本发明属于花生芽培养方法技术领域，具体涉及一种提高花生芽中白藜芦醇含量的方法。
背景技术：
花生芽，花生发芽后产生的，是一种食疗兼备的食品，它不但能够生吃，而且营养还特别丰富。花生芽的能量，蛋白质和粗脂肪含量居各种蔬菜之首，并富含维生素、钾、钙、铁、锌等矿物质及人体所需的各种氨基酸和微量元素，被誉为“万寿果芽”，也叫长寿芽。花生芽还可以使花生中的蛋白质水解为氨基酸，易于人体吸收；油脂被转化为热量，脂肪含量大大降低，害怕肥胖的人建议长期使用，与此同时，提高了各种人体必需的微量元素利用率。花生芽吃法多样，热炒、凉拌、泡菜、涮火锅、都很美味，也可根据各人的喜好搭配食用。
研究发现，花生芽的白藜芦醇含量比花生的要高5倍，由此可见，花生发芽的过程是产生白藜芦醇过程，因此想提高花生芽中白藜芦醇含量应当从花生发芽的过程入手。
白藜芦醇是多酚类化合物，主要来源于花生、葡萄（红葡萄酒）、虎杖、桑椹等植物。白藜芦醇是一种生物性很强的天然多酚类物质，又称为芪三酚，是肿瘤的化学预防剂，也是对降低血小板聚集，预防和治疗动脉粥样硬化、心脑血管疾病的化学预防剂。白藜芦醇具有抑制癌细胞、降血脂、防治心血管疾病、延缓衰老等作用，保健价值极高。
白藜芦醇是一种天然的抗氧化剂，可降低血液粘稠度，抑制血小板凝结和血管舒张，保持血液畅通，可预防癌症的发生及发展，具有抗动脉粥样硬化和冠心病，缺血性心脏病，高血脂的防治作用。抑制肿瘤的作用还具有雌激素样作用，可用于治疗乳腺癌等疾病。
20世纪90年代，中国科技工作者对白藜芦醇的研究不断深入，并揭示其药理作用：抑制血小板非正常凝聚，预防心肌硬塞、脑栓塞，对缺氧心脏有保护作用，对肥胖者可以起一个控制与减肥作用，对烧伤或失血性休克引起的心输出量下降有效恢复，并能够扩张动脉血管及改善微循环。同时中国生物技术有限公司研究白藜芦醇的提取和工业化生产，已经初具规模。
1998年美国艾尔·敏德尔编撰《抗衰老圣典》时，将白藜芦醇列为“100种最热门有效抗衰老物质”之一。中国农科院花生研究所禹山林研究员和国家著名医药专家毛文岳教授说，有关花生中白藜芦醇的研究开发将是21世纪最重要的营养课题之一。迄今美国宇航局已将花生定为航天食品，常吃花生制品，可缓解心血管疾病，降低血脂，延缓衰老。白藜芦醇保健食品将会成为21世纪营养健康的新时尚。
豆渣是生产豆奶或豆腐过程中的副产品，每年全球豆渣的产量都很大。中国是豆腐生产的发源地，具有悠久的豆腐生产历史，豆腐的生产、销售量都较大，相应的豆渣产量也很大。而豆渣的利用率很低，一般都将其作为动物饲料使用。
现有医疗和食用保健的白藜芦醇基本是从高白藜芦醇含量的天然产物中提取的，其产量受其天然产物中白藜芦醇含量影响很大。发明人为了提高白藜芦醇的产量，研究了花生发芽过程中的白藜芦醇含量变化，提供一种全新的提高花生芽中白藜芦醇含量的方法。
技术实现要素：
本发明的目的提供了一种提高花生芽中白藜芦醇含量的方法，依次包括：选取花生种子、浸泡液Ⅰ浸泡、清水浸泡和浸泡液Ⅱ浸泡；
其中，所述浸泡液Ⅰ的配方如下：
柠檬酸：0.02~0.04%，纤维素酶：0.3~0.5%，抗坏血酸：0.1~0.2%，余量为水；
所述浸泡液Ⅱ的制备方法如下：
选料：选取水分含量为5~12%的豆渣，按照料液比1:2~1:5加入浓度为3~10%的NaHCO3溶液，得到豆渣浆；
②板框压滤：板框压滤去除豆渣浆中的水;
③调浆：在沥水豆渣中加水，在搅拌过程中按固液比1:3~1:5加入水，升温至40-60℃，并采用氢氧化钠溶液调节溶液的pH值为8.0±0.2，得到豆渣溶液；
④酶解：在豆渣溶液中加入0.5-1.5%的胰酶，酶解结束后，灭酶活，得到酶解后的豆渣溶液；
⑤乳酸菌发酵：将活化好的乳酸乳球菌8148菌株以2~5%的量接种在酶解后的豆渣溶液中，有氧发酵24~96h，静置，并灭菌处理，得到发酵后的豆渣溶液；
⑥活性炭吸附：将3~10%（m/V）的DS-305糖用活性炭加入到所述发酵后的豆渣溶液中，静置吸附20~30min，吸附完成后过滤，去除不溶物，得到浸泡液Ⅱ。
进一步，所述板框压滤的过滤介质为高温定型滤布，压力为0.1~0.2MPa,得到沥水豆渣。
进一步，所述灭酶活的方法为：对酶解体系迅速升温至80~90℃，保持10~20min。
进一步，所述酶解的酶解时间为20~50min。
进一步，所述浸泡液Ⅰ的浸泡时间为3~5h。
进一步，所述清水的浸泡时间为4~8h。
有益效果
本发明首先使用浸泡液Ⅰ对花生种子中的纤维素进行轻度酶解，能够适当的破坏花生种子中的细胞壁，而柠檬酸和抗坏血酸可以保护花生种子中的细胞膜不会被破坏，保证细胞在发芽过程中的活性，随后配合清水洗涤并浸泡4~8h，再用豆渣制备的浸泡液Ⅱ浸泡，能够显著提高花生芽成品中白藜芦醇的含量，经过本发明实验数据表明，本发明将传统方法制备的花生芽中白藜芦醇含量10~30μg/g之间提高到174.495±1.063μg/g，提高了5倍以上，可见本发明对提高花生芽中白藜芦醇含量有显著的效果，而申请人也做了实验，如果仅用浸泡液Ⅰ或浸泡液Ⅱ均无法达到提高白藜芦醇的目的。
本发明巧妙的理由了豆腐制备的废弃物豆渣作为原料，经过酶解和发酵后，能够被花生所利用，不仅提高了花生芽中白藜芦醇的含量，而且能够将豆渣这一废弃物利用掉，不仅使得花生芽的制备成本降低，而且综合利用了我国丰富的大豆资源。
具体实施方式
下面结合具体实施例子进一步阐明本发明，应理解这些实施例仅用于说明本发明，而不用于限制本发明的范围，在阅读了本发明之后，本领域的技术人员对本发明各种等价形式的修改均落于本申请所附权利要求所规定的范围。
本发明实施例中，所述胰酶购买自广西庞博生物工程公司；所述乳酸乳球菌8148菌株购买自中国工业微生物菌种保藏管理中心，CICC编号20406。所述DS-305糖用活性炭来自溧阳市德胜活性炭厂。
所涉及到的其他试剂均为食品级。
实施例1
本实施例提供了一种提高花生芽白藜芦醇含量的方法，所述提高花生芽白藜芦醇含量的方法具体包括如下步骤：
1、选取花生种子：选取当年颗粒饱满，无破损的花生作为花生芽的制备原料，称之为花生种子。
2、浸泡液Ⅰ浸泡：将选好的花生种子用浸泡液Ⅰ浸泡4h。
3、清水浸泡：将用浸泡液Ⅰ浸泡后的花生种子去除，用清水冲洗后，放在清水中浸泡6h。
4、浸泡液Ⅱ浸泡：将花生种子放在浸泡液Ⅱ中浸泡催芽，直至完成发芽，可以显著提高花生芽中白藜芦醇的含量，得到高白藜芦醇的花生芽。
其中，所述浸泡液Ⅰ的制备方法如下：
用纯水配制成柠檬酸：0.04%，纤维素酶：0.5%，抗坏血酸：0.2%的混合溶液，完全溶解得到浸泡液Ⅰ。
所述浸泡液Ⅱ的制备方法如下：
选料：选取水分含量为5~12%的豆渣，按照料液比1:2加入浓度为10%的NaHCO3溶液，充分搅拌，得到豆渣浆。
②板框压滤：采用板框压滤去除豆渣浆中的水，过滤介质为高温定型滤布，压力为0.1 MPa,得到沥水豆渣。
③调浆：在沥水豆渣中加水，在搅拌过程中按固液比1:4加入水，升温至40-60℃，得到豆渣溶液。采用氢氧化钠溶液调节溶液的pH值为8.0±0.2。
④酶解：在豆渣溶液中加入0.5-1.5%的胰酶，边加边搅拌，酶解30min。酶解结束后，对酶解体系迅速升温至90℃，保持90℃的温度10 min，冷却到室温，得到酶解后的豆渣溶液。
⑤乳酸菌发酵：将活化好的乳酸乳球菌8148菌株以2%的量接种在酶解后的豆渣溶液中，有氧发酵24~96h，静置，在90℃的条件下灭菌处理，得到发酵后的豆渣溶液。
⑥活性炭吸附：取10%（m/V）的DS-305糖用活性炭加入到所述发酵后的豆渣溶液中，静置吸附20~30min，吸附完成后得到浸泡液Ⅱ。
申请人测定了采用本发明花生芽的白藜芦醇的含量，具体方法如下：
将粉碎后的花生芽样品过80目筛，参考国标GBT24903-2010花生中白藜芦醇的测定方法；采用高效液相色谱法测定发芽花生中白藜芦醇含量。
申请人根据花生芽的特性，白藜芦醇的测定方法如下:
准确称取1g发芽花生冻干粉末于150mL的三角瓶中,加入50mL浓度为80%的乙醇溶液，于80℃的恒温水浴振荡器中，以140r/min振荡45min，在5000rpm离心10min取上清液，过0.45微米的微孔滤膜待测。
色谱测试条件：单泵，流速为1.0mL/min；色谱柱为Waters Sunfire C18 5μm（4.6x250mm），柱温30℃；流动相为乙腈25%，水75%，冰乙酸0.1%；检测波长306nm；进样量20μL.
白藜芦醇标准曲线的绘制：用配制好的100mg/L的白藜芦醇标准液分别稀释100、50、25、12.5、10倍,吸取20μL进样，重复三次，以白藜芦醇的浓度为横坐标，峰面积为纵坐标,绘制标准曲线。
测定结果显示，本发明实施例1得到的白藜芦醇含量为174.495±1.063μg/g，而传统方法制备的花生芽白藜芦醇含量在10~30μg/g之间。由此可见本发明方法可以显著提高花生芽中白藜芦醇的含量。
实施例2
本实施例提供了一种提高花生芽白藜芦醇含量的方法，所述提高花生芽白藜芦醇含量的方法具体包括如下步骤：
1、选取花生种子：选取当年颗粒饱满，无破损的花生作为花生芽的制备原料，称之为花生种子。
2、浸泡液Ⅰ浸泡：将选好的花生种子用浸泡液Ⅰ浸泡3h。
3、清水浸泡：将用浸泡液Ⅰ浸泡后的花生种子去除，用清水冲洗后，放在清水中浸泡8h。
4、浸泡液Ⅱ浸泡：将花生种子放在浸泡液Ⅱ中浸泡催芽，直至完成发芽。
本方法可以显著提高花生芽中白藜芦醇的含量，得到高白藜芦醇的花生芽。
其中，所述浸泡液Ⅰ的制备方法如下：
用纯水配制成柠檬酸含量：0.02%，纤维素酶含量：0.3%，抗坏血酸含量：0.15%的混合溶液，完全溶解得到浸泡液Ⅰ。
所述浸泡液Ⅱ的制备方法如下：
选料：选取水分含量为12%的豆渣，按照料液比1:4加入浓度为5%的NaHCO3溶液，充分搅拌，得到豆渣浆。
②板框压滤：采用板框压滤去除豆渣浆中的水，过滤介质为高温定型滤布，压力为0.2 MPa,得到沥水豆渣。
③调浆：在沥水豆渣中加水，在搅拌过程中按固液比1:3加入水，升温至40℃，得到豆渣溶液。采用氢氧化钠溶液调节溶液的pH值为8.0±0.2。
④酶解：在豆渣溶液中加入0.5%的胰酶，边加边搅拌，酶解30min。酶解结束后，对酶解体系迅速升温至90℃，保持90℃的温度10 min，冷却到室温，得到酶解后的豆渣溶液。
⑤乳酸菌发酵：将活化好的乳酸乳球菌8148菌株以3%的量接种在酶解后的豆渣溶液中，有氧发酵24h，静置，并在90℃的条件下灭菌处理，得到发酵后的豆渣溶液。
⑥活性炭吸附：取3%（m/V）的DS-305糖用活性炭加入到所述发酵后的豆渣溶液中，静置吸附20~30min，吸附完成后得到浸泡液Ⅱ。
实施例3
本实施例提供了一种提高花生芽白藜芦醇含量的方法，所述提高花生芽白藜芦醇含量的方法具体包括如下步骤：
1、选取花生种子：选取当年颗粒饱满，无破损的花生作为花生芽的制备原料，称之为花生种子。
2、浸泡液Ⅰ浸泡：将选好的花生种子用浸泡液Ⅰ浸泡5h。
3、清水浸泡：将用浸泡液Ⅰ浸泡后的花生种子去除，用清水冲洗后，放在清水中浸泡4h。
4、浸泡液Ⅱ浸泡：将花生种子放在浸泡液Ⅱ中浸泡催芽，直至完成发芽。
本方法可以显著提高花生芽中白藜芦醇的含量，得到高白藜芦醇的花生芽。
其中，所述浸泡液Ⅰ的制备方法如下：
用纯水配制成柠檬酸含量：0.03%，纤维素酶含量：0.4%，抗坏血酸含量：0.1%的混合溶液，完全溶解得到浸泡液Ⅰ。
所述浸泡液Ⅱ的制备方法如下：
选料：选取水分含量为10%的豆渣，按照料液比1:5加入浓度为8%的NaHCO3溶液，充分搅拌，得到豆渣浆。
②板框压滤：采用板框压滤去除豆渣浆中的水，过滤介质为高温定型滤布，压力为0.15 MPa,得到沥水豆渣。
③调浆：在沥水豆渣中加水，在搅拌过程中按固液比1:5加入水，升温至60℃，得到豆渣溶液。采用氢氧化钠溶液调节溶液的pH值为8.0±0.2。
④酶解：在豆渣溶液中加入1.5%的胰酶，边加边搅拌，酶解30min。酶解结束后，对酶解体系迅速升温至90℃，保持90℃的温度10 min，冷却到室温，得到酶解后的豆渣溶液。
⑤乳酸菌发酵：将活化好的乳酸乳球菌8148菌株以8%的量接种在酶解后的豆渣溶液中，有氧发酵96h，静置，并在95℃的条件下灭菌处理，得到发酵后的豆渣溶液。
⑥活性炭吸附：取6%（m/V）的DS-305糖用活性炭加入到所述发酵后的豆渣溶液中，静置吸附30min，吸附完成后得到浸泡液Ⅱ。