一种梨树体细胞胚的生长与分化培养基的制作方法
【技术领域】
[0001]本发明涉及一种梨树离体叶片的体细胞胚的生长与分化培养基，属于植物学领域。
【背景技术】
[0002]梨树是蔷薇科梨属，多年生落叶果树，乔木，在全球均有广泛分布，全世界约有35个原生种，野生分布于欧、亚及非洲，分类上分为东方梨及西洋梨两大类。中国梨栽培面积和产量仅次于苹果。
[0003]梨树为一种具有较高开发价值的树种，目前，通常采用的繁殖方式为扦插繁殖，而此种繁殖方式易感染叶斑病等真菌性病害，春夏季其又易受蚜虫危害，其病毒严重，叶片花斑易脱落，良种化程度降低；而劣质种苗的使用又导致梨树固有的优良特性日益丧失，这在一定程度上约束了该树种的发展和推广应用，因此，选择、繁育优良梨树品系成为一个十分突出的生产问题，组培快繁是梨树良种产业化的一种有效途径，相关方面的报道也较多，但有关梨树叶片直接诱导体细胞胚及再生快繁系统的技术研究未见有成功的报道。
【发明内容】
[0004]为了克服现有技术的不足，本发明的目的在于提供一种能够有效为生产上提供量大质优、提纯复壮的梨树苗木的梨树体细胞胚的生长与分化培养基。
[0005]为了实现上述发明目的，本发明是通过以下技术方案来实现的:
一种梨树体细胞胚的生长与分化培养基，其特征在于，包括1/2改良MS+ 1.0?1.5mgL VBA + 0.5 ?1.0mgL J2, 4_D + 2.0 ?3.0mgL JKT + 6.0 ?7.0gL 1 琼脂 + 20gL 1 蔗糖 +2.0 ?2.5% phytagel,且 pH 值为 5.8 ?6.0。
[0006]—种梨树体细胞胚的生长与分化培养基，优选包括1/2改良MS+ 1.2 mgL 'θ-ΒΑ +
0.8mgL '2, 4-D +2.5mgL JKT + 6.5gL 1 琼脂 + 20gL 1 蔗糖+2.0% phytagel,且pH值为6.0。
[0007]进一步，所述的改良MS包括常量营养元素、微量营养元素和有机试剂。
[0008]更进一步，所述的常量营养元素的组分和其对应的浓度如下:
硝酸钾1900 mg/L ；
硫酸铵1500 mg/L ；
七水硫酸镁350mg/L ；
二水氯化钙420 mg/L ；
无水磷酸二氢钾185 mg/L ；
乙二胺四乙酸二钠26.8 mg/L;
七水硫酸亚铁15.9 mg/L ο
[0009]所述的微量营养元素的组分和其对应的浓度如下:
四水硫酸锰22.5 mg/L;
硫酸锌6.8 mg/L ； 硼酸5.4 mg/L ；
碘化钾1.Ο mg/L ；
钼酸钠0.2 mg/L ；
硫酸铜0.02 mg/L ；
氯化钴(λ 05 mg/L ο
[0010]而所述的有机试剂的组分和其对应的浓度如下:
盐酸硫胺素 10.0 mg/L ；
烟酸1.0 mg/L ；
盐酸卩比卩多醇 1.0mg/L ；
肌醇100.0 mg/L ο
[0011]本发明的有益效果是:本发明通过改良基本培养基及成分、调整培养条件等配套措施，使得植株移栽成活率可达到96%以上，种苗生长健壮，可有效解决优良种苗种质退化问题，也可为生产上提供大量优质提纯复壮的梨树苗木，此外，还可为梨树遗传转化或诱变育种选育新品种提供一个理想的受体体系。
【具体实施方式】
[0012]下面将结合具体实施例详细说明本发明的【具体实施方式】:
实施例1
梨树体细胞胚的生长与分化培养基，包括1/2改良MS+ 1.0 mgLk-BA + 0.5mgL J2, 4-D+ 2.0mgL JKT + 6.0gL1 琼脂 + 20gL 1 蔗糖+2.0% phytagel,且 pH 值为 5.8。
[0013]
实施例2
梨树体细胞胚的生长与分化培养基，包括1/2改良MS+ 1.5 mgL1-BA +1.0mgL J2, 4-D+ 23.0mgL JKT + 7.0gL 1 琼脂 + 20gL 1 蔗糖+2.5% phytagel,且 pH 值为 5.9。
[0014]
实施例3
梨树体细胞胚的生长与分化培养基，包括1/2改良MS+ 1.2 mgL 'θ-ΒΑ + 0.8mgL J2, 4-D+2.5mgL JKT + 6.5gL 1 琼脂 + 20gL 1 蔗糖 +2.0% phytagel,且 pH 值为 6.0。
[0015]上述实施例以实施例3为最佳实施例。
[0016]且其中上述的3个实施例中，改良MS包括常量营养元素、微量营养元素和有机试剂，其中，常量营养元素的组分和其对应的浓度如下:
硝酸钾1900 mg/L ；
硫酸铵1500 mg/L ；
七水硫酸镁350mg/L ；
二水氯化钙420 mg/L ；
无水磷酸二氢钾185 mg/L ；
乙二胺四乙酸二钠26.8 mg/L;
七水硫酸亚铁15.9 mg/L ο
[0017]所述的微量营养元素的组分和其对应的浓度如下: 四水硫酸锰22.5 mg/L;
硫酸锌6.8 mg/L ；
硼酸5.4 mg/L ；
碘化钾1.0 mg/L ；
钼酸钠0.2 mg/L ；
硫酸铜0.02 mg/L ；
氯化钴0.05 mg/L ο
[0018]而所述的有机试剂的组分和其对应的浓度如下:
盐酸硫胺素 10.0 mg/L ；
烟酸1.0 mg/L ；
盐酸卩比卩多醇 1.0mg/L ；
肌醇100.0 mg/L ο
[0019]本发明利用近几年植物细胞和组织培养中的热点研究植物体细胞胚胎发生技术快繁种子繁殖困难的梨树才是解决上述问题的根本途径，它不但能解决梨树种质退化的问题，达到优良种苗脱毒、提纯复壮及快速繁殖的目的，而且也是高效再生种子来源的重要途径，还是进行遗传转化或诱变育种选育新品种的理想受体材料。
[0020]以上已以较佳实施例公开了本发明，然其并非用以限制本发明，凡采用等同替换或者等效变换方式所获得的技术方案，均落在本发明的保护范围之内。
【主权项】
1.一种梨树体细胞胚的生长与分化培养基，其特征在于，包括1/2改良MS+ 1.0?1.5mgL VBA + 0.5 ?1.0mgL J2, 4_D + 2.0 ?3.0mgL JKT + 6.0 ?7.0gL 1 琼脂 + 20gL 1 蔗糖 +2.0 ?2.5% phytagel,且 pH 值为 5.8 ?6.0。2.—种梨树体细胞胚的生长与分化培养基，其特征在于，包括1/2改良MS+1.2mgL ^-BA + 0.8mgL 12, 4_D +2.5mgL:KT + 6.5gL 1 琼脂 + 20gL 1 鹿糖 +2.0% phytagel,且pH值为6.0。3.根据权利要求1或2所述的一种梨树体细胞胚的生长与分化培养基，其特征在于，所述的改良MS包括常量营养元素、微量营养元素和有机试剂。4.根据权利要求3所述的一种梨树体细胞胚的生长与分化培养基，其特征在于，所述的常量营养元素的组分和其对应的浓度如下: 硝酸钾1900 mg/L ； 硫酸铵1500 mg/L ； 七水硫酸镁350mg/L ； 二水氯化钙420 mg/L ； 无水磷酸二氢钾185 mg/L ； 乙二胺四乙酸二钠26.8 mg/L; 七水硫酸亚铁15.9 mg/L ο5.根据权利要求3所述的一种梨树体细胞胚的生长与分化培养基，其特征在于，所述的微量营养元素的组分和其对应的浓度如下: 四水硫酸锰22.5 mg/L; 硫酸锌6.8 mg/L ； 硼酸5.4 mg/L ； 碘化钾1.0 mg/L ； 钼酸钠0.2 mg/L ； 硫酸铜0.02 mg/L ； 氯化钴0.05 mg/L ο6.根据权利要求3所述的一种梨树体细胞胚的生长与分化培养基，其特征在于，所述的有机试剂的组分和其对应的浓度如下: 盐酸硫胺素 10.0 mg/L ； 烟酸1.0 mg/L ； 盐酸卩比卩多醇 1.0mg/L ； 肌醇100.0 mg/L ο
【专利摘要】一种梨树体细胞胚的生长与分化培养基，其特征在于，包括1/2改良MS+1.0～1.5？mgL-16-BA+0.5～1.0mgL-12,4-D+2.0～3.0mgL-1KT+？6.0～7.0gL-1琼脂+20gL-1蔗糖+2.0～2.5%？phytagel,且pH值为5.8～6.0。本发明通过改良基本培养基及成分、调整培养条件，使繁殖困难的梨树通过体细胞胚发生途径快繁，植株移栽成活率达到96%以上，种苗生长健壮，可有效解决优良种苗种质退化问题，也可为生产上提供大量优质提纯复壮的苗木，还可为梨树遗传转化或诱变育种选育新品种提供一个理想的受体体系。
【IPC分类】A01H4/00
【公开号】CN105409777
【申请号】CN201510938612
【发明人】不公告发明人
【申请人】青岛百瑞吉生物工程有限公司
【公开日】2016年3月23日
【申请日】2015年12月16日