本发明涉及到解一株淀粉芽孢杆菌(bacillusamyloliquefaciens)h47和短小芽孢杆菌及苏云金杆菌微生物发酵商陆制备植物源杀虫剂的生产方法，属于微生物和发酵技术领域。
背景技术：
商陆(phytolaccaacinosa)系为商陆科多年生宿根草本植物，其干燥块根是一种应用历史悠久的传统中药，始载于《神农本草经》。商陆一般株高70-100cm，全株无毛，根粗壮、肉质、圆锥形，外皮淡黄色；茎直立、多分枝、绿色或紫红色、具纵沟；叶互生、椭圆形或卵状椭圆形，长12-25cm，宽5-10cm，先端急尖、基部楔形而下延，全缘，侧脉羽状，主脉粗壮；叶柄长1.5-3cm，上面具槽，下面半圆形。总状花序顶生或侧生，长10-15cm；花两性，径约8mm，具小梗，小梗基部有苞片1及小苞片2；萼通常5片、偶为4片，卵形或长方状椭圆形，初白色，后变淡红色；无花瓣、雄蕊8，花药淡粉红色(少数成淡紫色)；心皮8-10，离生。浆果扁球形，径约7mm，通常由8个分果组成，熟时紫黑色。种子肾圆形，扁平，黑色。花期6-8月。果期8-10月。广布于长江以南红壤低丘陵地区，在中国现有分布的品种中主要有商陆(野萝卜)和垂序商陆。主产河南，湖北，山东，浙江，江西等。商陆根入药，以白色肥大者为佳，红根有剧毒，仅供外用；具有通二便，逐水、散结，治水肿、胀满、脚气、喉痹，外敷治痈肿疮毒；也可作兽药及农药。果实含鞣质，可提制栲胶。嫩茎叶可供蔬食。
商陆含有多种次生代谢产物，包括美商陆皂苷a、b、d、e、g、f、d2等，美商陆皂苷元，2-羟基商陆酸、商陆酸、美商陆酸、3-氧代-30-甲氧基羰基-23-去甲齐墩果烷-12-烯-28-酸等。另外，有菠菜甾醇、△1-豆甾烯醇等甾醇类成分，以及天冬氨酸、谷氨酸等氨基酸类成分，并含有多糖，尚有美商陆根抗病毒蛋白和美商陆根抗真菌蛋白r1、r2，美商陆毒素，有丝分裂原，组胺等。因而具有灭螺、杀螨、杀虫作用。
目前，植物性杀虫剂多用有机溶剂或煎煮提取，不利于节能且有较大的环境风险；也会影响活性物质的稳定性和遗失活性物质；同时增加成本使得开发应用困难较大，作用效果缓慢，因此给植物源杀虫剂的研发和生产带来了巨大的经济困难。利用合适的植物促生菌发酵商陆，不仅有利于生理活性物质的提取，还不易造成活性物质的失活，促生菌本身还有较好的杀虫防病和促生作用。有利于改善植物生长和增强杀虫效果，有利于环境保护和商陆植物本身的有效利用。
技术实现要素：
针对现有技术存在的上述缺陷，本发明利用商陆植物为原料，用2013年6月24日保存于中国典型培养物保藏中心的，保藏编号为：cctccno：m2013283的解淀粉芽孢杆菌(bacillusamyloliquefaciens)h47(该菌株以下简称：解淀粉芽孢杆菌h47cctccm2013283)和市售短小芽孢杆菌及市售苏云金杆菌发酵制备植物源杀虫剂，有利于改善植物生长和增强杀虫效果，有利于环境保护。
本发明的发酵技术方案：
1)菌种准备：将解淀粉芽孢杆菌h47cctccm2013283和市售短小芽孢杆菌、市售苏云金杆菌分别接种于种子培养基，于30℃，250r/min震荡培养12h；所述种子培养基成分按g/l计为：蛋白胨10，酵母膏5，nacl10，其余成分为水，121℃高压灭菌15min，调整ph至7.0。按一定比例混合做种子。
2)发酵液准备：选用质量优良的商陆，用水冲洗，70％—75％酒精浸泡3min，用水洗净，经搅碎机搅碎后待用。
3)发酵罐空消及空气管道消毒：按相关说明书进行发酵罐空消。
4)发酵液实消：将步骤2所得商陆放入发酵罐中，补充自来水至终体积为10l，按相关说明书进行实消灭菌。
5)接种培养：当发酵罐温度降至37℃时，将步骤1所得种子按体积比1％的接种量，接种至装有商陆的发酵罐中，25—30℃条件下培养3—12天，设置工艺要求的通气量并保持罐压，设置各其他培养参数培养。
6)出料：培养完毕，放出发酵液，过滤，过滤后所得发酵液即为杀虫剂成品。
本发明的有益效果：
本发明提供了发酵商陆制得一种生物源杀虫剂的方法。本发明制备方法及过程中无污染安全可靠，发酵时间周期短，工艺环节少，简单易操作，可节省投资和运行费用。与传统化学药剂相比，其具绿色安全，环境友好等优势，且促生菌本身还有较好的杀虫防病和促生作用，拥有广阔的应用前景。
具体实施方法：
下面结合实施例对本发明进行进一步描述。以下实施例仅为本发明的几个具体实施例，但本发明的设计构思并不局限于此，凡利用此构思对本发明进行非实质性的改动，均应属于侵犯本发明保护范围的行为。
实施例1
1)菌种准备：将解淀粉芽孢杆菌h47cctccm2013283和市售短小芽孢杆菌、市售苏云金杆菌分别接种于种子培养基，于30℃，250r/min震荡培养12h；所述种子培养基成分按g/l计为：蛋白胨10，酵母膏5，nacl10，其余成分为水，121℃高压灭菌15min，调整ph至7.0。按1:1:1混合做种子。
2)发酵液准备：选用质量优良的商陆，用水冲洗，70％—75％酒精浸泡3min，用水洗净，经搅碎机搅碎后待用。
3)发酵罐空消及空气管道消毒：按相关说明书进行发酵罐空消。
4)发酵液实消：将步骤2所得商陆放入发酵罐中，补充自来水至终体积为10l，按相关说明书进行实消灭菌。
5)接种培养：当发酵罐温度降至37℃时，将步骤1所得种子按体积比1％的接种量，接种至装有商陆的发酵罐中，25—30℃条件下培养3—12天，设置工艺要求的通气量并保持罐压，设置各其他培养参数培养。
6)出料：培养完毕，放出发酵液，过滤，过滤后所得发酵液即为杀虫剂成品。
实施例2
1)菌种准备：将解淀粉芽孢杆菌h47cctccm2013283和市售短小芽孢杆菌、市售苏云金杆菌分别接种于种子培养基，于30℃，250r/min震荡培养12h；所述种子培养基成分按g/l计为：蛋白胨10，酵母膏5，nacl10，其余成分为水，121℃高压灭菌15min，调整ph至7.0。按1:2:1混合做种子。
2)发酵液准备：选用质量优良的商陆，用水冲洗，70％—75％酒精浸泡3min，用水洗净，经搅碎机搅碎后待用。
3)发酵罐空消及空气管道消毒：按相关说明书进行发酵罐空消。
4)发酵液实消：将步骤2所得商陆放入发酵罐中，补充自来水至终体积为10l，按相关说明书进行实消灭菌。
5)接种培养：当发酵罐温度降至37℃时，将步骤1所得种子按体积比1％的接种量，接种至装有商陆的发酵罐中，25—30℃条件下培养3—12天，设置工艺要求的通气量并保持罐压，设置各其他培养参数培养。
6)出料：培养完毕，放出发酵液，过滤，过滤后所得发酵液即为杀虫剂成品。
实施例3
1)菌种准备：将解淀粉芽孢杆菌h47cctccm2013283和市售短小芽孢杆菌、市售苏云金杆菌分别接种于种子培养基，于30℃，250r/min震荡培养12h；所述种子培养基成分按g/l计为：蛋白胨10，酵母膏5，nacl10，其余成分为水，121℃高压灭菌15min，调整ph至7.0。按1:1:2混合做种子。
2)发酵液准备：选用质量优良的商陆，用水冲洗，70％—75％酒精浸泡3min，用水洗净，经搅碎机搅碎后待用。
3)发酵罐空消及空气管道消毒：按相关说明书进行发酵罐空消。
4)发酵液实消：将步骤2所得商陆放入发酵罐中，补充自来水至终体积为10l，按相关说明书进行实消灭菌。
5)接种培养：当发酵罐温度降至37℃时，将步骤1所得种子按体积比1％的接种量，接种至装有商陆的发酵罐中，25—30℃条件下培养3—12天，设置工艺要求的通气量并保持罐压，设置各其他培养参数培养。
6)出料：培养完毕，放出发酵液，过滤，过滤后所得发酵液即为杀虫剂成品。