本发明属于羊肚菌生产技术领域，更具体的是涉及一种简易羊肚菌菌种一次性提纯方法。
背景技术：
目前的提纯技术，使用试管进行提纯，原材料的进入与提纯后的产品均是从同一个口进和同一个口出，需要严格灭菌及严格无菌操作，必须在无菌环境下进行操作，需要使用无菌室及超净工作台或者生物安全柜等设备，需要一定的专业知识，需要操作者接受专业的培训，对操作者的要求较高，无菌设备的使用使得提纯成本大大提高；目前的提纯技术中，羊肚菌需要消毒或者需要精细的取种方法，使得成功率极低，一般熟练操作人员取外植体成功率也仅在20-30％；提纯和复壮需要多次转接，需要大量工作的同时多次转接也严重影响羊肚菌菌种的活性。
技术实现要素：
本发明的目的在于：为了解决目前提纯技术复杂、对设备要求较高、对操作人员要求较高并且提纯效率不高的问题，本发明提供一种简易羊肚菌菌种一次性提纯方法。
本发明为了实现上述目的具体采用以下技术方案：
本发明的简易羊肚菌菌种一次性提纯方法，其特征在于，包括如下步骤：
第一步：制备具有两个通口的培养管，所述培养管的两个通口配设有透气瓶塞，所述培养管的两个通口相互贯通；
第二步：将培养基放入培养管并进行灭菌处理；
第三步：待灭菌处理后的培养管冷却之后，从培养管的一通口接入孢子、菌丝或者含有孢子或菌丝的培养土；
第四步：将培养管进行培养，从培养管的另一通口处获得无菌菌丝或者直接将培养管的另一通口插入有菌土壤中一段时间后在另一通口获得无菌菌丝。
优选的，所述培养管呈“u”形、直线形、波浪形或v形。
优选的，所述灭菌处理方法为常压或高压灭菌法。
本发明的有益效果如下：
本发明可以一次性在非无菌状态下直接接种，仅需要一个简单的通管设备而不需要无菌室或者超净工作台或者生物安全柜等复杂设备，操作人员可以在无任何专业知识的情况下完成提纯任务，在接种后仅一次提纯复壮，无需转接，大大简化培养过程，提高了生产效率，具有提升羊肚菌整体菌种产业水平的优点。
附图说明
图1是培养管的结构示意图；
附图标记：1-透气瓶塞，2-培养管。
具体实施方式
为了本技术领域的人员更好的理解本发明，下面结合附图和以下实施例对本发明作进一步详细描述。
本发明的简易羊肚菌菌种一次性提纯方法，包括如下步骤：
第一步：制备具有两个通口的培养管2，所述培养管2的两个通口配设有透气瓶塞1，所述培养管2的两个通口相互贯通；
第二步：将培养基放入培养管2并进行灭菌处理；
第三步：待灭菌处理后的培养管2冷却之后，从培养管2的一通口接入孢子、菌丝或者含有孢子或菌丝的培养土；
第四步：将培养管2进行培养，从培养管2的另一通口处获得无菌菌丝或者直接将培养管2的另一通口插入有菌土壤中获得无菌菌丝。
优选的，所述培养管2呈“u”形、直线形、波浪形或v形。
优选的，所述灭菌处理方法为常压或高压灭菌法。
将培养物放进培养管后直接进行灭菌操作，待灭菌冷却后，从培养管的一端接入孢子，菌丝，或者含有孢子或菌丝的培养土，在5-18摄氏度低温环境下培养一端时间后，从培养管接入孢子的另一端可以直接取出提纯好的无菌菌丝。其原理是，在低温下，羊肚菌菌丝生长速度大于杂菌生长速度，利用此原理，羊肚菌菌种优先到达培养管的另一端，培养基又是无菌的，所以从培养管接入孢子的另一端取出的菌丝体则为无菌菌丝体，且因为最先到达另一端的菌丝是生长速度最快而且是最强壮的.可达到一次性提纯的目的。
以上所述，仅为本发明的较佳实施例，并不用以限制本发明，本发明的专利保护范围以权利要求书为准，凡是运用本发明的说明书及附图内容所作的等同结构变化，同理均应包含在本发明的保护范围内。