芽孢杆菌菌悬液的菌体浓度为108cfu/mL。
[0051 ] 将上述枯草芽孢杆菌菌悬液以体积比5 %的接种量接到枯草芽孢杆菌种子培养基中进行种子培养，种子培养条件为:35 V _37°C，摇床培养72h，得到枯草芽孢杆菌种子液；所述枯草芽孢杆菌种子培养基的配方为:葡萄糖33g、玉米浆3ml、MgSO40.8g、K2HP043.5g、KH2P04lg、蒸馏水 lOOOmL、pH 7.2。
[0052]将上述枯草芽孢杆菌种子液以体积比10%的接种量接种于枯草芽孢杆菌发酵培养基中，35°C _37°C的条件下，液体发酵培养4天后，得到枯草芽孢杆菌发酵培养液；所述枯草芽孢杆菌发酵培养基的配方为:葡萄糖30g、蛋白胨17g、MgSO4Ig, K2HP043g、KH2PO4Igi馏水 100mUpH 7.2。
[0053]将上述枯草芽孢杆菌发酵培养液进行菌液分离得到菌泥，对该菌泥进行喷雾干燥，所述喷雾干燥的进风口温度为150°C，出风口温度为50°C，则制备得到本实施例的枯草芽孢杆菌菌粉，该枯草芽孢杆菌菌粉中含水量不高于10%。
[0054]实施例3性能测试实验
[0055]1、实验样品
[0056]本实施例的实验样品分为实验组1、实验组2、实验组3、对比实验组1、对比实验组2和对比实验组3，具体如下所示:
[0057](I)实验组 I
[0058]将壳聚糖研磨后过100目筛，按照如下配方用量，将壳聚糖、实施例1制备的黑曲霉菌粉、实施例2制备的枯草芽孢杆菌菌粉混合后则制备得到实验组I的实验样品。
[0059]实验组I的配方是由如下重量份数的各组份组成:
[0060]黑曲霉菌粉3份；
[0061 ] 枯草芽孢杆菌菌粉 6份；
[0062]壳聚糖3份。
[0063](2)实验组 2
[0064]将壳聚糖研磨后过100目筛，按照如下配方用量，将壳聚糖、实施例1制备的黑曲霉菌粉、实施例2制备的枯草芽孢杆菌菌粉混合后则制备得到实验组2的实验样品。
[0065]实验组2的配方是由如下重量份数的各组份组成:
[0066]黑曲霉菌粉6份；
[0067]枯草芽孢杆菌菌粉 4份；
[0068]壳聚糖I份。
[0069](3)实验组 3
[0070]将壳聚糖研磨后过100目筛，按照如下配方用量，将壳聚糖、实施例1制备的黑曲霉菌粉、实施例2制备的枯草芽孢杆菌菌粉混合后则制备得到实验组3的实验样品。
[0071]实验组3的配方是由如下重量份数的各组份组成:
[0072]黑曲霉菌粉5份；
[0073]枯草芽孢杆菌菌粉 5份；
[0074]壳聚糖2份。
[0075](4)对比实验组I
[0076]将壳聚糖研磨后过100目筛后则制备得到对比实验组I的实验样品。
[0077](5)对比实验组2
[0078]实施例1制备的黑曲霉菌粉为对比实验组2的实验样品。
[0079](6)对比实验组3
[0080]实施例2制备的枯草芽孢杆菌菌粉为对比实验组3的实验样品ο
[0081]2、实验过程和结果
[0082]选择I个相同地域条件的湿地进行对比实验，其中空白实验组的湿地不加任何实验样品，其余6个湿地分别施加实验组1、实验组2、实验组3、对比实验组1、对比实验组2和对比实验组3的实验样品，其实验样品施加量均为每100株植物施用实验样品30g。
[0083]观察7组湿地发现:10天后，施加实验组I和实验组3的湿地的植物就已经长成成熟叶片，且能够实现正常的湿地功能；添加实验组2的湿地的植物是13天后长成成熟叶片，并能够实现正常的湿地功能；添加对比实验组I的湿地的植物是27天后长成成熟叶片，并能够实现正常的湿地功能；添加对比实验组2和对比实验组3的湿地的植物均是一个月后才长成成熟叶片，并能够实现正常的湿地功能。
[0084]从上述结果可以看出，与对比实验组1、对比实验组2和对比实验组3相比，本发明的人工湿地植物促生长剂能够加快人工湿地植物的快速繁衍，促进根系发达，从而加快人工湿地的快速形成，尽早发挥湿地净化污水的功能。
【主权项】
1.一种人工湿地植物促生长剂，其特征在于该人工湿地植物促生长剂的配方是由如下重量份数的各组份组成: 黑曲霉菌粉3-6份； 枯草芽孢杆菌菌粉4-7份； 壳聚糖1-3份； 上述黑曲霉菌粉的制备方法是将黑曲霉菌株经斜面培养活化后用无菌生理盐水冲洗斜面得到黑曲霉菌悬液，将该黑曲霉菌悬液以体积比5%的接种量接到黑曲霉种子培养基中进行种子培养，种子培养条件为:28°C -30°C，摇床培养60h，得到黑曲霉种子液，将该黑曲霉种子液以体积比10%的接种量接种于黑曲霉发酵培养基中，28°C -30°C的条件下，液体发酵培养5天后，得到黑曲霉发酵培养液，将该黑曲霉发酵培养液进行菌液分离得到菌泥，对该菌泥进行喷雾干燥，则制备得到所需黑曲霉菌粉； 上述枯草芽孢杆菌菌粉的制备方法是将枯草芽孢杆菌菌株经斜面培养活化后用无菌生理盐水冲洗斜面得到枯草芽孢杆菌菌悬液，将该枯草芽孢杆菌菌悬液以体积比5 %的接种量接到枯草芽孢杆菌种子培养基中进行种子培养，种子培养条件为:35°C _37°C，摇床培养72h，得到枯草芽孢杆菌种子液，将该枯草芽孢杆菌种子液以体积比10%的接种量接种于枯草芽孢杆菌发酵培养基中，35°C _37°C的条件下，液体发酵培养4天后，得到枯草芽孢杆菌发酵培养液，将该枯草芽孢杆菌发酵培养液进行菌液分离得到菌泥，对该菌泥进行喷雾干燥，则制备得到所需枯草芽孢杆菌菌粉。
2.根据权利要求1所述一种人工湿地植物促生长剂，其特征在于所述人工湿地植物促生长剂的配方是由如下重量份数的各组份组成: 黑曲霉菌粉5份； 枯草芽孢杆菌菌粉5份； 壳聚糖2份。
3.根据权利要求1或2所述一种人工湿地植物促生长剂，其特征在于所述黑曲霉菌粉的制备方法中，黑曲霉种子培养基的配方为:甘蔗糖蜜3g、尿素6g、玉米蛋白粉2g、K2HPO40.5g、MgS04.7H200.06g、蒸馏水100mL, pH 5.0 ;黑曲霉发酵培养基的配方为:甘蔗糖蜜12g、尿素 8g、玉米蛋白粉 2g、KCl 0.3g、Na2HPO4 0.2g、MgSO4.7H20 0.06g、蒸馏水 lOOOmL、pH 6.00
4.根据权利要求1或2所述一种人工湿地植物促生长剂，其特征在于所述枯草芽孢杆菌菌粉的制备方法中，枯草芽孢杆菌种子培养基的配方为:葡萄糖33g、玉米浆3ml、MgSO40.8g,K2HPO4 3.5g,KH2PO4 lg、蒸馏水lOOOmL、pH 7.2 ;枯草芽孢杆菌发酵培养基的配方为:葡萄糖 30g、蛋白胨 17g、MgSO4 lg、K2HP04 3g, KH2PO4 lg、蒸馏水 lOOOmL、pH 7.2。
5.根据权利要求1或2所述一种人工湿地植物促生长剂，其特征在于所述黑曲霉菌悬液的菌体浓度为107cfu/mL，所述枯草芽孢杆菌菌悬液的菌体浓度为108cfu/mL。
6.根据权利要求1或2所述一种人工湿地植物促生长剂，其特征在于所述黑曲霉菌粉的制备方法中，斜面培养基的配方为:NaNO3 2.0g、K2HPO4 1.0g, KCl 0.5g、MgSO4 0.5g、FeSO4 0.01g、蔗糖30g、琼脂20g、蒸馏水1000mL、pH自然；斜面培养活化温度为30°C，培养时间为48ho
7.根据权利要求1或2所述一种人工湿地植物促生长剂，其特征在于所述枯草芽孢杆菌菌粉的制备方法中，斜面培养基的配方为:牛肉膏3 g、蛋白胨1 g、氯化钠5 g、琼脂20 g、蒸馏水100mUpH 7.2 ;斜面培养活化温度为35°C，培养时间为50h。
8.根据权利要求1或2所述一种人工湿地植物促生长剂，其特征在于所述喷雾干燥的进风口温度为150°C，出风口温度为50°C，所述黑曲霉菌粉中含水量不高于10%，所述枯草芽孢杆菌菌粉中含水量不高于10%。
9.根据权利要求1或2所述一种人工湿地植物促生长剂，其特征在于所述壳聚糖的粘度为 0.25 ?0.65Pa.S。
10.根据权利要求1或2所述一种人工湿地植物促生长剂，其特征在于所述人工湿地植物促生长剂的施用量为每100株植物施加30g-50g。
【专利摘要】本发明公开一种人工湿地植物促生长剂，该人工湿地植物促生长剂的配方按重量份数计，由3-6份黑曲霉菌粉、4-7份枯草芽孢杆菌菌粉和1-3份壳聚糖组成。本发明的一种人工湿地植物促生长剂，针对黑曲霉和枯草杆菌分别选择合适的发酵培养基，得到的黑曲霉菌粉和枯草芽孢杆菌菌粉，再搭配壳聚糖后，用于人工湿地后，能够加快人工湿地植物的快速繁衍，促进根系发达，加快人工湿地的快速形成，尽早发挥湿地净化污水的功能，恢复生态水环境。
【IPC分类】A01G7-06, A01P21-00, A01N63-04, A01N63-00
【公开号】CN104585242
【申请号】CN201410820515
【发明人】张琰, 卢海燕, 李才锐
【申请人】张琰
【公开日】2015年5月6日
【申请日】2014年12月23日