本发明属于种子培养基
技术领域：
，具体地说，涉及一种添加天然植物激素的铁皮石斛种子培养基。
背景技术：
：铁皮石斛(dendrobiumofficinalekimuraetmigo)是兰科石斛属多年生附生草本植物，被誉为“中华九大仙草”之首。其味甘，性微寒，用于热病津伤，口干烦渴，胃阴不足，食少干呕，病后虚热不退，阴虚火旺，骨蒸劳热，目暗不明，筋骨痿软。铁皮石斛的主要成分为石斛多糖和石斛碱，具有滋阴、益胃、生津止渴、润肺止咳、强壮及增强免疫活性的作用。近几年来，铁皮石斛也被用于癌症放疗、化疗后的副作用消除和体能恢复等临床治疗，且效果显著。近年来国内外对铁皮石斛种子的无菌萌发进行了深入的研究，研究表明石斛种子在适合的培养基上可以进行无菌萌发，这使得铁皮石斛发展规模化人工育种成为可能。现有技术中，多采用向基本培养基添加化学合成激素等添加物来提高铁皮石斛种子的萌发率，然而化学合成激素容易导致环境污染。技术实现要素：针对现有技术中上述的不足，本发明的目的在于提供一种添加天然植物激素的铁皮石斛种子培养基，采用该培养基不仅能够减少化学激素排放对环境的危害，而且能够排除人们对人工种植铁皮石斛采用的人工合成激素的顾虑；采用该培养基能够大大提高铁皮石斛苗生根速率。为了达到上述目的，本发明采用的解决方案是：一种添加天然植物激素的铁皮石斛种子培养基，其制备方法包括：以1/2ms为基础培养基，加入浓度为50-150g/l的绿豆芽研磨液，浓度为30g/l的蔗糖，浓度为7g/l的琼脂，于ph值为5.8，121℃下灭菌20min。本发明的有益效果是：采用本发明提供的该种添加天然植物激素的铁皮石斛种子培养基有利于铁皮石斛组培苗诱导芽的分化，铁皮石斛的根系生长比较旺盛。具体实施方式为使本发明实施例的目的、技术方案和优点更加清楚，下面将对本发明实施例中的技术方案进行清楚、完整地描述。实施例中未注明具体条件者，按照常规条件或制造商建议的条件进行。所用试剂或仪器未注明生产厂商者，均为可以通过市售购买获得的常规产品。下面对本发明实施例提供的一种添加天然植物激素的铁皮石斛种子培养基进行具体说明。本发明提供了一种添加天然植物激素的铁皮石斛种子培养基，其制备方法包括：以1/2ms为基础培养基，加入浓度为50-150g/l的绿豆芽研磨液，浓度为30g/l的蔗糖，浓度为7g/l的琼脂，于ph值为5.8，121℃下灭菌20min。进一步地，绿豆芽研磨液浓度为50g/l。进一步地，还包括加入浓度为20-150g/l的土豆研磨液。且以当绿豆芽研磨液的浓度为150g/l，土豆研磨液的浓度为100g/l时效果最佳。需要说明的是，在本申请中，绿豆芽研磨液的制备方法包括:称取绿豆芽用清水洗净滤干后切成小段，放入榨汁机搅拌杯中，加蒸馏水，研磨5min；接着取两层纱布将研磨液过滤，得到第一滤液，向搅拌杯加蒸馏水清洗并过滤，得到的第二滤液加入所述第一滤液中，得到绿豆芽研磨液。需要说明的是，在本申请中，土豆研磨液的制备方法包括：将土豆洗净去皮，用吸水纸吸干表面水分，称取所需的土豆量并切块，放入榨汁机搅拌杯中，加水刚好没过土豆，搅拌至没有明显块状土豆为止，得到所述土豆研磨液。以下结合实施例对本发明的特征和性能作进一步的详细描述。实施例1本实施例提供了一种添加天然植物激素的铁皮石斛种子培养基，其制备方法包括：以1/2ms为基础培养基，加入浓度为50g/l的绿豆芽研磨液，浓度为30g/l的蔗糖，浓度为7g/l的琼脂，于ph值为5.8，121℃下灭菌20min。实施例2本实施例提供了一种添加天然植物激素的铁皮石斛种子培养基，其制备方法包括：以1/2ms为基础培养基，加入浓度为50g/l的绿豆芽研磨液，浓度为20g/l的土豆研磨液，浓度为30g/l的蔗糖，浓度为7g/l的琼脂，于ph值为5.8，121℃下灭菌20min。实施例3本实施例提供了一种添加天然植物激素的铁皮石斛种子培养基，其制备方法包括：以1/2ms为基础培养基，加入浓度为50g/l的绿豆芽研磨液，浓度为50g/l的土豆研磨液，浓度为30g/l的蔗糖，浓度为7g/l的琼脂，于ph值为5.8，121℃下灭菌20min。实施例4本实施例提供了一种添加天然植物激素的铁皮石斛种子培养基，其制备方法包括：以1/2ms为基础培养基，加入浓度为100g/l的绿豆芽研磨液，浓度为150g/l的土豆研磨液，浓度为30g/l的蔗糖，浓度为7g/l的琼脂，于ph值为5.8，121℃下灭菌20min。实施例5本实施例提供了一种添加天然植物激素的铁皮石斛种子培养基，其制备方法包括：以1/2ms为基础培养基，加入浓度为150g/l的绿豆芽研磨液，浓度为100g/l的土豆研磨液，浓度为30g/l的蔗糖，浓度为7g/l的琼脂，于ph值为5.8，121℃下灭菌20min。对比例1本对比例提供了一种添加天然植物激素的铁皮石斛种子培养基，其制备方法包括：以1/2ms为基础培养基，加入浓度为30g/l的蔗糖，浓度为7g/l的琼脂，于ph值为5.8，121℃下灭菌20min。对比例2本对比例提供了一种添加天然植物激素的铁皮石斛种子培养基，其制备方法包括：以1/2ms为基础培养基,加入浓度为0.3mg/l的naa，浓度为30g/l的蔗糖，浓度为7g/l的琼脂，于ph值为5.8，121℃下灭菌20min。实验例1实验过程：取成熟但尚未开裂的铁皮石斛蒴果，在流水下冲洗干净，吸水纸吸干水分后，用75％酒精浸泡的棉球擦拭铁皮石斛蒴果表皮2次，在超净工作台，用75％乙醇浸泡30s，然后用8.0％次氯酸钠浸泡8min，无菌水冲洗5次，用吸水纸吸干铁皮石斛蒴果表面的水分。在无菌条件下，将处理过的铁皮石斛蒴果用镊子夹紧果柄一端，用解剖刀将铁皮石斛蒴果另一端切一小口，将铁皮石斛蒴果的种子撒入到无菌水中，然后摇匀，用移液枪将铁皮石斛种子匀浆，分别等量加入到实施例1-5对比例1-2的培养基表面，轻轻晃动培养瓶，使种子分布均匀，盖好培养瓶瓶盖，做好标记，设置为实验组1-5对照组1-2；然后将已接种的培养瓶放调好温度、光照强度、光照周期组培室进行培养。观察记录种子萌发生长情况。每个实验设3次重复，每个重复接种5瓶，为组内对照。记录播种60天芽的重量和播种120天芽的重量，并计算增殖系数(增殖系数＝(播种120天芽的重量-播种60天芽的重量)/播种60天芽的重量)，结果见表1所示：表1组号增殖系数实验组122.28实验组221.03实验组320.66实验组419.49实验组524.28对照组114.75对照组217.53由表1数据可知，由本发明实施例提供的培养基有利于铁皮石斛组培苗诱导芽的分化,铁皮石斛的根系生长比较旺盛。尤其是当铁皮石斛在添加绿豆芽研磨液浓度为150g/l土豆研磨液浓度100g/l的培养基上增殖系数最高，达到了24.28；其次是添加豆芽研磨液浓度为50g/l，达到了22.28。采用本发明实施例提供的培养基，而且相比于在培养基中添加化学合成激素，不仅促铁皮石斛苗生根分化的效果更好，而且环保，减少化学激素排放对环境的危害。综上所述，采用本发明提供的添加天然植物激素的铁皮石斛种子培养基；采用该培养基不仅能够减少化学激素排放对环境的危害，而且能够排除人们对人工种植铁皮石斛采用的人工合成激素的顾虑；采用该培养基能够大大提高铁皮石斛苗生根速率。以上所述仅为本发明的优选实施例而已，并不用于限制本发明，对于本领域的技术人员来说，本发明可以有各种更改和变化。凡在本发明的精神和原则之内，所作的任何修改、等同替换、改进等，均应包含在本发明的保护范围之内。当前第1页12