本发明涉及园林
技术领域：
，尤其涉及一种促使金钱松种子萌发方法。技术背景金钱松属松科落叶松亚科金钱松属，单属单种，为中国特有的孑遗植物，最早的化石发现于地质年代的的晚白垩世地层中，古新世至上新世在斯匹次卑尔根群岛、欧洲、美洲、亚洲亦有发现。根据化石资料推测，金钱松可能起源于白垩纪中晚期，曾广泛分布于北纬33°～52°之间；中更新世以前曾分布于我国华北地区；更新世大冰期后，各地金钱松相继灭绝，只有在我国长江中下游地区幸存下来，成为现今中国特有的单属单种植物。根据世界自然保护联盟(iucn)新制定的物种受威胁的分类系统标准和中国植物红皮书的标准，金钱松均被定为渐危种，并被列为国家二级保护植物。金钱松树干通直，树冠卵状塔形，雄壮美观。短枝上叶簇生呈圆盘状，叶色初始嫩绿，入秋转为金黄，故名金钱松，是优良的建筑、家具等用材树种和园林绿化树种，历史上就作为珍贵的用材树种和观赏树种而栽培。金钱松具有较高的观赏价值，其树形优美，叶片条形，扁平柔软，春夏为浅绿色，柔翠娇嫩，秋后变金黄色，圆如铜钱，如簇簇黄金，是优良的观赏树种。早在19世纪就被引种美国，目前已在世界各地广泛栽培，与南洋杉、雪松、日本金松、北美巨杉合称为世界五大庭园树木。金钱松是珍贵的经济树木，其树干通直，材性优良，可作建筑、家具及木纤维工业原料等用；叶片可提取植物挥发油，应用于制药、香料、香精、化妆品及食品等工业；根皮是传统的中药材，俗称土槿皮，能杀虫止痒，抗真菌，外用治疗手脚癣、神经性皮炎、湿疹等。研究发现，土槿皮的化学成分主要有二萜类、三萜类、三萜内酯及甾醇类以及其他类化合物。现代药理学实验表明，金钱松的天然提取物具有抗真菌、抗肿瘤、抗生育、抑制血管生成等功效。金钱松植物的繁殖包括种子繁殖、扦插繁殖等。扦插繁殖，即选取10年以下植株的枝条扦插，但是扦插成活率非常低，因为扦插生长周期长，易受金钱松小卷蛾虫的危害而枯死。而种子繁殖是金钱松繁殖的主要方式，在育种中，金钱松种子中油脂含量高，对种子萌发会产生抑制作用，且金钱松结实有大小年之分，3～5年才能丰产一次，采用种子繁殖中势必会用到陈化达2、3年的种子，而随着储存时间过长，种子的活性降低萌发率会下降。因此，如何提高金钱松种子的活力，对种质资源的保护和利用、金钱松生产及经济效益的提高具有重要意义。技术实现要素：本发明的目的是针对现有金钱松种子出芽率低的缺陷，提供了一种金钱松种子萌发方法。本发明的目的是通过以下技术方案解决的：一种促使金钱松种子萌发方法，包括以下内容：1)种子前处理：置于杀菌液中浸泡处理，取出晾干后进行沙藏处理；2)杀菌处理：取出沙藏后的种子，用碱性溶液浸种，浸种完成后冲洗干净再用杀菌液浸泡处理；3)活性处理：将步骤2)所得种子先针扎多个小孔，然后置于活性溶液中浸泡；4)萌发：将步骤3)所得种子置于萌发容器内浸种培养。本发明一具体实施例中，所述杀菌液为高锰酸钾、次氯酸钠或多菌灵的水溶液，质量浓度为1-1.5％。本发明一具体实施例中，步骤1)中，种子浸泡于杀菌液中时长为1-6h。本发明一具体实施例中，步骤1)中，在对种子进行沙藏处理前，先将所用沙进行灭菌处理，灭菌处理后的沙用沙藏液溶液淋湿；所述沙藏液溶液为赤霉酸、复硝酚钠的混合水溶液，浓度为100-300mg/l，所述赤霉酸、复硝酚钠质量比为1:1-3。其中沙藏用沙以溶液淋湿，以手握成团，手松散开为度。对沙进行高温灭菌，相关灭菌技术均为现有常规技术手段。申请人研究发现种子经过长时间的沙藏处理以后，有助于增强发芽态势，特别是对一些陈化的老种子，进而提高发芽率。优选的，所述沙藏时间为8-15d。本发明一具体实施例中，步骤2)中，所述碱性溶液为质量浓度为50-60％的氢氧化钠或氢氧化钾溶液。本发明一具体实施例中，步骤2)中，用碱性溶液浸种的时长为12-28h；优选为24-26h。本发明一具体实施例中，步骤2)中，种子浸泡于杀菌液的时长为1-3h。本发明一具体实施例中，步骤3)中，在种子表面针扎多个小孔，所述小孔深度与种子种皮相当。本发明一具体实施例中，步骤3)中，在活性溶液中浸泡10-16h，所述活性溶液为吲哚乙酸、萘乙酸、葡萄糖的混合水溶液。本发明一具体实施例中，所述吲哚乙酸、萘乙酸、葡萄糖的质量比为1:1:3-6，活性溶液的浓度为3-4.5％。本发明相比现有技术有如下优点：一、本发明创新性的对种子采用长时间沙藏处理，增强了种子的萌发态势，促使种子萌发，提高萌发率。二、本发明采用多次杀菌处理，将金钱松种子进行消毒，对沙藏用沙进行高温灭菌处理，可有效降低种子在沙藏、催芽过程中的霉变。三、本发明创造性的采用沙藏处理和碱液溶液、活性溶液浸泡的配合，提高了金钱松种子的生命活性和出苗率。四、本发明提供的促进金钱松种子萌发的方法，萌发率在95％以上，且操作简单，成本低，易于人工操作，对金钱松种子育苗、规模化种植具有很高的实际应用价值。具体实施方式下面结合实施例对本发明作进一步的说明。实施例1一种促使金钱松种子萌发方法，包括以下内容：1)种子前处理：取干净的河沙，高温灭菌处理后备用，置于质量浓度为1％的高锰酸钾、次氯酸钠或多菌灵的水溶液中浸泡处理，种子浸泡于杀菌液中时长为1h，然后再取出种子晾干后进行沙藏处理；在沙藏处理钱需先将沙藏液溶液淋湿河沙；所述沙藏液溶液为赤霉酸、复硝酚钠的混合水溶液，浓度为100mg/l，所述赤霉酸、复硝酚钠质量比为1:1；2)杀菌处理：取出沙藏后的种子，用质量浓度为50％的氢氧化钠或氢氧化钾溶液浸种12h；浸种完成后用干净清水反复冲洗4次以上，直至冲洗干净，再用质量浓度为1％的高锰酸钾、次氯酸钠或多菌灵的水溶液浸泡1-3h；3)活性处理：将步骤2)所得种子先针扎多个小孔，小孔数量控制在5-10个左右，且任一小孔针扎深度与种皮厚度相当，尽可能不刺透种皮，然后置于质量浓度为3％活性溶液中浸泡10h；其中活性溶液的溶质质量比为1:1:3吲哚乙酸、萘乙酸、葡萄糖组成；4)萌发：将步骤3)所得种子置于萌发容器内浸种培养，萌发容器底部放置海绵，将海绵用蒸馏水完全浸湿后再在海绵表面上置种，每个萌发容器放置种子100粒，在温度为25±2℃的培养箱内培养发芽，光暗周期为10h/14h，每2d喷洒适量蒸馏水。实施例2一种促使金钱松种子萌发方法，包括以下内容：1)种子前处理：取干净的河沙，高温灭菌处理后备用，置于质量浓度为1.5％的高锰酸钾、次氯酸钠或多菌灵的水溶液中浸泡处理，种子浸泡于杀菌液中时长为3h，然后再取出种子晾干后进行沙藏处理；在沙藏处理钱需先将沙藏液溶液淋湿河沙；所述沙藏液溶液为赤霉酸、复硝酚钠的混合水溶液，浓度为150mg/l，所述赤霉酸、复硝酚钠质量比为1:2；2)杀菌处理：取出沙藏后的种子，用质量浓度为55％的氢氧化钠或氢氧化钾溶液浸种24h，浸种完成后用干净清水反复冲洗4次以上，直至冲洗干净，再用质量浓度为1％的高锰酸钾、次氯酸钠或多菌灵的水溶液浸泡1-3h；3)活性处理：将步骤2)所得种子先针扎多个小孔，小孔数量控制在5-10个左右，且任一小孔针扎深度与种皮厚度相当，尽可能不刺透种皮，然后置于质量浓度为4％活性溶液中浸泡14h；其中活性溶液的溶质质量比为1:1:5吲哚乙酸、萘乙酸、葡萄糖组成；4)萌发：将步骤3)所得种子置于萌发容器内浸种培养，萌发容器底部放置海绵，将海绵用蒸馏水完全浸湿后再在海绵表面上置种，每个萌发容器放置种子100粒，在温度为25±2℃的培养箱内培养发芽，光暗周期为10h/14h，每2d喷洒适量蒸馏水。实施例3一种促使金钱松种子萌发方法，包括以下内容：1)种子前处理：取干净的河沙，高温灭菌处理后备用，置于质量浓度为1.5％的高锰酸钾、次氯酸钠或多菌灵的水溶液中浸泡处理，种子浸泡于杀菌液中时长为6h，然后再取出种子晾干后进行沙藏处理；在沙藏处理钱需先将沙藏液溶液淋湿河沙；所述沙藏液溶液为赤霉酸、复硝酚钠的混合水溶液，浓度为300mg/l，所述赤霉酸、复硝酚钠质量比为1:3；2)杀菌处理：取出沙藏后的种子，用质量浓度为50-60％的氢氧化钠或氢氧化钾溶液浸种26h；浸种完成后用干净清水反复冲洗4次以上，直至冲洗干净，再用质量浓度为1.5％的高锰酸钾、次氯酸钠或多菌灵的水溶液浸泡1-3h；3)活性处理：将步骤2)所得种子先针扎多个小孔，小孔数量控制在5-10个左右，且任一小孔针扎深度与种皮厚度相当，尽可能不刺透种皮，然后置于质量浓度为4.5％活性溶液中浸泡16h；其中活性溶液的溶质质量比为1:1:6吲哚乙酸、萘乙酸、葡萄糖组成；4)萌发：将步骤3)所得种子置于萌发容器内浸种培养，萌发容器底部放置海绵，将海绵用蒸馏水完全浸湿后再在海绵表面上置种，每个萌发容器放置种子100粒，在温度为25±2℃的培养箱内培养发芽，光暗周期为10h/14h，每2d喷洒适量蒸馏水。申请人进一步的对影响种子发芽的因素进行考察：1、新种、陈种对种子萌发的影响从市场购入新收获的1年内金钱松种子、以及2年外的陈种，分别进行发芽率检测，分别取100粒种子，经消毒、温水浸泡后置于培养皿内萌发，30d后最终新种的萌发率在37％，陈种的萌发率在14％。由此可以看出陈种受细胞活性的影响萌发率远低于新种。分别取新种、陈种分别分成10组，每组100粒，然后按照实施例1中所述方法进行种子萌发，各组萌发情况如表1。表1组别20d萌发率(％)30d萌发率(％)组别20d萌发率(％)30d萌发率(％)新种18596陈种18195新种28495陈种28396新种38795陈种38095新种48696陈种47995新种58396陈种58297新种68995陈种67896新种78297陈种78196新种88496陈种88097新种98595陈种98095新种108795陈种1083962、消毒时间对种子萌发的影响取市售金钱松种子，种子前处理中采用采用1.5％的高锰酸钾溶液处理金钱松种子0h(对照组)、1h、2h、4h、6h、8h、12h后，每组100粒，培养25d统计种子萌发率和污染率，其它按照实施例1的技术方案，结果见表2。表2组别(h)萌发率(％)染菌率(％)09345195202961149536953884012750由实验可以看出，对照组萌发率仍然处于一个高水平的位置，但是染菌率同样也处于一个很高的水平；随着1.5％的高锰酸钾溶液处理时间增大，萌发率维持在一个较高的水平95％左右，但染菌率呈明显的下降趋势，特别是在4h、6h仅为3％。当浸泡处理时间继续增大，萌发率反而出现了下降。因此，本申请种子处理前杀菌消毒时间控制在1-6h较好，特别是控制在4-6h可以使萌发率保持在95％同时染菌率控制在3％左右。3、沙藏处理对种子萌发率的影响取市售金钱松种子，分为空白组(1)、仅灭菌沙藏组(2)、含50mg/l赤霉酸-复硝酚钠的混合水溶液沙藏组(3)、含100mg/l赤霉酸-复硝酚钠的混合水溶液沙藏组(4)、含150mg/l赤霉酸-复硝酚钠的混合水溶液沙藏组(5)、含300mg/l赤霉酸-复硝酚钠的混合水溶液沙藏组(6)、含400mg/l赤霉酸-复硝酚钠的混合水溶液沙藏组(7)，每组100粒，培养10d、25d统计种子萌发率和污染率，其它按照实施例1的技术方案，结果见表3，所述赤霉酸、复硝酚钠质量比为1:2。表3组别10d萌发率(％)25d萌发率(％)1728215373356844795555966549674887由实验可以看出，采用沙藏处理后的种子萌发率要高于未沙藏处理种子萌发率；而在沙藏中采用赤霉酸、复硝酚钠组成沙藏液处理的沙藏组的萌发率高于仅采用仅高温灭菌用蒸馏水喷湿河沙的沙藏组。浓度低于100mg/l时种子萌发率仅能达到68％，而达到400mg/l时萌发率反而出现了下降，为87％。因此，本申请选择浓度为100-300mg/l，更进一步得为150-300mg/l。复硝酚钠是一种强力细胞赋活剂，与重楼种子接触后能迅速渗透到种子内，促进细胞的原生质流动，提高细胞活力。促进种子萌发过程中对各种激素和营养成分的吸收，同时也促进浸种药剂各组分进入种子细胞内。研究发现，单独使用赤霉酸或者是复硝酚钠，种子的萌发率都有一定小幅度的下降，大约为3-7％。4、沙藏与碱液浸泡的组合对种子萌发率的影响取市售金钱松种子，分为仅灭菌沙藏组(1)、仅含沙藏液沙藏组(2)、仅含碱液组(3)、含沙藏液沙藏-碱液组(4)、含仅灭菌沙藏-碱液组(5)，每组100粒，培养10d、25d统计种子萌发率和污染率，其它按照实施例1的技术方案，结果见表4，其中仅含沙藏组所述赤霉酸、复硝酚钠质量比为1:2，浓度为150mg/l，碱液为60％的氢氧化钠溶液。表4组别10d萌发率(％)25d萌发率(％)1153724088336804559654281由实验可以看出，仅采用灭菌河沙沙藏、仅碱液浸泡处理的种子萌发率均低于同时含有沙藏液沙藏与碱液浸泡的组合。以上所述，仅为本发明的具体实施方式，但本发明的保护范围并不局限于此，任何熟悉本领域的技术人员在本发明所揭露的技术范围内，可不经过创造性劳动想到的变化或替换，都应涵盖在本发明的保护范围之内。因此，本发明的保护范围应该以权利要求书所限定的保护范围为准。当前第1页12