中透艺春兰的组培方法
【技术领域】
[0001] 本发明属于植物组培技术领域，涉及一种中透艺春兰的组培方法。
【背景技术】
[0002] 中透艺是兰花叶艺的一种，在兰花叶艺品种里，它比一般兰花更具观赏价值。中 透，指叶片出现贯通叶中的白色宽线条，花叶面出现绿白或绿黄相间的缟艺，即在兰花的叶 面上出现长短和宽狭不一致的白或黄颜色的"实体"线条。
[0003] -株艺兰从花籽至最高艺向的境界，至少约需经过五年至十五年或更长的时间。 而常规情况下种子不完全，极难萌发，如果沿用传统的分株繁殖法，繁殖系数又极低，致使 许多珍惜品种无法大量繁殖以满足市场需求。春兰根状茎是中国兰继代增殖的有利阶段， 也是快速繁殖提高增殖系数的关键。由于兰花叶面上出现的那些美丽的缟艺性状，不具有 较高的遗传稳定性，通常情况下，组培苗在受到培养环境的影响下，艺向具有不稳定性。研 究杂交兰和线艺兰的组织培养已有报道，但对中透艺春兰的组培及叶艺兰的艺向培养仍未 见报道。
[0004] 中国专利文献[【申请号】201010127788.4]公开了一种春兰种苗繁殖方法，其种苗 获得主要包括种子萌发、原球茎继代增殖和生根培养过程，其特征在于该繁殖方法在种苗 获得后还进行生根苗的炼苗及与菌根真菌的菌根化过程。上述采用春兰种子无菌萌发与菌 根真菌共生的菌根化培育技术，既可繁殖优良品种，从种子实生苗中选择优良兰株，又能快 速提高春兰繁育速度，克服纯组培苗生长缓慢，周期长，甚至不开花的缺点，对春兰的大面 积产业化扩繁具有重要的利用价值。但该方案并未公开艺向培养的相关技术方案。
【发明内容】
[0005] 本发明的目的是针对现有技术的不足，提供一种组培快繁及艺向稳定的中透艺春 兰的组培方法。
[0006] 为达到上述目的，本发明采用了下列技术方案:一种中透艺春兰的组培方法，包括 以下步骤：
[0007] A、选材，在实验室培养中获得的整条都为淡黄色的中透艺春兰根状茎作为组培材 料，
[0008] B、增殖培养，用含有MS、TDZ、6-BA和椰乳的培养基对中透艺春兰根状茎在培养室 进行增殖培养，
[0009] C、分化培养，用含有MS、6-BA、IBA和椰乳的培养基对中透艺春兰根状茎在培养室 进行分化培养，
[0010] D、生根培养，用含有1^、6-84、184、祖4^(：_^?的培养基对中透艺春兰根状茎在 培养室进行生根培养。
[0011]在上述的中透艺春兰的组培方法中，在步骤B中，所述的培养基为3/4MS+TDZ 0.5mg · L-^Θ-ΒΑ l.Omg · L-kSOniL · L-1 椰乳，在步骤C中，所述的培养基为3/4MS+6- BAl.Omg · L-i+IBA l.Omg · L-i+SOmL · L-1 椰乳，在步骤D中，所述的培养基为1/21^+6_ BA1 .Omg · L-hlBA 1 .Omg · L-kNAA 1 .Omg · L-k2g · L-IC+Sg · L-^VP。
[0012] 在上述的中透艺春兰的组培方法中，所述的培养室温度为25°C±2°C，相对湿度为 60%-80%，光照强度为1000-3000LX，光照时间为10-14h/d。
[0013] 在上述的中透艺春兰的组培方法中，所述的培养室温度为25°C，相对湿度为 70%，光照强度为2000Lx，光照时间为12h/d。
[0014] 与现有的技术相比，本发明的优点在于：本方法组培得到的中透艺春兰，艺向稳 定，为中透艺春兰的培育及工厂化提供了可靠的方法。
【具体实施方式】
[0015] 下述实施例中所用的试剂，如无特殊说明，可以从常规生化试剂商店购买得到。以 下实施例中的定量数据，均设置三次重复实验，结果取平均值。
[0016] 实施例1
[0017]将以梅瓣芽变后产生的中透艺春兰根状茎为材料，选取整条都为淡黄色的中透艺 春兰根状茎作为组培材料，置于放有培养基的培养瓶中，并于培养室内进行增殖培养，培养 基为3/4MS+TDZ 0.5mg · L-^Θ-ΒΑ l.Omg · L-bSOniL · L-1 椰乳，培养室温度为25°C，相对湿 度为70%，光照强度为2000Lx，光照时间为12h/d，增殖培养结束后，将中透艺春兰根状茎放 入装有培养基的培养瓶中，并于培养室内进行分化培养，培养基为3/4MS+6-BA1.0mg · L一b IBA 1 .Omg · L-^OmL · L-1椰乳，培养室温度为25°C，相对湿度为70%，光照强度为2000Lx， 光照时间为12h/d，分化培养结束后，将中透艺春兰根状茎放入装有培养基的培养瓶中进行 生根培养，培养基为l/2MS+6-BA1.0mg · L-klBA l.Omg · L-kNAA l.Omg · L-k2g · L-lC+ 5g · I^PVP，培养室温度为25°C，相对湿度为70%，光照强度为2000Lx，光照时间为12h/d。生 根培养结束，即完成中透艺春兰的组培。
[0018] 实施例2
[0019] 将以梅瓣芽变后产生的中透艺春兰根状茎为材料，选取整条都为淡黄色的中透艺 春兰根状茎作为组培材料，置于放有培养基的培养瓶中，并于培养室内进行增殖培养，培 养基为3/4MS+TDZ 0.5mg · L-be-BA l.Omg · L-i+SOmL · L-1 椰乳，培养室温度为23°C，相对 湿度为60%，光照强度为lOOOLx，光照时间为10h/d，增殖培养结束后，将中透艺春兰根状茎 放入装有培养基的培养瓶中，并于培养室内进行分化培养，培养基为3/4MS+6-BA1.0mg · L一1 + IBA l.Omg · L-i + SOmL · L-1椰乳，培养室温度为23°C，相对湿度为60%，光照强度为 lOOOLx，光照时间为10h/d，分化培养结束后，将中透艺春兰根状茎放入装有培养基的培养 瓶中进行生根培养，培养基为l/2MS+6-BA1.0mg · L-klBA l.Omg · L-kNAA l.Omg · L-工+ 2g · L-IC+Sg · L-^VP，培养室温度为23°C，相对湿度为60%，光照强度为lOOOLx，光照时间 为1 Oh/d。生根培养结束，即完成中透艺春兰的组培。
[0020] 实施例3
[0021] 将以梅瓣芽变后产生的中透艺春兰根状茎为材料，选取整条都为淡黄色的中透艺 春兰根状茎作为组培材料，置于放有培养基的培养瓶中，并于培养室内进行增殖培养，培养 基为3/4MS+TDZ 0.5mg · L-^Θ-ΒΑ l.Omg · L-bSOniL · L-1 椰乳，培养室温度为27°C，相对湿 度为80%，光照强度为3000Lx，光照时