本发明属于农药技术领域，具体来说是一种木焦油和博落回生物碱复配杀菌剂、制备方法及应用，主要应用于防治果树以及蔬菜上的腐烂病、溃疡病、灰霉病、霜霉病、软腐病等农业病害。
背景技术：
霜霉病、灰霉病、腐烂病、软腐病、溃疡病等是瓜、果、蔬菜上的主要病害，危害范围广，在防治上难度较大。目前防治这些病害的药剂主要是化学杀菌剂，然而长期大量的化学用药导致产生了抗药性、环境污染、危害人类健康等问题的出现；另外，农产品出口屡遭“绿色壁垒”的冲击，致使国家不得不限制许多化学农药的使用。从天然的资源宝库中寻找杀菌活性物质，正在成为新型杀菌剂创制的重要途径和研究热点。特别是通过多种成份的科学复配之后，植物源杀菌活性物质的效果可显著提高。
木焦油是从木材中高温蒸馏得到的，其主要成分2-甲基苯酚、3-甲基苯酚、2，3-二甲基苯酚、2，4-二甲基苯酚、2-甲氧基-4-甲基苯酚、4-乙基-2-甲氧基苯酚2-甲氧基-4-(1-丙烯基)-苯酚和4-烯丙基-2,6-二甲氧基苯酚等酚类物质。其对果树、蔬菜上的腐烂病、溃疡病、灰霉病、霜霉病、软腐病等多种病害有较好防治效果；室内生测和田间药效测定结果表明，木焦油对苹果树腐烂病等均有很好的防治效果。
博落回属植物化学成分以生物碱为主。目前报道的生物碱基本上可以归为两大类，一类是原阿片碱类，如原阿片碱与别隐品碱等，另一类是苯并菲啶类，如血根碱、白屈菜红碱、白屈菜根碱、小檗碱与黄连碱等，为季胺型生物碱。对博落回属植物化学成分的最早报道见于1962年，日本学者谷千秋等从博落回根和地上部分分离到原阿片碱，白屈菜红碱、血根碱、黄连碱，小檗碱和沙明碱等。
根据申请人所作的资料检索，目前木焦油为基础的混配杀菌剂主要有：马建义等申请了一种含木焦油多效农药制剂的专利，公开号为cn101263830，该发明主要用含有焦油与有机酸的组合物防治螨类害虫和杀灭细菌等。马建义等申请了一种含木焦油多效农药制剂的专利，公开号为cn101263827，该发明主要用含有焦油盐的组合物杀螨、杀虫、杀菌等。吴得治等申请了一种含有木焦油的一种环保型木焦油杀菌驱虫剂，公开号为cn105685102，该发明主要使用木焦油及桂花、樟树、紫罗兰、丁香树、茉莉、七里香、柠檬、天竺葵、石竹的植物提取物的组合物杀菌、驱虫等。
纵观上述专利，大都是以木焦油与植物提取物或农药进行混配，其主要用途为杀菌、驱虫、杀螨，而将木焦油和博落回生物碱复配应用于植物病原菌上的专利和产品迄今未见公开报道。
技术实现要素：
本发明的目的在于，提供一种以植物源物质木焦油和博落回生物碱为杀菌活性物质及其增效复配制剂的制备方法，主要应用于防治瓜、果、蔬菜上的腐烂病、溃疡病、灰霉病、霜霉病、软腐病等农业病害。
为了实现上述任务，本发明采取如下的技术解决方案得以实现：
一种木焦油和博落回生物碱复配杀菌剂，该杀菌剂的活性成分包括木焦油和博落回，木焦油和博落回的质量比为9:1～1:9。
具体的，所述的杀菌剂的制剂形态是微乳剂，所述的微乳剂由以下原料按重量百分比配制：
木焦油：30％～80％，博落回生物碱：0.1％～10％，有机溶剂：0～20％，表面活性剂：5％～15％，增效剂：0～20％，防冻剂：4％～10％，余量为水，原料的重量百分比之和为100％。
或者，所述的杀菌剂的制剂形态是涂抹剂，所述的涂抹剂由以下原料按重量百分比配制：
木焦油：30％～80％，博落回生物碱：0.1％～10％，有机溶剂：0～20％，表面活性剂：5％～20％，乳化剂：10％～20％，原料的重量百分比之和为100％。
或者，所述的杀菌剂的制剂形态是可溶性液剂，所述的可溶性液剂由以下原料按重量百分比配制：
木焦油：15％～50％，博落回生物碱：0.1％～10％，表面活性剂：5％～20％，乳化剂：0～20％，余量为有机溶剂，原料的重量百分比之和为100％。
更具体的，所述的有机溶剂为乙醇、乙酸和n-甲基吡咯烷酮中的一种或一种以上的混合物；
所述的乳化剂是蓖麻油聚氧乙烯醚、脂肪醇聚氧乙烯醚类、苯乙基酚聚氧乙烯醚类及其类似物质和吐温中的一种或一种以上的混合物；
所述的增效剂为有机硅、增效醚和碳酸烷基酯中的一种或一种以上的混合物；
所述的渗透剂为脂肪醇聚氧乙烯醚；
所述的防冻剂为乙二醇或丙二醇；
所述的增稠剂为聚乙烯醇或黄原胶。
所述的木焦油和博落回生物碱复配杀菌剂的制备方法，所述的微乳剂的制备方法是：按照配方量将木焦油、博落回生物碱、有机溶剂、表面活性剂、增效剂、防冻剂和水混合，在反应釜中搅拌透明，经过质量检验即得成品。
所述的木焦油和博落回生物碱复配杀菌剂的制备方法，所述的涂抹剂的制备方法是：按照配方量将木焦油、博落回生物碱、有机溶剂、乳化剂、渗透剂和水混合，在反应釜中搅拌透明，经过质量检验后，制成成品。
所述的木焦油和博落回生物碱复配杀菌剂的制备方法，所述的可溶性液剂的制备方法是：按照配方量将木焦油、博落回生物碱、表面活性剂、防冻剂、渗透剂和有机溶剂混合，在反应釜中搅拌透明，经过质量检验后，制成成品。
权利要求所述的木焦油和博落回生物碱复配杀菌剂用于防治植物腐烂病、溃疡病、霜霉病、灰霉病或软腐病农业病害的应用。
所述的木焦油和博落回生物碱复配杀菌剂的制备方法制备得到的杀菌剂用于防治植物腐烂病、溃疡病、霜霉病、灰霉病或软腐病农业病害的应用。
本发明的优点如下：
1.木焦油和博落回生物碱均为天然活性物质，在环境中易降解，对人畜等哺乳动物低毒，对害虫天敌及其它有益生物安全，且病菌对其不易产生抗药性。
2.所采用的剂型主要为涂抹剂、微乳剂、可溶性液剂等，不用二甲苯等芳烃类溶剂，大大降低了对环境的破坏，降低了施药过程中对施药者的毒害。
3.光稳定性提高、持效期适宜，能够降低施药频率和防治成本，并有利于进一步减轻对环境的压力。
4.本发明的植物源增效复配杀菌剂对灰霉病、腐烂病、溃疡病、软腐病等经济作物病害具有良好的防治效果，可取得较大的经济、社会和生态效益。
具体实施方式
申请人经过对木焦油和博落回生物碱研究，确定两者经过合理复配后，通过添加助剂加工成的涂抹剂环保型乳油、微乳剂或水乳剂，用于防治多种农业病害，尤其是对于葡萄霜霉病、番茄灰霉病、苹果腐烂病、猕猴桃溃疡病、核桃溃疡病、花椒干腐病、白菜软腐病等具有良好的防治效果。
本发明的植物源增效复配杀菌剂，以木焦油和博落回生物碱为活性成分，加入一定比例的溶剂和助溶剂以及其它农药助剂，进行剂型加工，可以制得环保型乳油、微乳剂、水剂和可溶性液剂。其中，木焦油用量按重量百分比计30％～80％，博落回生物碱用量按重量百分比计0.1％～10％，其余是助剂。
经发明人的试验证明，在本发明的植物源增效复配杀菌剂中，博落回生物碱和木焦油重量比例为1:9～9:1之间是合适的，制剂形态是涂抹剂、微乳剂或可溶性液剂，主要应用于防治霜霉病、灰霉病、腐烂病、溃疡病、软腐病等经济作物病害。
为了更好的理解发明的实质，下面用实施例来详细说明发明的技术内容，但发明的内容并不局限于这些实施例。
研究一：木焦油与博落回生物碱复配对苹果腐烂病菌室内联合毒力测定
1.1材料与方法
1.1.1供试菌种
苹果腐烂病菌(valsamalimiyabeetyamada)(菌种由西北农林科技大学无公害农药研究服务中心提供)
1.1.2供试药剂
a.95％博落回生物碱原药，由西北农林科技大学无公害农药服务中心提供。
b.木焦油原液，由西北农林科技大学无公害农药服务中心提供。
1.2测定方法
以苹果枝条为供试材料，采用苹果枝条法测供试药剂对苹果腐烂病的室内生物测定。具体方法如下：
枝条制备：选择健壮枝条作为实验材料，将其截成35cm为一段，先用自来水将其表面冲洗干净，晾干后再用蘸有75％酒精的脱脂棉擦拭表面消毒，等酒精挥发完后用灭过菌直径为4mm的打孔器在枝条上打孔备用(打孔深度即露出木质部即可)，每段枝条上面打两个孔，枝条两头用浸过无菌水的脱脂棉包着，使其充分保湿，做好标记放置在消过毒的容器内；
菌饼制备：将存放在冰箱里的苹果腐烂病病原菌活化后，用灭过菌的4mm打孔器打制一定数量的菌饼；
治疗作用：先接菌后涂药，将打制好的菌饼用灭过菌的牙签使其倒扣置在侵染区域，并轻轻的压一下，然后放置在恒温培养箱(t＝24℃)培养24h后涂抹不同含量的木焦油涂抹剂；
保护作用：先在打过孔的枝条上涂抹不同含量的药剂，在恒温培养箱中放置24h后接苹果腐烂病病原菌；
设计空白和药剂对照，以特效·封口腐烂愈合剂为药剂对照，每含量为一处理，每处理重复3次，保湿培养，7-8d后检查结果，根据以下公式(5)(6)计算防效。
1.2.1计算方法
根据调查数据，计算各处理浓度对供试靶标菌的菌丝生长抑制率，单位为百分率(％)，计算结果保留小数点后两位：
d＝d1-d2
式中：d—菌落增长直径；d1—菌落直径；d2—菌饼直径。
式中：i—菌丝生长抑制率；d0—空白对照菌落增长直径；dt—药剂处理菌落增长直径。
1.3联合毒力评价
1.3.1两种药剂合理配比的确定
参照张宗炳方法进行，具体方法为：先测定各单剂对供试菌种的毒力，然后以二者的ec50值为基础，测定两者不同配比组合的药效，并求出各配比组合的预测抑制率和毒性比率(实测抑制率/预期抑制率)。当毒性比率＞1时，为增效作用；毒性比率＜1为拮抗作用；毒性比率为1左右时为相加作用。毒性比率最高者，即为最佳配比。
1.3.2混剂共毒系数的测定及计算
生测方法同前。用sun氏法求出各种复配制剂的共毒系数(ctc值)，并以ctc值评判混剂的增效作用。本专利认为：当ctc>120时为增效作用，ctc<80时为拮抗作用，80<ctc<120为相加作用，ctc>180时则有显著增效作用。
毒力指数＝(已知药剂的ec50/供试药剂的ec50)×100
若混剂有n个单剂组成，则混剂的理论毒力指数(tti)为：
tti＝∑ni＝n药剂i的毒力指数×药剂在混剂中的含量。
混剂的共毒系数(ctc)＝(混剂的实际毒力指数/混剂的理论毒力指数)×100
1.4结果与分析
1.4.1木焦油和博落回生物碱对苹果腐烂病室内毒力测定结果
采用枝条法法测定了木焦油和博落回生物碱对苹果腐烂病的室内毒力，结果见表1。
表1木焦油和博落回生物碱两种药剂对苹果腐烂病室内生物测定结果
1.4.2混剂合理配比的确定
根据上述结果，进行了木焦油和博落回生物碱之间的合理配比的确定试验，具体测定结果如表2所示：
表2木焦油和博落回生物碱不同配比对苹果腐烂病菌生物测定结果
由表2可知，木焦油和博落回生物碱的组合在9:1～1:9间都具有不同程度的增效作用，木焦油:博落回生物碱＝8959170时的增效效果最好。
1.4.3木焦油和博落回生物碱混剂共毒系数(ctc)的测定结果
据以上测定结果，配置了60％木焦油·博落回生物碱可溶性液剂(sl)、40％木焦油·博落回生物碱微乳剂(me)两种复配制剂(配制方法同实施例5，实施例7)，分别同木焦油原液、20％博落回生物碱乳油(ec)和上述两种复配制剂对苹果腐烂病的室内毒力，并以sun氏法求得ctc值，具体结果见表3：
表3：木焦油和博落回生物碱及其复配制剂对苹果腐烂病菌的室内毒力测定结果
由以上测定结果可以看出，两种木焦油和博落回生物碱复配药剂均有增效作用，且ctc＞180，表现为显著增效作用。综上所述，可根据此配比将两种成分作为有效成分加工成特定的复配制剂，用于防治苹果腐烂病。
研究二：木焦油和博落回生物碱复配对番茄灰霉病菌室内联合毒力测定
番茄灰霉病菌(botrytiscinereapers.)(菌种由西北农林科技大学植保学院杀菌剂试验室提供)。实验操作过程如下所述，实验结果见表12。
2.1试验方法
以番茄果实为供试材料，采用番茄果实针刺法测定供试样品对番茄灰霉病的室内药效。具体方法如下：从田间采摘未施药的番茄果实(带蒂)，用蘸有75％酒精的脱脂棉擦拭表面消毒，晾干后放在超净工作台紫外灭菌30min，然后用灭过菌的牙签在番茄果实表面刺出直径大约4mm的侵染区域，以利于病原菌的侵染。将培养好的菌种用4mm的打孔器打制菌饼，将菌饼倒扣置侵染区域。治疗作用：将接好菌饼的番茄果实24℃恒温培养24h后喷施制备好的不同浓度的药液；保护作用：先将配制好的不同浓度的药液喷施于番茄表面，24℃恒温放置24h后接菌，以50％速克灵为对照药剂。设置空白对照，每浓度为一处理，每处理重复3次，保湿培养，5-7d观察结果。用十字交叉法测量病斑菌落直径两次，取其平均值。计算方法同实验例1。
表4木焦油和博落回生物碱两种种药剂对番茄灰霉病室内生物测定结果
表5木焦油和博落回生物碱不同混配组合对番茄灰霉病菌室内配方筛选试验结果
由表5可知，木焦油和博落回生物碱的组合在9:1～1:9间都具有不同程度的增效作用，木焦油:博落回生物碱＝5:5时的增效效果最好。
1.4.3木焦油和博落回生物碱混剂共毒系数(ctc)的测定结果
据以上测定结果，配置了50％木焦油·博落回生物碱可溶性液剂(sl)、50％木焦油·博落回生物碱微乳剂(me)两种复配制剂(配制方法同实施例5，实施例7)，分别测定了木焦油、20％博落回生物碱乳油(ec)和上述两种复配制剂对番茄灰霉病病的室内毒力，并以sun氏法求得ctc值，具体结果见表6：
表6：木焦油和博落回生物碱及其复配制剂对番茄灰霉病菌的室内毒力测定结果
由以上测定结果可以看出，两种木焦油和博落回生物碱复配药剂均有增效作用，且ctc＞180，表现为显著增效作用。综上所述，可根据此配比将两种成分作为有效成分加工成特定的复配制剂，用于防治番茄灰霉病。
实施例1：30％木焦油·博落回生物碱涂抹剂配制
在室温下，取30份木焦油·博落回生物碱(木焦油和博落回生物碱的复配比为9:1)，在上述混合物基础上依次加入10份蓖麻油和5份脂肪醇聚氧乙烯醚，以水+油+黄原胶(25:1:1.5)补足至100份，以搅拌速度100～200转/分钟搅拌10～30分钟，即可制得30％木焦油·博落回生物碱涂抹剂。
实施例2：50％木焦油·博落回生物碱涂抹剂配制
在室温下，取50份木焦油·博落回生物碱(木焦油和博落回生物碱的复配比为4:1)，在上述混合物基础上依次加入10份蓖麻油和5份脂肪醇聚氧乙烯醚，以水+油+黄原胶(16:2:0.6)补足至100份，以搅拌速度100～200转/分钟搅拌10～30分钟，即可制得50％木焦油·博落回生物碱涂抹剂。
实施例3：80％木焦油·博落回生物碱涂抹剂配制
在室温下，取80份木焦油·博落回生物碱(木焦油和博落回生物碱的复配比为7:3)，在上述混合物基础上依次加入10份蓖麻油和5份脂肪醇聚氧乙烯醚，以水+油+黄原胶(3:1:1)补足至100份，以搅拌速度100～200转/分钟搅拌10～30分钟，即可制得80％木焦油·博落回生物碱涂抹剂。
实施例4：30％木焦油·博落回生物碱微乳剂配制
在室温下，取30份木焦油·博落回生物碱(木焦油和博落回生物碱的复配比为9:1)，然后在上述混合物中依次加入3份有机硅、10份蓖麻油、5份脂肪醇聚氧乙烯醚、2份乙醇，2份乙酸，加水补齐至100份，混合均匀后以搅拌速度100～200转/分钟搅拌10～30分钟，即可制得30％木焦油·博落回生物碱微乳剂。
实施例5：50％木焦油·博落回生物碱微乳剂配制
在室温下，取50份木焦油·博落回生物碱(木焦油和博落回生物碱的复配比为4:1)，然后在上述混合物中依次加入2份有机硅、15份蓖麻油、10份脂肪醇聚氧乙烯醚、5份乙醇，5份乙酸，水补齐至100份，混合均匀后以搅拌速度100～200转/分钟搅拌10～30分钟，即可制得50％木焦油·博落回生物碱微乳剂。
实施例6：30％木焦油·博落回生物碱可溶性液剂配制
在室温下，取30份木焦油·博落回生物碱(木焦油和博落回生物碱的复配比为9:1)，在上述混合物中依次加入10份蓖麻油、5份脂肪醇聚氧乙烯醚、2份乙二醇，用有机溶剂和水补齐至100份，混合均匀后以搅拌速度100～200转/分钟搅拌10～30分钟，即可制得3％木焦油·博落回生物碱可溶性液剂。
实施例7：50％木焦油·博落回生物碱可溶性液剂配制
在室温下，取50份木焦油·博落回生物碱(木焦油和博落回生物碱的复配比为4:1)，在上述混合物中依次加入5份蓖麻油、5份脂肪醇聚氧乙烯醚、2份乙二醇，用有机溶剂和水补齐至100份，混合均匀后以搅拌速度100～200转/分钟搅拌10～30分钟，即可制得50％木焦油·博落回生物碱可溶性液剂。
实施例8：四种植物源增效复配杀菌剂番茄灰霉病菌的田间药效试验
为明确实施例4-7四种植物源增效复配杀菌剂的田间药效情况，我们于2016年在陕西省大荔县对该药剂进行了防治番茄灰霉病的田间小区药效试验。
1供试药剂
30％木焦油·博落回生物碱微乳剂，药剂代号mxw1；
50％木焦油·博落回生物碱微乳剂，药剂代号mxw2；
30％木焦油·博落回生物碱可溶性液剂，药剂代号mxy1；
50％木焦油·博落回生物碱可溶性液剂，药剂代号mxy2；
75％百菌清可湿性粉剂，由山东汉高生物工程有限公司生产。
2试验物品
注射器(10ml)3支，吊牌(300个)，铅笔5支，记录本1个，烧杯(1000ml)1个，背负式喷雾器2个，1000ml量筒3个，100ml量筒2个，以及照相机一部。
3供试作物
番茄。
4试验设计及方法
小区试验为随机排列，重复3次，小区面积视实际情况而定。供试药剂按有效成分的含量分别稀释成浓度为500,250,125μg/ml进行叶面常量喷雾(即叶面上出现一层水膜为宜)，75％百菌清可湿性粉剂1000倍液为对照药剂进行叶面常量喷雾，并设清水对照。根据空白对照发病情况分级调查。采用如下分级方法：
0级：无病；
1级：病斑面积占整片叶面积的5％以下；
3级：病斑面积占整片叶面积的6％～15％；
5级：病斑面积占整片叶面积的16～25％；
7级：病斑面积占整片叶面积的26～50％；
9级：病斑面积占整片叶面积的50％以上；
根据调查数据，计算各处理的病情指数和防治效果。
病情指数按公式(1)计算，计算结果保留小数点后两位：
式中：
x-----病情指数；
ni-----各级病叶数；
i-----相对级数值；
n-----调查总叶数。
防治效果按公式(2)计算：
式中：
p----防治效果，单位为百分率(％)；
ck----空白对照病情指数；
pt----药剂处理病情指数；
5试验结果与统计
采用常规喷雾法对木焦油和博落回生物碱4种复配剂对番茄灰霉病的田间防效进行了试验，结果见表7。
表7四种植物源杀菌剂对番茄灰霉病的田间药效试验结果
注：“防效”栏中，数列后标相同小写字母者表示在方差分析(dmrt法)中，于5％水平上无显著差异,下同。
由上表可以看出，四种植物源药剂有效成分浓度为500μg/ml时，防效均在70％以上，与药剂对照75％百菌清可湿性粉剂2000倍液的防治效果无显著差异。有效成分浓度为200μg/ml时，4种药剂的防效均在60％以上。综合来看，4种植物源药剂中以药剂mxw-2、药剂mxy-2的对番茄灰霉病防治效果较其他药剂为佳。
实施例9：四种植物源增效复配杀菌剂防治白菜软腐病田间药效试验
申请人于2016年在陕西渭南进行了实施例4-7四种植物源增效复配杀菌剂防治白菜软腐病的田间小区药效试验，试验设计同实施例8，对照药剂为20％噻森铜悬浮剂(浙江东风化工有限公司生产)，药效试验结果如表8：
表8植物源杀菌剂对白菜软腐病的田间药效试验结果
由上表可以看出，四种植物源药剂有效成分浓度为800μg/ml时，防效均在50％以上。有效成分浓度为400μg/ml时，四种药剂的防效均在60％以上。综合来看四种植物源药剂中以药剂mxw-2、药剂mxy-2与药剂对照20％噻森铜悬浮剂2000倍液的防治效果无显著差异，且对大白菜软腐病菌的防治效果较其他药剂为佳。
实施例10：四种植物源增效复配杀菌剂防治葡萄霜霉病田间药效试验
申请人于2016年在陕西户县进行了实施例4-7四种植物源增效复配杀菌剂防治葡萄霜霉病的田间小区药效试验，试验设计同实施例8，对照药剂为65％代森锌可湿性粉剂(江西中迅农化有限公司生产)，药效试验结果如表9：
表9植物源杀菌剂对葡萄霜霉病的田间药效试验结果
由上表可以看出，四种植物源药剂有效成分浓度为800μg/ml时，防效均在60％以上。有效成分浓度为400μg/ml时，四种药剂的防效均在65％以上。综合来看四种植物源药剂中以药剂mxw-2、药剂mxy-2与药剂对照65％代森锌可湿性粉剂2000倍液的防治效果无显著差异，对葡萄霜霉病病菌的防治效果较其他药剂为佳。
实施例11：三种植物源增效复配杀菌剂防治苹果腐烂病田间药效试验
申请人于2016年在陕西渭南进行了实施例1-3三种植物源增效复配杀菌剂防治白菜软腐病的田间小区药效试验，试验设计如下：
1供试药剂
30％木焦油·博落回生物碱涂抹剂，药剂代号mxt1；
50％木焦油·博落回生物碱涂抹剂，药剂代号mxt2；
80％木焦油·博落回生物碱涂抹剂，药剂代号mxt3；
10％福美双膏剂，陕西省杨凌博迪森生物科技发展股份有限公司。
2试验物品
牙刷3支，吊牌(300个)，铅笔5支，记录本1个，卷尺一个，以及照相机一部。
3供试作物
苹果。
4试验设计及方法
试验设mxt1、mxt2、mxt3、10％福美双膏剂以及空白对照共五个处理，每处理选100个大小相近的病斑，并随机划分5个小区。病斑处理方法如下：
(1)刮除病斑：首先在病斑周围用刮皮刀延出0.5cm划圈，然后用刀将圈内的发病组织和健皮彻底刮除干净(注意刀具必须先用高温消毒然后用酒精擦拭晾干)，并深达木质部。为了有利于愈合，刮病斑时最好将形状刮成椭圆形，刮除的病斑残余用塑料布收集好，并且带出果园销毁。
(2)涂抹药剂：用牙刷在试验果树的病斑上均匀的涂抹药剂(厚度大约为2mm-5mm)，膏剂涂抹的范围最好超出刮面外3-4cm；空白对照组刮除病斑后涂抹清水。
检查结果：(1)检查所有处理病斑的复发情况；(2)涂药后一个月观察一次，看是否对果树造成了药害。
根据调查数据，计算各处理的病情指数和防治效果。
病情指数按公式(2)(3)计算，计算结果保留小数点后两位：
药效试验结果如表10：
表10植物源杀菌剂对苹果腐烂病的田间药效试验结果
由上表可以看出，三种植物源药剂防效均在60％以上，药剂mxt-1与药剂对照10％福美双膏剂的防治效果无显著差异。3种植物源药剂中以药剂mxt-3的对苹果腐烂病防治效果较其他药剂为佳。
实施例12：三种植物源增效复配杀菌剂防治猕猴桃溃疡病田间药效试验
为明确实施例1-3三种植物源增效复配杀菌剂的田间药效情况，我们于2016年在陕西省周至县对该药剂进行了防治猕猴桃溃疡病的田间小区药效试验。试验设计同实施例11，对照药剂为60％百菌通杀可湿性粉剂(中国青岛威美特生物科技有限公司生产)，依据下表进行分级，根据公式(3)(4)计算防效：
猕猴桃溃疡病严重性分级标准
(注：上式ta为防治后病情指数，tb为防治前病情指数；ca为对照未防治前病情指数，cb为对照防治后病情指数)
药效试验结果如表11：
表11植物源杀菌剂对猕猴桃溃疡病的田间药效试验结果
由上表可以看出，三种植物源药剂防效均在60％以上，mxt-2与药剂对照60％百菌通500倍液的防治效果无显著差异。综合来看，3种植物源药剂中以药剂mxt-3对猕猴桃溃疡病的防治效果较其他药剂为佳。
实施例13：三种植物源增效复配杀菌剂防治核桃溃疡病田间药效试验
为明确实施例1-3三种植物源增效复配杀菌剂的田间药效情况，我们于2016年在陕西省山阳县对该药剂进行了防治核桃溃疡病的田间小区药效试验。试验设计同实施例11，对照药剂为50％多菌灵(四川国光农化股份有限公司生产)，依据下表进行分级，根据公式(3)(4)计算防效：
核桃溃疡病严重性分级标准
药效试验结果如表12：
表12植物源杀菌剂对核桃溃疡病的田间药效试验结果
由上表可以看出，三种植物源药剂防效均在60％以上，mxt-2与药剂对照50％多菌灵500倍液的防治效果无显著差异。综合来看，3种植物源药剂中以药剂mxt-3对核桃溃疡病的防治效果较其他药剂为佳。
实施例14：三种植物源增效复配杀菌剂防治花椒干腐病病田间药效试验
为明确实施例1-3三种植物源增效复配杀菌剂的田间药效情况，我们于2016年在陕西省凤县对该药剂进行了防治花椒干腐病的田间小区药效试验。试验设计同实施例11，对照药剂为50％甲基托布津可湿性粉剂(广州润捷农业科技有限公司生产)，依据下表进行分级，根据公式(3)(4)计算防效：
花椒干腐病严重性分级标准
药效试验结果如表13：
表13植物源杀菌剂对花椒干腐病的田间药效试验结果
由上表可以看出，三种植物源药剂防效均在60％以上，mxt-1与药剂对照50％多菌灵500倍液的防治效果无显著差异。综合来看，3种植物源药剂中以药剂mxt-3对花椒干腐病的防治效果较其他药剂为佳。
综合以上七表的大田试验结果，七种植物源杀菌剂在田间试验中，都表现出了较强的抑菌活性，有些药剂与化学药剂抑菌性能无显著差异。分析原因，这可能是由植物活性物质复杂的构成成分决定的，作用的本质正是由于多种成分之间相互作用的结果。另外，植物源杀菌剂具有一定的持效期，且对非靶标生物和环境友好，因此在经济作物和有机食品开发中极为适用，具有很大的应用推广价值。
虽然，上文中已经用一般性说明及具体实施方案对本发明作了详尽的描述，但在本发明基础上，可以对之作一些修改或改进，这对本领域技术人员而言是显而易见的。因此，在不偏离本发明精神的基础上所做的这些修改或改进，均属于本发明要求保护的范围。