本发明涉及石斑鱼繁殖技术领域，特别涉及一种棕点石斑鱼和蓝身大斑石斑鱼杂交种的人工繁殖方法。
背景技术：
棕点石斑鱼(学名：epinephelusfuscoguttatus)，隶属鲈形目、鮨科、石斑鱼属，又称老虎斑、褐点石斑鱼，分布于红海、印度洋非洲东岸至太平洋波利尼西亚、北达琉球群岛、南至澳大利亚、台湾岛以及南海诸岛、澎湖列岛等海域等，栖息深度1-60米，体长可达120厘米，属于暖水性近岸及珊瑚礁鱼类，生活在水质清澈的珊瑚礁、泻湖。肉食性，以鱼类、头足类、甲壳类为食，可做为食用鱼、养殖鱼及观赏鱼。棕点石斑鱼摄食凶猛、生长快，广泛应用于养殖生产。
蓝身大斑石斑鱼，epinephelustukula，俗名金钱斑、黑斑石斑鱼，是辐鳍鱼纲鲈形目鲈亚目鮨科石斑鱼属的鱼类，体型仅次于鞍带石斑鱼，生长较快，是极具养殖前途的石斑鱼物种。分布于印度西太平洋区，从红海、东非至澳洲昆士兰海域，栖息深度10-150米，体长可达200厘米，重量可达110公斤，为世界名贵暖水性鱼类。
由雌棕点石斑鱼和雄蓝身大斑石斑鱼杂交可得新品种金虎斑。目前对于金虎斑的人工杂交育种技术的相关研究较少，采用常规的杂交方法获得受精率和孵化率均比较低。故急需一种棕点石斑鱼和蓝身大斑石斑鱼杂交种的人工繁殖方法，解决上述技术问题。
技术实现要素：
鉴以此，本发明提出一种棕点石斑鱼和蓝身大斑石斑鱼杂交种的人工繁殖方法。
本发明的技术方案是这样实现的：
一种棕点石斑鱼和蓝身大斑石斑鱼杂交种的人工繁殖方法，包括以下步骤：
(1)亲本选择：
a、雌性亲本：选择5龄以上的健康棕点石斑鱼作为雌性亲本；
b、雄性亲本：选择7龄以上的健康蓝身大斑石斑鱼作为雄性亲本；
(2)棕点石斑鱼亲本培育强化：
a、培育环境：选择露天池塘，水深3～4m，培育密度200～300尾/亩，雌雄比例为1：(0.5～0.8)；
b、投喂饲料a和饲料b，
所述饲料a按重量份计，包括以下组份：鲐鱼2～6份、秋刀鱼8～15份、田螺肉3～8份和蜗牛肉1～3份，每天投喂3～5次，每次投喂量为鱼体重量的0.8～1.5％；
所述饲料b为人工饲料，按重量份计，包括以下组份：鸡屎藤叶粉5～10份、盐藻粉0.7～1.2份、裂壶藻粉3～6份和维生素e0.5～0.8份，每2～3天投喂1次，所述饲料b投喂量为鱼体重量的0.9～1.2％；
(3)蓝身大斑石斑鱼亲本的培育强化
a、培育环境：选择露天池塘，水深5～10m，培育密度60～75尾/亩，雌雄比例为1：(2～3)；
b、投喂饲料c和饲料d，
所述饲料c按重量份计，包括以下组份：青衣鱼8～14份、马鲛鱼5～8份、牡蛎3～5份和大蒜素0.3～0.5份，每天投喂1～2次，每次投喂量为亲鱼体重的1～2％；
所述饲料d为人工饲料，按重量份计，包括以下组份：桥头地瓜粉80～90份、椰子粉4～7份、松针粉1～2份、马尾藻粉2～8份、维生素a0.2～0.6份、维生素c0.2～0.3份和维生素e0.3～0.5份，每2～3天投喂1次，每次投喂量为亲鱼体重的2～3％；
(4)亲鱼性成熟的判断
a、每周对雌性亲鱼进行成熟度检查；外观上腹部隆起，生殖孔微红，即可达到性成熟；
b、每周对雄性亲鱼进行成熟度检查；生殖孔微红，轻压腹部，能挤出乳白色的精液，即达到性成熟；
(5)人工受精
分别采集雌性棕点石斑鱼卵子和雄性蓝身大斑石斑鱼精液；向盛有卵子的容器内加入干净海水，一边加海水一边轻轻搅拌，再加入蓝身大斑石斑鱼精液，混匀，并于30～50hz条件下振动刺激10～30秒，静置1～2min，用海水冲洗受精卵；
(6)受精卵的孵化
将经过步骤(5)处理过的受精卵放入孵化桶中孵化，受精卵孵化条件为水中溶氧为5～8mg/l，水温25～28℃，盐度28～31，ph7.0～8.0，孵化后得到仔鱼。
进一步的，步骤(2)中，所述饲料a按重量份计，包括以下组份：鲐鱼5份、秋刀鱼11份、田螺肉5份和蜗牛肉2份。
进一步的，步骤(2)中，所述饲料a每天投喂5次，每次投喂量为鱼体重量的1.3％。
进一步的，步骤(2)中，所述饲料b为块状饲料，按重量份计，包括以下组份：鸡屎藤叶粉7份、盐藻粉0.9份、裂壶藻粉4份和维生素e0.6份。
进一步的，步骤(3)中，所述饲料c按重量份计，包括以下组份：青衣鱼11份、马鲛鱼7份、牡蛎4份和大蒜素0.4份。
进一步的，步骤(3)中，所述饲料d按重量份计，包括以下组份：桥头地瓜粉87份、椰子粉5份、松针粉1.2份、马尾藻粉5份、维生素a0.4份、维生素c0.25份和维生素e0.4份。
进一步的，步骤(5)中，精液加入量为每公斤卵子1.1～1.3ml精液；海水盐度为28～31，海水加水量为精液量的0.9～1.1倍。
进一步的，步骤(5)中，所述振动频率为47hz，振动刺激时间为20秒。
进一步的，步骤(6)中，孵化密度为280～300万粒受精卵/m3。
进一步的，步骤(6)中，每2～3小时换水一次，每次换水量为孵化桶容积的30～50％。
与现有技术相比，本发明的有益效果是：
(1)采用本发明繁育方法，优化棕点石斑鱼的卵子质量以及蓝身大斑石斑鱼的精子质量，显著提高受精率以及孵化率，为获得优质杂交种金虎斑建立良好基础。
(2)采用本发明繁育方法，亲鱼的产卵量高，受精率可达98％，受精卵的孵化率可达95％。
(3)本发明针对棕点石斑鱼投喂饲料a结合饲料b，以及针对蓝身大斑石斑鱼投喂饲料c结合饲料d，优化棕点石斑鱼的卵子质量以及蓝身大斑石斑鱼的精子质量，显著提高受精率以及孵化率。
(4)本发明采用振动刺激，显著提高受精率，并提高了受精卵质量，提高孵化率。
具体实施方式
为了更好理解本发明技术内容，下面提供具体实施例，对本发明做进一步的说明。
本发明实施例所用的实验方法如无特殊说明，均为常规方法。
本发明实施例所用的材料、试剂等，如无特殊说明，均可从商业途径得到。
本发明的桥头地瓜采购自海南省澄迈县桥头地瓜。
实施例1
一种棕点石斑鱼和蓝身大斑石斑鱼杂交种的人工繁殖方法，包括以下步骤：
(1)亲本选择：
a、雌性亲本：选择5龄以上的健康棕点石斑鱼作为雌性亲本；
b、雄性亲本：选择7龄以上的健康蓝身大斑石斑鱼作为雄性亲本；
(2)棕点石斑鱼亲本培育强化：
a、培育环境：选择露天池塘，水深3～4m，培育密度约200尾/亩，雌雄比例为1：0.5；
b、投喂饲料a和饲料b，
所述饲料a按重量份计，包括以下组份：鲐鱼2份、秋刀鱼15份、田螺肉3份和蜗牛肉3份，每天投喂3次，每次投喂量为鱼体重量的1.5％；
所述饲料b为人工饲料，按重量份计，包括以下组份：鸡屎藤叶粉5份、盐藻粉0.7份、裂壶藻粉6份和维生素e0.5份，每2天投喂1次，所述饲料b投喂量为鱼体重量的1.2％；
(3)蓝身大斑石斑鱼亲本的培育强化
a、培育环境：选择露天池塘，水深5～10m，培育密度约60尾/亩，雌雄比例为1：2；
b、投喂饲料c和饲料d，
所述饲料c按重量份计，包括以下组份：青衣鱼8份、马鲛鱼8份、牡蛎3份和大蒜素0.5份，每天投喂1次，每次投喂量为亲鱼体重的2％；
所述饲料d为人工饲料，按重量份计，包括以下组份：桥头地瓜粉80份、椰子粉4份、松针粉1份、马尾藻粉8份、维生素a0.2份、维生素c0.3份和维生素e0.3份，每2天投喂1次，每次投喂量为亲鱼体重的3％；
(4)亲鱼性成熟的判断
a、每周对雌性亲鱼进行成熟度检查；外观上腹部隆起，生殖孔微红，即可达到性成熟；
b、每周对雄性亲鱼进行成熟度检查；生殖孔微红，轻压腹部，能挤出乳白色的精液，即达到性成熟；
(5)人工受精
分别采集雌性棕点石斑鱼卵子和雄性蓝身大斑石斑鱼精液；向盛有卵子的容器内加入干净海水，加水量与精液量相同，一边加海水一边轻轻搅拌，再加入蓝身大斑石斑鱼精液，精液加入量为每公斤卵子1.1ml精液，混匀，并于30hz条件下振动刺激30秒，静置1min，用海水冲洗受精卵，所述海水盐度为28～31；
(6)受精卵的孵化
将经过步骤(5)处理过的受精卵放入孵化桶中孵化，受精卵孵化条件为水中溶氧为5～8mg/l，水温25～28℃，盐度28～31，ph7.0～8.0，孵化密度约为280万粒受精卵/m3，每2小时换水一次，每次换水量为孵化桶容积的30％，孵化后得到仔鱼。
实施例2
一种棕点石斑鱼和蓝身大斑石斑鱼杂交种的人工繁殖方法，包括以下步骤：
(1)亲本选择：
a、雌性亲本：选择5龄以上的健康棕点石斑鱼作为雌性亲本；
b、雄性亲本：选择7龄以上的健康蓝身大斑石斑鱼作为雄性亲本；
(2)棕点石斑鱼亲本培育强化：
a、培育环境：选择露天池塘，水深3～4m，培育密度约300尾/亩，雌雄比例为1：0.8；
b、投喂饲料a和饲料b，
所述饲料a按重量份计，包括以下组份：鲐鱼6份、秋刀鱼8份、田螺肉8份和蜗牛肉1份，每天投喂5次，每次投喂量为鱼体重量的0.8％；
所述饲料b为人工饲料，按重量份计，包括以下组份：鸡屎藤叶粉10份、盐藻粉1.2份、裂壶藻粉3份和维生素e0.8份，每3天投喂1次，所述饲料b投喂量为鱼体重量的0.9％；
(3)蓝身大斑石斑鱼亲本的培育强化
a、培育环境：选择露天池塘，水深5～10m，培育密度75尾/亩，雌雄比例为1：3；
b、投喂饲料c和饲料d，
所述饲料c按重量份计，包括以下组份：青衣鱼14份、马鲛鱼5份、牡蛎5份和大蒜素0.3份，每天投喂2次，每次投喂量为亲鱼体重的1％；
所述饲料d为人工饲料，按重量份计，包括以下组份：桥头地瓜粉90份、椰子粉7份、松针粉2份、马尾藻粉2份、维生素a0.6份、维生素c0.2份和维生素e0.5份，每3天投喂1次，每次投喂量为亲鱼体重的2％；
(4)亲鱼性成熟的判断
a、每周对雌性亲鱼进行成熟度检查；外观上腹部隆起，生殖孔微红，即可达到性成熟；
b、每周对雄性亲鱼进行成熟度检查；生殖孔微红，轻压腹部，能挤出乳白色的精液，即达到性成熟；
(5)人工受精
分别采集雌性棕点石斑鱼卵子和雄性蓝身大斑石斑鱼精液；向盛有卵子的容器内加入干净海水，加水量与精液量相同，一边加海水一边轻轻搅拌，再加入蓝身大斑石斑鱼精液，精液加入量为每公斤卵子1.3ml精液，混匀，并于50hz条件下振动刺激10秒，静置2min，用海水冲洗受精卵，所述海水盐度为28～31；
(6)受精卵的孵化
将经过步骤(5)处理过的受精卵放入孵化桶中孵化，受精卵孵化条件为水中溶氧为5～8mg/l，水温25～28℃，盐度28～31，ph7.0～8.0，孵化密度约为300万粒受精卵/m3，每3小时换水一次，每次换水量为孵化桶容积的50％，孵化后得到仔鱼。
实施例3
一种棕点石斑鱼和蓝身大斑石斑鱼杂交种的人工繁殖方法，包括以下步骤：
(1)亲本选择：
a、雌性亲本：选择5龄以上的健康棕点石斑鱼作为雌性亲本；
b、雄性亲本：选择7龄以上的健康蓝身大斑石斑鱼作为雄性亲本；
(2)棕点石斑鱼亲本培育强化：
a、培育环境：选择露天池塘，水深3～4m，培育密度约250尾/亩，雌雄比例为1：0.7；
b、投喂饲料a和饲料b，
所述饲料a按重量份计，包括以下组份：鲐鱼5份、秋刀鱼11份、田螺肉5份和蜗牛肉2份，每天投喂5次，每次投喂量为鱼体重量的1.3％
所述饲料b为人工饲料，按重量份计，包括以下组份：鸡屎藤叶粉7份、盐藻粉0.9份、裂壶藻粉4份和维生素e0.6份，每3天投喂1次，所述饲料b投喂量为鱼体重量的1.1％；
(3)蓝身大斑石斑鱼亲本的培育强化
a、培育环境：选择露天池塘，水深5～10m，培育密度60～75尾/亩，雌雄比例为1：(2～3)；
b、投喂饲料c和饲料d，
所述饲料c按重量份计，包括以下组份：青衣鱼11份、马鲛鱼7份、牡蛎4份和大蒜素0.4份，每天投喂2次，每次投喂量为亲鱼体重的1.5％；
所述饲料d为人工饲料，按重量份计，包括以下组份：桥头地瓜粉87份、椰子粉5份、松针粉1.2份、马尾藻粉5份、维生素a0.4份、维生素c0.25份和维生素e0.4份，每2天投喂1次，每次投喂量为亲鱼体重的2％；
(4)亲鱼性成熟的判断
a、每周对雌性亲鱼进行成熟度检查；外观上腹部隆起，生殖孔微红，即可达到性成熟；
b、每周对雄性亲鱼进行成熟度检查；生殖孔微红，轻压腹部，能挤出乳白色的精液，即达到性成熟；
(5)人工受精
分别采集雌性棕点石斑鱼卵子和雄性蓝身大斑石斑鱼精液；向盛有卵子的容器内加入干净海水，加水量与精液量相同，一边加海水一边轻轻搅拌，再加入蓝身大斑石斑鱼精液，精液加入量为每公斤卵子1.2ml精液，混匀，并于40hz条件下振动刺激20秒，静置2min，用海水冲洗受精卵，所述海水盐度为28～31；
(6)受精卵的孵化
将经过步骤(5)处理过的受精卵放入孵化桶中孵化，受精卵孵化条件为水中溶氧为5～8mg/l，水温25～28℃，盐度28～31，ph7.0～8.0，孵化密度约为290万粒受精卵/m3，每2.5小时换水一次，每次换水量为孵化桶容积的40％，孵化后得到仔鱼。
对比例1
本对比例与实施例3的区别在于，步骤(2)中，所述饲料a中秋刀鱼替换为蓝圆鲹，且不含有田螺肉和蜗牛肉；所述饲料b不含有鸡屎藤叶粉。
对比例2
本对比例与实施例3的区别在于，步骤(2)中，所述饲料a按重量份计，包括以下组份：鲐鱼10份、秋刀鱼5份、田螺肉0.5份和蜗牛肉5份；所述饲料b按重量份计，包括以下组份：鸡屎藤叶粉2份、盐藻粉2份、裂壶藻粉1份和维生素e1份。
对比例3
本对比例与实施例3的区别在于，步骤(3)中，所述饲料c中青衣鱼和马鲛鱼均替换为鲐鱼。
对比例4
本对比例与实施例3的区别在于，步骤(3)中，所述饲料c包括以下组份：青衣鱼5份、马鲛鱼10份、牡蛎1份和大蒜素1份；所述饲料d包括以下组份：桥头地瓜粉5份、椰子粉1份、松针粉3份、马尾藻粉1份、维生素a0.1份、维生素c0.1份和维生素e0.4份。
对比例5
本对比例与实施例3的区别在于，步骤(5)中，未进行振动刺激。
对比例6
本对比例与实施例3的区别在于，步骤(5)中，所述振动频率为100hz，振动刺激为1分钟。
分别测定上述各实施例与对比例的产卵量、受精率、孵化率，结果见下表：
上述实施例1～3的结果表明，采用本发明繁育方法，亲鱼的产卵量高，受精率可达到98.3％，受精卵的孵化率可达到95.7％。
其中，对比例1～2与实施例3对比，可见本发明针对棕点石斑鱼投喂饲料a结合饲料b，影响产卵量、受精率、孵化率。采用本发明的饲料a结合饲料b，显著提高产卵量、受精率以及孵化率。
对比例3～4与实施例3对比，可见本发明针对蓝身大斑石斑鱼投喂饲料c结合饲料d，影响受精率、孵化率。采用本发明的饲料c结合饲料d，显著提高受精率以及孵化率。
对比例5～6与实施例3对比，在受精过程中，本发明采用振动刺激，显著提高受精率，并提高了受精卵质量，提高孵化率。
以上所述仅为本发明的较佳实施例而已，并不用以限制本发明，凡在本发明的精神和原则之内，所作的任何修改、等同替换、改进等，均应包含在本发明的保护范围之内。