本发明涉及芦竹培育技术领域，尤其涉及利用花培单倍体培育芦竹的方法。
背景技术：
芦竹(arundodonax)禾本科、芦竹属多年生植物，具发达根状茎，秆粗大直立、坚韧，具多数节，常生分枝，可用于饲料、乙醇、造纸、发电和环境修复等多种行业。
现有芦竹繁殖有播种、分株、扦插等方法，一般以分株方法为主；通常是早春时用快揪沿植物四周切成有4-5个芽一丛，然后移植；这种方法繁殖速度慢、种苗易带毒，且劳动强度大、运输不便，造林成本高，难以在短时间内解决种苗供应紧缺的问题，不利于芦竹的产业化生产。相对于传统的方法，利用组培技术对芦竹进行繁殖，能够短时间内获得大量整齐一致的无病毒种苗，种苗生长优势明显，是芦竹种苗产业化繁育的一种有效途径。
多倍体育种是植物新品种培育的重要手段，多倍体育种起源于20世纪初，现在已广泛应用于植物新品种的培育中。多倍体由于基因组倍性的增加，往往表现出形态上的巨大性和抗性增强等特点。其中三倍体还具有不育特点，即可作为永久杂种，也有利于商业保护；通过基因组三倍化，可以获得具有多倍体和杂交种双重优势的三倍体，其优势表现出具有巨大性和不可替代性。
技术实现要素：
基于背景技术存在的技术问题，本发明提出了利用花培单倍体培育芦竹的方法，提高了芦竹的抗逆性,缩短了芦竹的培育周期。
本发明提出的利用花培单倍体培育芦竹的方法，方法步骤如下：
s1：将抗逆性好、植株大的芦竹上处于单核靠边期的花芽取下，然后进行消毒处理，将消毒处理后的花芽在解剖镜下取出花药；
s2：将s1所得花药接种在愈伤组织培养基上进行愈伤组织诱导培养，所述愈伤组织培养基的配方为1/2ms+naa0.1-0.15mg/l+蔗糖6-8g/l+椰乳5-10g/l+萘乙酸0.05-0.1mg/l+6-ba(2-4mg/l)；
s3：将s2培养获得的芦竹愈伤组织接种于不定芽分化培养基上进行分化培育，获得芦竹不定芽，所述分化培养基的配方为1/2ms+naa0.1-0.15mg/l+cppu(0.8-1.2mg/l)+椰乳5-10g/l+6-ba(0.1-0.15mg/l)+萘乙酸0.05-0.1mg/l+2、4-d(1-3mg/l)+蔗糖6-8g/l；
s4：将s3所得的芦竹不定芽接种于生根培养基上进行生根培养，所述生根培养基的配方为：ms+naa0.1-0.15mg/l+蔗糖6-8g/l+椰乳5-10g/l+萘乙酸0.05-0.1mg/l+海泡石0.5-1.5g/l+活性炭0.8-2.0g/l；
s5：经过倍性鉴定，获得芦竹单倍体植株。
优选地，所述s1中的消毒处理方法为：首先对取下的花芽用无菌水冲洗，然后再用酒精浸泡20-40min，然后再用次氯酸钠对花芽进行表面灭菌，最后再用无菌水冲洗，并喜感花芽表面的水分。
优选地，所述s2中愈伤组织的培养条件为：黑暗条件，温度25±2℃。
优选地，所述s3中分化培养的条件为：培养温度25±2℃，光照时间为10-14h/d，光照强度2000-3000lux，色温4500-5500k。
优选地，所述s4中生根培养的条件为：培养温度在25-18℃的昼夜温差范围内，光照时间为10-14h/d，光照强度2000-3000lux，色温4500-5500k。
与现有技术相比，本发明的有益效果是：本发明通过芦竹的花培来获得单倍体幼苗，提高了芦竹的抗逆性，缩短了芦竹培育的周期；愈伤组织所用的培养基为1/2ms+naa0.1-0.15mg/l+蔗糖6-8g/l+椰乳5-10g/l+萘乙酸0.05-0.1mg/l+6-ba(2-4mg/l)，分化培养基为1/2ms+naa0.1-0.15mg/l+cppu(0.8-1.2mg/l)+椰乳5-10g/l+6-ba(0.1-0.15mg/l)+萘乙酸0.05-0.1mg/l+2、4-d(1-3mg/l)+蔗糖6-8g/l，生根培养基为ms+naa0.1-0.15mg/l+蔗糖6-8g/l+椰乳5-10g/l+萘乙酸0.05-0.1mg/l+海泡石0.5-1.5g/l+活性炭0.8-2.0g/l，以上述培养基培养获得的芦竹幼苗的性能得到很大的提高。
具体实施方式
下面结合具体实施例对本发明作进一步解说。
实施例1
本发明提出的利用花培单倍体培育芦竹的方法，方法步骤如下：
s1：将抗逆性好、植株大的芦竹上处于单核靠边期的花芽取下，然后进行消毒处理，将消毒处理后的花芽在解剖镜下取出花药，消毒处理方法为：首先对取下的花芽用无菌水冲洗，然后再用酒精浸泡20min，然后再用次氯酸钠对花芽进行表面灭菌，最后再用无菌水冲洗，并喜感花芽表面的水分；
s2：将s1所得花药接种在愈伤组织培养基上进行愈伤组织诱导培养，所述愈伤组织培养基的配方为1/2ms+naa0.1mg/l+蔗糖6g/l+椰乳5g/l+萘乙酸0.05mg/l+6-ba(2mg/l)，培养条件为：黑暗条件，温度25±2℃；
s3：将s2培养获得的芦竹愈伤组织接种于不定芽分化培养基上进行分化培育，获得芦竹不定芽，所述分化培养基的配方为1/2ms+naa0.1mg/l+cppu(0.8mg/l)+椰乳5g/l+6-ba(0.1mg/l)+萘乙酸0.05mg/l+2、4-d(1mg/l)+蔗糖6g/l，分化培养的条件为：培养温度25±2℃，光照时间为10h/d，光照强度2000lux，色温4500k；
s4：将s3所得的芦竹不定芽接种于生根培养基上进行生根培养，所述生根培养基的配方为：ms+naa0.1mg/l+蔗糖6g/l+椰乳5g/l+萘乙酸0.05mg/l+海泡石0.5g/l+活性炭0.8g/l，生根培养的条件为：培养温度在25-18℃的昼夜温差范围内，光照时间为10h/d，光照强度2000lux，色温4500k；
s5：经过倍性鉴定，获得芦竹单倍体植株。
实施例2
本发明提出的利用花培单倍体培育芦竹的方法，方法步骤如下：
s1：将抗逆性好、植株大的芦竹上处于单核靠边期的花芽取下，然后进行消毒处理，将消毒处理后的花芽在解剖镜下取出花药，消毒处理方法为：首先对取下的花芽用无菌水冲洗，然后再用酒精浸泡40min，然后再用次氯酸钠对花芽进行表面灭菌，最后再用无菌水冲洗，并喜感花芽表面的水分；
s2：将s1所得花药接种在愈伤组织培养基上进行愈伤组织诱导培养，所述愈伤组织培养基的配方为1/2ms+naa0.15mg/l+蔗糖8g/l+椰乳10g/l+萘乙酸0.1mg/l+6-ba(4mg/l)，培养条件为：黑暗条件，温度25±2℃；
s3：将s2培养获得的芦竹愈伤组织接种于不定芽分化培养基上进行分化培育，获得芦竹不定芽，所述分化培养基的配方为1/2ms+naa0.15mg/l+cppu(1.2mg/l)+椰乳10g/l+6-ba(0.15mg/l)+萘乙酸0.1mg/l+2、4-d(3mg/l)+蔗糖8g/l，分化培养的条件为：培养温度25±2℃，光照时间为14h/d，光照强度3000lux，色温5500k；
s4：将s3所得的芦竹不定芽接种于生根培养基上进行生根培养，所述生根培养基的配方为：ms+naa0.15mg/l+蔗糖8g/l+椰乳10g/l+萘乙酸0.1mg/l+海泡石1.5g/l+活性炭2.0g/l，生根培养的条件为：培养温度在25-18℃的昼夜温差范围内，光照时间为14h/d，光照强度3000lux，色温5500k；
s5：经过倍性鉴定，获得芦竹单倍体植株。
实施例3
本发明提出的利用花培单倍体培育芦竹的方法，方法步骤如下：
s1：将抗逆性好、植株大的芦竹上处于单核靠边期的花芽取下，然后进行消毒处理，将消毒处理后的花芽在解剖镜下取出花药，消毒处理方法为：首先对取下的花芽用无菌水冲洗，然后再用酒精浸泡30min，然后再用次氯酸钠对花芽进行表面灭菌，最后再用无菌水冲洗，并喜感花芽表面的水分；
s2：将s1所得花药接种在愈伤组织培养基上进行愈伤组织诱导培养，所述愈伤组织培养基的配方为1/2ms+naa0.12mg/l+蔗糖7g/l+椰乳8g/l+萘乙酸0.08mg/l+6-ba(3mg/l)，培养条件为：黑暗条件，温度25±2℃；
s3：将s2培养获得的芦竹愈伤组织接种于不定芽分化培养基上进行分化培育，获得芦竹不定芽，所述分化培养基的配方为1/2ms+naa0.12mg/l+cppu(1.0mg/l)+椰乳8g/l+6-ba(0.12mg/l)+萘乙酸0.08mg/l+2、4-d(2mg/l)+蔗糖7g/l，分化培养的条件为：培养温度25±2℃，光照时间为12h/d，光照强度2500lux，色温5000k；
s4：将s3所得的芦竹不定芽接种于生根培养基上进行生根培养，所述生根培养基的配方为：ms+naa0.12mg/l+蔗糖7g/l+椰乳8g/l+萘乙酸0.08mg/l+海泡石1.0g/l+活性炭1.4g/l，生根培养的条件为：培养温度在25-18℃的昼夜温差范围内，光照时间为12h/d，光照强度2500lux，色温5000k；
s5：经过倍性鉴定，获得芦竹单倍体植株。
实施例4
本发明提出的利用花培单倍体培育芦竹的方法，方法步骤如下：
s1：将抗逆性好、植株大的芦竹上处于单核靠边期的花芽取下，然后进行消毒处理，将消毒处理后的花芽在解剖镜下取出花药，消毒处理方法为：首先对取下的花芽用无菌水冲洗，然后再用酒精浸泡20min，然后再用次氯酸钠对花芽进行表面灭菌，最后再用无菌水冲洗，并喜感花芽表面的水分；
s2：将s1所得花药接种在愈伤组织培养基上进行愈伤组织诱导培养，所述愈伤组织培养基的配方为1/2ms+naa0.1mg/l+蔗糖8g/l+椰乳5g/l+萘乙酸0.05mg/l+6-ba(4mg/l)，培养条件为：黑暗条件，温度25±2℃；
s3：将s2培养获得的芦竹愈伤组织接种于不定芽分化培养基上进行分化培育，获得芦竹不定芽，所述分化培养基的配方为1/2ms+naa0.1mg/l+cppu(1.2mg/l)+椰乳10g/l+6-ba(0.12mg/l)+萘乙酸0.08mg/l+2、4-d(2mg/l)+蔗糖6g/l，分化培养的条件为：培养温度25±2℃，光照时间为12h/d，光照强度2000lux，色温5500k；
s4：将s3所得的芦竹不定芽接种于生根培养基上进行生根培养，所述生根培养基的配方为：ms+naa0.1mg/l+蔗糖6g/l+椰乳10g/l+萘乙酸0.1mg/l+海泡石0.5g/l+活性炭0.8g/l，生根培养的条件为：培养温度在25-18℃的昼夜温差范围内，光照时间为10h/d，光照强度3000lux，色温5500k；
s5：经过倍性鉴定，获得芦竹单倍体植株。
实施例5
本发明提出的利用花培单倍体培育芦竹的方法，方法步骤如下：
s1：将抗逆性好、植株大的芦竹上处于单核靠边期的花芽取下，然后进行消毒处理，将消毒处理后的花芽在解剖镜下取出花药，消毒处理方法为：首先对取下的花芽用无菌水冲洗，然后再用酒精浸泡30min，然后再用次氯酸钠对花芽进行表面灭菌，最后再用无菌水冲洗，并喜感花芽表面的水分；
s2：将s1所得花药接种在愈伤组织培养基上进行愈伤组织诱导培养，所述愈伤组织培养基的配方为1/2ms+naa0.1mg/l+蔗糖8g/l+椰乳8g/l+萘乙酸0.05mg/l+6-ba(4mg/l)，培养条件为：黑暗条件，温度25±2℃；
s3：将s2培养获得的芦竹愈伤组织接种于不定芽分化培养基上进行分化培育，获得芦竹不定芽，所述分化培养基的配方为1/2ms+naa0.15mg/l+cppu(1.2mg/l)+椰乳10g/l+6-ba(0.1mg/l)+萘乙酸0.08mg/l+2、4-d(1mg/l)+蔗糖6g/l，分化培养的条件为：培养温度25±2℃，光照时间为12h/d，光照强度2000lux，色温5000k；
s4：将s3所得的芦竹不定芽接种于生根培养基上进行生根培养，所述生根培养基的配方为：ms+naa0.12mg/l+蔗糖7g/l+椰乳8g/l+萘乙酸0.08mg/l+海泡石0.5g/l+活性炭1.6g/l，生根培养的条件为：培养温度在25-18℃的昼夜温差范围内，光照时间为12h/d，光照强度2000lux，色温5500k；
s5：经过倍性鉴定，获得芦竹单倍体植株。
以上所述，仅为本发明较佳的具体实施方式，但本发明的保护范围并不局限于此，任何熟悉本技术领域的技术人员在本发明揭露的技术范围内，根据本发明的技术方案及其发明构思加以等同替换或改变，都应涵盖在本发明的保护范围之内。