本发明属于石斛培养领域，具体涉及一种铁皮石斛原球茎的增殖分化培养基及其应用。
背景技术：
：铁皮石斛(deudrobiumofficiuale)是兰科石斛属多年生附生草本植物，为我国特有的名贵药材，李时珍在《本草纲目》中评价铁皮石斛“强阴益精，厚肠胃，补内绝不足，平胃气，长肌肉，益智除惊，轻身延年”；民间称其为“救命仙草”。多分布于海拔近千米的山地半阴湿岩石上，加上长期采挖，使得野生铁皮石斛资源日渐枯竭。因其种子无胚乳，需结合共生菌才能正常萌发，故实生苗的栽培难度大。传统的无性繁殖方式繁殖系数低，原球茎的培养经过诱导、分化、增殖三个阶段，原球茎的培养的好坏直接影响铁皮石斛的茎段粗细多少、生根率以及成苗率。现有技术中，是铁皮石斛仍存在增长率不高、移栽成活率低等许多问题。其中，生根壮苗是组培苗移栽成活的关键因素，因此在组织培养过程中提高组培苗生根率和生根数量尤为重要影响根部发育，生根少，根细，且生长慢，移栽后容易出现烂根或根部发育不良现象。技术实现要素：发明目的：为了克服现有技术中存在的不足，本发明提供了一种铁皮石斛生根培养基。技术方案：为解决上述技术问题，本发明提供的一种铁皮石斛生根培养基，所述生根培养基由以下组分组成：改良ms基本培养基+吲哚丁酸iba0.5～2.0mg/l+pqq0.5～1.5umol/l+胺鲜酯0.02～0.1mg/l+香蕉肉汁5～15g/l+柠檬酸5～12g/l+维生素b20.2~0.3mg/l+植物提取混合物12～18mg/l+培养基功能液5～8mg/l。进一步地，所述改良ms基本培养基由以下组分组成：硝酸铵nh4no3300mg/l硝酸钙ca(no3)2·4h2o328mg/l氯化钙cacl2·2h2o98mg/l硫酸镁mgso4·7h2o185mg/l磷酸二氢钾kh2po485mg/l硫酸钾k2so4495mg/l乙二胺四乙酸二钠na2·edta37.3mg/l硫酸亚铁feso4·7h2o27.8mg/l硫酸锰mnso4·h2o22.3mg/l硫酸锌znso4·7h2o8.6mg/l硼酸h3bo38.2mg/l钼酸钠na2moo4·2h2o0.25mg/l硫酸铜cuso4·5h2o0.05mg/l氯化钴cocl2.6h2o20.05mg/l肌醇c6h12o6·2h2o500mg/l甘氨酸nh2·ch2·cooh5mg/l盐酸硫胺素c12h17clos·2hcl2mg/l盐酸吡哆醇c8h10no5p0.8mg/l烟酸nc5h4cooh0.8mg/l进一步地，所述植物提取液由桑叶提取物、菱角叶汁以及鞣质组成；桑叶提取物桑树枝条上的第1～3位新叶加工的桑叶粉为原料，阴干，粉碎，分别用正丁醇、90%乙醇和水加温浸提，并喷雾干燥而得。进一步地，所述桑叶提取物、菱角叶汁以及鞣质三者之间的重量份比依次分别为5：8：1。进一步地，所述培养基功能液由芦荟凝胶、皂甙以及棕榈酸组成。进一步地，所述芦荟凝胶、皂甙以及棕榈酸的重量份比例依次分别为6:4:1。上述铁皮石斛生根培养基的应用，所述应用步骤如下：将高1～2cm、带有2～3片叶的分化增殖后的小芽切下转入生根培养基上进行生根培养，进行一定的光照，培养28~32天，基部开始出现2～3条约1cm长的白色根，随后逐渐伸长，生根率达到99%以上。所述光照条件为，光质为自然光。所述光照条件为：光强为90-100μmol·m-2·s-1，光照时间12小时/天。有益效果：本发明相对于现有技术而言具备以下优点：1）本发明提供的培养基中培养基功能液包括芦荟凝胶、皂甙以及棕榈酸且通过特定比例，使得培养基呈液体与固定之间，培养基呈悬浮状态，液体之间呈微流动状态，使得培养基中的组分之间均匀，不会因石斛根部发育而造成的组分分布不均；且最后成苗移栽时，比较容易拔出，不易伤根。2）本发明中改良的ms基本培养基能与其他组分配合作用能够提高生根率，生根从平均生根3~5根，提升至平均25根以上，根粗能达到0.22-0.25cm。3)本发明提供的培养基中植物提取混合物包括桑叶提取物、菱角叶汁以及鞣质以及特定比例，能够使得根部抗逆性强，成苗移栽后，移栽存活率达到近100%，不会出现烂根或者根部发育不良现象。具体实施方式本实施例中改良的ms基本培养基中：包括如下成份：常量元素的组分如下：硝酸铵（nh4no3）、硝酸钙（ca(no3)2·4h2o）、氯化钙（cacl2·2h2o）、硫酸镁（mgso4·7h2o）、磷酸二氢钾（kh2po4）、硫酸钾（k2so4）；微量元素的组分和其对应的使用浓度如下：硫酸锰（mnso4·h2o）、硫酸锌（znso4·7h2o）、硼酸（h3bo3）、钼酸钠（na2moo4·2h2o）、硫酸铜（cuso4·5h2o）、氯化钴（cocl2.62）；铁盐的组分如下：乙二胺四乙酸二钠（na2·edta）、硫酸亚铁（feso4·7h2o）；有机成分的组分如下：肌醇、甘氨酸（gly）、盐酸硫胺素（vb1）、盐酸吡哆醇（vb6）、烟酸（vpp）。实施例1一种铁皮石斛生根培养基，所述生根培养基由以下组分组成：改良ms基本培养基+吲哚丁酸iba0.5mg/l+pqq1.5umol/l+胺鲜酯0.1mg/l+香蕉肉汁15g/l+柠檬酸12g/l+植物提取混合物18mg/l+维生素b20.2mg/l+培养基功能液8mg/l。所述改良ms基本培养基由以下组分组成：硝酸铵nh4no3300mg/l硝酸钙ca(no3)2·4h2o328mg/l氯化钙cacl2·2h2o98mg/l硫酸镁mgso4·7h2o185mg/l磷酸二氢钾kh2po485mg/l硫酸钾k2so4495mg/l乙二胺四乙酸二钠na2·edta37.3mg/l硫酸亚铁feso4·7h2o27.8mg/l硫酸锰mnso4·h2o22.3mg/l硫酸锌znso4·7h2o8.6mg/l硼酸h3bo38.2mg/l钼酸钠na2moo4·2h2o0.25mg/l硫酸铜cuso4·5h2o0.05mg/l氯化钴cocl2.6h2o20.05mg/l肌醇c6h12o6·2h2o500mg/l甘氨酸nh2·ch2·cooh5mg/l盐酸硫胺素c12h17clos·2hcl2mg/l盐酸吡哆醇c8h10no5p0.8mg/l烟酸nc5h4cooh0.8mg/l。植物提取液由桑叶提取物、菱角叶汁以及鞣质组成；桑叶提取物桑树枝条上的第1～3位新叶加工的桑叶粉为原料，阴干，粉碎，分别用正丁醇、90%乙醇和水加温浸提，并喷雾干燥而得。所述桑叶提取物、菱角叶汁以及鞣质三者之间的重量份比依次分别为5：8：1。培养基功能液由芦荟凝胶、皂甙以及棕榈酸组成。芦荟凝胶、皂甙以及棕榈酸的重量份比例依次分别为6:4:1。铁皮石斛生根培养基的应用，所述应用步骤如下：将高1～2cm、带有2～3片叶的分化增殖后的小芽切下转入生根培养基上进行生根培养，进行一定的光照，培养28~32天，基部开始出现2～3条约1cm长的白色根，随后逐渐伸长。所述光照条件为，光质为自然光。所述光照条件为：光强为100μmol·m-2·s-1，光照时间12小时/天。实施例2一种铁皮石斛生根培养基，所述生根培养基由以下组分组成：改良ms基本培养基+吲哚丁酸iba2.0mg/l+pqq0.5umol/l+胺鲜酯0.02mg/l+香蕉肉汁5g/l+柠檬酸5g/l+植物提取混合物12mg/l+维生素b20.3mg/l+培养基功能液5mg/l。所述改良ms基本培养基由以下组分组成：硝酸铵nh4no3300mg/l硝酸钙ca(no3)2·4h2o328mg/l氯化钙cacl2·2h2o98mg/l硫酸镁mgso4·7h2o185mg/l磷酸二氢钾kh2po485mg/l硫酸钾k2so4495mg/l乙二胺四乙酸二钠na2·edta37.3mg/l硫酸亚铁feso4·7h2o27.8mg/l硫酸锰mnso4·h2o22.3mg/l硫酸锌znso4·7h2o8.6mg/l硼酸h3bo38.2mg/l钼酸钠na2moo4·2h2o0.25mg/l硫酸铜cuso4·5h2o0.05mg/l氯化钴cocl2.6h2o20.05mg/l肌醇c6h12o6·2h2o500mg/l甘氨酸nh2·ch2·cooh5mg/l盐酸硫胺素c12h17clos·2hcl2mg/l盐酸吡哆醇c8h10no5p0.8mg/l烟酸nc5h4cooh0.8mg/l。植物提取液由桑叶提取物、菱角叶汁以及鞣质组成；桑叶提取物桑树枝条上的第1～3位新叶加工的桑叶粉为原料，阴干，粉碎，分别用正丁醇、90%乙醇和水加温浸提，并喷雾干燥而得。所述桑叶提取物、菱角叶汁以及鞣质三者之间的重量份比依次分别为5：8：1。培养基功能液由芦荟凝胶、皂甙以及棕榈酸组成。芦荟凝胶、皂甙以及棕榈酸的重量份比例依次分别为6:4:1。铁皮石斛生根培养基的应用，所述应用步骤如下：将高1～2cm、带有2～3片叶的分化增殖后的小芽切下转入生根培养基上进行生根培养，进行一定的光照，培养28~32天，基部开始出现2～3条约1cm长的白色根，随后逐渐伸长。所述光照条件为，光质为自然光。所述光照条件为：光强为90μmol·m-2·s-1，光照时间12小时/天。实施例3一种铁皮石斛生根培养基，所述生根培养基由以下组分组成：改良ms基本培养基+吲哚丁酸iba0.8mg/l+pqq0.9umol/l+胺鲜酯0.07mg/l+香蕉肉汁12g/l+柠檬酸8g/l+植物提取混合物15mg/l+维生素b20.25mg/l+培养基功能液7mg/l。所述改良ms基本培养基由以下组分组成：硝酸铵nh4no3300mg/l硝酸钙ca(no3)2·4h2o328mg/l氯化钙cacl2·2h2o98mg/l硫酸镁mgso4·7h2o185mg/l磷酸二氢钾kh2po485mg/l硫酸钾k2so4495mg/l乙二胺四乙酸二钠na2·edta37.3mg/l硫酸亚铁feso4·7h2o27.8mg/l硫酸锰mnso4·h2o22.3mg/l硫酸锌znso4·7h2o8.6mg/l硼酸h3bo38.2mg/l钼酸钠na2moo4·2h2o0.25mg/l硫酸铜cuso4·5h2o0.05mg/l氯化钴cocl2.6h2o20.05mg/l肌醇c6h12o6·2h2o500mg/l甘氨酸nh2·ch2·cooh5mg/l盐酸硫胺素c12h17clos·2hcl2mg/l盐酸吡哆醇c8h10no5p0.8mg/l烟酸nc5h4cooh0.8mg/l植物提取液由桑叶提取物、菱角叶汁以及鞣质组成；桑叶提取物桑树枝条上的第1～3位新叶加工的桑叶粉为原料，阴干，粉碎，分别用正丁醇、90%乙醇和水加温浸提，并喷雾干燥而得。所述桑叶提取物、菱角叶汁以及鞣质三者之间的重量份比依次分别为5：8：1。培养基功能液由芦荟凝胶、皂甙以及棕榈酸组成。芦荟凝胶、皂甙以及棕榈酸的重量份比例依次分别为6:4:1。铁皮石斛生根培养基的应用，所述应用步骤如下：将高1～2cm、带有2～3片叶的分化增殖后的小芽切下转入生根培养基上进行生根培养，进行一定的光照，培养28~32天，基部开始出现2～3条约1cm长的白色根，随后逐渐伸长，生根率达到99%以上。所述光照条件为，光质为自然光。所述光照条件为：光强为95μmol·m-2·s-1，光照时间12小时/天。实施例4一种铁皮石斛生根培养基，所述生根培养基由以下组分组成：改良ms基本培养基+吲哚丁酸iba1.2mg/l+pqq1.2umol/l+胺鲜酯0.05mg/l+香蕉肉汁10g/l+柠檬酸7g/l+植物提取混合物14mg/l+维生素b20.28mg/l+培养基功能液6mg/l。所述改良ms基本培养基由以下组分组成：硝酸铵nh4no3300mg/l硝酸钙ca(no3)2·4h2o328mg/l氯化钙cacl2·2h2o98mg/l硫酸镁mgso4·7h2o185mg/l磷酸二氢钾kh2po485mg/l硫酸钾k2so4495mg/l乙二胺四乙酸二钠na2·edta37.3mg/l硫酸亚铁feso4·7h2o27.8mg/l硫酸锰mnso4·h2o22.3mg/l硫酸锌znso4·7h2o8.6mg/l硼酸h3bo38.2mg/l钼酸钠na2moo4·2h2o0.25mg/l硫酸铜cuso4·5h2o0.05mg/l氯化钴cocl2.6h2o20.05mg/l肌醇c6h12o6·2h2o500mg/l甘氨酸nh2·ch2·cooh5mg/l盐酸硫胺素c12h17clos·2hcl2mg/l盐酸吡哆醇c8h10no5p0.8mg/l烟酸nc5h4cooh0.8mg/l。植物提取液由桑叶提取物、菱角叶汁以及鞣质组成；桑叶提取物桑树枝条上的第1～3位新叶加工的桑叶粉为原料，阴干，粉碎，分别用正丁醇、90%乙醇和水加温浸提，并喷雾干燥而得。所述桑叶提取物、菱角叶汁以及鞣质三者之间的重量份比依次分别为5：8：1。培养基功能液由芦荟凝胶、皂甙以及棕榈酸组成。芦荟凝胶、皂甙以及棕榈酸的重量份比例依次分别为6:4:1。铁皮石斛生根培养基的应用，所述应用步骤如下：将高1～2cm、带有2～3片叶的分化增殖后的小芽切下转入生根培养基上进行生根培养，进行一定的光照，培养28~32天，基部开始出现2～3条约1cm长的白色根，随后逐渐伸长，生根率达到99%以上。所述光照条件为，光质为自然光。所述光照条件为：光强为98μmol·m-2·s-1，光照时间12小时/天。对比例：生根培养基：ms+2.0mg/lnaa+3%蔗糖+10%香蕉+0.8%琼脂；其他培养条件与实施4相同。本实施例1~4经过近万株石斛培养试验，经测试数据如下：实施例平均生根率平均生根数平均根粗移栽烂根率实施例199.2%26.20.220实施例299.5%26.40.230实施例399.9%28.30.240实施例499.7%27.90.230对比例75%12.30.1512.5%以上所述仅是本发明的优选实施方式，应当指出：对于本
技术领域：
的普通技术人员来说，在不脱离本发明原理的前提下，还可以做出若干改进和润饰，这些改进和润饰也应视为本发明的保护范围。当前第1页12