一种水稻种子消毒的装置的制作方法

本实用新型主要涉及种子消毒技术领域，尤其是涉及一种水稻种子消毒的装置。

背景技术：

水稻作为全球的主要粮食作物之一，其生产过程中受到病虫害的威胁对其产量造成巨大的损失。自上世纪80年代以来，人们利用基因工程的手段成功的将外源基因导入水稻，成功培育出一批抗虫、抗病、抗逆的转基因水稻，极大缓解了粮食安全问题。近年来以CRISPR-cas9为代表的基因编辑新技术的出现，极大促进了对水稻基因功能的研究。然而如何快速对大量“珍贵”的转基因材料进行无菌培养是对基因功能学分析的第一步。目前对转基因水稻种子消毒的方法主要采用移液枪加、取消毒试剂，中间操作步骤较多，时间长，浪费实验耗材而且容易污染，造成“珍贵”样品的丢失，因此这种操作方法不适用对大量水稻种子的快速消毒处理。

技术实现要素：

本实用新型的目的是提供一种水稻种子消毒的装置，以解决现有水稻种子消毒方法不适合大规模、快速对种子进行消毒、无菌培养的缺陷

本实用新型的技术方案如下：

本实用新型的一种水稻种子消毒的装置，包括锥形瓶形状的抽滤瓶，该抽滤瓶的顶部连接一根软管，该抽滤瓶的瓶颈下方侧面设有一个细颈并在该细颈处通过一根连接管与一个真空泵连接，所述真空泵设有气压表、排气扇和用于调节真空气压的调节旋钮；所述软管的另一端连接一个用于从离心管中吸取消毒液的移液枪枪头，所述离心管设置在离心管板上的离心管孔中。

其中，所述离心管板为矩形板状结构，其顶部成排布置离心管孔。所述软管穿过所述抽滤瓶顶部的瓶盖并伸入到抽滤瓶内部。所述真空泵设有把手。

一种采用该装置进行水稻种子消毒的方法，包括如下步骤：

S1,通过连接管把抽滤瓶与真空泵抽气口相连；

S2,在抽滤瓶顶部的软管另一端处置入1个移液枪枪头；

S3,将待消毒的水稻种子去壳；

S4,将离心管板放在超净工作台上，把去壳的种子置于的离心管中；

S5,在离心管中加入的酒精，上下混匀；

S6,启动真空泵，吸取酒精；

S7,用无菌水清洗3次，并用真空泵吸取水；

S8,在离心管中加次氯酸钠溶液，颠倒混匀，静止；

S9,真空泵吸取废液；

S10,重复步骤S7；

S11,用灭菌的镊子把消毒的种子均匀平铺在1/2MS培养基，并置于光照培养箱培养。

优选的，所用的消毒液与处理时间依次为75％的酒精处理1分钟和40％次氯酸钠处理30分钟。

本实用新型提到的种子不限于水稻种子，也可以是小麦，大麦等种子，消毒液的消毒时间需要根据实际情况进行调整。本实用新型提到的抽滤瓶不限于1000毫升，也可以是300毫升，500毫升等，可以根据需要进行选取。

本实用新型的技术优势是：与一般水稻种子消毒方法相比，有以下优点：1)无需反复使用移液枪，极大减少工作量；2)无需频繁更换枪头，减少浪费；3)对批量样品的做操更为节省精力；4)简化操作步骤，更为高效。

附图说明

图1是本实用新型的消毒装置结构示意图。

附图标记说明：1-抽滤瓶，2-离心管板，3-离心管，4-离心管孔，5-软管，6-细颈，7-连接管，8-气压，9-真空泵，10-排气扇，11-调节旋钮，12-把手，13-移液枪枪头。

具体实施方式

下面结合附图和实施例对本实用新型作进一步说明，但不作为对本实用新型的任何限制。

请先看图1，本实用新型的装置，主要包括一个抽滤瓶1、一个离心管板2和一个真空泵9。抽滤瓶1起收集废液的作用，抽滤瓶1通过软管5连接移液枪枪头13，移液枪枪头13起着从离心管3中吸取消毒液的作用，离心管板2起支撑、放置离心管3的作用，待消毒的水稻种子放置在离心管3中，离心管板2上的离心管孔4用于放置离心管3，软管5用于吸取和输送离心管3中的废液到抽滤瓶1中，细颈6起连接连接管7的作用，连接管7起连接抽滤瓶1和真空泵9的作用，连接管7和软管5可以采用同样的柔性管道；气压表8起指示气压值的作用。真空泵9的排气扇10对真空泵9起散热作用。调节旋钮11是真空气压调节装置。把手12起方便移动真空泵9的作用。

实施例1：

CRISPR-cas9基因编辑技术是一种快速、精确对基因功能进行研究的手段，其系统组成主要包括不连续的重复序列R(repeat)与长度相似的间区序列S(spacers)间隔排列而成的CRISPR簇，前导序列L(leader)以及CRISPR相关蛋白基因cas9。

利用CRISPR-cas9基因编辑技术对水稻日本晴(Nipponbare)中的转录因子WRKY家族成员进行基因敲除，对收获的T0代种子在超净工作台进行消毒培养。

用橡皮软管连接1000毫升的抽滤瓶1与真空泵9(WELCH,Model 2522c-02)，在连接抽滤瓶1的另一端的软管5接头处安装1个1毫升移液器枪头13；对60个系的转基因T0代种子去壳后分别放入2毫升离心管3中，并在管盖上做好编号；

将编号的离心管3置于超净工作台中的离心管板2上；用移液枪给每个离心管3中加入1毫升75％酒精，上下混匀，静置1分钟；启动真空泵9，吸取酒精；

用灭菌蒸馏水冲洗3次，用真空泵9吸取废液；加入40％次氯酸钠，上下颠倒混匀，静置30分钟；用灭菌蒸馏水冲洗3次，用真空泵9吸取废液；

用镊子把60个系的转基因材料分别移入1/2MS培养基，置于光照培养箱培养7天，发现所有材料都没有污染，长势良好。

以上只是本实用新型的具体应用范例，本实用新型还有其他的实施方式，凡采用等同替换或等效变换形成的技术方案，均落在本实用新型所要求的保护范围之内。