一种提高鲈鱼品质的养殖方法与流程

文档序号:15060883发布日期:2018-07-31 21:50阅读:451来源:国知局

本发明属于养殖技术领域,具体涉及一种提高鲈鱼品质的养殖方法。



背景技术:

鲈鱼具有生长快、适应性强、病害少、效益好等特点,适合于各种形式的养殖,其肉质细嫩、味道鲜美、营养丰富、滋补强身,深受广大消费者的青睐,随着水产品质量安全问题日益受到人们的关注,生产健康、优质、无公害的鲈鱼,为人们提供安全放心的水产品,将成为鲈鱼养殖的发展方向。

随着时代的变迁,人们对食物的要求越来越高,为了跟上时代的进步,促使鲈鱼的销量不降低,提高硒元素的鲈鱼的养殖方式将是一种更好的提高鲈鱼的经济价值的方法。



技术实现要素:

本发明的目的是提供一种提高鲈鱼品质的养殖方法,本发明的养殖出来的鲈鱼硒元素含量有所提高,且产量相比普通养殖方法提高658-758公斤/亩。

为了实现上述目的,本发明采用的技术方案如下:

一种提高鲈鱼品质的养殖方法,包括以下具体步骤:

(1)鱼塘建造:设置若干鱼塘,每个鱼塘设置为250-400平米,在鱼塘四周围使用石块垒砌成壁,使用石灰水对池塘进行消毒,暴晒1-3天后,在鱼塘的周缘围绕以黑淤泥为基肥种植芦苇,然后鱼塘底部铺上一层10厘米厚的坚硬泥沙,然后加入一层5-8厘米的淤泥,种植水草,水草的覆盖率为60-70%;

(2)选鱼苗:选种体质健壮、无病害的重量为150-200g的鲈鱼鱼苗放入鱼塘中,每个鱼塘放养的密度为1000-1250尾/亩,并套样泥鳅50-100尾/亩;

(3)调节水质:控制鱼塘内的水质ph为6.5-7.5,透明度为30-40cm,溶解度保持于6-8mg/l;

(4)投饲料:当鲈鱼投放的前一个月至第三个月,每天投放2次饲料,每次200-300g/只;第四个月至第十个月,每天投放3次饲料,每次400-500g/只;第十一个月后,每天投放3次饲料,每次500-600g/只;

(5)防病管理:每间隔20-30天喷洒一次防病液,防病液每次的投放量减少1%,初次投放防病液的量为5.0毫升/立方米;

所述饲料由以下重量百分数原料制备得到:玉米蛋白粉10-15%、鱼粉8-15%、蝉虫6-12%、发酵料20-30%、富硒蚕豆5-15%、矿质元素5-10%、富硒茶树菇下脚料5-10%、豆腐渣10-15%、复合维生素3-8%;

所述发酵料由以下原料制备得到:矮象草20-30重量份、看麦娘20-30重量份、甜木薯20-30重量份、木瓜提取物20-30重量份、混合发酵菌5-8重量份;

所述混合发酵菌由以下原料混合得到:纤维素酶1-3重量份、红曲霉菌2-5重量份、嗜热脂肪酸芽孢杆菌3-8重量份、粪链球菌2-7重量份;

所述防病液由以下原料制备得到:血水草提取物30-60mg/l、菜子七提取物40-70mg/l、黄皮树提取物40-60mg/l、酸橙枳壳提取物50-70mg/l、白茶提取物80-110mg/l、飞燕草提取物80-110mg/l、连翘提取物50-70mg/l、栀子提取物50-80mg/l;

(5)成鱼打捞:在放养第二年后,将鱼塘的水放至1米深后进行打捞买卖。

在本发明中进一步说明,所述复合维生素包括1-5重量份维生素e、2-3重量份维生素a、1-3重量份烟酸、1-3重量份维生素b2、2-5重量份维生素b6、1-5重量份烟酸2、3-5重量份维生素c、1-3重量份维生素d3、1-3重量份铁、1-2重量份锌、1-2重量份硒。

在本发明中进一步说明,所述纤维素酶的活菌数为3-5亿cfu/g、红曲霉菌的活菌数为5-9亿cfu/g、嗜热脂肪酸芽孢杆菌的活菌数为2-8亿cfu/g、粪链球菌的活菌数为3-8亿cfu/g。

在本发明中进一步说明,所述发酵料是由以下方法制备得到的:

第一步,将木瓜去皮取芯后加入2-5倍体积的水搅碎打浆5-10分钟装入锥形瓶中,接着加入0.1-0.2%(w/v)的碳酸氢钠溶液调节ph至5-6得到混合浆液,再加入浆液2-3%体积的混合分解酶于锥形瓶中57-62℃下进行摇床酶解20-35分钟,过100目筛后,采用离心机进行离心2-5分钟即可得到木瓜提取物;

第二步,将新鲜的甜木薯清洗干净后加入密封高压蒸汽锅,然后通入300-500℃的蒸汽进行蒸煮5-10分钟,接着将凉至常温、自然通风晾干水、加入烘干机38-40℃进行烘干至含水率15-20%即可;

第三步,将看麦娘、矮象草粉碎后与第一、二步处理后得到的材料,接着加入混合发酵菌进行建堆发酵5-8天后即可,发酵期间控制发酵堆的中心位置温度为65-68℃。

在本发明中进一步说明,所述混合分解酶是由5-9重量份纤维素分解酶、3-8重量份无花果蛋白酶、3-5重量份淀粉酶、2-6重量份果胶酶组成。

在本发明中进一步说明,所述摇床的速率为30-50r/min,所述离心机的离心转速为2000-3000r/min。

在本发明中进一步说明,所述血水草提取物是由以下方法制备得到的:将血水草洗净粉碎,加入50-65%(v/v)乙醇溶液于50-60℃下进行加热回流提取10-20分钟,取提取液减压浓缩直至无乙醇味,接着加入5-10倍体积的醋酸溶液调节ph至4.5-5.5,于55℃下,100-120赫兹高压脉冲电场脉冲处理0.5-1.2×10-6-3×10-6s,提取20-30分钟,得到粗提液,接着使用乙酸乙酯进行分层萃取,取乙酸乙酯部减压浓缩,喷雾干燥即可得到血水草提取物,提取物中主含有生物碱31.23-39.57mg/g;

所述菜子七提取物是由以下方法制备得到的:将菜子七洗净后加入适量的硅藻土进行研钵研磨成浆,接着加入50-65%(v/v)乙醇溶液于40-50℃下进行加热回流提取5-10分钟,过滤取滤液,将滤液通过减压浓缩回收乙醇直至无醇味,接着加入稀盐酸调节ph至4.0-5.0后过滤取上清液,接着加入纤维素酶于45-50℃下水浴酶解20-30分钟,接着加入氢氧化钠调节ph至中性,过滤取沉淀即可得到菜子七提取物,提取物中主含有总生物碱40.23-58.36mg/g。

在本发明中进一步说明,所述黄皮树提取物是由以下方法制备得到的:将黄皮树在压力3-5mpa下进行超微粉碎后过10-20目筛,加入10-20倍水回流提取于50-60℃下提取20-30分钟得到提取液,然后加入提取液体积1.2-1.5倍的石油醚进行萃取,取石油醚部接着用水浴蒸馏回收石油醚,接着加入80-85%(v/v)乙醇溶液进行醇提1-2小时,接着用大孔树脂进行吸附分离洗脱,洗脱依次用体积浓度为20%、40%、60%、80%和90%的乙醇-水体系洗脱液进行梯度洗脱,每个梯度的乙醇-水溶液洗脱体积为5-6bv,洗脱流速为3-4bv/h,减压浓缩得到膏状物,干燥即可得到黄皮树提取物,提取物中主含有吡喃香豆素10.36-28.37mg/g;

所述酸橙枳提取物是由以下方法制备得到的:将酸橙枳洗净后加入白油、硅藻土研磨成浆,然后加入80-85%(v/v)乙醇溶液回流提取3次,每次提取的温度为60-68℃、提取的时间为30-40分钟,合并3次提取的提取液,加入活性炭脱色后过滤去除活性炭,接着加水稀释后加入正丁醇振荡摇晃后静置5-10分钟,接着取正丁醇部分用硅胶柱色谱分离,以石油醚-乙酸乙酯为洗脱剂进行梯度洗脱,在40:1洗脱部分,用丙酮进行5次重结晶得到酸橙枳提取物主含有黄酮类物质10.26-21.34mg/g、香豆素类物质14.26-20.24mg/g、生物碱物质

14.26-19.37mg/g;所述酸橙枳:白油:硅藻土的重量比为2-3:0.05-0.07:0.1-0.2。

在本发明中进一步说明,所述白茶提取物是由以下方法制备得到的:将白茶干燥在压力3-5mpa下进行超微粉碎后过50-100目筛,使用3-5倍体积、温度为100-120℃的水恒温浸泡白茶茶粉5-10分钟得到汤茶,接着加入醋酸调节ph至2.0-3.0,使用65-75%(v/v)乙醇溶液回流提取取提取液,接着按照体积比为1:1的比例加入乙酸乙酯进行摇荡20-30分钟后静置萃取,将乙酸乙酯部分用硅胶柱色谱分离,以石油醚-乙酸乙酯为洗脱剂进行梯度洗脱,在40:1洗脱部分,用丙酮进行5次重结晶得到白茶提取物主含有茶多酚265.31-288.17mg/g;

所述飞燕草提取物是由以下方法制备得到的:将飞燕草粉碎后,加入80-85%(v/v)乙醇溶液在超声波辅助条件下,于80-90℃下进行回流提取30-40分钟,一共回流提取3次,合并3次提取液进行减压浓缩、低温蒸干得到原体积1.12倍的浸膏,即可得到飞燕草提取物主含有飞燕草色素15.36-19.47mg/g。

在本发明中进一步说明,所述连翘提取物是由以下方法制备得到的:将连翘加入5-10倍的水煎煮100-150分钟,过滤取滤液,减压蒸发浓缩至原体积1.11-1.12倍即可得到连翘活性成分的连翘提取物;

栀子提取物是由以下方法制备得到的:将栀子加入3-8倍的水煎煮70-90分钟,过滤取滤液,减压蒸发浓缩至原体积1.05-1.08倍即可得到栀子活性成分的栀子提取物。

综上所述,由于采用了上述技术方案,本发明的有益效果是:

1.本申请中的饲料营养全面均衡,能够提供鲈鱼生长所需的营养元素,而不会因为缺少营养元素而生长缓慢,添加的发酵料中利用了有害的杂草变废为宝,是一种能资源利用杂草的一种新处理方式,甜木薯在进行发酵中会酶解产生氢氰酸鲈鱼食用后会引起脑、心血管等系统的机能障碍,因此不能直接发酵后食用需要进一步的进行处理降解甜木薯的氰化物,本申请人经过研究发现,通过本申请的技术处理方法,能迅速的将有毒物质进行脱毒降解了本身的毒性,减少在发酵释放的量,且在发酵过程中由于有温度有微生物作用产生的化学反应会引起一系列的性质变化,产生一些促进吸收的营养物质和促进动物生长的因子,至今还尚未有一个详细的报道其中的原理,因此在发酵前对原料进行脱毒是非常有必要的,经过研究发现经过脱毒后使得发酵过程中有毒物质释放量减少但并未彻底,通过复配的微生物进行降解大大降低有毒物质的含量,增加了饲料的安全性,且发现有毒物质降解后饲料的有机物含量有所提高;通过本申请的配方饲料硒元素含量达到185μg/g,在进行饲养中鲈鱼吸收硒元素营养物质,经过检测相比较使用本申请的饲料饲养的鲈鱼的相比市场上的鲈鱼硒元素含量提高了5.36-7.28μg/只。

2.本申请的防病药液中8种提取物各为不同的活性部位提取部,各司其职、相辅相成,协同作用起到防治鲈鱼指环虫的目的,通过本申请的原料提取物中的物质中含有生物碱、酚类、鞣质类、酚酸类、苷类,通过本申请人试验配比,各个原料的活性成分相辅相成后达到协同增效、且能解除碱性物质的毒性的解毒作用,复配后达到92%以上的防治鲈鱼指环虫的发病和毒杀的作用,减少了指环虫的病害,从而提高了产量,产量达到5485-6125公斤/亩。

【具体实施方式】

在下面的描述中阐述了很多具体细节以便于充分理解本发明。但是本发明能够以很多不同于在此描述的其它方式来实施,本领域技术人员可以在不违背本发明内涵的情况下做类似改进,因此本发明不受下面公开的具体实施的限制。

实施例1:

一种提高鲈鱼品质的养殖方法,包括以下具体步骤:

(1)鱼塘建造:设置若干鱼塘,每个鱼塘设置为250平米,在鱼塘四周围使用石块垒砌成壁,使用石灰水对池塘进行消毒,暴晒1天后,在鱼塘的周缘围绕以黑淤泥为基肥种植芦苇,然后鱼塘底部铺上一层10厘米厚的坚硬泥沙,然后加入一层5厘米的淤泥,种植水草,水草的覆盖率为60%;

(2)选鱼苗:选种体质健壮、无病害的重量为150g的鲈鱼鱼苗放入鱼塘中,每个鱼塘放养的密度为1000尾/亩,并套样泥鳅50尾/亩;

(3)调节水质:控制鱼塘内的水质ph为6.5,透明度为30cm,溶解度保持于6mg/l;

(4)投饲料:当鲈鱼投放的前一个月至第三个月,每天投放2次饲料,每次200g/只;第四个月至第十个月,每天投放3次饲料,每次400g/只;第十一个月后,每天投放3次饲料,每次500g/只;

(5)防病管理:每间隔20天喷洒一次防病液,防病液每次的投放量减少1%,初次投放防病液的量为5.0毫升/立方米;

所述饲料由以下重量百分数原料制备得到:玉米蛋白粉13%、鱼粉10%、蝉虫9%、发酵料26%、富硒蚕豆12%、矿质元素7%、富硒茶树菇下脚料12%、豆腐渣12%、复合维生素3%(1重量份维生素e、2重量份维生素a、1重量份烟酸、1重量份维生素b2、2重量份维生素b6、1重量份烟酸2、3重量份维生素c、1重量份维生素d3、1重量份铁、1重量份锌、1重量份硒);

所述发酵料由以下原料制备得到:矮象草20重量份、看麦娘20重量份、甜木薯20重量份、木瓜提取物20重量份、混合发酵菌5重量份;

所述混合发酵菌由以下原料混合得到:活菌数为3亿cfu/g的纤维素酶2重量份、活菌数为5亿cfu/g的红曲霉菌3重量份、活菌数为2亿cfu/g的嗜热脂肪酸芽孢杆菌1重量份、活菌数为3亿cfu/g的粪链球菌1重量份;

所述防病液由以下原料制备得到:血水草提取物30mg/l、菜子七提取物40mg/l、黄皮树提取物40mg/l、酸橙枳壳提取物50mg/l、白茶提取物80mg/l、飞燕草提取物80mg/l、连翘提取物50mg/l、栀子提取物50mg/l;

(5)成鱼打捞:在放养第二年后,将鱼塘的水放至1米深后进行打捞买卖。

相比市场上的鲈鱼硒元素含量提高了6.14μg/只;产量达到5845公斤/亩,相比普通养殖方式产量增加658公斤/亩。

上述的发酵料是由以下方法制备得到的:

第一步,将木瓜去皮取芯后加入2倍体积的水搅碎打浆5分钟装入锥形瓶中,接着加入0.1%(w/v)的碳酸氢钠溶液调节ph至5得到混合浆液,再加入浆液2%体积的由5重量份纤维素分解酶、3重量份无花果蛋白酶、3重量份淀粉酶、2重量份果胶酶组成混合分解酶于锥形瓶中57℃下进行以速率为30r/min摇床酶解20分钟,过100目筛后,采用离心机进行转速为2000r/min的离心2分钟即可得到木瓜提取物;

第二步,将新鲜的甜木薯清洗干净后加入密封高压蒸汽锅,然后通入300℃的蒸汽进行蒸煮5分钟,接着将凉至常温、自然通风晾干水、加入烘干机38℃进行烘干至含水率15%即可;

第三步,将看麦娘、矮象草粉碎后与第一、二步处理后得到的材料,接着加入混合发酵菌进行建堆发酵5天后即可,发酵期间控制发酵堆的中心位置温度为65℃。

所述防病液中,血水草提取物是由以下方法制备得到的:将血水草洗净粉碎,加入50%(v/v)乙醇溶液于50℃下进行加热回流提取10分钟,取提取液减压浓缩直至无乙醇味,接着加入5倍体积的醋酸溶液调节ph至4.5,于55℃下,100赫兹高压脉冲电场脉冲处理0.5×10-6s,提取20分钟,得到粗提液,接着使用乙酸乙酯进行分层萃取,取乙酸乙酯部减压浓缩,喷雾干燥即可得到血水草提取物,提取物中主含有生物碱31.23mg/g;

所述菜子七提取物是由以下方法制备得到的:将菜子七洗净后加入适量的硅藻土进行研钵研磨成浆,接着加入50%(v/v)乙醇溶液于40℃下进行加热回流提取5分钟,过滤取滤液,将滤液通过减压浓缩回收乙醇直至无醇味,接着加入稀盐酸调节ph至4.0后过滤取上清液,接着加入纤维素酶于45℃下水浴酶解20分钟,接着加入氢氧化钠调节ph至中性,过滤取沉淀即可得到菜子七提取物,提取物中主含有总生物碱40.23mg/g。

所述黄皮树提取物是由以下方法制备得到的:将黄皮树在压力3mpa下进行超微粉碎后过10目筛,加入10倍水回流提取于50℃下提取20分钟得到提取液,然后加入提取液体积1.2倍的石油醚进行萃取,取石油醚部接着用水浴蒸馏回收石油醚,接着加入80%(v/v)乙醇溶液进行醇提1小时,接着用大孔树脂进行吸附分离洗脱,洗脱依次用体积浓度为20%、40%、60%、80%和90%的乙醇-水体系洗脱液进行梯度洗脱,每个梯度的乙醇-水溶液洗脱体积为5bv,洗脱流速为3bv/h,减压浓缩得到膏状物,干燥即可得到黄皮树提取物,提取物中主含有吡喃香豆素10.36mg/g;

所述酸橙枳提取物是由以下方法制备得到的:将酸橙枳洗净后加入白油、硅藻土研磨成浆,然后加入80%(v/v)乙醇溶液回流提取3次,每次提取的温度为60℃、提取的时间为30分钟,合并3次提取的提取液,加入活性炭脱色后过滤去除活性炭,接着加水稀释后加入正丁醇振荡摇晃后静置5分钟,接着取正丁醇部分用硅胶柱色谱分离,以石油醚-乙酸乙酯为洗脱剂进行梯度洗脱,在40:1洗脱部分,用丙酮进行5次重结晶得到酸橙枳提取物主含有黄酮类物质10.26mg/g、香豆素类物质14.26mg/g、生物碱物质14.26mg/g;所述酸橙枳:白油:硅藻土的重量比为2:0.05:0.1。

所述白茶提取物是由以下方法制备得到的:将白茶干燥在压力3mpa下进行超微粉碎后过50目筛,使用3倍体积、温度为100℃的水恒温浸泡白茶茶粉5分钟得到汤茶,接着加入醋酸调节ph至2.0,使用65%(v/v)乙醇溶液回流提取取提取液,接着按照体积比为1:1的比例加入乙酸乙酯进行摇荡20分钟后静置萃取,将乙酸乙酯部分用硅胶柱色谱分离,以石油醚-乙酸乙酯为洗脱剂进行梯度洗脱,在40:1洗脱部分,用丙酮进行5次重结晶得到白茶提取物主含有茶多酚265.31mg/g;

所述飞燕草提取物是由以下方法制备得到的:将飞燕草粉碎后,加入80%(v/v)乙醇溶液在超声波辅助条件下,于80℃下进行回流提取30分钟,一共回流提取3次,合并3次提取液进行减压浓缩、低温蒸干得到原体积1.12倍的浸膏,即可得到飞燕草提取物主含有飞燕草色素15.36mg/g。

所述连翘提取物是由以下方法制备得到的:将连翘加入5倍的水煎煮100分钟,过滤取滤液,减压蒸发浓缩至原体积1.11倍即可得到连翘活性成分的连翘提取物;

栀子提取物是由以下方法制备得到的:将栀子加入3倍的水煎煮70分钟,过滤取滤液,减压蒸发浓缩至原体积1.05倍即可得到栀子活性成分的栀子提取物。

实施例2:

一种提高鲈鱼品质的养殖方法,包括以下具体步骤:

(1)鱼塘建造:设置若干鱼塘,每个鱼塘设置为400平米,在鱼塘四周围使用石块垒砌成壁,使用石灰水对池塘进行消毒,暴晒3天后,在鱼塘的周缘围绕以黑淤泥为基肥种植芦苇,然后鱼塘底部铺上一层10厘米厚的坚硬泥沙,然后加入一层8厘米的淤泥,种植水草,水草的覆盖率为70%;

(2)选鱼苗:选种体质健壮、无病害的重量为200g的鲈鱼鱼苗放入鱼塘中,每个鱼塘放养的密度为1250尾/亩,并套样泥鳅100尾/亩;

(3)调节水质:控制鱼塘内的水质ph为7.5,透明度为30-40cm,溶解度保持于8mg/l;

(4)投饲料:当鲈鱼投放的前一个月至第三个月,每天投放2次饲料,每次300g/只;第四个月至第十个月,每天投放3次饲料,每次500g/只;第十一个月后,每天投放3次饲料,每次600g/只;

(5)防病管理:每间隔20-30天喷洒一次防病液,防病液每次的投放量减少1%,初次投放防病液的量为5.0毫升/立方米;

所述饲料由以下重量百分数原料制备得到:玉米蛋白粉15%、鱼粉8%、蝉虫6%、发酵料30%、富硒蚕豆5%、矿质元素10%、富硒茶树菇下脚料5%、豆腐渣15%、复合维生素6%(5重量份维生素e、3重量份维生素a、3重量份烟酸、3重量份维生素b2、5重量份维生素b6、5重量份烟酸2、5重量份维生素c、3重量份维生素d3、3重量份铁、2重量份锌、2重量份硒);

所述发酵料由以下原料制备得到:矮象草30重量份、看麦娘30重量份、甜木薯30重量份、木瓜提取物30重量份、混合发酵菌8重量份;

所述混合发酵菌由以下原料混合得到:活菌数为5亿cfu/g的纤维素酶5重量份、活菌数为9亿cfu/g的红曲霉菌8重量份、活菌数为8亿cfu/g的嗜热脂肪酸芽孢杆菌3重量份、活菌数为8亿cfu/g的粪链球菌5重量份;

所述防病液由以下原料制备得到:血水草提取物60mg/l、菜子七提取物70mg/l、黄皮树提取物60mg/l、酸橙枳壳提取物70mg/l、白茶提取物110mg/l、飞燕草提取物110mg/l、连翘提取物70mg/l、栀子提取物80mg/l;

(5)成鱼打捞:在放养第二年后,将鱼塘的水放至1米深后进行打捞买卖。

相比市场上的鲈鱼硒元素含量提高了5.36μg/只;产量达到5485公斤/亩,相比普通养殖方式产量增加758公斤/亩。

上述的发酵料是由以下方法制备得到的:

第一步,将木瓜去皮取芯后加入4倍体积的水搅碎打浆8分钟装入锥形瓶中,接着加入0.15%(w/v)的碳酸氢钠溶液调节ph至5.5得到混合浆液,再加入浆液2.5%体积的由9重量份纤维素分解酶、8重量份无花果蛋白酶、5重量份淀粉酶、6重量份果胶酶组成混合分解酶于锥形瓶中60℃下进行以速率为80r/min摇床酶解25分钟,过100目筛后,采用离心机进行转速为3000r/min的离心5分钟即可得到木瓜提取物;

第二步,将新鲜的甜木薯清洗干净后加入密封高压蒸汽锅,然后通入400℃的蒸汽进行蒸煮6分钟,接着将凉至常温、自然通风晾干水、加入烘干机39℃进行烘干至含水率18%即可;

第三步,将看麦娘、矮象草粉碎后与第一、二步处理后得到的材料,接着加入混合发酵菌进行建堆发酵7天后即可,发酵期间控制发酵堆的中心位置温度为75℃。

所述防病液中,血水草提取物是由以下方法制备得到的:将血水草洗净粉碎,加入55%(v/v)乙醇溶液于55℃下进行加热回流提取15分钟,取提取液减压浓缩直至无乙醇味,接着加入7倍体积的醋酸溶液调节ph至5,于55℃下,110赫兹高压脉冲电场脉冲处理1.0×10-6s,提取25分钟,得到粗提液,接着使用乙酸乙酯进行分层萃取,取乙酸乙酯部减压浓缩,喷雾干燥即可得到血水草提取物,提取物中主含有生物碱39.57mg/g;

所述菜子七提取物是由以下方法制备得到的:将菜子七洗净后加入适量的硅藻土进行研钵研磨成浆,接着加入60%(v/v)乙醇溶液于45℃下进行加热回流提取7分钟,过滤取滤液,将滤液通过减压浓缩回收乙醇直至无醇味,接着加入稀盐酸调节ph至4.5后过滤取上清液,接着加入纤维素酶于48℃下水浴酶解25分钟,接着加入氢氧化钠调节ph至中性,过滤取沉淀即可得到菜子七提取物,提取物中主含有总生物碱58.36mg/g。

所述黄皮树提取物是由以下方法制备得到的:将黄皮树在压力4mpa下进行超微粉碎后过15目筛,加入15倍水回流提取于55℃下提取25分钟得到提取液,然后加入提取液体积1.3倍的石油醚进行萃取,取石油醚部接着用水浴蒸馏回收石油醚,接着加入82%(v/v)乙醇溶液进行醇提1.5小时,接着用大孔树脂进行吸附分离洗脱,洗脱依次用体积浓度为20%、40%、60%、80%和90%的乙醇-水体系洗脱液进行梯度洗脱,每个梯度的乙醇-水溶液洗脱体积为5.5bv,洗脱流速为3.5bv/h,减压浓缩得到膏状物,干燥即可得到黄皮树提取物,提取物中主含有吡喃香豆素28.37mg/g;

所述酸橙枳提取物是由以下方法制备得到的:将酸橙枳洗净后加入白油、硅藻土研磨成浆,然后加入82%(v/v)乙醇溶液回流提取3次,每次提取的温度为65℃、提取的时间为35分钟,合并3次提取的提取液,加入活性炭脱色后过滤去除活性炭,接着加水稀释后加入正丁醇振荡摇晃后静置7分钟,接着取正丁醇部分用硅胶柱色谱分离,以石油醚-乙酸乙酯为洗脱剂进行梯度洗脱,在40:1洗脱部分,用丙酮进行5次重结晶得到酸橙枳提取物主含有黄酮类物质21.34mg/g、香豆素类物质20.24mg/g、生物碱物质19.37mg/g;所述酸橙枳:白油:硅藻土的重量比为2:0.06:0.2。

所述白茶提取物是由以下方法制备得到的:将白茶干燥在压力4mpa下进行超微粉碎后过80目筛,使用4倍体积、温度为110℃的水恒温浸泡白茶茶粉8分钟得到汤茶,接着加入醋酸调节ph至2.5,使用70%(v/v)乙醇溶液回流提取取提取液,接着按照体积比为1:1的比例加入乙酸乙酯进行摇荡25分钟后静置萃取,将乙酸乙酯部分用硅胶柱色谱分离,以石油醚-乙酸乙酯为洗脱剂进行梯度洗脱,在40:1洗脱部分,用丙酮进行5次重结晶得到白茶提取物主含有茶多酚288.17mg/g;

所述飞燕草提取物是由以下方法制备得到的:将飞燕草粉碎后,加入82%(v/v)乙醇溶液在超声波辅助条件下,于85℃下进行回流提取35分钟,一共回流提取3次,合并3次提取液进行减压浓缩、低温蒸干得到原体积1.12倍的浸膏,即可得到飞燕草提取物主含有飞燕草色素19.47mg/g。

所述连翘提取物是由以下方法制备得到的:将连翘加入10倍的水煎煮150分钟,过滤取滤液,减压蒸发浓缩至原体积1.12倍即可得到连翘活性成分的连翘提取物;

栀子提取物是由以下方法制备得到的:将栀子加入8倍的水煎煮90分钟,过滤取滤液,减压蒸发浓缩至原体积1.08倍即可得到栀子活性成分的栀子提取物。

实施例3:

一种提高鲈鱼品质的养殖方法,包括以下具体步骤:

(1)鱼塘建造:设置若干鱼塘,每个鱼塘设置为300平米,在鱼塘四周围使用石块垒砌成壁,使用石灰水对池塘进行消毒,暴晒2天后,在鱼塘的周缘围绕以黑淤泥为基肥种植芦苇,然后鱼塘底部铺上一层10厘米厚的坚硬泥沙,然后加入一层6厘米的淤泥,种植水草,水草的覆盖率为65%;

(2)选鱼苗:选种体质健壮、无病害的重量为170g的鲈鱼鱼苗放入鱼塘中,每个鱼塘放养的密度为1100尾/亩,并套样泥鳅80尾/亩;

(3)调节水质:控制鱼塘内的水质ph为7,透明度为35cm,溶解度保持于7mg/l;

(4)投饲料:当鲈鱼投放的前一个月至第三个月,每天投放2次饲料,每次250g/只;第四个月至第十个月,每天投放3次饲料,每次450g/只;第十一个月后,每天投放3次饲料,每次550g/只;

(5)防病管理:每间隔25天喷洒一次防病液,防病液每次的投放量减少1%,初次投放防病液的量为5.0毫升/立方米;

所述饲料由以下重量百分数原料制备得到:玉米蛋白粉10%、鱼粉15%、蝉虫12%、发酵料20%、富硒蚕豆5%、矿质元素10%、富硒茶树菇下脚料10%、豆腐渣10%、复合维生素3%(3重量份维生素e、2重量份维生素a、2重量份烟酸、2重量份维生素b2、3重量份维生素b6、3重量份烟酸2、4重量份维生素c、2重量份维生素d3、2重量份铁、1.5重量份锌、1.5重量份硒);

所述发酵料由以下原料制备得到:矮象草24重量份、看麦娘25重量份、甜木薯26重量份、木瓜提取物27重量份、混合发酵菌7重量份;

所述混合发酵菌由以下原料混合得到:活菌数为4亿cfu/g的纤维素酶3重量份、活菌数为7亿cfu/g的红曲霉菌6重量份、活菌数为5亿cfu/g的嗜热脂肪酸芽孢杆菌2重量份、活菌数为6亿cfu/g的粪链球菌4重量份;

所述防病液由以下原料制备得到:血水草提取物40mg/l、菜子七提取物60mg/l、黄皮树提取物50mg/l、酸橙枳壳提取物60mg/l、白茶提取物90mg/l、飞燕草提取物100mg/l、连翘提取物60mg/l、栀子提取物60mg/l;

(5)成鱼打捞:在放养第二年后,将鱼塘的水放至1米深后进行打捞买卖。

相比市场上的鲈鱼硒元素含量提高了7.28μg/只;产量达到6125公斤/亩,相比普通养殖方式产量增加751公斤/亩。

上述的发酵料是由以下方法制备得到的:

第一步,将木瓜去皮取芯后加入5倍体积的水搅碎打浆10分钟装入锥形瓶中,接着加入0.2%(w/v)的碳酸氢钠溶液调节ph至6得到混合浆液,再加入浆液3%体积的由6重量份纤维素分解酶、5重量份无花果蛋白酶、4重量份淀粉酶、4重量份果胶酶组成混合分解酶于锥形瓶中62℃下进行以速率为40r/min摇床酶解35分钟,过100目筛后,采用离心机进行转速为

2550r/min的离心5分钟即可得到木瓜提取物;

第二步,将新鲜的甜木薯清洗干净后加入密封高压蒸汽锅,然后通入500℃的蒸汽进行蒸煮10分钟,接着将凉至常温、自然通风晾干水、加入烘干机40℃进行烘干至含水率20%即可;

第三步,将看麦娘、矮象草粉碎后与第一、二步处理后得到的材料,接着加入混合发酵菌进行建堆发酵8天后即可,发酵期间控制发酵堆的中心位置温度为68℃。

所述防病液中,血水草提取物是由以下方法制备得到的:将血水草洗净粉碎,加入65%(v/v)乙醇溶液于60℃下进行加热回流提取20分钟,取提取液减压浓缩直至无乙醇味,接着加入10倍体积的醋酸溶液调节ph至5.5,于55℃下,120赫兹高压脉冲电场脉冲处理0.9×10-6s,提取30分钟,得到粗提液,接着使用乙酸乙酯进行分层萃取,取乙酸乙酯部减压浓缩,喷雾干燥即可得到血水草提取物,提取物中主含有生物碱33.25mg/g;

所述菜子七提取物是由以下方法制备得到的:将菜子七洗净后加入适量的硅藻土进行研钵研磨成浆,接着加入65%(v/v)乙醇溶液于50℃下进行加热回流提取10分钟,过滤取滤液,将滤液通过减压浓缩回收乙醇直至无醇味,接着加入稀盐酸调节ph至5.0后过滤取上清液,接着加入纤维素酶于50℃下水浴酶解30分钟,接着加入氢氧化钠调节ph至中性,过滤取沉淀即可得到菜子七提取物,提取物中主含有总生物碱47.36mg/g。

所述黄皮树提取物是由以下方法制备得到的:将黄皮树在压力5mpa下进行超微粉碎后过20目筛,加入20倍水回流提取于60℃下提取30分钟得到提取液,然后加入提取液体积1.5倍的石油醚进行萃取,取石油醚部接着用水浴蒸馏回收石油醚,接着加入85%(v/v)乙醇溶液进行醇提2小时,接着用大孔树脂进行吸附分离洗脱,洗脱依次用体积浓度为20%、40%、60%、80%和90%的乙醇-水体系洗脱液进行梯度洗脱,每个梯度的乙醇-水溶液洗脱体积为6bv,洗脱流速为4bv/h,减压浓缩得到膏状物,干燥即可得到黄皮树提取物,提取物中主含有吡喃香豆素18.26mg/g;

所述酸橙枳提取物是由以下方法制备得到的:将酸橙枳洗净后加入白油、硅藻土研磨成浆,然后加入85%(v/v)乙醇溶液回流提取3次,每次提取的温度为℃、提取的时间为40分钟,合并3次提取的提取液,加入活性炭脱色后过滤去除活性炭,接着加水稀释后加入正丁醇振荡摇晃后静置10分钟,接着取正丁醇部分用硅胶柱色谱分离,以石油醚-乙酸乙酯为洗脱剂进行梯度洗脱,在40:1洗脱部分,用丙酮进行5次重结晶得到酸橙枳提取物主含有黄酮类物质18.27mg/g、香豆素类物质17.24mg/g、生物碱物质16.58mg/g;所述酸橙枳:白油:硅藻土的重量比为3:0.07:0.2。

所述白茶提取物是由以下方法制备得到的:将白茶干燥在压力5mpa下进行超微粉碎后过100目筛,使用5倍体积、温度为120℃的水恒温浸泡白茶茶粉10分钟得到汤茶,接着加入醋酸调节ph至3.0,使用75%(v/v)乙醇溶液回流提取取提取液,接着按照体积比为1:1的比例加入乙酸乙酯进行摇荡30分钟后静置萃取,将乙酸乙酯部分用硅胶柱色谱分离,以石油醚-乙酸乙酯为洗脱剂进行梯度洗脱,在40:1洗脱部分,用丙酮进行5次重结晶得到白茶提取物主含有茶多酚271.21mg/g;

所述飞燕草提取物是由以下方法制备得到的:将飞燕草粉碎后,加入85%(v/v)乙醇溶液在超声波辅助条件下,于90℃下进行回流提取40分钟,一共回流提取3次,合并3次提取液进行减压浓缩、低温蒸干得到原体积1.12倍的浸膏,即可得到飞燕草提取物主含有飞燕草色素17.21mg/g。

所述连翘提取物是由以下方法制备得到的:将连翘加入7倍的水煎煮130分钟,过滤取滤液,减压蒸发浓缩至原体积1.11倍即可得到连翘活性成分的连翘提取物;

栀子提取物是由以下方法制备得到的:将栀子加入6倍的水煎煮80分钟,过滤取滤液,减压蒸发浓缩至原体积1.06倍即可得到栀子活性成分的栀子提取物。

试验一:

对比例1:发酵料的制备方法:第一步,与实施例1相同;第二步,将看麦娘、甜木薯、矮象草粉碎后与第一步处理后得到的材料,接着加入混合发酵菌进行建堆发酵5天后即可,发酵期间控制发酵堆的中心位置温度为68℃。

对比例2:发酵料的制备方法:第一步,将新鲜的木瓜全株清洗干净进行水提、浓缩得到木瓜提取物;第二步,与实施例1相同;第三步,将看麦娘、矮象草粉碎后与第一、二步处理后得到的材料接着加入混合发酵菌进行建堆发酵5天后即可,发酵期间控制发酵堆的中心位置温度为68℃。

对比例3:发酵料的制备方法:第一步,与实施例1相同;第二步,与实施例1相同;第三步,将看麦娘、矮象草粉碎后与第一、二步处理后得到的材料进行建堆发酵5天后即可,发酵期间控制发酵堆的中心位置温度为68℃。

对比例4:发酵料的制备方法基本与实施例1相同,不同点是混合发酵菌由以下原料混合得到:纤维素酶、红曲霉菌,活菌数和重量份数相同;

对比例5:发酵料的制备方法基本与实施例1相同,不同点是混合发酵菌由以下原料混合得到:纤维素酶、嗜热脂肪酸芽孢杆菌,活菌数和重量份数相同;

对比例6:发酵料的制备方法基本与实施例1相同,不同点是混合发酵菌由以下原料混合得到:纤维素酶、粪链球菌,活菌数和重量份数相同;

对比例7:发酵料的制备方法基本与实施例1相同,不同点是混合发酵菌由以下原料混合得到:红曲霉菌、嗜热脂肪酸芽孢杆菌、粪链球菌,活菌数和重量份数相同;

对比例8:发酵料的制备方法基本与实施例1相同,不同点是混合发酵菌由以下原料混合得到:纤维素酶、红曲霉菌、粪链球菌,活菌数和重量份数相同;

对比例9:发酵料的制备方法基本与实施例1相同,不同点是混合发酵菌由以下原料混合得到:纤维素酶、嗜热脂肪酸芽孢杆菌、粪链球菌,活菌数和重量份数相同;

对比例10:发酵料的制备方法基本与实施例1相同,不同点是混合发酵菌由以下原料混合得到:纤维素酶、红曲霉菌、嗜热脂肪酸芽孢杆菌,活菌数和重量份数相同;

将实施例1-3、对照组1-10方式处理后的发酵料进行cn-残余浓度检测,根据发酵处理前后发酵料的含氰量计算降氰率,其中,降氰率%=(反应前发酵料中含氰浓度-反应后发酵料中含氰浓度)/反应前发酵料中含氰浓度,且每次检测均做三次平行检测,取平均值。

表1

由上表可知,对比例1与实施例1相比降氰率降低了28%,说明对甜木薯进行特殊的处理后能降低在发酵后期产生氰化物的含量,即为甜木薯本身的毒素将在发酵前能得到清除,这与试验设想前的预期相符合。对比例2与实施例1相比较降氰率降低了26.5%,证明了经过特殊提取的木瓜提取物中含有动力素(糖、蛋白质)的含量更高,在发酵期提供发酵菌一个良好的生长环境,能充分发挥菌群的分解能力;对比例3与实施例1相比较降氰率降低了了47.2%多,证明混合发酵菌之间具有很好的分解能力,接着为了验证这观点,做了对比例4-10的对比试验,对比例4-6的单一发酵菌液相比实施例1-3降氰能力降低了14%左右;、对比例8-10的量量混合菌液与实施例1-3相比较降氰能力降低了11%左右;由此可见采用本申请的组合发酵菌具有相辅相成相互协同降氰的能力,促使降氰能力大大提高。

试验二:

采用本发明实施例1制备的防病液对鲈鱼的急性毒理学试验观察

试验在东兰县安篓东二养殖场临床实验室中进行。试验鲈鱼购自河池市金城江老姐批发市场,规格10g左右,购回后暂养于水族箱中。试验水温25.0±1℃左右。水体充气,投喂少量饵料。试验维持5-7天。试验采用浸泡法,共设4个浓度梯度药物组(0.5ml/m3、1.0ml/m3、2.0ml/m3、5.0ml/m3)及1个不加药物的空白对照组,每组设3个重复,每个水族箱(0.75m×0.55m×0.6m=0.25m3)放鲈鱼20尾,具体见表1。试验开始后,连续观察,记录鲈鱼异常及死亡情况。

1对鲈鱼的急性毒理学试验分组

表2不同药物浓度下鲈鱼死亡情况

结果见表2。对照组及0.05ml/m3药物浓度组,没有鲈鱼发现死亡,且活动正常0.10ml/m3组,96h后平均死亡率达到6.67%,0.20ml/m3组,累计平均死亡率20.00%,0.50ml/m3组,累计平均死亡率53.33%。

用bliss法计算本发明实施例1对鲈鱼半数致死剂量为ld50=0.34745ml/m3,其回归方程为y(probit)=6.438+3.1321log(d),具体见表3。按特伦堡公式(安全浓度=48hlc50*0.3/(24hlc/48hlc50))计算本申请的药液杀虫剂对鲈鱼的安全浓度为0.0955ml/m3,说明本发明实施例1对鲈鱼的安全性较高。

表3bliss法计算本发明实施例1对鲈鱼半数致死量

试验三:

1.1试验鱼

严重感染指环虫的鲈鱼(重量300±20g)购自河池市金城江老街。并按照1:5左右的比例与未感染寄生虫的鲈鱼混养感染,感染15-20天后,随机选取110尾鱼,取全鳃镜检观察统计鳃上指环虫数量,试验鱼指环虫感染率为100%,每尾鱼平均感染指环虫约50个,随机分配为11组,每组10尾鱼一个水箱,一个水箱容积为10平方米,装8平米的水。

实验组1-3分别使用实施例1-3制备得到的防病液投入,投放的量分别为0.5、2.0、5.0毫升/立方米;

对照组1-8分别使用仅仅单一含有血水草提取物、菜子七提取物、黄皮树提取物、酸橙枳提取物、白茶提取物、飞燕草提取物、连翘提取物、栀子提取物的防病物质投放入水箱,投放的量分别为2.0毫升/立方米。

于48h时取鲈鱼全鳃制片、镜检,统计每尾鲈鱼在鳃部指环虫存活数量,计算平均杀虫率,并同时进行对照试验。

杀虫率(%)=(对照组的指环虫平均存活数量-试验组的指环虫平均存活数量)/对照组的指环虫平均存活数量×100%

鱼平均死亡率(%)=(投放的鱼数量-镜检时的鱼存活数量)/投放的鱼数量×100%样品最高有效浓度,即最高杀虫率所对应的溶剂提取物浓度。

表4各个组药剂对指环虫的防治效果表

试验结果表明:采用本申请的防病药液对鲈鱼的指环虫的疫病具有优异的防治效果,相比较对照组1-8单一使用的提取物相比较不仅具有更高的防治指环虫的效果,且杀虫效果更佳持久,证明了本申请的配方具有相互辅助协同的作用。

以上所述实施例仅表达了本发明的几种实施方式,其描述较为具体和详细,但并不能因此而理解为对本发明范围的限制。应当指出的是,对于本领域的普通技术人员来说,在不脱离本发明构思的前提下,还可以做出若干变形和改进,这些都属于本发明的保护范围。因此,本发明的保护范围应以所附权利要求为准。

当前第1页1 2 
网友询问留言 已有0条留言
  • 还没有人留言评论。精彩留言会获得点赞!
1