本发明涉及一种高效的甜樱桃正反杂交种繁育方法，属于果树杂交育种技术领域。
背景技术
人工杂交育种是甜樱桃新品种选育的主要方式，其中，杂交授粉是关键步骤。为排除其他品种干扰，专一获得指定亲本的杂交后代，传统的杂交授粉需要严格遵守以下步骤：（一）制作父本花粉：采集处于铃铛花期（即将开放但尚未开放）的父本花朵，收集花药后在室内阴干，待花粉散出，收集花粉于0-4℃冷藏保存。（二）人工授粉：在母本的铃铛花期，人工去除其花瓣，使雌蕊露出；用棉棒蘸取父本花粉，点授于雌蕊柱头。（三）隔离：完成人工授粉后，将已授粉的花朵使用纸袋或细密网袋隔离，防止沾染其他品种的花粉。
这种方式虽然保证了杂交授粉的精确度，但存在很大的局限性。首先，只能使用早花品种做父本、晚花品种做母本，在亲本配置上受限制；第二，人工授粉须在雌蕊发育成熟但花朵尚未开放时进行，操作时间局限在开花前一天内，因每朵花发育程度不同，授粉效率偏低；第三，人工授粉过程中，需要对母本花朵逐个去除花瓣并点授花粉，费时费力、授粉效率低，而且容易伤害雌蕊，降低授粉成功率。
技术实现要素：
针对上述问题，本发明利用甜樱桃自交不亲和的特性，提供一种适用于甜樱桃的，高效繁育育种亲本正反杂交种的方法。为达到以上目的，本发明所采用的技术方案是：
一种高效的甜樱桃正反杂交种繁育方法，具体步骤如下：
（1）预处理调控花期：在晚花亲本萌芽前1个月左右，选择晴朗天气对亲本枝条喷施质量浓度为0-2%的单氰胺，使得父本与母本的花期相遇；
若父本与母本花期不相遇，则无法进行授粉，通过喷施质量浓度为0-2%的单氰胺，促使亲本花期提前至与另一亲本的花期一致。
（2）父本花枝采集和嫁接：喷施单氰胺后，选择父本生长健壮、无病虫危害、直径1cm左右、花芽多而饱满、带有叶芽的枝条，裁剪成长28-32cm的接穗，首先用湿报纸包裹后再用塑料薄膜包起，置于4℃冷藏；选择晴朗天气，在母本树冠外围的不同方向，使用双舌接的方法，将5-8个父本接穗嫁接在与之粗度相近的母本枝条上，将接口用塑料条包扎紧密，并做好标记；
（3）树体隔离与熊蜂辅助授粉：开花之前，使用防虫网或尼龙网将已嫁接好父本花枝的母本树体完全包裹，使其与其他树体隔离；至开花时，向网内放入熊蜂进行授粉；花期结束后，拆除防虫网，使果实自然发育；
（4）收集正反杂交种：待果实完全成熟后，采集未标记枝条上的果实，收取种子，即为正交杂交种；收集标记枝条上的果实，即为反交杂交种。
进一步的，所述步骤（2）中选择父本生长健壮、无病虫危害、直径1cm左右、花芽多而饱满、带有叶芽的枝条，裁剪成长30cm的接穗。
进一步的，所述防虫网或尼龙网的孔径为0.5-1.5mm；优选为1mm。
单氰胺浓度根据父本、母本花期差距程度及品种敏感性确定。花期差距小、对单氰胺敏感，需降低施用浓度；反之，适当提高浓度。
尼龙网的作用是防止昆虫带入非父本的花粉，需在整个花期持续使用。熊蜂适应性、活动能力强，在狭小空间内授粉效果好，使用时须购买商业化产品，现购现用，使用前避免蜂群在甜樱桃种植区域活动，防止出现非父本的花粉污染。
本方法与现有技术相比具有以下优点：
1、本发明利用单氰胺调控开花时间，免除了提前采集花粉的步骤，使花期较晚的品种也可作为父本；
2、本发明利用甜樱桃自交不亲和的特性，同时采用物理隔绝的方式，切断了父本之外花粉的污染途径，授粉时间可持续整个花期，花朵雌蕊发育程度高，授粉成功率高；
3、本发明使用熊蜂辅助授粉，无需对母本花朵逐个人工授粉，劳动力需求小，可进行规模化杂交授粉，工作效率极大提高。
具体实施方式
下面结合具体实施例来进一步描述本发明，本发明的优点和特点将会随着描述而更为清楚。但实施例仅是范例性的，并不对本发明的范围构成任何限制。本领域技术人员应该理解的是，在不偏离本发明的精神和范围下可以对本发明技术方案的细节和形式进行修改或替换，但这些修改和替换均落入本发明的保护范围内。
实施例1一种高效的甜樱桃正反杂交种繁育方法
具体步骤如下：
2017年，在山东省泰安市夏张镇，以“萨米特”甜樱桃为父本、“美早”甜樱桃为母本，进行杂交授粉。
“萨米特”与“美早”花期不完全一致，“萨米特”比“美早”晚4-8天，两者存在花期不相遇的风险，需提前使用单氰胺对“萨米特”花期进行调整。
（1）预处理调控父本花期：在3月4日（开花前约1个月，天气晴朗），向“萨米特”树体均匀喷施浓度为1.5%的单氰胺溶液。
（2）父本花枝采集和嫁接：3月7日，从“萨米特”树冠外围选择生长健壮、无病虫危害、直径1cm左右、花芽多而饱满、带有叶芽的枝条6根，裁剪成10根长30cm左右的接穗，用湿报纸和塑料薄膜包裹后于4℃冷藏；3月10日，选择1株生长健壮、花芽饱满、无病虫危害的“美早”植株，于晴天在其树冠外围的东、西、南、北四个方向各选择2个与接穗粗度相近的枝条，使用双舌接的方法嫁接“萨米特”接穗，每个接穗悬挂2个红色标签进行标记。
（3）树体隔离与熊蜂辅助授粉：3月24日，花芽已膨大萌动，使用边长为8米的正方形防虫网将所选“美早”植株整树覆盖，防虫网落地处用土压实；4月1日，“美早”花朵已发育至铃铛花（距开放1-2天），购买熊蜂并从树冠下方释放入防虫网内，将防虫网重新密封，使熊蜂在网内自由授粉。花期结束后，拆除防虫网，使果实自然发育。
（4）收集正反杂交种：至5月26日，“美早”果实完全成熟，从无红色标签的枝条上采集果实863粒，去除果肉，收集果核，获得正交杂交种（“美早”为母本、“萨米特”为父本的杂交种子）。
至6月5日，“萨米特”果实完全成熟，从红色标签标记的枝条上采集果实75粒，去除果肉，收集果核，获得反交杂交种（“萨米特”为母本、“美早”为父本的杂交种子）。
实施例2一种高效的甜樱桃正反杂交种繁育方法
2017年，在山东省泰安市泰山区，以“先锋”甜樱桃为父本、“红灯”甜樱桃为母本，进行杂交授粉。“先锋”与“红灯”开花时间接近，花期相遇，无需使用单氰胺进行花期调整。
（1）父本花枝采集和嫁接：3月8日，从“先锋”树冠外围选择生长健壮、无病虫危害、直径1cm左右、花芽多而饱满、带有叶芽的枝条，剪取10根长30cm左右的接穗，用湿报纸和塑料薄膜包裹后于4℃冷藏；3月11日，天气晴朗，选择1株生长健壮、花芽饱满、无病虫危害的“红灯”植株，在其树冠外围不同方位，使用双舌接的方法嫁接冷藏的“先锋”接穗，嫁接后的接穗悬挂红色标签进行标记。
（2）树体隔离与熊蜂辅助授粉：3月22日，花芽已膨大萌动，使用边长为8米的正方形防虫网将所选“红灯”植株整树覆盖，防虫网落地处用土压实；4月2日，父母本花朵开始进入铃铛花期（距开放1-2天），将提前准备好的熊蜂并从树冠下方释放入防虫网内，重新密封防虫网，使熊蜂在网内自由授粉。花期结束后，拆除防虫网，果实自然发育。
（3）收集正反杂交种：至5月19日，“红灯”果实完全成熟，从无红色标签的枝条上采集果实624粒，去除果肉，收集果核，获得正交杂交种（“红灯”为母本、“先锋”为父本的杂交种子）。
至5月24日，“先锋”果实完全成熟，从红色标签标记的枝条上采集果实53粒，去除果肉，收集果核，获得反交杂交种（“先锋”为母本、“红灯”为父本的杂交种子）。
实施例3一种高效的甜樱桃正反杂交种繁育方法
2017年，在山东省泰安市泰山区，以“早红宝石”甜樱桃为父本、“先锋”甜樱桃为母本，进行杂交授粉。“早红宝石”开花比“先锋”早4天左右，花期部分重叠，为保证授粉质量，需使用低浓度单氰胺（0.7%）对母本品种“先锋”进行花期调整。
（1）预处理调控母本花期：3月3日（开花前约1个月，天气晴朗），选择1株生长健壮、花芽饱满、无病虫危害的“先锋”植株，向树体均匀喷施浓度为0.7%的单氰胺溶液。
（2）父本花枝采集和嫁接：3月3日，从“早红宝石”树冠外围选择生长健壮、无病虫危害、直径1cm左右、花芽多而饱满、带有叶芽的枝条，剪取10根长30cm左右的接穗，用湿报纸和塑料薄膜包裹后于4℃冷藏；3月11日，天气晴朗，在所选“先锋”植株树冠外围的不同方位，使用双舌接的方法嫁接“早红宝石”接穗，嫁接后的接穗悬挂红色标签进行标记。
（3）树体隔离与熊蜂辅助授粉：3月22日，花芽已膨大萌动，使用边长为8米的正方形防虫网将“先锋”植株整树覆盖，防虫网落地处用土压实；3月29日，父母本花朵开始发育至铃铛花（距开放1-2天），将提前准备好的熊蜂并从树冠下方释放入防虫网内，重新密封防虫网，使熊蜂在网内自由授粉。花期结束后，拆除防虫网，果实自然发育。
（4）收集正反杂交种：至5月13日，“早红宝石”果实完全成熟，从带红色标签的枝条上采集果实56粒，去除果肉，收集果核，获得反交杂交种（“早红宝石”为母本、“先锋”为父本的杂交种子）。
至5月21日，“先锋”果实完全成熟，从未标记的枝条上采集果实663粒，去除果肉，收集果核，获得正交杂交种（“先锋”为母本、“早红宝石”为父本的杂交种子）。