专利名称：食用菌制备防治植物病毒的农药及工艺的制作方法
食用菌制备防治植物病毒的农药是一种用食用菌发酵物提取杀生剂，用于防治植物病毒，特别是TMV病毒的防治，其工艺是将食用菌的固体发酵培养物及长过子实体的固体培养物经温水浸提浓缩的工艺。
食用菌生物学基础一书(杨庆尧编，上海科技出版社1983年版)第196～198页记载的内容，说明了食用菌的固体培养物的水浸液对植物病毒有阻抑效果。其工艺是将食用菌的固体培养物在热水浸泡(120℃20分钟)，而制得浸提液。而这只是从机理上做的试验，证明浸泡液能抑制烟草花叶病毒浸染的自然现象，并没有说明是否能防治植物病毒，其记载的试验工艺不能用于生产，生产出的农药活性成份含量低，大部分的活性成份活化酶都转化损失，而且部分对植物生长的营养物质及生物激素也被损失。使用时需要用浓度较高的浸提液，对植物生长无促进作用。所形成的浸提液并不能形成广泛应用的农药。
本发明的目的在于提供一种能有效防治植物病毒、促进植物生长的食用菌生物农药，提供一种有效活性成份损失少的食用菌制备农药的工艺。
本发明的制备工艺是将已经发酵好的食用菌固体培养物或长过子实体的废固体培养物装入水中浸泡。其特点是放入50～60℃的水中浸泡，浸泡后分离出浸液，再将浸液进行真空减压蒸发浓缩，取得的浓缩液就是制备出防治植物病毒的农药。水浸泡的温度比较适合食用菌固体培养物中活性成份的存活，特别是蘑菇RNA及活性酶的提取存活和植物生产营养物的存活，有利于获取这些有效成份含量较高的提取液。在浓缩过程不是采用常压加热蒸发，而是采用真空减压蒸发提取液的水份。由于蒸发温度低，更有利于提取液中有效成份的存活。特别是当真空减压蒸发浓缩温度控制在55℃以下的真空蒸发，更有利于蘑菇RNA(也就是葡萄糖、半乳糖、甘露糖、吡喃木糖和十五种氨基酸)及活性酶的存活，也有利于提取液中的营养物的存活。当然真空蒸发浓缩能在50℃以下更低的温度进行更好，但真空蒸发浓缩温度越低，真空度越难达到，并不易控制。所以一般最好是掌握在48～50℃的条件下进行真空蒸发浓缩。在55℃以下温度真空蒸发浓缩，所获得的浓缩液农药有效成份含量较高。同用120℃热水浸泡，并用高于100℃的常压蒸发的浓缩液相比，本发明的浓缩液农药有效成份及活性酶提高了60%左右。
食用菌固体培养物在温水浸泡前最好是破碎，而且是破碎的粒度最小最好，以便增大对固体培养物的浸泡面积，增加有效成份及活性酶溶解于水速度，减少浸泡的时间。固体培养物与浸泡温水重量比例一般为1∶1至1∶5。浸泡的温水过少，不易溶解固体培养物的有效成份和活性酶，不能充分浸泡固体培养物。浸泡的温水过多已对增加溶解有效成份和活性酶作用不大，而浸泡液的水份过量，增加了真空蒸发浓缩的时间及耗用的能量。在浸泡过程最好加有搅拌，可隔一段时间一搅拌，以加速浸泡的溶解，增加浸泡液中有效成份和活性酶。同样为了使溶于水的有效成份和活性酶尽量随浸泡液分离出来，浸泡后的分离采用离心机进行离心分离。在真空蒸发时不断地对被浓缩液进行加热。加热可以采用各种加热，但不能用高温热源进行加热，以防止局部温度过高，破坏被浓缩液中的有效成份和活性酶。
用发酵好的食用菌固体培养物或长过子实体的食用菌固体培养物经温水浸泡，分离的浸泡液经真空减压蒸发浓缩而得到的浓缩液就为本发明防治植物病毒的农药。浓缩液的农药便于贮存运输。使用时只要根据需要稀释不同的倍数即可。为了使农药更便于贮存，防止有效成份及活性酶的变质，增加使用效果，最好是在浓缩液内加有0.5～0.8%(重量)的苯甲酸钠和2±0.5%(重量)的吐温80。浓缩液和苯甲酸钠及吐温80配成液体防治植物病毒的农药。这种浓药能确保有效性和促进植物生长的作用。
本发明与已有技术相比，所采用的原料不但是发酵好的食用菌固体培养物，而且还可用长过子实体的废固体培养物，充分利用了废料，降低了成本。本发明的制备工艺及生产出的农药有效地保持了食用菌代谢产物的有效成份和生物活性，增加了有效成份和活性酶的提取率和农药的含量。提高了对植物病毒的防治能力和使用效果。使得可以用于工业生产，并能生产出可以实用的农药。本发明的农药对农作物防治病毒的同时，含有的天然营养物还能对植物生长发育起促进作用，可提高产量15～20%。用本发明的浓缩液农药稀释300倍，对番茄、辣椒、黄瓜等植物作TMV的感染抑制率试验，感染抑制率竞达96.7%以上，其中对辣椒的TMV感染抑制率达100%。
下面结合实例进一步说明本发明。
实例1将食用菌香菇菌种接种于阔叶木屑与麦麸4∶1，含水55%的混合培养物中，并在20～22℃条件下培养发酵。当菌丝长满并初步形成树皮状组织，达到充分发酵时，停止发酵培养。将发酵培养好的香菇固体培养物粉碎，按1∶2的重量加入55℃～60℃的温水浸泡5小时，其间每隔1小时进行一次搅拌，使培养物中的有效成分充分溶于温水中。用高速离心机将浸泡后的液体分离出来，并将分离液沉淀。取上清液放入蒸发浓缩罐中，对罐内进行减压形成真空，并同时对罐中液体进行加热。将液体保持在55℃以下条件下进行真空减压蒸发。连续蒸发，使其体积蒸发到20%时，停止加热真空减压蒸发。这样蒸发到20%的浓缩液就可作为防治植物病毒的农药。如果存放时间超过48小时，而要长期存放或运输再使用的，可在浓缩液中加入重量0.5%的苯甲酸钠。为了增加浓缩液的农药对植物的作用时间，还可在浓缩液中加入2±0.5%的吐温80，以增加药液对植物及种子的附着，增加药液的药性作用时间，从而增加药效。用该药液稀释300～500倍对植物喷撒二次，在田间进行小区对比试验和大面积示范，对TMV和CMV植物病毒进行防治，其防治效果如下蕃茄为65.3～78.7%;青椒62.4～75.7%;菜豆74.6～85.1%;大白菜62.5～65.8%;花生74.1～80.0%;烟草63.6～86.7%;而同时促进植株生长茁壮，早熟，平均增产10～15%。
实例2用长过CrO2子实体蘑菇后的废固体培养物，经破碎后按1∶4比例放入50～55℃的温水池内浸泡。浸泡4个小时后，用离心机将浸液分离出来。分离出的浸液可经过滤清除残渣。过滤的液体加入到真空蒸发器内，进行真空减压蒸浓缩。加热温度保持在48～50℃，在48～50℃温度下进行抽真空蒸发浓缩。浓缩到原液的15%后就停止加热真空蒸发浓缩。在浓缩液里加入0.8%苯钾酸钠，组成本发明的防治植物病毒的农药。这种农药装入瓶子内密封存装，可在常温下保存一年内有效。用这种农药稀释300倍对蔬菜生长期喷3～4次。对于春季大棚里生长的蕃茄，本农药喷撒区无TMV及CMV病毒的病株发生，而在同等条件下用其他抗毒剂的则发病株率为7～10%。本农药同时还能促进蕃茄提早成熟。对于露天种植的黄瓜，大田防治率达76.8%。对于露天种植的蕃茄，大田防治率达94.1%。对于露天种植的甜椒，大田防治率达80.9%。对于露天种植的菜豆，大田防治率达99.5%。对于露天种植的大白菜，大田防治率达98.1%。在大白菜上还可明显抑制软腐病和霜霉病的发生。对菜豆有明显的提早开花、结荚和增产的效果。
权利要求
1.一种食用菌制备防治植物病毒农药的工艺，是将已经发酵好的食用菌固体培养物或长过子实体的废固体培养物放入水中浸泡，其特征在于水的温度为50℃～60℃，浸泡后分离出浸液，再将浸液进行真空减压蒸发浓缩。
2.根据权利要求1所说的工艺，其特征在于真空减压浓缩是在低于或等于55℃下真空蒸发浓缩。
3.根据权利要求2所述的工艺，其特征在于真空减压浓缩是在48～50℃的真空减压浓缩。
4.根据权利要求1或2或3所述的工艺，其特征在于放入水中浸泡过程加有搅拌。
5.根据权利要求1或2或3所述的工艺，其特征在于浸泡后分离采用离心机进行分离。
6.根据权利要求1或2或3所说的工艺，其特征在于浸液为分离后的沉淀上清浸液。
7.一种食用菌制备防治植物病毒的农药，其特征在于用发酵好的食用菌固体培养物或长过子实体的食用菌固体培养物浸液真空减压蒸发而得到的浓缩液。
8.根据权利要求7所述的农药，其特征在于浓缩液配有0.5～0.8%苯甲酸钠和2±0.5%的吐温80。
全文摘要
食用菌制备防治植物病毒的农药及工艺是一种将已经发酵好的食用菌固体培养物或长过子实体的废固体培养物破碎装入50～60℃的温水中浸泡，浸泡后分离液经真空减压蒸发浓缩的工艺，从而制得生物农药，用于防治TMV、CMV等植物病毒。
文档编号A01N63/02GK1078094SQ93102828
公开日1993年11月10日 申请日期1993年3月20日 优先权日1993年3月20日
发明者兰著碧, 王先彬 申请人:辽宁省出口食用菌研究所, 北京市农林科学院植物保护环境保护研究所