红叶黄八丈的组培快繁方法，与实施例1的区别在于：
[005引步骤（2)中，启动培养基的组成为:MS基本培养基，补充0.08mg/LIAA、0.6mg/L KT、50g/L薦糖、8g/L琼脂；
[0059] 步骤（3)中，增殖培养基的组成为：B5基本培养基，补充0.05mg/LNAA、0.05mg/L KT、0.1mg/L6-BA、100mg/LCH;
[0060] 步骤(4)中，生根培养基的组成为：1/2B5基本培养基，补充0.5mg/LIBA。
[0061 ]本实施例中，启动培养过程中，第一个蔽芽生成的时间为40天，启动培养结束时， 蔽芽伸长l-2cm;增殖培养过程中，第一个丛生芽生成的时间为67天，增殖培养结束时，丛 生芽株局1一3cm，增殖系数为2-3。
[0062] 实施例6
[0063] 本实施例所述的一种山红叶黄八丈的组培快繁方法，与实施例1的区别在于：
[0064] 步骤(2)中，启动培养基的组成为:MS基本培养基，补充0.015mg/LIAA、0.15mg/L KT、20g/L薦糖、2g/L琼脂；
[00化]步骤（3)中，增殖培养基的组成为：B5基本培养基，补充0.05mg/LNAA、0.05mg/L KT、0.5mg/L6-BA、300mg/LCH;
[0066] 步骤(4)中，生根培养基的组成为：1/2B5基本培养基，补充0.3mg/LIBA。
[0067] 本实施例中，启动培养过程中，第一个蔽芽生成的时间为28天，启动培养结束时， 蔽芽伸长l-2cm;增殖培养过程中，第一个丛生芽生成的时间为88天，增殖培养结束时，丛 生芽株局1一3cm，增殖系数为2-3。
[006引实施例7
[0069] 本实施例所述的一种山红叶黄八丈的组培快繁方法，与实施例1的区别在于：
[0070] 步骤（2)中，启动培养基的组成为:MS基本培养基，补充0.03mg/LIAA、0.4mg/L KT、40g/L薦糖、6g/L琼脂；
[0071] 步骤（3)中，增殖培养基的组成为：B5基本培养基，补充ο. 15mg/LNAA、0.15mg/L KT、0.9mg/L6-BA、600mg/LCH;
[0072] 步骤(4)中，生根培养基的组成为：1/2B5基本培养基，补充O.lmg/LIBA。
[0073] 本实施例中，启动培养过程中，第一个蔽芽生成的时间为27天，启动培养结束时， 蔽芽伸长l-2cm;增殖培养过程中，第一个丛生芽生成的时间为58天，增殖培养结束时，丛 生芽株局1一3cm，增殖系数为2-3。
[0074] 实施例8
[0075] 本实施例所述的一种山红叶黄八丈的组培快繁方法，与实施例1的区别在于：
[0076] 步骤(2)中，启动培养基的组成为:MS基本培养基，补充0.015mg/LIAA、0.15mg/L KT、20g/L薦糖、2g/L琼脂；
[0077] 步骤（3)中，增殖培养基的组成为：B5基本培养基，补充0.15mg/LNAA、0.15mg/L KT、0.9mg/L6-BA、60mg/LCH;
[0078] 步骤(4)中，生根培养基的组成为：1/2B5基本培养基，补充O.lmg/LIBA。
[0079] 本实施例中，启动培养过程中，第一个蔽芽生成的时间为28天，启动培养结束时， 蔽芽伸长l-2cm;增殖培养过程中，第一个丛生芽生成的时间为58天，增殖培养结束时，丛 生芽株局1一3cm，增殖系数为2-3。
[0080] 实施例9
[0081] 本实施例所述的一种山红叶黄八丈的组培快繁方法，与实施例1的区别在于：
[0082] 步骤（2)中，启动培养基的组成为:MS基本培养基，补充0.03mg/LIAA、0.4mg/L KT、40g/L薦糖、6g/L琼脂；
[0083] 步骤（3)中，增殖培养基的组成为：B5基本培养基，补充0.05mg/LNAA、0.05mg/L KT、0.5mg/L6-BA、300mg/LCH;
[0084] 步骤(4)中，生根培养基的组成为：1/2B5基本培养基，补充0.3mg/LIBA。
[0085] 本实施例中，启动培养过程中，第一个蔽芽生成的时间为27天，启动培养结束时， 蔽芽伸长l-2cm;增殖培养过程中，第一个丛生芽生成的时间为87天，增殖培养结束时，丛 生芽株局1一3cm，增殖系数为2-3。
[00化]实施例10
[0087] 启动培养基中生长激素成分和浓度对蔽芽生长的影响
[0088] 取生长情况一致的外植体若干，经过灭菌惊干后接种到pH值为6.3-6.7的启动培 养基上培养3-5周，培养溫度为24-28°C，光照强度为2000-3000LX，光照时间为14-18h/ d。其中启动培养基采用B5基本培养基，补充生长激素、薦糖、琼脂。在B5基本培养基、薦糖、 琼脂均相同的条件下，根据生长激素的成分和浓度进行分组，观察并记录培养基中外植体 的培养情况，具体分组及培养结果见表1。
[0089] 表1启动培养基中生长激素成分和浓度对蔽芽生长的影响结果
[0090]
[0091] 从上表可W看出，IAA和KT同时使用比二者任一单用时的分化率要高得多，平均蔽 芽长度也更长，且从7-9组可W看出，两者同时使用时，IAA为0.02mg/L，KT为0.2mg/L时，分 化率最高，为启动培养基的最适合的生长激素组成条件。
[0092] 实施例11
[0093] 增殖培养基中生长激素成分和浓度对增殖的影响
[0094] 取生长情况一致的经过启动培养的蔽芽若干，接种到增殖培养基上培养6-8周， 培养溫度为24-28°C，光照强度为2000-3000LX，光照时间为14-1她/d。其中增殖培养基 采用B5基本培养基，补充生长激素，在B5基本培养基条件相同的情况下，根据生长激素的成 分和浓度进行分组，观察并记录培养基中蔽芽的培养情况，具体分组及培养结果见表2。 [00M]表2增殖培养基中生长激素成分和浓度对增殖的影响结果
[0096]
[0097] 从上表可W看出，魁4、0、6-84、邸同时使用比四者任一单用时的增殖率要高得 多，平均株高也更高，且从13-15组可W看出，四者同时使用时，NAA为0.1mg/L，KT为O.lmg/ L，6-BA为0.8mg/L，CH为500mg/L时，其增殖率最高，为增殖培养基的最适合的生长激素组成 条件。
[009引实施例12
[0099] 生根培养基中生长激素成分和浓度对生根的影响
[0100] 取生长情况一致的经过增殖培养的丛生芽的单株若干，接种到增殖培养基上培养 3-4周，培养溫度为24-28°C，光照强度为2000-3000LX，光照时间为14-1她/d。其中生根 培养基采用1/2B5基本培养基，补充IBA，在1/2B5基本培养基条件相同的情况下，根据IBA的 浓度进行分组，观察并记录培养基中丛生芽的单株的培养情况，具体分组及培养结果见表 3。
[0101 ]表3生根培养基中生长激素成分和浓度对生根的影响结果 [0102]
[010；3] 从上表可W看出，IBA为0.2mg/L时，其生根率达到90%，且长势较好，平均生根数 和平均根长均较高，为生根培养基的最适合的生长激素条件。
[0104]W上仅是本发明的优选实施方式，应当指出的是，上述优选实施方式不应视为对 本发明的限制，本发明的保护范围应当W权利要求所限定的范围为准。对于本技术领域的 普通技术人员来说，在不脱离本发明的精神和范围内，还可W做出若干改进和润饰，运些改 进和润饰也应视为本发明的保护范围。
【主权项】
1. 一种山红叶黄八丈的组培快繁方法，其特征在于:包括以下步骤： (1)外植体选取及灭菌：切取山红叶黄八丈带芽茎段，采用酒精和升汞灭菌处理后，得 外植体； ⑵启动培养:将步骤⑴所得外植体接种到启动培养基中培养3-5周，腋芽生成，所述 启动培养基的组成为:MS基本培养基，补充0.01 - 0.08mg/LΙΑΑ、0·1 - 0.6mg/LKT、10- 50g/L鹿糖、1 一8g/L琼脂； (3) 增殖培养:切取步骤(2)所得腋芽，接种到增殖培养基中培养6-8周，丛生芽生成， 所述增殖培养基的组成为:B5基本培养基，补充0.05-0.25mg/LΝΑΑ、0.05-0.25mg/LKT、 0.1-1.0mg/L6-BA^100-800mg/LCH； (4) 生根培养:将步骤(3)所得丛生芽分离成单芽，接种到生根培养基中培养3-4周即 得山红叶黄八丈无菌苗，所述生根培养基的组成为：1/2B5基本培养基，补充0.1 -0.5mg/L IBAo2. 根据权利要求1所述的一种山红叶黄八丈的组培快繁方法，其特征在于:所述外植体 选取及灭菌的具体操作为:选取山红叶黄八丈幼嫩枝条，去掉叶片，切割成长度为2-3cm的 带芽茎段，在无菌操作台上，用75%的酒精处理8-15s，再用0.1%的升汞处理8-13min，无 菌水冲洗4 一6次，晾干即可。3. 根据权利要求1所述的一种山红叶黄八丈的组培快繁方法，其特征在于:所述启动培 养基的组成为:MS基本培养基，补充0·015-0·03mg/LΙΑΑ、0· 15-0·4mg/LKT、20-40g/L 蔗糖、2-6g/L琼脂。4. 根据权利要求3所述的一种山红叶黄八丈的组培快繁方法，其特征在于:所述启动培 养基的组成为:MS基本培养基，补充0.02mg/LIAA、0.2mg/LKT、30g/L蔗糖、5g/L琼脂。5. 根据权利要求1所述的一种山红叶黄八丈的组培快繁方法，其特征在于:所述增殖培 养基的组成为：B5 基本培养基，补充 0.05-0.15mg/LΝΑΑ、0·05-0.15mg/LΚΤ、0·5 - 0.9mg/L6-BA、300-600mg/LCH。6. 根据权利要求5所述的一种山红叶黄八丈的组培快繁方法，其特征在于:所述增殖培 养基的组成为:B5基本培养基，补充O.lmg/LNAA、0.1mg/LKT、0.8mg/L6-BA、500mg/LCH。7. 根据权利要求1所述的一种山红叶黄八丈的组培快繁方法，其特征在于:所述生根培 养基的组成为：1/2B5基本培养基，补充0.1 -0.3mg/LIBA。8. 根据权利要求7所述的一种山红叶黄八丈的组培快繁方法，其特征在于:所述生根培 养基的组成为：1/2B5基本培养基，补充0.2mg/LIBA。9. 根据权利要求1所述的一种山红叶黄八丈的组培快繁方法，其特征在于:所述启动培 养基的pH值为6.3-6.7。10. 根据权利要求1所述的一种山红叶黄八丈的组培快繁方法，其特征在于:所述启动 培养、增殖培养、生根培养步骤中，培养温度为24-28°C，光照强度为2000-3000Lx，光照时 间为14一18h/d〇
【专利摘要】本发明公开一种山红叶黄八丈的组培快繁方法，包括以下步骤：(1)外植体选取及灭菌：切取山红叶黄八丈带芽茎段，采用酒精和升汞灭菌处理后，得外植体；(2)启动培养：将步骤(1)所得外植体接种到启动培养基中培养3—5周，腋芽生成；(3)增殖培养：切取步骤(2)所得腋芽，接种到增殖培养基中培养6—8周，丛生芽生成；(4)生根培养：将步骤(3)所得丛生芽分离成单芽，接种到生根培养基中培养3—4周即得山红叶黄八丈无菌苗；所用培养基配方简单，组培流程简便，培养时间短，增殖频率高，幼苗整齐，便于后期统一的移栽和种植管理，降低了人工成本，能保证所长出的幼苗植株在形状上的一致性，易于操作，可进行产业化生产。
【IPC分类】A01H4/00
【公开号】CN105409782
【申请号】CN201511024658
【发明人】沈香兰, 王小辉, 马良良, 马建华, 杨小霞
【申请人】四川禾木本业农林科技有限公司
【公开日】2016年3月23日
【申请日】2015年12月30日