmr分析;-测量-sh基团的氧化活性;-测量-nh2基团的氧化活性。在本申请的上下文中,使用13cnmr来鉴定和量化离子。另外,其用于确定在根据本发明的组合物中没有检测到次硫氰酸根离子(oscn-)。i2scn-和i(scn)2-离子混合物的存在通过存在于约49至50.5ppm处的特征峰来证明。次硫氰酸根离子的不存在通过在约127至128ppm处不存在峰来证明。次硫氰酸根离子的这一不存在还通过离子色谱法来揭示。-分析sh和nh2官能团的氧化;nh2官能团的氧化分析通过tmb(四甲基联苯胺)的氧化来进行。sh官能团的氧化分析通过将tnb(5-硫代-2-硝基苯甲酸)氧化成dtnb(5,5′-二硫代双-(2-硝基苯甲酸))来进行。-对微生物测试组合物实施例1.1:缓冲液/ph/缓冲液浓度的影响下文示出了测试的概括性表格:表1首先,指出对于其中引入两种离子i-和scn-的所有组合物(测试3至25)都没有检测到次硫氰酸根离子(oscn-),而在不存在i-的情况下形成这样的离子(测试1-2)。如实施例1的引言中所解释的,nmr中50ppm附近的峰是鉴定的新种类(即i2scn-和i(scn)2-)的特征。此外,其强度揭示形成的新种类的量。当溶液的ph为4.4至7.4时观察到该峰。如果ph小于4.4,则发生硫氰酸盐的水解。当测定的氧化分子量较高并且可以看到在49至50ppm处出现峰时,不再观察到与硫氰酸盐相关的峰,这确实表明其参与反应。实施例1.2:ph对水性基质(具有lp)的影响下文示出了测试的概括性表格:表2在此又在存在碘离子的情况下,不论化合物如何,都检测不到次硫氰酸根离子(oscn-)。当未缓冲水溶液的ph小于6.5时,观察到检测到以nmr的位移(49.6ppm)为特征的新峰,这与氧化sh和nh2基团的能力提高相关。在酸性ph值5.5和4.4下观察到新峰,其中在ph4.4下强度几乎加倍。相比之下,在较高的ph值下,未观察到新峰。实施例1.3:i-/scn-比的影响下文示出了测试的概括性表格:表3在此又在存在碘离子的情况下,不论化合物如何,都未检测到次硫氰酸根离子(oscn-)。在i-/scn-比从9/1到严格大于1/1时观察到新峰。相比之下,在i-/scn-比从0.27/1到1/1时未观察到峰。实施例2:根据本发明的组合物的效力如下制备根据本发明的组合物:根据实施例1中所述的方案,将碘化钾(ki)5.4mm、1.2mm硫氰酸钾(kscn)、6.6mm过氧化氢(h2o2)在存在50mg/l乳过氧化物酶(lp)(1000个abts单位/mg)的情况下在乙酸铵缓冲液(100mm,ph4.5)中合并。将该化合物与通过合并以下制备的现有技术化合物进行比较:-碘化钾(ki)、乳过氧化物酶(lp)和过氧化氢(h2o2);-或者硫氰酸钾(kscn)、乳过氧化物酶(lp)和过氧化氢(h2o2)。结果在下表中给出:表4观察到,根据本发明的组合物对所有受试微生物具有常常远远更大的活性。实施例3:根据本发明的组合物的氧化力如下制备根据本发明的组合物:根据实施例1中所述的方案,将碘化钾(ki)5.4mm、1.2mm硫氰酸钾(kscn)、6.6mm过氧化氢(h2o2)在存在50mg/l乳过氧化物酶(lp)(1000个abts单位/mg)的情况下在乙酸铵缓冲液(100mm,ph4.5)中合并。不同溶液的接触时间设定为1分钟。然后,在以下储存时间后通过将tnb(5-硫代-2-硝基苯甲酸)氧化成dtnb(5,5′-二硫代双-(2-硝基苯甲酸))的方法来测量对sh官能团的氧化力:1、3、5、10、15、20、30、60和120分钟。时间t=0对应于去除乳过氧化物酶(lp)时的时间。结果在下表中给出:表5时间(分钟)氧化-sh0516.543567.645586.410586.715587.0220584.6830581.7860701.58120684.7注意到,氧化活性随储存时间而提高。另外,在60分钟后,氧化力是稳定的。实施例4:根据本发明的组合物的稳定性如下制备根据本发明的组合物:根据实施例1中所述的方案,将碘化钾(ki)5.4mm、1.2mm硫氰酸钾(kscn)、6.6mm过氧化氢(h2o2)在存在50mg/l乳过氧化物酶(lp)(1000个abts单位/mg)的情况下在乙酸铵缓冲液(100mm,ph4.5)中合并。该组合物分配在6个烧瓶中。然后,打开烧瓶(每月1次),并测试对白色念珠菌的杀菌活性。图5中示出了显示在6个月的时间内评价的作为时间之函数的白色念珠菌的存活率变化的图。观察到,在6个月的时间期间未检测到活性的可测量降低。实施例5:与白色念珠菌接触的短时间(5分钟)的测试如下制备根据本发明的组合物:根据实施例1中所述的方案,将碘化钾(ki)5.4mm、1.2mm硫氰酸钾(kscn)、6.6mm过氧化氢(h2o2)在存在50mg/l乳过氧化物酶(lp)(1000个abts单位/mg)的情况下在乙酸铵缓冲液(100mm,ph4.5)中合并。针对与白色念珠菌接触的以下时间来测试对白色念珠菌的杀菌活性:5分钟或30分钟。在与组合物(或对照)的5分钟或30分钟接触时间后,进行培养基的接种。这些测试的结果在图6中示出(接触与对照之后的培养基的照片):不管接触时间是30分钟(附图的左侧部分)还是5分钟(附图的右侧部分),可视结果是相同的:白色念珠菌的菌落不抵抗根据本发明的组合物。实施例6:浓度降低的氧化剂的效力如下制备根据本发明的组合物:根据实施例1中所述的方案,将碘化钾(ki)5.4mm、1.2mm硫氰酸钾(kscn)、6.6mm过氧化氢(h2o2)在存在50mg/l乳过氧化物酶(lp)(1000个abts单位/mg)的情况下在乙酸铵缓冲液(100mm,ph4.5)中合并。根据不同的稀释度按照递减顺序将该组合物分配在5个烧瓶中:755μm、252μm、75μm、25μm。还制备了对照溶液。在与6种不同组合物(5种稀释液和对照)接触5分钟的时间后,进行培养基的接种。结果示于图7中:即使在25μm的浓度下,也观察到与对照相比,形成的菌落的数目大大减少。此外,在高至252μm时,活性未降低。实施例7:根据本发明的组合物对突变链球菌/唾液链球菌的选择性如下制备根据本发明的组合物:根据实施例1中所述的方案,将碘化钾(ki)5.4mm、1.2mm硫氰酸钾(kscn)、6.6mm过氧化氢(h2o2)在存在50mg/l乳过氧化物酶(lp)(1000个abts单位/mg)的情况下在乙酸铵缓冲液(100mm,ph4.5)中合并。针对该组合物对突变链球菌(致龋细菌)和唾液链球菌(共生细菌)的杀菌作用来测试该组合物。结果示于图8中:根据本发明的组合物对突变链球菌(附图的左侧部分)具有杀菌作用而对唾液链球菌不具有作用(附图的右侧部分)。实施例8:针对生物膜的活性根据本发明的组合物根据实施例1中所述的方案制备。将该组合物稀释3倍并且其具有浓度为250μm的i2scn-离子。将该组合物称为“溶液b”。相对于对照,并且相对于另一种其他商业化组合物(其为2.0%葡萄糖酸氯己定(“溶液a”)),使该组合物与不同的生物膜组织化细菌接触。使组合物与不同细菌的生物膜接触不同的持续时间:5分钟、15分钟、30分钟、11小时和24小时。这种接触如下进行:将包含细菌生物膜的条带浸入组合物的溶液中或浸入2%葡萄糖酸氯己定的溶液中或作为对照浸入水溶液中(参见下文应用于白色念珠菌的技术的细节)。测试对以下细菌的活性:嗜酸乳杆菌、产碱韦荣球菌、突变链球菌、黏性放线菌和核粒梭菌。结果示于图21中:根据本发明的组合物从接触5分钟时开始对所有受试细菌具有活性,相比之下,2%葡萄糖酸氯己定的溶液的作用效果较低,并且仅在接触11小时后开始出现。对照明显不具有作用。●白色念珠菌生物膜将白色念珠菌生物膜固定在树脂和钛上的方案a)树脂:通过使有机化合物聚合获得的用于制造牙齿假体的材料将树脂片储存在叠氮化钠(0.5g/500ml)中以进行消毒。该操作在无菌条件下进行。将3片树脂转移到罐中。在搅拌下在60mlh2o中洗涤5分钟,洗涤3次。在搅拌下用60ml沙保罗氏(sabouraud)液最后一次清洗5分钟。将每片树脂转移到10ml圆底管中。在10ml沙保罗氏培养基中制备106bl/ml的白色念珠菌悬浮液。如下表中所示制备3个反应管。在rotatortm中孵育24至48小时(每分钟3转)。●在孵育后,从3个管中的每一个中,将1ml上清液转移到小杯中。测量600nm处的吸光度。●抽吸3个管中的培养基。●在磷酸盐缓冲液中洗涤3次。●制备包含葡萄糖(2g/100ml)的磷酸盐缓冲溶液。●使用该缓冲液制备i2scn-的溶液。●如下表所示制备3个反应管。●孵育30分钟。●在4个培养皿中连续接种树脂条带的每个面。●在37℃下孵育24至48小时。b)钛该操作在无菌条件下进行。在3个不同的管中称量500mg的钛。在10ml沙保罗氏培养基中制备106bl/ml的白色念珠菌悬浮液。如下表所示制备3个反应管。在rotatortm中孵育24小时至48小时(每分钟3转)。●孵育后,使沉降准确10分钟。●从3个管中的每一个中,将1ml上清液转移到小杯中。测量600nm处的吸光度。●抽吸3个管中的培养基●在磷酸盐缓冲液中洗涤3次●制备i2scn-的溶液●制备含有葡萄糖(2g/100ml)的磷酸盐缓冲溶液●如下表所示制备3个反应管孵育30分钟●抽吸上清液mtt测定(*)活的芽生孢子将mtt-四唑转化为在570nm处吸收的mtt-甲(levitz&diamond,1985)。该操作的不同步骤详述如下:●在10ml包含葡萄糖(2g/100ml)的磷酸盐缓冲液中制备106bl/ml的白色念珠菌悬浮液●(*)mtt:溴化3-(4,5-二甲基噻唑-2-基)-2,5-二苯基四唑●如下表所示制备4个反应管图22中示出了:对照-(左侧):无菌树脂条带。对照+(中间):被污染的条带。测试(右侧):被污染并经溶液a消毒的条带。观察到,被白色念珠菌atcc10231污染的树脂条带在浸入包含250μmi2scn-离子的溶液中后被灭菌。在环境温度下接触30分钟后,在树脂上形成的生物膜被完全破坏。通过用mtt测定念珠菌生物膜来测量i2scn-溶液对生物膜(钛上的生物膜)的作用。包含250μm离子i2scn-的溶液使得可以破坏约70%的已形成24至48小时的生物膜。获得的结果汇集如下:实施例9:根据本发明的组合物应用于漆料和树脂污染问题的稳定性和活性如下制备根据本发明的组合物:根据实施例1中所述的方案,将碘化钾(ki)5.4mm、1.2mm硫氰酸钾(kscn)、6.6mm过氧化氢(h2o2)在存在50mg/l乳过氧化物酶(lp)(1000个abts单位/mg)的情况下在乙酸铵缓冲液(100mm,ph4.5)中合并。使漆料和树脂样品被一系列数种微生物污染,例如细菌、酵母和霉菌、及其混合物。通过从开始就添加根据本发明的组合物来进行测试。在24小时的等待时间后,向树脂和漆料样品接种微生物混合物的悬浮液以达到1,000,000cfu/ml的污染水平。微生物混合物由例如以下的细菌、酵母和霉菌组成:-细菌:荧光假单胞菌atcc9721、铜绿假单胞菌atcc10145、枯草芽孢杆菌(bacillussubtilis)atcc6984、普通变形杆菌(proteusvulgaris)atcc9920;-酵母:热带念珠菌(candidatropicalis)atcc750、脆壁克鲁维酵母(kluyveromycesfragilis)atcc8554、假热带念珠菌(candidapseudotropicalis)atcc4135;-霉菌:黑曲霉atcc9642、黄曲霉(aspergillusflavus)atcc9643、嗜松青霉atcc9644。在1、2和7天的接触时间后,进行微生物分析。其总结在下表6中:表6注意到,不论样品如何,都不存在污染。这证实,根据本发明的组合物具有阻止漆料和树脂中微生物生长的活性。实施例10:根据本发明的组合物用于土壤、生产材料以及牙齿、外科手术装置等的污染问题的活性在工业过程中,应用称为cip(现场清洁(cleaninginplace))的清洁,其在于在使用设备后在高温下应用消毒剂。这适用于在牙科实践中使用的装置,在医院中,所述装置在其使用后通过在高温烘箱中灭菌进行清洁。如下制备根据本发明的组合物:根据实施例1中所述的方案,将碘化钾(ki)5.4mm、1.2mm硫氰酸钾(kscn)、6.6mm过氧化氢(h2o2)在存在50mg/l乳过氧化物酶(lp)(1000个abts单位/mg)的情况下在乙酸铵缓冲液(100mm,ph4.5)中合并。已经证明,该组合物能够消除引起该工业设备和其他设备污染的微生物,并且具有可以在环境温度下使用的优点。实施例11:根据本发明的组合物用于人和动物中损伤瘢痕形成期间的污染问题的活性微生物针对抗生素的抗性是一个越来越大的问题,并且严重地使由皮肤损伤或烧伤引起的创伤的瘢痕形成复杂化。这些微生物能够增强炎性过程。根据本发明的组合物根据实施例1中描述的方案制备并稀释直至获得包含250μmi2scn-的组合物。对针对当前抗生素具有抗性的微生物测试该组合物。更确切地,浸渍织物的使用显示,当将所述织物施用于创伤时,具有针对对不同抗生素具有抗性的细菌物种的抗菌活性的潜力。下表中描述的结果表明,根据实施例1中描述的方案制备的根据本发明的组合物即使其i2scn-离子浓度为250μm仍对这些微生物非常有效。表7实施例12:根据本发明的组合物针对在马和人中引起呼吸道疾病的微生物的活性根据实施例1中描述的方案制备根据本发明的组合物,并对在马和人中引起呼吸系统疾病的微生物进行测试。指数期和稳定生长期之间的生长曲线允许我们选择对应于1,000,000个孢子/ml的浓度的理想条件。根据本发明的组合物根据实施例1中描述的方案制备,并且显示出针对在马中引起呼吸系统疾病的微生物的效力。微生物为以下:马红球菌atcc25729-马链球菌马亚种(streptococcusequisubspequi)atcc53185和马链球菌兽疫亚种(streptococcusequisubspzooepidemicus)atcc43079。其在马中引起呼吸系统疾病。考虑到这些微生物的生长时间,在微生物生长48小时和120小时后进行测试。在所有的混合物中,所有的过氧化氢都被耗尽。硫氰酸盐和碘以相同的比例消耗。显示,根据实施例1中所述的方案制备的组合物在5分钟的接触时间后有效地抑制微生物。在不同的稀释度下使用离子组合物中4种浓度的i2scn-。每个数值代表3个独立进行的实验的结果。在5分钟的接触时间后测量微生物的体外抑制百分比。对照用不具有酶的溶液进行,一方面仅具有底物5.4mmki+2.2mmkscn,另一方面具有6.6mmh2o2。这些溶液显示对微生物不存在效力(参见下表8)。表8用在人中引起呼吸系统疾病并且在黏液黏稠病的情况下检出的其他微生物在相同条件下进行第二测试系列:妥布霉素抗性洋葱伯克氏菌(atccbaa-245)、黏液型铜绿假单胞菌、对甲氧西林和苯唑西林具有抗性的金黄色葡萄球菌(atcc43300)。表9总之,检测到强抗微生物活性。实施例13:根据本发明的组合物针对引起植物、水果和蔬菜以及其他收获植物、特别是香蕉的变质的微生物的活性如下制备根据本发明的组合物:根据实施例1中所述的方案,将碘化钾(ki)5.4mm、1.2mm硫氰酸钾(kscn)、6.6mm过氧化氢(h2o2)在存在50mg/l乳过氧化物酶(lp)(1000个abts单位/mg)的情况下在乙酸铵缓冲液(100mm,ph4.5)中合并。对受污染的香蕉、特别是对被引起炭疽病害和腐心病的真菌污染的香蕉测试该组合物。通过将香蕉浸入根据实施例1中所述方案制备的组合物中,证明了所述组合物对由芭蕉炭疽菌、串株镰孢霉(fusariummonoliforme)和尖孢镰孢霉(fusariumoxysporum)引起的感染具有高效力。另外,证明与具有毒性且污染环境的常规杀真菌剂相比,根据实施例1制备的组合物对真菌具有更高活性。实施例14:对苛养木杆菌的活性如下制备根据本发明的组合物:根据实施例1中所述的方案,将碘化钾(ki)5.4mm、1.2mm硫氰酸钾(kscn)、6.6mm过氧化氢(h2o2)在存在50mg/l乳过氧化物酶(lp)(1000个abts单位/mg)的情况下在柠檬酸盐-磷酸盐缓冲液(100mm,ph6.9)中合并。根据下述方案针对该组合物对以下细菌的杀菌作用来测试该组合物:苛养木杆菌苛养亚种、苛养木杆菌multiplex亚种和苛养木杆菌pauca亚种。结果示于图9、10和11中:根据本发明的组合物同时对苛养木杆菌苛养亚种、苛养木杆菌multiplex亚种和苛养木杆菌pauca亚种具有杀菌作用。通过在包含下述3种溶液a、b和c的混合物的培养基上进行连续2次传代(每次传代在26℃下进行10天)来制备接种物;将a和b的混合物在高压釜中灭菌,之后添加通过过滤灭菌的溶液c。●溶液a:500ml蒸馏水(aq.dest)(50℃)+10gacessigmaa9758-25g●溶液b:440ml蒸馏水(aq.dest)+40ml1.0nkoh(1nkoh:2.24g溶液40ml蒸馏水)。然后,向溶液b中添加2g炭(活性炭sigmac-4386)、10g酵母提取物(oxoid)和17g琼脂。制备两种溶液的混合物,然后在高压釜中灭菌。●溶液c:半胱氨酸hcl0.4g+焦磷酸铁0.25g溶液20ml蒸馏水(aq.dest)冷法灭菌(0.2μm过滤器)然后,将5ml无菌pbs添加到包含木杆菌属(xylella)菌株的培养皿中;用无菌刮刀对培养皿进行铺板,并将5ml吸移到无菌烧瓶中。用无菌pbs将do650调整至1(1的do650=104cfu/ml,参考shi等,2007,appl.environ.microbiol.,73(21))。-在15mlfalcon管中添加:对照:1ml接种物、1ml调节至ph6.9的无菌等张h2o(nacl8.5g/l)、1mlpd2肉汤。pd2肉汤通过混合下述溶液a和b获得:溶液a:蒸馏水1l:●大豆蛋白胨:2.0g●细菌用胰蛋白胨:4.0g●琥珀酸二钠:1.0g●柠檬酸三钠:1.0g●k2hpo4:1.5g●kh2po4:1.0g●氯化血红素贮存溶液(0.1%,在(0.05nnaoh:0.112g/40ml)中):10.0ml●mgso4.7h2o:1.0g●ph:6.9在121℃下在高压釜中15分钟。溶液b:●牛血清白蛋白级分v(20%w/v):10ml。冷法灭菌(0.2μm过滤)。将溶液a与溶液b混合:当经高压灭菌的培养基(a)已冷却至50℃时,添加经灭菌的白蛋白(b)。生物防治剂通过混合1ml接种物、1ml抑制剂和1mlpd2肉汤获得,将其在26℃下在搅拌(100rpm)下孵育30分钟。对照如下获得:混合4滴(10μl)/培养皿,在培养皿的左侧)×5个培养皿,并在26℃下孵育14天。生物防治剂如下获得:混合4滴(10μl)/培养皿,在培养皿的右侧)×5个培养皿,并在26℃下孵育14天。在双目显微镜30x下观察培养皿并拍照。照片示于图9至11中。实施例15:去除酶的重要性在期望离子的产生期间,如果将酶保持在混合物中,观察到期望离子的逐渐损失,并且在48小时后,由于期望离子的酶促氧化而导致期望离子全部损失,如图19所示,在图19中观察到:信号强度作为酶在基质(溶液)中的存在时间的函数而降低。实施例16:补充酶的添加如图20所示,补充酶的存在赋予意想不到的效果。明显观察到,当混合物被稀释10倍时,与未添加乳铁蛋白的溶液相比,乳铁蛋白(>5mg/l)的添加赋予提高的抗微生物活性。实施例17:与现有技术的比较未获得i2scn-或i(scn)2-的种类。包含ki/kscn比为1.74的酶促混合物的组合物根据ep1349457中所述的方案制备。包含ki/kscn比为1.55的酶促混合物的组合物根据wo00/01237中所述的方案制备。nmr谱在以下条件下制备:使用具有8-mm宽带探针的brukeramx-500mhz装置。根据所述方法从反应混合物(乳过氧化物酶/[13c]scn-/i-/h2o2获得谱。样品由540μl反应混合物、60μld2o(氧化氘)、2μldss(4,4-二甲基-4-甲硅烷基戊烷-1-磺酸)组成。将样品放入具有8mm长度和8英寸壁的nmr管中。使用以下参数收集谱:扫描宽度=15009,点数=32000,采集时间=1.066秒,再循环延迟:2秒,扫描次数=2000。化学位移(ppm)参照nmr光谱术校准标准品dss(4,4-二甲基-4-甲硅烷基戊烷-1-磺酸)。图12至16是用以下组合物获得的谱:●图12:1.86mmki+1.2mmkscn(比1.55)+3.06mmh2o2在存在乳过氧化物酶的情况下在水性基质中的混合物。在1分钟、60分钟、3小时、24小时或48小时后去除酶。●图13:1.86mmki+1.2mmkscn(比1.55)+3.06mmh2o2在乳过氧化物酶存在1分钟、60分钟、3小时、24小时或48小时的情况下在酸缓冲基质(柠檬酸盐缓冲液100mmph5)中的混合物。为了更加清楚,消除了对应于柠檬酸盐缓冲液的信号。●图14:对应于柠檬酸盐缓冲液和scn-的信号的图示。●图15:1.86mmki+1.2mmkscn(比1.55)+3.06mmh2o2在乳过氧化物酶存在1分钟、60分钟、3小时、24小时或48小时的情况下在中性缓冲基质(磷酸盐缓冲液100mmph7.4)中的混合物。●图16:5.4mmki+1.2mmkscn+6.6mmh2o2在存在乳过氧化物酶的情况下的混合物。无论使用哪种基质,都观察到对应于ks13cn的峰。在49至50ppm处不存在峰。在wo00/01237或ep1349457中描述的混合物中,未产生i2scn-或i(scn)2-离子。次硫氰酸根离子的存在的证明图17:1.86mmki+1.2mmkscn(比1.55)+3.06mmh2o2在存在乳过氧化物酶的情况下在水性基质中的混合物。在24小时后去除酶。图18:1.86mmki+1.2mmkscn(比1.55)+3.06mmh2o2在乳过氧化物酶存在3小时的情况下在酸缓冲基质(柠檬酸盐缓冲液100mmph5)中的混合物。在根据wo00/01237或ep1349457制备的酶促混合物中,检测到少量的次硫氰酸根离子,同样的是对应于oscn-离子的降解的氰酸根离子(ocn-),其由于其三重信号而完全可鉴定出(gerritsen等1993)。实施例18:酶促氧化和化学氧化的动力学和抗微生物活性的比较●a)期望离子产生的快速性(酶促动力学),其暗指酶促混合物的即刻抗微生物活性。期望离子产生的动力学(通过-sh或-nh2基团的氧化进行测量)制备所述根据本发明的在乙酸钠缓冲液100mmph4.4+/-lp中包含5.4mmki+1.2mmkscn+6.6mmh2o2的溶液。表10表11注意到:期望离子形成的动力学是完全不同的:在具有酶下期望离子的产生是即时的,而在不具有酶下获得的产生是相当慢的,在孵育1小时后仅获得约1/3的期望离子。这暗示活性混合物的即刻活性:针对扩展青霉的活性表12表13注意到,化学混合物(试剂的孵育时间:1分钟)对扩展青霉的体外生长抑制不具有效果。相反,酶促混合物((5.4mmki+1.2mmkscn+6.6mmh2o2)+1分钟乳过氧化物酶,然后除去酶)对于500mm缓冲液直至1/30稀释度,以及对于缓冲液100mm、10mm和1mm直至1/15稀释度都是有效的。用于制备包含期望离子的活性混合物的方法(即,化学方法或酶促方法)暗示混合物的即刻抗微生物活性。酶促混合物具有即刻抗微生物效力(在早至孵育1分钟后就存在),而在化学混合物中在孵育底物1分钟后不存在该抗微生物活性。实施例19:固定在织物上并冻干的组合物对大肠杆菌的抗微生物活性如下制备根据本发明的组合物:将5.4mm碘化钾(ki)、1.2mm硫氰酸钾(kscn)、6.6mm过氧化氢(h2o2)在存在50mg/l乳过氧化物酶(lp)(1000个abts单位/mg)的情况下在柠檬酸钠缓冲液100mmph6.2(图23b)或磷酸盐缓冲液100mmph7.4(图23c)或柠檬酸钠缓冲液100mmph6.2中合并;在制备后冻干;并在水中重构(23d)。将这些组合物固定在织物上,并测试用这些组合物浸渍的这些织物对大肠杆菌的抗菌活性(图23b、23c和23d)。可以看出,冻干组合物保持与其他非冻干组合物等效的杀菌作用(图23b和23c相对于图23d)。“对照”织物用无菌水浸渍(图23a)。图23示出了根据本发明的组合物对大肠杆菌(109cfu/ml)的作用。显然,将100μl的109cfu/ml大肠杆菌在培养皿中的培养基中在37℃下孵育24小时后,固定在织物上的组合物阻止细菌的生长(可见光圈)。当前第1页12
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