本发明涉及组培
技术领域：
，具体涉及一种龟背竹种子组织培养基。
背景技术：
：龟背竹，(学名：monsteradeliciosa)。又名“蓬莱蕉”、“电线草”，常绿藤本植物。茎粗壮；幼叶心形无孔，长大后成广卵形、羽状深裂；叶脉间有椭圆形的穿孔，叶具长柄，深绿色。佛焰花序，佛焰苞舟形，11月开花，淡黄色。茎干上着生有褐色的气根，形如电线，故名“电线草”；叶卵圆形，在羽状的叶脉间呈龟甲形散布许多长圆形的孔洞和深裂，其形状似龟甲图案，茎有节似竹干，故名“龟背竹”。肉穗花序，整个花形好像“台灯”，有灯罩和灯泡。原产墨西哥热带雨林中，性喜温暖、湿润环境，忌阳光直射，不耐寒，我国北方均作室内盆栽。近年来，随着空气污染问题的加剧，室内空气净化成为人们关注的热点。在城市的居家室内和办公室内几乎都有盆栽龟背竹，这不仅为净化室内空气起到重要作用，还为室内增添了视觉美观，对缓解眼疲劳有良好的作用。自然状态下，龟背竹主要依靠种子进行繁育，但繁殖系数低，另外，靠采取种子进行人工育苗显然难度较大，所以提供一种能够使龟背竹种子为种源，缩短育苗时间，保证出芽后芽的存活率、增加芽肉厚度、保证出芽后芽色油绿的培养方法迫在眉睫。技术实现要素：有鉴于此，本发明的目的在于提供一种龟背竹种子组织培养基，本发明的培养基在基础培养液中对土豆渣的利用减少了传统工艺中蔗糖等培养基原料用量，节省了培养基制备成本，另外，添加本发明的母液配方，在能够快速促进壮苗生根，使得生根率达到90％以上，且壮苗生根后的植株平均根数达到20-25条。为了解决上述技术问题，本发明采用了如下的技术方案：一种龟背竹种子组织培养基，所述培养基由基础培养液与母液混合而成，它们的体积比为4-6:0.05-0.09；所述每升母液主要含有：10-15mg的恶霉灵、10-20mg的复硝酚钠、20-50mg的α-萘乙酸钠、0.3-0.5mg的烟酸、6-12mg的微囊藻素、0.2-0.4mg的碘化钾和20-50mg的胺鲜酯；所述每升基础培养液主要含有：25-38mg的土豆渣水解液、5-10mg的葡萄糖、10-20mg的琼脂、5-10mg的椰子汁、4-8mg的西红柿汁、5-8mg的水解乳蛋白、1-4mg的玉米胚乳、50-80mg的肌醇和1-3mg的赤霉素。本发明中，进一步地，所述培养基由基础培养液与母液混合而成，它们的体积比为5:0.07；所述每升母液主要含有：12mg的恶霉灵、15mg的复硝酚钠、35mg的α-萘乙酸钠、0.4mg的烟酸、9mg的微囊藻素、0.3mg的碘化钾和35mg的胺鲜酯；所述每升基础培养液主要含有：30mg的土豆渣水解液、7mg的葡萄糖、15mg的琼脂、7mg的椰子汁、6mg的西红柿汁、7mg的水解乳蛋白、3mg的玉米胚乳、65mg的肌醇和2mg的赤霉素。本发明中，进一步地，所述土豆渣水解液主要经过如下处理得到：a.将土豆渣进行干燥、粉碎，然后加入离子液体至土豆渣的质量浓度为5-9％，然后在90-120℃、80-120r/min的条件下，搅拌处理60-120min，得到土豆渣溶液，再加入土豆渣溶液4-8倍体积的水，在150-200r/min搅拌处理30-60min后，在3000-5000r/min下，离心10-20min，收集沉淀，将沉淀在40-60℃真空干燥3-5h，得到再生土豆渣；b.将步骤a所得再生土豆渣加适量水充分混匀，再加入纤维素酶进行酶解后即可得到土豆渣水解液。本发明中，进一步地，所述的酶解的条件为：ph值为4.5-6.5，温度为55-65℃；酶解时间为10-12h。本发明中，进一步地，所述培养基的配置是将基础培养液和母液按照各自的组份配置后，按照体积比为4-6:0.05-0.09混合，再煮沸调节ph，浓缩后进行高压灭菌后即可。本发明中，进一步地，所述培养基的ph＝5.5-6.5。综上所述，由于采用了上述技术方案，本发明的有益效果是：1.本发明的一种广豆根种子组织培养基在传统的培养基的配方上改进，添加一些能够在龟背竹在生根壮苗期间所需的因子，经研究发现采用本发明的基础培养液后添加本发明的母液配方，能够提供生根的良好条件，促进苗健康茁壮，其中胺鲜酯能够促进根系的发育，调节体内养分的平衡；微囊藻素中富含有活性氧，植物中低浓度的活性氧作为第二信使能在植物细胞信号转导途径中介导多种应答反应；芸苔素内酯为生长调节剂，能调节生长、促进生根；在组培过程中往往会出现黄化现象，一般两个原因，细胞活性不足死亡和病菌感染死亡，恶霉灵的复配添加能够有效的抑制病原真菌菌丝体的正常生长或直接杀死病菌，又能促进植物生长；并具有促进作物根系生长发育、生根壮苗，且其渗透率极高，两个小时就能移动到种子细胞内部，保证了龟背竹种子在第一时间上拥有健康的培养环境，提高龟背竹种子的成活率；本发明的母液配方能够快速促进壮苗生根，生根率达到90％以上，且壮苗生根后的植株平均根数达到20-25条。2.本发明的广豆根种子组织培养基中，基础培养液添加有土豆渣，采用离子液体对其进行再生处理，然后用纤维素酶进行水解，菠萝渣中中含有大量的纤维素、果胶等可利用成分,同时含有部分淀粉和少量蛋白质，溶解后的纤维素溶液加水之后可使纤维素沉淀析出，实现纤维素的再生，再生过程可使纤维素分子中部分氢键断裂，聚合度、结晶度降低，使纤维素的表面形态发生改变，表面积增大，进而与酶的接触面积增大，对菠萝渣的利用减少了传统工艺中蔗糖等培养基原料用量，节省了培养基制备成本，同时能够解决土豆汁等产品生产过程中产生的下脚料(土豆渣)引起的环境污染问题。3.本发明的培养基制备工艺简单，易操作，具有极大的推广意义。【具体实施方式】下面的实施例可以帮助本领域的技术人员更全面地理解本发明，但不可以以任何方式限制本发明。实施例1本实施例所提供的一种龟背竹种子组织培养基由基础培养液与母液混合而成，它们的体积比为4:0.05；其中，每升母液主要含有：10mg的恶霉灵、10mg的复硝酚钠、20mg的α-萘乙酸钠、0.3mg的烟酸、6mg的微囊藻素、0.2mg的碘化钾和20mg的胺鲜酯；每升基础培养液主要含有：25mg的土豆渣水解液、5mg的葡萄糖、10mg的琼脂、5mg的椰子汁、4mg的西红柿汁、5mg的水解乳蛋白、1mg的玉米胚乳、50mg的肌醇和1mg的赤霉素；土豆渣水解液主要经过如下处理得到：a.将土豆渣进行干燥、粉碎，然后加入离子液体至土豆渣的质量浓度为5％，然后在90℃、80r/min的条件下，搅拌处理60min，得到土豆渣溶液，再加入土豆渣溶液4倍体积的水，在150r/min搅拌处理30min后，在3000r/min下，离心10min，收集沉淀，将沉淀在40℃真空干燥3h，得到再生土豆渣；b.将步骤a所得再生土豆渣加适量水充分混匀，再加入纤维素酶进行酶解后即可得到土豆渣水解液，酶解的条件为：ph值为4.5，温度为55℃；酶解时间为10h。上述培养基的配置是将基础培养液和母液按照各自的组份配置后，按照体积比为4:0.05混合，再煮沸调节ph为5.5，浓缩后进行高压灭菌后即可。实施例2本实施例所提供的一种龟背竹种子组织培养基由基础培养液与母液混合而成，它们的体积比为5:0.07；其中，每升母液主要含有：12mg的恶霉灵、15mg的复硝酚钠、35mg的α-萘乙酸钠、0.4mg的烟酸、9mg的微囊藻素、0.3mg的碘化钾和35mg的胺鲜酯；每升基础培养液主要含有：30mg的土豆渣水解液、7mg的葡萄糖、15mg的琼脂、7mg的椰子汁、6mg的西红柿汁、7mg的水解乳蛋白、3mg的玉米胚乳、65mg的肌醇和2mg的赤霉素；土豆渣水解液主要经过如下处理得到：a.将土豆渣进行干燥、粉碎，然后加入离子液体至土豆渣的质量浓度为7％，然后在100℃、100r/min的条件下，搅拌处理90min，得到土豆渣溶液，再加入土豆渣溶液6倍体积的水，在170r/min搅拌处理45min后，在4000r/min下，离心15min，收集沉淀，将沉淀在50℃真空干燥4h，得到再生土豆渣；b.将步骤a所得再生土豆渣加适量水充分混匀，再加入纤维素酶进行酶解后即可得到土豆渣水解液，酶解的条件为：ph值为5.5，温度为60℃；酶解时间为11h。上述培养基的配置是将基础培养液和母液按照各自的组份配置后，按照体积比为5:0.07混合，再煮沸调节ph为6.0，浓缩后进行高压灭菌后即可。实施例3本实施例所提供的一种龟背竹种子组织培养基由基础培养液与母液混合而成，它们的体积比为6:0.07；其中，每升母液主要含有：15mg的恶霉灵、20mg的复硝酚钠、50mg的α-萘乙酸钠、0.5mg的烟酸、12mg的微囊藻素、0.4mg的碘化钾和50mg的胺鲜酯；每升基础培养液主要含有：38mg的土豆渣水解液、10mg的葡萄糖、20mg的琼脂、10mg的椰子汁、8mg的西红柿汁、8mg的水解乳蛋白、4mg的玉米胚乳、50-80mg的肌醇和3mg的赤霉素；土豆渣水解液主要经过如下处理得到：a.将土豆渣进行干燥、粉碎，然后加入离子液体至土豆渣的质量浓度为9％，然后在120℃、120r/min的条件下，搅拌处理120min，得到土豆渣溶液，再加入土豆渣溶液8倍体积的水，在200r/min搅拌处理60min后，在5000r/min下，离心20min，收集沉淀，将沉淀在60℃真空干燥5h，得到再生土豆渣；b.将步骤a所得再生土豆渣加适量水充分混匀，再加入纤维素酶进行酶解后即可得到土豆渣水解液，酶解的条件为：ph值为6.5，温度为65℃；酶解时间为12h。上述培养基的配置是将基础培养液和母液按照各自的组份配置后，按照体积比为6:0.07混合，再煮沸调节ph为6.5，浓缩后进行高压灭菌后即可。效果验证为了进一步说明本发明龟背竹种子组织培养基的应用价值，实施人选择无病害，无残缺，粒径大小相近的龟背竹种子，经过灭菌后，在无菌条件下分别接入以下2组中制备得到的培养基，每个处理接种10瓶，每瓶10粒，培养温度(27±1)℃，光照强度2500-3000lx，光照时间12h/d。记录出芽时间，芽生长情况，结果见表1；第一组：去掉母液，其他方式严格按照实施例2进行；第二组：严格按照实施例2进行。表1龟背竹种子的生长情况试验组发芽率％出芽时间(h)芽颜色芽肉厚度(cm)第一组7471嫩黄-黄绿-黄绿0.09第二组10040嫩黄-嫩绿-绿色0.13由上表可知，通过采用本发明的的技术方案(实施例2)，的发芽率达到100％，平均出芽时间和芽色也优于去掉母液的第一组，且芽厚度饱满。虽然，上文中已经用一般性说明及具体实施方案对本发明作了详尽的描述，但在本发明基础上，可以对之作一些修改或改进，这对本领域技术人员而言是显而易见的。因此，在不偏离本发明精神的基础上所做的这些修改或改进，均属于本发明要求保护的范围。当前第1页12