一种真姬菇工厂化栽培菌种及其栽培方法与流程

本发明涉及食用菌工厂化生产的工艺技术领域中的一种真姬菇工厂化栽培菌种及其栽培方法，特别涉及食用菌的工厂化瓶栽菌种制备及其栽培方法。

背景技术：

真姬菇(hypsizygusmarmoreus)，因它具有独特的蟹鲜味，故有人称它为海鲜菇。目前栽培的有浅灰色和纯白色两个品系，白色品系又称"白玉菇"、"玉龙菇"，深受市场欢迎，多为工厂化栽培。该菇营养丰富，是一种非常珍贵的食用菌。

真姬菇的生物特性：真姬菇子实体丛生，每丛15-50株不等，有时散生，散生时数量少而菌盖大。菌盖幼时呈半球形，边缘内卷后逐渐平展，直径4-15厘米，近白色至灰褐色，中央带有深色大理石状斑纹。菌褶近白色，与菌柄成圆头状直生，密集至稍稀。菌柄长3-10厘米，粗0.3-0.6厘米，偏生或中生。孢子阔卵形至近球形，显微镜下透明，成堆时白色。菌丝发育温度范围为9-30℃，适温22-24℃；子实体原基分化在4-18℃，生长适温10-14℃；培养料含水量在65%左右为宜，出菇前补充水分，使含水量达70-75%。菇蕾分化期，菇房相对湿度98-100%为宜。菇体发育期菇房相对湿度90-95%；菌丝生长阶段不需要光，但菇蕾分化期应有弱光刺激。子实体生长有向光性，如在地下室或山洞栽培，每昼夜应开日光灯10-15小时；真姬菇生长的各阶段需要新鲜空气，尤其是原基大量发生时每小时应通风4-8次；菌丝生长阶段的最适ph值6.5-7.5。真姬菇是北温带秋季和冬季发生的食用蕈菌。

真姬菇的发育特性：真姬菇的菌丝体白色，棉毛状，气生菌丝不旺盛，不分泌黄色液滴，不形成菌皮。在培养程中可产生节孢子和厚垣孢子。真姬菇抗逆性较强，其生活条件与香菇、平菇等其它木腐菌有许多共同之处，但也有不同之处，而且真姬菇的不同菌株对各种生活条件的需求不完全相同。营养上真姬菇是一种低温型的木腐菌，栽培原料比较广，如木屑、玉米芯、甘蔗渣和棉籽壳等都可作为主要原料，以用棉籽壳的产量最高。在栽培过程中加少量的辅料，如米糠、麸皮、大豆皮、棉籽饼和玉米粉等可以提高单产。温度上真姬菇与金针菇、滑菇、香菇和平菇等一样具有变温结实特性。真姬菇发菌需30-45天，菌丝成熟达到有出菇能力要30-60天，菇蕾分化需7-12天，子实体发育成长约5-7天。时间控制应根据不同菌种和温度适当伸缩。细致观察，及时控制，是栽培成败和质量高低的关键。

专利号201710213080.2公开了一种真姬菇栽培方法，该栽培方法存在的问题是:栽培料含35份的木屑，现在东北地区木屑量少，价格高；发菌时间为120天，生产周期长；固体种生产周期长。

专利号201810011228.9公开了一种真姬菇菌株及其培养方法，该菌株及其培养方法存在的问题是：固体菌种，生产周期长，70-78天。

专利号201810530728.3公开了一种双色真姬菇栽培方法，该栽培方法存在的问题是，栽培料含48.1%的木屑，现在东北地区木屑量少，价格高；固体菌种生产周期长。

现有技术中真姬菇的栽培方法：在营养、培养料配方、接种发菌、温度、水分、光线、空气、ph值、出菇管理等方面还存在一些问题。生产周期长，产品价格高。因此，研制开发一种真姬菇工厂化栽培菌种及其栽培方法一直是急待解决的课题。

技术实现要素：

本发明的目的在于提供一种真姬菇工厂化栽培菌种及其栽培方法，解决存在的问题是，实现腐生菌进行工厂化栽培，以工厂化瓶栽真姬菇生产的菌种，经人工培育后用于真姬菇的工厂化生产。

本发明的真姬菇（hypsizygusmarmoreus）hs-xw08，已经于2017年7月27日保藏在中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心，简称cgmcc,地址为北京市朝阳区北辰西路1号院3号。保藏编号为：cgmccno.14541。

本发明的真姬菇（hypsizygusmarmoreus）hs-xw08经中科院微生物研究所的培养特征、显微特征以及rrna基因序列等实验数据综合分析，确认hs-xw08的鉴定结果为hypsizygusmarmoreus真姬菇。

本发明的目的是这样实现的：一种真姬菇工厂化栽培菌种，所述的真姬菇工厂化栽培菌种为真姬菇hs-xw08，保藏编号为：cgmccno.14541；

所述的一种真姬菇工厂化栽培菌种的rrna基因序列是：

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所述的一种真姬菇工厂化栽培菌种的栽培方法是以真姬菇hs-xw08为母种进行培育、发菌、出菇管理及采收的：

（1）真姬菇工厂化栽培菌种生产工艺流程：

①培养皿f1代菌种制备和培养：配制马铃薯葡萄糖琼脂培养基（pda），即固体培养基，121℃15min进行灭菌，分装至培养皿中，将母种转接到平皿培养基中，培养温度20-22℃，培养16-18天；

②三角瓶f2代液体菌种制备和培养：配制液体培养基，在1000ml水中加入白糖20g、豆粕粉5g、玉米粉4g、酵母粉2g、硫酸镁1g、磷酸二氢钾1g；将液体培养基装入1000ml的三角瓶中，每个三角瓶装液体培养基600ml，放入高压灭菌锅中，温度121℃，时间15min进行灭菌，将生长状态较好母种培养皿f1代菌种接种到三角瓶中，放置在摇床上，温度20-22℃，120转/分钟，黑暗培养，10-12天；

③发酵罐备料、灭菌和冷却：发酵罐培养液：在1000ml水中加入白糖25g、豆粕粉4g、玉米粉3g、硫酸镁1g、磷酸二氢钾1g、消泡剂0.3ml、自然ph值，进行高温高压灭菌，通气水淋至20-22℃；

④发酵罐f3代菌种制备和培养：将f2代菌种转接到发酵罐内形成f3代菌种，温度20-22℃，通气量为1.2-1.7m³/h，培养8-10天；

（2）真姬菇工厂化栽培方法工艺流程：

①栽培料配料、搅拌、装瓶：采用瓶栽工厂化培养时，将母种培育出原种和栽培种，再将栽培种接种到瓶装栽培料上；

②灭菌釜，将栽培瓶装车，推入灭菌釜进行高温高压灭菌；

③预冷室，料瓶预冷；

④冷却室，料瓶降温，逐步冷却，降温至20-22℃；

⑤接种机室，将发酵罐f3代菌种通过液态接种机，接种至栽培瓶中，接种量为30-35g；

⑥培养室，发菌管理，将接种后的栽培瓶转移至培养室，进行黑暗培养，适当通入新风，培养90天，温度22-24℃，湿度70-85%，二氧化碳浓度2500-4500ppm；

⑦搔菌、洗菌、加水，栽培瓶中菌丝长满后，进行机械搔菌洗菌，去掉老化菌层；

⑧栽培车间,生育管理,周期30天，温度14-16℃，湿度85-100%，二氧化碳浓度2000-3500ppm；

⑨包装车间，采收管理；

⑩入库，4℃储存；

所述的真姬菇工厂化栽培菌种的栽培方法，所述的真姬菇栽培料配方由以下各组分重量配比制成1000g培养料：玉米芯140g，棉籽壳35g，米糠70g，麸皮52.5g，玉米粉35g，贝化石10.5g，碳酸钙7g,水650g；ph7.0。

本发明的真姬菇（hypsizygusmarmoreus）hs-xw08具有以下特性：

真姬菇(hypsizygusmarmoreus)，又名玉蕈、斑玉蕈、荷叶离褶伞。因它具有独特的蟹鲜味，故有人称它为蟹味菇、海鲜菇。

本发明的有益效果：真姬菇（hypsizygusmarmoreus）hs-xw08营养丰富，据分析每100克鲜菇中含粗蛋白3.22克、粗脂肪0.22克、粗灰色真姬菇纤维1.68克、碳水化合物4.56克、灰分1.32克，磷、铁、锌、钙、钾、钠的含量非常丰富，维生素b1、b2、b6、c的含量也较一般菇类高，是一种非常珍贵的食用菌。

本发明的产品栽培的有浅灰色和纯白色两个品系，白色品系又称"白玉菇"、"玉龙菇"，深受市场欢迎。多为工厂化栽培。

附图说明

下面结合附图及实施例对本发明进行详细说明。

图1是本发明的真姬菇工厂化栽培菌种生产工艺流程图。

图2是本发明的真姬菇工厂化栽培方法工艺流程图。

图3是本发明在显微镜下菌丝情况图。

图4是本发明的三角瓶菌种培养图。

图5是本发明的发酵罐菌种1培养图。

图6是本发明的发酵罐菌种2培养图。

图7是本发明的瓶栽发菌1情况图。

图8是本发明的瓶栽发菌2情况图。

图9是本发明的瓶栽出菇情况图。

图10是本发明的平板菌种培养图。

图11是本发明的接种设备图。

图12是本发明的搔菌前图。

图13是本发明的搔菌后图。

图14是本发明的采收真姬菇图。

图15是本发明的采收真姬菇称重图。

具体实施方式

本发明的真姬菇（hypsizygusmarmoreus）hs-xw08，已经于2017年7月27日保藏在中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心，简称cgmcc,地址为北京市朝阳区北辰西路1号院3号。保藏编号为：cgmccno.14541。

本发明的真姬菇（hypsizygusmarmoreus）hs-xw08经中科院微生物研究所的培养特征、显微特征以及rrna基因序列等实验数据综合分析，确认hs-xw08的鉴定结果为hypsizygusmarmoreus真姬菇。

一种真姬菇工厂化栽培菌种，所述的真姬菇工厂化栽培菌种为真姬菇hs-xw08，保藏编号为：cgmccno.14541。

所述的真姬菇工厂化栽培菌种，所述的一种真姬菇工厂化栽培菌种的rrna基因序列是：

3’-agagttgtcccgtgaaggggacggttagaagctgaacccataattaaagctgcttcgcaatggcgtagataattatcacaccagagctggtcaacaaaggttccgctaatgcatttaaggagagccgacttctgagaagcccgcaacccccacatccaagcctgaccaagctantaaaagctggaaaggttgagaatttaatgacactcaaacaggcatgctcctcggaataccaaggagcgcaaggtgcgttcaaagattcgatgattcactgaattctgcaattcacattacttatcgcatttcgctgcgctgcgttcttcatcgatgcgagagccaagagatccgttgttgaaagttgtatttgatttaaaggcactaaggcccattaaagacattcagttacattcatggggtatataaagacatagaccgggaacgcaaggaaagccggcttttcagcagcggcaatcctcaaaccgagttacctcgagaggtgttccaggtctacaaagggtgcacaggtggtaaaaatgtgtcaggcgtgcacatgctcctaagagccagcaacaacccaaacaagtttattcaataatgatccttccgcaggttcacctacggaaaccttgtt-5’。

实施例一

所述的真姬菇工厂化栽培菌种的栽培方法，所述的一种真姬菇工厂化栽培菌种的栽培方法是以真姬菇hs-xw08为母种进行培育、发菌、出菇管理及采收的：

（1）真姬菇工厂化栽培菌种生产工艺流程（详见附图1）：

①培养皿f1代菌种制备和培养：配制马铃薯葡萄糖琼脂培养基（pda），即固体培养基，121℃15min进行灭菌，分装至培养皿中，将母种（子实体）转接到平皿培养基中，培养温度20℃，培养16天；

②三角瓶f2代液体菌种制备和培养：配制液体培养基，在1000ml水中加入白糖20g、豆粕粉5g、玉米粉4g、酵母粉2g、硫酸镁1g、磷酸二氢钾1g；将液体培养基装入1000ml的三角瓶中，每个三角瓶装液体培养基600ml，放入高压灭菌锅中，温度121℃，时间15min进行灭菌，将生长状态较好母种培养皿f1代菌种接种到三角瓶中，放置在摇床上，温度20℃，120转/分钟，黑暗培养，10天；

③发酵罐备料、灭菌和冷却：发酵罐培养液：在1000ml水中加入白糖25g、豆粕粉4g、玉米粉3g、硫酸镁1g、磷酸二氢钾1g、消泡剂0.3ml、自然ph值，进行高温高压灭菌，通气水淋至20℃；

④发酵罐f3代菌种制备和培养：将f2代菌种转接到发酵罐内形成f3代菌种，温度20℃，通气量为1.2m³/h，培养8天；

（2）真姬菇工厂化栽培方法工艺流程（详见附图2）：

①栽培料配料、搅拌、装瓶：采用瓶栽工厂化培养时，将母种培育出原种和栽培种，再将栽培种接种到瓶装栽培料上；真姬菇栽培料配制：玉米芯140g，棉籽壳35g，米糠70g，麸皮52.5g，玉米粉35g，贝化石10.5g，碳酸钙7g,水650g；ph7.0。

②灭菌釜，将栽培瓶装车，推入灭菌釜进行高温高压灭菌；

③预冷室，料瓶预冷；

④冷却室，料瓶降温，逐步冷却，降温至20℃；

⑤接种机室，将发酵罐f3代菌种通过液态接种机，接种至栽培瓶中，接种量为30g；

⑥培养室，发菌管理，将接种后的栽培瓶转移至培养室，进行黑暗培养，适当通入新风，培养90天，温度22℃，湿度70%，二氧化碳浓度2500ppm；

⑦搔菌、洗菌、加水，栽培瓶中菌丝长满后，进行机械搔菌洗菌，去掉老化菌层；

⑧栽培车间,生育管理,周期30天，温度14℃，湿度85%，二氧化碳浓度2000ppm；

⑨包装车间，采收管理；

⑩入库，4℃储存。

实施例二

所述的真姬菇工厂化栽培菌种的栽培方法，所述的一种真姬菇工厂化栽培菌种的栽培方法是以真姬菇hs-xw08为母种进行培育、发菌、出菇管理及采收的：

（1）真姬菇工厂化栽培菌种生产工艺流程（详见附图1）：

①培养皿f1代菌种制备和培养：配制马铃薯葡萄糖琼脂培养基（pda），即固体培养基，121℃15min进行灭菌，分装至培养皿中，将母种（子实体）转接到平皿培养基中，培养温度22℃培养，18天；

②三角瓶f2代液体菌种制备和培养：配制液体培养基，在1000ml水中加入白糖20g、豆粕粉5g、玉米粉4g、酵母粉2g、硫酸镁1g、磷酸二氢钾1g；将液体培养基装入1000ml的三角瓶中，每个三角瓶装液体培养基600ml，放入高压灭菌锅中，温度121℃，时间15min进行灭菌，将生长状态较好母种培养皿f1代菌种接种到三角瓶中，放置在摇床上，温度22℃，120转/分钟，黑暗培养，12天；

③发酵罐备料、灭菌和冷却：发酵罐培养液：在1000ml水中加入白糖25g、豆粕粉4g、玉米粉3g、硫酸镁1g、磷酸二氢钾1g、消泡剂0.3ml、自然ph值，进行高温高压灭菌，通气水淋至22℃；

④发酵罐f3代菌种制备和培养：将f2代菌种转接到发酵罐内形成f3代菌种，温度22℃，通气量为1.7m³/h，培养10天；

（2）真姬菇工厂化栽培方法工艺流程（详见附图2）：

①栽培料配料、搅拌、装瓶：采用瓶栽工厂化培养时，将母种培育出原种和栽培种，再将栽培种接种到瓶装栽培料上；真姬菇栽培料配制：玉米芯140g，棉籽壳35g，米糠70g，麸皮52.5g，玉米粉35g，贝化石10.5g，碳酸钙7g,水650g；ph7.0。

②灭菌釜，将栽培瓶装车，推入灭菌釜进行高温高压灭菌；

③预冷室，料瓶预冷；

④冷却室，料瓶降温，逐步冷却，降温至22℃；

⑤接种机室，将发酵罐f3代菌种通过液态接种机，接种至栽培瓶中，接种量为35g；

⑥培养室，发菌管理，将接种后的栽培瓶转移至培养室，进行黑暗培养，适当通入新风，培养90天，温度24℃，湿度85%，二氧化碳浓度4500ppm；

⑦搔菌、洗菌、加水，栽培瓶中菌丝长满后，进行机械搔菌洗菌，去掉老化菌层；

⑧栽培车间,生育管理,周期30天，温度16℃，湿度100%，二氧化碳浓度3500ppm；

⑨包装车间，采收管理；

⑩入库，4℃储存。

序列表

<110>沈阳恒生生物科技发展有限公司沈阳恒生农业发展有限公司

<120>一种真姬菇工厂化栽培菌种及其栽培方法

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