本发明属于农药制备
技术领域：
，具体涉及一种高效生物除虫剂的制备方法。
背景技术：
：随着城市园林绿化的推广，园林绿化草丛中会隐藏越来越多的蚊虫，会给路人或者园林休闲者带来危害，而现有的消除蚊虫的方法大多为喷洒药剂，随着时间的延长，药剂不断挥发，药效随之降低，只能起到短暂的防蚊除虫的效果，尤其遇上雨天天气，喷洒的药剂直接付诸东流，不能起到应有的防蚊除虫的效果，进而导致造福人类的园林绿化成了人们的健康威胁所在。目前的害虫防治不仅防治效果差，而且针对不同害虫，还要使用不同的除虫剂，耗费大量的人力、物力和财力成本，还会造成环境的污染，而且连续使用单一活性成分的杀虫剂容易产生抗药性。在倡导绿色和保护环境的今天，多种高毒和高残留化学物已被限量或停产。有机磷、拟除虫菊酯、苯甲酰脲类和生化等农药经复配组合已使原有的毒性在一定程度上有所降低，但由于累年使用的结果，致使虫体耐药性和抗药性逐年加强，交替使用的效果也不十分理想。农用除虫剂的实际稀释量已远远超出其限用范围，农产品化学物残留远达不到无公害的要求，逐年增加的农药需求量造成农村环境污染的加剧，其残留物对人体的危害更不容忽视。技术实现要素：本发明所要解决的技术问题：针对目前除虫剂除虫效率差、会对害虫产生抗药性、除虫有效时间短的问题，提供一种高效生物除虫剂的制备方法。为解决上述技术问题，本发明采用如下所述的技术方案是：一种生物高效除虫剂的制备方法，其特征在于，该制备方法包括如下步骤：（1）取去离子水置于磁场发生器中，于电流强度0.2A、磁场强度14.4Gs预处理1~2h，得预处理去离子水，按质量份数计，取5~8份牛肉膏、20~30份菌糠、2~4份黄豆饼粉、10~13份蛋白胨、3~5份葡萄糖、2~4份氯化钠、0.3~0.5份硫酸铁、0.3~0.6份硫酸镁、0.3~0.5份磷酸二氢钾、0.03~0.06份硫酸锰、1000份预处理去离子水混合，灭菌，得灭菌物；（2）取苏云金芽孢杆菌、座壳孢菌、莫勒菌按质量比3~5：1~3：1~3混合，得混合菌剂，取混合菌剂按4~6%的接种量接种至灭菌物中，于25~30℃发酵培养，离心，取沉淀干燥，得干燥物，备用；（3）取甲基聚乙二醇按质量比4~7：1~3加入琥珀酸酐，再加入甲基聚乙二醇质量10~20%的N,N-二甲基甲酰胺，于90~95℃搅拌混合，冷却至室温，得冷却物，取冷却物按质量比8~10：1~4加入乙醚，于1~4℃静置，过滤，取滤渣按质量比1~3：10~15：14~18加入N-羟基琥珀酰亚胺、二环己基碳二亚胺，于25~30℃搅拌混合，再加入滤渣质量20~30%的N,N-二甲基甲酰胺，搅拌混合，过滤，取滤液按质量比1：3~5加入乙醚，取沉淀a；（4）取步骤（2）备用的干燥物按质量比1：10~15加入硼酸缓冲液混合，再加入干燥物质量4~7倍的沉淀a，于30~38℃保温1~2h，得混合液，按质量份数计，取30~50份混合液、3~6份酸添加物、10~15份取食刺激剂、0.4~0.7份刚果红、8~12份海藻酸钠、30~40份水，于30~40℃搅拌混合，得高效生物除虫剂。所述步骤（4）中酸添加物是取L-刀豆氨酸、肉桂酸、P-香豆酸按质量比1~3：2~5：1混合，即得酸添加物。所述步骤（4）中取食刺激剂是按质量份数计，取3~6份蜜糖、0.3~0.8份L-丙氨酸、0.4~0.7份r-氨基丁酸、2~5份玉米油、10~15份玉米粉、2~5份棉花叶、6~9份棉籽混合，得取食刺激剂。本发明与其他方法相比，有益技术效果是：（1）本发明先将去离子水经磁化预处理，能够刺激苏云金芽孢杆菌、座壳孢菌、莫勒菌产孢性能，刺激菌种活性，由此产生萜类、黄酮类、蒽醌类物质，由于刺激昆虫肠腔中的Ⅱ型围食膜是由前胃的细胞产生的，它能够在食物通过前胃的时候合成几丁质，进而将食物和消化酶包裹其中，进入肠道消化吸收，苏云金芽孢杆菌、座壳孢菌、莫勒菌能分泌几丁质酶，水解围食膜，从而破坏并穿透肠膜，进入宿主的淋巴细胞，阻止昆虫正常蜕皮和变态，进行杀虫，通过像发酵培养基中添加菌糠，其富含胶体类的几丁质，能促进几丁质酶分泌，提高除虫活性，同时这几种菌类通过侵染方式通过害虫体壁进入，产孢能力提高，提高了侵染效率，孢子的存活期长、耐受性强，进入体内不会产生抗药性，能够长效除虫；（2）本发明加入的几种除虫活性菌剂，在紫外照射等外在条件下对菌体活性会造成影响，产酶容易失活，通过以甲基聚乙二醇、琥珀酸酐为原料，经N-羟基琥珀酰亚胺活化对产酶表面的氨基进行了修饰，活化后的聚乙二醇与蛋白质表面N末端的α-氨基或赖氨酸侧链的δ-氨基共价结合为稳定的酞胺键，形成对产酶的活性中心的保护，在紫外光照射、热、酸、碱条件下依然能保持高活性的除虫性能；（3）本发明加入L-刀豆氨酸、肉桂酸、P-香豆酸改变害虫幼虫中肠和马氏管的膜性质及其通透性和主动运输方式，促进除虫活性成分的渗入，同时加入引诱害虫营养物质，提高了害虫对除虫剂的采食率，加入刚果红通过对紫外光的吸收对活性菌剂形成保护，触杀效果增强。具体实施方式苏云金芽孢杆菌、座壳孢菌、莫勒菌：于-1~4℃实验室斜面保藏。菌糠：培养金针菇后的栽培肥料，主要含麸皮、棉籽壳、木屑、生石灰，熟石灰，粉碎过40目筛，收集过筛颗粒，干燥，即得菌糠。酸添加物：取L-刀豆氨酸、肉桂酸、P-香豆酸按质量比1~3：2~5：1混合，即得酸添加物。取食刺激剂：按质量份数计，取3~6份蜜糖、0.3~0.8份L-丙氨酸、0.4~0.7份r-氨基丁酸、2~5份玉米油、10~15份玉米粉、2~5份棉花叶、6~9份棉籽混合，得取食刺激剂。一种高效生物除虫剂的制备方法，包括如下步骤：（1）取去离子水置于磁场发生器中，于电流强度0.2A、磁场强度14.4Gs预处理1~2h，得预处理去离子水，按质量份数计，取5~8份牛肉膏、20~30份菌糠、2~4份黄豆饼粉、10~13份蛋白胨、3~5份葡萄糖、2~4份氯化钠、0.3~0.5份硫酸铁、0.3~0.6份硫酸镁、0.3~0.5份磷酸二氢钾、0.03~0.06份硫酸锰、1000份预处理去离子水，pH7.5，121℃灭菌20min，得灭菌物；（2）取苏云金芽孢杆菌、座壳孢菌、莫勒菌按质量比3~5：1~3：1~3混合，得混合菌剂，取混合菌剂按4~6%的接种量接种至灭菌物中，于25~30℃发酵培养24~36h，离心，取沉淀干燥，得干燥物，备用；（3）取甲基聚乙二醇按质量比4~7：1~3加入琥珀酸酐，再加入甲基聚乙二醇质量10~20%的N,N-二甲基甲酰胺，于90~95℃搅拌混合2~3h，冷却至室温，得冷却物，取冷却物按质量比8~10：1~4加入乙醚，于1~4℃静置30~40min，过滤，取滤渣按质量比1~3：10~15：14~18加入N-羟基琥珀酰亚胺、二环己基碳二亚胺，于25~30℃搅拌混合30~40min，再加入滤渣质量20~30%的N,N-二甲基甲酰胺，搅拌混合18~24h，过滤，取滤液按质量比1：3~5加入乙醚，取沉淀a；（4）取步骤（2）备用的干燥物按质量比1：10~15加入浓度为0.1mol/L的硼酸缓冲液混合，再加入干燥物质量4~7倍的沉淀a，于30~38℃保温1~2h，得混合液，按质量份数计，取30~50份混合液、3~6份酸添加物、10~15份取食刺激剂、0.4~0.7份刚果红、8~12份海藻酸钠、30~40份水，于30~40℃搅拌混合1~2h，得高效生物除虫剂。苏云金芽孢杆菌、座壳孢菌、莫勒菌：于-1℃实验室斜面保藏。菌糠：培养金针菇后的栽培肥料，主要含麸皮、棉籽壳、木屑、生石灰，熟石灰，粉碎过40目筛，收集过筛颗粒，干燥，即得菌糠。酸添加物：取L-刀豆氨酸、肉桂酸、P-香豆酸按质量比1：2：1混合，即得酸添加物。取食刺激剂：按质量份数计，取3份蜜糖、0.3份L-丙氨酸、0.4份r-氨基丁酸、2份玉米油、10份玉米粉、2份棉花叶、6份棉籽混合，得取食刺激剂。一种高效生物除虫剂的制备方法，包括如下步骤：（1）取去离子水置于磁场发生器中，于电流强度0.2A、磁场强度14.4Gs预处理1h，得预处理去离子水，按质量份数计，取5份牛肉膏、20份菌糠、2份黄豆饼粉、10份蛋白胨、3份葡萄糖、2份氯化钠、0.3份硫酸铁、0.3份硫酸镁、0.3份磷酸二氢钾、0.03份硫酸锰、1000份预处理去离子水，pH7.5，121℃灭菌20min，得灭菌物；（2）取苏云金芽孢杆菌、座壳孢菌、莫勒菌按质量比3：1：1混合，得混合菌剂，取混合菌剂按4%的接种量接种至灭菌物中，于25℃发酵培养24h，离心，取沉淀干燥，得干燥物，备用；（3）取甲基聚乙二醇按质量比4：1加入琥珀酸酐，再加入甲基聚乙二醇质量10%的N,N-二甲基甲酰胺，于90℃搅拌混合2h，冷却至室温，得冷却物，取冷却物按质量比8：1加入乙醚，于1℃静置30min，过滤，取滤渣按质量比1：10：14加入N-羟基琥珀酰亚胺、二环己基碳二亚胺，于25℃搅拌混合30min，再加入滤渣质量20%的N,N-二甲基甲酰胺，搅拌混合18h，过滤，取滤液按质量比1：3加入乙醚，取沉淀a；（4）取步骤（2）备用的干燥物按质量比1：10加入浓度为0.1mol/L的硼酸缓冲液混合，再加入干燥物质量4倍的沉淀a，于30~38℃保温1h，得混合液，按质量份数计，取30份混合液、3份酸添加物、10份取食刺激剂、0.4份刚果红、8份海藻酸钠、30份水，于30℃搅拌混合1h，得高效生物除虫剂。苏云金芽孢杆菌、座壳孢菌、莫勒菌：于2℃实验室斜面保藏。菌糠：培养金针菇后的栽培肥料，主要含麸皮、棉籽壳、木屑、生石灰，熟石灰，粉碎过40目筛，收集过筛颗粒，干燥，即得菌糠。酸添加物：取L-刀豆氨酸、肉桂酸、P-香豆酸按质量比2：4：1混合，即得酸添加物。取食刺激剂：按质量份数计，取5份蜜糖、0.5份L-丙氨酸、0.6份r-氨基丁酸、4份玉米油、13份玉米粉、4份棉花叶、8份棉籽混合，得取食刺激剂。一种高效生物除虫剂的制备方法，包括如下步骤：（1）取去离子水置于磁场发生器中，于电流强度0.2A、磁场强度14.4Gs预处理1.5h，得预处理去离子水，按质量份数计，取7份牛肉膏、25份菌糠、3份黄豆饼粉、12份蛋白胨、4份葡萄糖、3份氯化钠、0.4份硫酸铁、0.5份硫酸镁、0.4份磷酸二氢钾、0.05份硫酸锰、1000份预处理去离子水，pH7.5，121℃灭菌20min，得灭菌物；（2）取苏云金芽孢杆菌、座壳孢菌、莫勒菌按质量比4：2：2混合，得混合菌剂，取混合菌剂按5%的接种量接种至灭菌物中，于28℃发酵培养30h，离心，取沉淀干燥，得干燥物，备用；（3）取甲基聚乙二醇按质量比6：2加入琥珀酸酐，再加入甲基聚乙二醇质量15%的N,N-二甲基甲酰胺，于93℃搅拌混合2.5h，冷却至室温，得冷却物，取冷却物按质量比9：3加入乙醚，于3℃静置35min，过滤，取滤渣按质量比2：13：16加入N-羟基琥珀酰亚胺、二环己基碳二亚胺，于28℃搅拌混合35min，再加入滤渣质量25%的N,N-二甲基甲酰胺，搅拌混合21h，过滤，取滤液按质量比1：4加入乙醚，取沉淀a；（4）取步骤（2）备用的干燥物按质量比1：13加入浓度为0.1mol/L的硼酸缓冲液混合，再加入干燥物质量6倍的沉淀a，于34℃保温1.5h，得混合液，按质量份数计，取40份混合液、5份酸添加物、13份取食刺激剂、0.6份刚果红、10份海藻酸钠、35份水，于35℃搅拌混合1.5h，得高效生物除虫剂。苏云金芽孢杆菌、座壳孢菌、莫勒菌：于4℃实验室斜面保藏。菌糠：培养金针菇后的栽培肥料，主要含麸皮、棉籽壳、木屑、生石灰，熟石灰，粉碎过40目筛，收集过筛颗粒，干燥，即得菌糠。酸添加物：取L-刀豆氨酸、肉桂酸、P-香豆酸按质量比3：5：1混合，即得酸添加物。取食刺激剂：按质量份数计，取6份蜜糖、0.8份L-丙氨酸、0.7份r-氨基丁酸、5份玉米油、15份玉米粉、5份棉花叶、9份棉籽混合，得取食刺激剂。一种高效生物除虫剂的制备方法，包括如下步骤：（1）取去离子水置于磁场发生器中，于电流强度0.2A、磁场强度14.4Gs预处理2h，得预处理去离子水，按质量份数计，取8份牛肉膏、30份菌糠、4份黄豆饼粉、13份蛋白胨、5份葡萄糖、4份氯化钠、0.5份硫酸铁、0.6份硫酸镁、0.5份磷酸二氢钾、0.06份硫酸锰、1000份预处理去离子水，pH7.5，121℃灭菌20min，得灭菌物；（2）取苏云金芽孢杆菌、座壳孢菌、莫勒菌按质量比5：3：3混合，得混合菌剂，取混合菌剂按6%的接种量接种至灭菌物中，于30℃发酵培养36h，离心，取沉淀干燥，得干燥物，备用；（3）取甲基聚乙二醇按质量比7：3加入琥珀酸酐，再加入甲基聚乙二醇质量20%的N,N-二甲基甲酰胺，于95℃搅拌混合3h，冷却至室温，得冷却物，取冷却物按质量比10：4加入乙醚，于4℃静置40min，过滤，取滤渣按质量比3：15：18加入N-羟基琥珀酰亚胺、二环己基碳二亚胺，于30℃搅拌混合40min，再加入滤渣质量30%的N,N-二甲基甲酰胺，搅拌混合24h，过滤，取滤液按质量比1：5加入乙醚，取沉淀a；（4）取步骤（2）备用的干燥物按质量比1：15加入浓度为0.1mol/L的硼酸缓冲液混合，再加入干燥物质量7倍的沉淀a，于38℃保温2h，得混合液，按质量份数计，取50份混合液、6份酸添加物、15份取食刺激剂、0.7份刚果红、12份海藻酸钠、40份水，于40℃搅拌混合2h，得高效生物除虫剂。对比例：市场上某品牌生产的除虫剂。将上述制备方法的实施例1、2、3样品和对比例进行效果检测，分别取四个通风的植被独立空间，然后向四个空间中放入相同数量的蚊虫，向四个空间中分别添加等当量的除虫剂，每隔1h，放入与第一次相同数量的蚊虫，观察各空间中蚊虫的存活率，检测结果记录表1：表1：测试项目实施例1实施例2实施例3对比例第一次放虫数量/只1001001001001h后第二次放虫前虫数量/只151013562h后第三次放虫前虫数量/只25262080蚊虫存活率/%35340防治效果/%96959750综上所述，由表1可知，本发明的除虫剂具有较好的药效持久性，且防治效果良好，除虫效率较高，具有较大的发展前景。当前第1页1 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