一种施加生长调节剂对蓝果忍冬增殖培养的方法与流程

本发明属于组培快繁技术领域，主要涉及一种施加生长调节剂对蓝果忍冬增殖培养的方法

背景技术：

蓝果忍冬俗称蓝靛果，黑瞎子果，羊奶子等。为多年生浆果类落叶灌木，花为黄色，常常两朵花共用一个子房，偶有3朵花共用一个子房。果实依品种不同呈现蓝色、深蓝色、深紫色、蓝紫色、蓝黑色等，有的品种果实表面有白色果粉。果实风味多样，口感不一，有的苦涩，较酸，有的很甜，即使同为酸涩或酸甜，因风味物质种类或含量的不同，不同品种的口感也有细微差异。蓝果忍冬果实富含花色苷类、黄酮类以及多酚类等生物活性物质，维生素、氨基酸、糖类、有机酸、矿物质等营养物质丰富，因此具有较高的营养和医疗保健价值。开发一种能够高效培育组培快繁苗的方法，具有重要的现实意义。

植物组织培养是一种将植物体的部分细胞或组织与母体分离，在适当的条件下加以培养，使它们能够生长、发育、分化与增殖的技术。根据植物细胞具有全能性，也就是植物体内的某一类细胞，能够独立发育并且分化成为完整的植物成体。目前国内外对蓝果忍冬组培的研究主要集中在培养基的筛选、培养条件的优化和外植体消毒灭菌等方面。在组培快繁过程中，植物生长调节剂发挥着重要作用，往往通过施用不同的植物生长调节剂或单纯改变生长调节剂的浓度就可使组培快繁过程的分化率和增殖系数大大增加，而生长调节剂在离体植株再生过程中更是有着不可忽视的关键性作用，植物激素和植物生长调节剂作为第一信使，通过植物体内的各种信号系统调控基因活性，控制相关基因的表达，进而促进或抑制离体器官的发生，不同生长调节剂对愈伤组织诱导及器官再生的效用不同，同一生长调节剂不同浓度的作用效果也不同

技术实现要素：

本发明所要解决的技术问题是克服现有快繁体系的不足，提供施加生长调节剂对蓝果忍冬增殖培养的方法，达到加快组培快繁体系建立的目的。

本发明所要解决的技术问题是通过以下技术方案来实现的：

1、一种施加生长调节剂对蓝果忍冬增殖培养的方法，其特征在于，该方法包括以下步骤：

(1)在蓝果忍冬休眠期采集健壮饱满的一年生枝条，减去基部较老部位和顶梢细弱部分，将枝条剪成16～20cm的茎段后，用洗衣粉洗去灰尘，再用清水漂洗干净；

(2)将处理好的茎段放入人工气候室进行水培催芽，培养温度约19-21℃，湿度74-76％，待腋芽萌发，抽出新梢；

(3)取新梢的带芽茎段为外植体进行初代培养，蓝果忍冬邱雷姆和娜雷姆在ms+0.9-1.1mg/l6-ba+0.1-0.3mg/liba的初代诱导培养基上培养；

(4)将邱雷姆在ms+1.9-2.1mg/l6-ba+0.05-0.15mg/lnaa条件下的培养基进行增值培养，娜雷姆在1/2-1ms+1.9-2.1mg/l6-ba+0.1-0.3mg/lnaa条件下进行增殖培养，能够获得较高的增值系数。

2、根据权利要求1所述的一种施加生长调节剂对蓝果忍冬增殖培养的方法，其特征在于，所述的枝条修建长度优选参数为:茎段长度18cm。

3、根据权利要求1所述的一种施加生长调节剂对蓝果忍冬增殖培养的方法，其特征在于，所述的培养温度优选参数为：温度20℃。

4、根据权利要求1所述的一种施加生长调节剂对蓝果忍冬增殖培养的方法，其特征在于，所述的人工气候室培养湿度优选参数为：湿度75％。

5、根据权利要求1所述的一种施加生长调节剂对蓝果忍冬增殖培养的方法，其特征在于，所述初代培养的优选参数为：培养基ms+1.0mg/l6-ba+0.2mg/liba

6、根据权利要求1所述的一种施加生长调节剂对蓝果忍冬增殖培养的方法，其特征在于，所述的邱雷姆增殖培养优选参数：培养基ms+2.0mg/l6-ba+0.1mg/lnaa

7、根据权利要求1所述的一种施加生长调节剂对蓝果忍冬增殖培养的方法，其特征在于，所述的娜雷姆增殖培养优选参数：培养基3/4ms+2.0mg/l6-ba+0.2mg/lnaa。

一种施加生长调节剂对蓝果忍冬增殖培养的方法属于组织培养相关技术，该方法包括以下步骤：在蓝果忍冬休眠期采集芽健壮饱满的一年生枝条，减去基部较老部位和顶梢细弱部分，将枝条剪成茎段后，用洗衣粉洗去灰尘，再用清水漂洗干净，将处理好的茎段放入人工气候室进行水培催芽，待腋芽萌发，抽出新梢后，取新梢的带芽茎段为外植体进行初代培养、继代增殖培养、生根培养，建立组培快繁体系。通过本法发明建立的组培快繁体系，能够加大组培苗的增值系数，有利于节省资金，创造更大的经济价值，具有广泛的应用价值和发展前景。

附图说明

附图为本工艺技术路线图。

具体实施方式

实施例1：

(1)在蓝果忍冬休眠期采集健壮饱满的一年生枝条，减去基部较老部位和顶梢细弱部分，将枝条剪成16～20cm的茎段后，用洗衣粉洗去灰尘，再用清水漂洗干净；

(2)将处理好的茎段放入人工气候室进行水培催芽，培养温度约19℃，湿度74-76％，待腋芽萌发，抽出新梢；

(3)取新梢的带芽茎段为外植体进行初代培养，蓝果忍冬邱雷姆和娜雷姆在ms+0.9-1.1mg/l6-ba+0.1-0.3mg/liba的初代诱导培养基上培养；

(4)将邱雷姆在ms+1.9-2.1mg/l6-ba+0.05-0.15mg/lnaa条件下的培养基进行增值培养，娜雷姆在1/2-1ms+1.9-2.1mg/l6-ba+0.1-0.3mg/lnaa条件下进行增殖培养，能够获得较高的增值系数。

实施例2：

(1)在蓝果忍冬休眠期采集健壮饱满的一年生枝条，减去基部较老部位和顶梢细弱部分，将枝条剪成16～20cm的茎段后，用洗衣粉洗去灰尘，再用清水漂洗干净；

(2)将处理好的茎段放入人工气候室进行水培催芽，培养温度约20℃，湿度74-76％，待腋芽萌发，抽出新梢；

(3)取新梢的带芽茎段为外植体进行初代培养，蓝果忍冬邱雷姆和娜雷姆在ms+0.9-1.1mg/l6-ba+0.1-0.3mg/liba的初代诱导培养基上培养；

(4)将邱雷姆在ms+1.9-2.1mg/l6-ba+0.05-0.15mg/lnaa条件下的培养基进行增值培养，娜雷姆在1/2-1ms+1.9-2.1mg/l6-ba+0.1-0.3mg/lnaa条件下进行增殖培养，能够获得较高的增值系数。

实施例3：

(1)在蓝果忍冬休眠期采集健壮饱满的一年生枝条，减去基部较老部位和顶梢细弱部分，将枝条剪成16～20cm的茎段后，用洗衣粉洗去灰尘，再用清水漂洗干净；

(2)将处理好的茎段放入人工气候室进行水培催芽，培养温度约21℃，湿度74-76％，待腋芽萌发，抽出新梢；

(3)取新梢的带芽茎段为外植体进行初代培养，蓝果忍冬邱雷姆和娜雷姆在ms+0.9-1.1mg/l6-ba+0.1-0.3mg/liba的初代诱导培养基上培养；

(4)将邱雷姆在ms+1.9-2.1mg/l6-ba+0.05-0.15mg/lnaa条件下的培养基进行增值培养，娜雷姆在1/2-1ms+1.9-2.1mg/l6-ba+0.1-0.3mg/lnaa条件下进行增殖培养，能够获得较高的增值系数。