一种人工湿地植物促生长剂的制作方法
【技术领域】
[0001]本发明涉及人工湿地技术领域，具体涉及一种人工湿地植物促生长剂。
【背景技术】
[0002]人工湿地是利用土壤、人工介质、植物、微生物的物理、化学、生物三重协同作用，对污水、污泥进行处理的一种技术。植物是人工湿地的重要组成部分，湿地中的植物对于湿地净化污水的作用能起到极重要的影响。
[0003]在实践中，建设湿地较为容易，但要使新建的湿地发挥原生湿地的作用决非易事，因为，新建的湿地的植被需要一定的时间和过程去生长，因此，如果能够研发出新型的帮助湿地植物生长的生物制剂，则有利于新建湿地尽快发挥原生湿地的作用，具有重要的价值。
[0004]壳聚糖(chitosan)又称脱乙醜甲壳素，化学名:β _ (I — 4) ~2~氛基_2_脱氧-D-葡萄糖，是一种白色或灰白色半透明的片状或粉状固体。
【发明内容】
[0005]本发明的目的在于针对现有技术的不足，提供一种能够加快湿地植物生长的人工湿地植物促生长剂。
[0006]本发明的上述目的是通过如下方案予以实现的:
[0007]一种人工湿地植物促生长剂，该促生长剂的配方是由如下重量份数的各组份组成:
[0008]黑曲霉菌粉3-6份；
[0009]枯草芽孢杆菌菌粉 4-7份；
[0010]壳聚糖1-3份。
[0011]上述黑曲霉菌粉的制备方法如下所示:
[0012]将黑曲霉菌株经斜面培养活化后用无菌生理盐水冲洗斜面得到黑曲霉菌悬液，将该黑曲霉菌悬液以体积比5 %的接种量接到黑曲霉种子培养基中进行种子培养，种子培养条件为:28°C _30°C，摇床培养60h，得到黑曲霉种子液，将该黑曲霉种子液以体积比10%的接种量接种于黑曲霉发酵培养基中，28°C -30°C的条件下，液体发酵培养5天后，得到黑曲霉发酵培养液，将该黑曲霉发酵培养液进行菌液分离得到菌泥，对该菌泥进行喷雾干燥，则制备得到所需黑曲霉菌粉。
[0013]上述黑曲霉菌粉的制备方法中，黑曲霉为市购产品。
[0014]上述黑曲霉菌粉的制备方法中，所述斜面培养活化采用本领域技术人员的常规操作即可，具体操作过程中也可以采用如下方法:
[0015]斜面培养基的配方为:NaN032.0g、K2HPO4L 0g、KCl 0.5g、MgSO40.5g、FeSO40.0lg、蔗糖30g、琼脂20g、蒸馏水1000mL、pH自然；斜面培养活化温度为30°C，培养时间为48h。
[0016]上述黑曲霉菌粉的制备方法中，将黑曲霉菌株经斜面培养活化后用无菌生理盐水冲洗斜面得到黑曲霉菌悬液，所述黑曲霉菌悬液的菌体浓度为107cfu/mL。
[0017]上述黑曲霉菌粉的制备方法中，黑曲霉种子培养基的配方为:甘蔗糖蜜3g、尿素6g、玉米蛋白粉 2g、K2HPO40.5g、MgSO4.7Η200.06g、蒸馏水 1000mL、pH 5.0。
[0018]上述黑曲霉菌粉的制备方法中，黑曲霉发酵培养基的配方为:甘蔗糖蜜12g、尿素8g、玉米蛋白粉 2g、KCl 0.3g、Na2HPO40.2g、MgSO4.7H20 0.06g、蒸馏水 lOOOmL、pH 6.0。
[0019]上述黑曲霉菌粉的制备方法中，所述喷雾干燥的进风口温度为150°C，出风口温度为50°C，所述黑曲霉菌粉中含水量不高于10%。
[0020]上述枯草芽孢杆菌菌粉的制备方法如下所示:
[0021]将枯草芽孢杆菌菌株经斜面培养活化后用无菌生理盐水冲洗斜面得到枯草芽孢杆菌菌悬液，将该枯草芽孢杆菌菌悬液以体积比5%的接种量接到枯草芽孢杆菌种子培养基中进行种子培养，种子培养条件为:35°C _37°C，摇床培养72h，得到枯草芽孢杆菌种子液，将该枯草芽孢杆菌种子液以体积比10%的接种量接种于枯草芽孢杆菌发酵培养基中，350C _37°C的条件下，液体发酵培养4天后，得到枯草芽孢杆菌发酵培养液，将该枯草芽孢杆菌发酵培养液进行菌液分离得到菌泥，对该菌泥进行喷雾干燥，则制备得到所需枯草芽孢杆菌菌粉。
[0022]上述枯草芽孢杆菌菌粉的制备方法中，枯草芽孢杆菌为市购产品。
[0023]上述枯草芽孢杆菌菌粉的制备方法中，所述斜面培养活化采用本领域技术人员的常规操作即可，具体操作过程中也可以采用如下方法:
[0024]斜面培养基的配方为:牛肉膏3g、蛋白胨10g、氯化钠5g、琼脂20g、蒸馏水100mUpH 7.2 ;斜面培养活化温度为35°C，培养时间为50h。
[0025]上述枯草芽孢杆菌菌粉的制备方法中，将枯草芽孢杆菌菌株经斜面培养活化后用无菌生理盐水冲洗斜面得到枯草芽孢杆菌菌悬液，所述枯草芽孢杆菌菌悬液的菌体浓度为108cfu/mLo
[0026]上述枯草芽孢杆菌菌粉的制备方法中，枯草芽孢杆菌种子培养基的配方为:葡萄糖 33g、玉米浆 3ml、MgSO40.8g、K2HP043.5g、KH2P04lg、蒸馏水 lOOOmL、pH 7.2。
[0027]上述枯草芽孢杆菌菌粉的制备方法中，枯草芽孢杆菌发酵培养基的配方为:葡萄糖 30g、蛋白胨 17g、MgS04lg、K2HP043g、KH2P04lg、蒸馏水 100mUpH 7.2。
[0028]上述枯草芽孢杆菌菌粉的制备方法中，所述喷雾干燥的进风口温度为150°C，出风口温度为50°C，所述枯草芽孢杆菌菌粉中含水量不高于10%。
[0029]上述一种人工湿地植物促生长剂的配方中，壳聚糖采用市售产品即可实现本发明；优选粘度为0.25?0.65Pa.s的壳聚糖。
[0030]本发明还提供上述一种人工湿地植物促生长剂的优选配方，该配方是由如下重量份数的各组份组成:
[0031]黑曲霉菌粉5份；
[0032]枯草芽孢杆菌菌粉 5份；
[0033]壳聚糖2份。
[0034]本发明一种人工湿地植物促生长剂的制备方法，具体步骤如下所示:
[0035]根据上述黑曲霉菌粉和枯草芽孢杆菌菌粉的制备方法先分别制备黑曲霉菌粉和枯草芽孢杆菌菌粉；
[0036]将壳聚糖研磨后过100目筛；
[0037]按照配方用量，将黑曲霉菌粉、枯草芽孢杆菌菌粉和壳聚糖混合后，则制备得到本发明的一种人工湿地植物促生长剂。
[0038]本发明的一种人工湿地植物促生长剂在施用到人工湿地时，其施用量是每100株植物施用本发明人工湿地植物促生长剂30g-50g。
[0039]与现有技术相比，本发明具有如下有意效果:
[0040]本发明的一种人工湿地植物促生长剂，针对黑曲霉和枯草杆菌分别选择合适的发酵培养基，得到的黑曲霉菌粉和枯草芽孢杆菌菌粉，再搭配壳聚糖后，用于人工湿地后，能够加快人工湿地植物的快速繁衍，促进根系发达，加快人工湿地的快速形成，尽早发挥湿地净化污水的功能，恢复生态水环境。
【具体实施方式】
[0041]下面结合具体实施例对本发明做进一步地描述，但具体实施例并不对本发明做任何限定。
[0042]实施例1黑曲霉菌粉
[0043]本实施例黑曲霉采用市购产品黑曲霉Aspergillus nigeATCC6275。
[0044]将黑曲霉菌株先进行斜面培养活化，斜面培养基的配方为:NaN032.0g、K2HPO4L 0g,KCl 0.5g、MgS040.5g、FeS040.0lg、蔗糖 30g、琼脂 20g、蒸馏水 1000mL、pH 自然；斜面培养活化温度为30°C，培养时间为48h ;斜面培养活化后用无菌生理盐水冲洗斜面得到黑曲霉菌悬液，黑曲霉菌悬液的菌体浓度为107cfu/mL。
[0045]将上述黑曲霉菌悬液以体积比5%的接种量接到黑曲霉种子培养基中进行种子培养，种子培养条件为:28°C -30°C，摇床培养60h，得到黑曲霉种子液；所述黑曲霉种子培养基的配方为:甘鹿糖蜜3g、尿素6g、玉米蛋白粉2g、K2HPO40.5g、MgSO4.7H20 0.06g、蒸饱水lOOOmL、pH 5.0o
[0046]将上述黑曲霉种子液以体积比10%的接种量接种于黑曲霉发酵培养基中，280C -30°C的条件下，液体发酵培养5天后，得到黑曲霉发酵培养液；所述黑曲霉发酵培养基的配方为:甘蔗糖蜜12g、尿素8g、玉米蛋白粉2g、KCl 0.3g、Na2HPO40.2g、MgSO4.7H200.06g、蒸饱水 lOOOmL、pH 6.0。
[0047]将上述黑曲霉发酵培养液进行菌液分离得到菌泥，对该菌泥进行喷雾干燥，喷雾干燥的进风口温度为150°C，出风口温度为50°C，则制备得到本实施例的黑曲霉菌粉，该黑曲霉菌粉中含水量不高于10%。
[0048]实施例2枯草芽孢杆菌菌粉
[0049]本实施例的枯草芽孢杆菌采用市购产品枯草芽孢杆菌Bacillus subtilisATCC6633o
[0050]将枯草芽孢杆菌菌株先进行斜面培养活化，斜面培养基配方为:牛肉膏3g、蛋白胨10g、氯化钠5g、琼脂20g、蒸馏水lOOOmL、pH 7.2 ;斜面培养活化温度为35°C，培养时间为50h ;斜面培养活化后用无菌生理盐水冲洗斜面得到枯草芽孢杆菌菌悬液，枯草