一种防治心脑血管疾病的生物制剂及其应用的制作方法

专利名称：一种防治心脑血管疾病的生物制剂及其应用的制作方法
所属领域本发明属于一种生物方法制得菌体的代谢物的混合物，特别是一种有关与心脑血管疾病有关的药品原料或保健食品添加剂。
背景技术：
传统的高血脂等疾病治疗的生物药物中含有路伐西汀和常规纳豆激酶，这些物质被认为具有降血压和降血脂作用，但需要和许多种中药复合后才能有效，单独应用于该领域，几乎不能产生效果，而中药药性与产地、采药时间有很大关系，所以质量不稳定，不能作为工业化生产的稳定疗效生产的原料。
3、发明目的本发明提供一种对预防和缓解因心脑血管疾病引起卒死的疾病，明显提高治愈率的新药及其应用。
本发明的目的是这样实现的一种防治心脑血管疾病的生物制剂，其组成包括路伐西汀，其中包含纳豆激酶和弹性蛋白酶，其重量配比为路伐西汀150mg纳豆激酶6000-18000μ/日弹性蛋白酶500-2500μ/日。
上述的防治心脑血管疾病的生物制剂，所述的纳豆激酶是纳豆激酶芽孢杆菌Bacillus Subtilis/nattoHw 9302 CGMCC No 0718和/或者弹性蛋白酶是枯草杆菌异变体生产的弹性蛋白酶Bacillus subtilis Hw 236-5 CGMCC N00652和/或者红曲异变体生产的路伐西汀Monascus purpureus Went。
上述的生物制剂在制药和保健行业的应用，将上述产品应用于制作心脑血管并发症的药物或患心脑血管并发症高发人群的保健食品。
本发明的优点在于l、本产品中活性物制品协同作用具有对人体心血管内有机纤维的明显溶解性能，服用后可以激活体内的纤维溶解酶原，促进体内的内源性纤溶酶的产生，并增加其产生量，因此对于血管特别是心脑血管纤维性栓塞、阻塞及血小板聚集等患者的疾病预防和缓解有明显效果，使心脑血管疾病的卒死率和发病率，分别降低30％到50％，这将为数十万心脑血管的易发和高发人群带来巨大福音。
2、本产品使用一个疗程后可以使高密度脂蛋白产生显著变化，可以明显降低胆固醇甘油三酯，治疗高血脂症，可以分解血管的陈旧蛋白，恢复血管的弹性，有效的防治动脉粥样硬化症。
3、本产品对人体胆固醇合成对需要的限速酶的还原酶形成强烈的生物限制，可以有效降低血脂中的有效成份，使血管通畅，降低血压，并且本产品易溶于水，不会产生血管中的固性物。经临床检验，本产品安全无毒，并且对抑制肿瘤的生长有明显效果。
4、本产品中的三种生物组份形成生物学上的协同互补和增强，使其医疗方面取得的成绩，令世界同仁刮目相看。
实施例l一、原料l、原料l纳豆激酶，选用纳豆芽孢杆菌Bacillus subtilis/natto Hw9302其菌学特征菌体杆状，内生孢子长2-3μM，宽0.7-0.8μM革兰氏染色+孢子形态椭圆，中生，孢子囊不膨胀菌落形态圆形，不透明，无光泽起趋产酸+产气-淀物水解+明胶液化+No3→No2+厌氧洋菜中-酪朊水解+生长温度℃最高45-55最低5-20菌株来源该菌株系从传统食品豆豉中分离纯化而来。利用分离所得菌株制备豆豉，豆豉的质量检验结果符合豆豉质量标准。该菌在中国微生物菌种保藏中心CGMCC有保藏。
关于枯草芽孢杆菌(Bacills subtilis)与纳豆芽孢杆菌(Bacillu natto)。日本泽村(Sawamura)氏定名的纳豆芽孢杆菌，此菌外形和芽孢枯草杆菌相似。在Bergey氏细菌鉴定手册第八版中描述成可能的同物异名，纳豆芽胞杆菌的原始菌株与枯草杆菌相同。
2、原料2生产弹性酶的枯草杆菌Bacillus subtilis Hw236-5 CGMCC保藏号0652菌字特性


说明“+”为90～100％的菌株为阳性“-”为90～100％的菌株为阴性此生理生化试验是以已经中科院微生物所鉴定过的枯草芽孢杆菌为模式株，并根据《伯杰氏细菌鉴定手册》第九版及《一般细菌常用鉴定方法》的规定要求的实验进行的，经鉴定试验证明HW236-5为枯草芽孢杆菌。
3、原料3采用紫红色红曲霉Monascus purpureus Went Hw12-4-1，菌字特性菌落呈褶皱皮膜，成熟后呈葡萄酱紫色，能发酵纤维的二糖产生酸，不发酵蔗糖、果糖、山梨醇，D-阿拉伯糖生酸。
二、培养基1、纳豆芽孢杆菌蛋白胨 0.5～2％牛肉浸膏 0.5～2％蔗糖 0.5～2％Nacl 0.1～0.8％琼脂 1.5～2.0％PH5-82、枯草杆菌干酪素 1～5％葡萄糖 2～6％玉米提取液 0～0.5％K2HPO40～0.5％MgSO47H2O0～0.5％PH5-83、紫色红曲霉麦芽汁琼脂培养基三、培养生产方法1、纳豆激酶的生产方法1精选大豆、浸泡、蒸煮、将斜面活化菌种固体发酵生产方法制成种子液，按5-10％接种量，接入大豆上液体发酵生产方法在20-45℃下发酵12-48小时，后熟，提取纳豆激酶组分测定纳豆激酶的活性体，备用。
2、按如下配方制成发酵培养液碳源1.5％ 酶提取物0.6％氮源1.5％ KH2PO40.1％K2HPO40.2％MgSO47H2O0.06％CaCl22H2O0.02％PH6.0-8.0按5-10％接种量接种斜面盛液体菌种，发酵1-6天，提取纳豆激酶测定活性，备用。
3、纳豆激酶的另一种生产方法菌株纳豆枯草芽孢杆菌(Bacilus bultlis/natto)菌株预先在斜面上活化，然后接入液体培养基，过夜培养。
黄豆加工温水浸泡2-12h，水分含量在45％左右，在高压锅中以1kg/cm2压力下蒸煮0.5-1.5小时，冷却至20-60℃。
大豆发酵将过夜培养的菌种接入蒸煮后的大豆中，接菌量为5-10％，在20-45℃和95％温度下发酵12小时或24小时或36小时，最多为48小时(根据温度情况而定)，低温保存。
纳豆激酶提取物的制备取纳豆100g，加生理盐水5000ml，在10℃以下浸渍过液。以5000转离心30分钟，弃去沉淀，收集上清液，加入硫铵至饱和度60％，充分搅拌后，置冰箱过夜，以5000转离心30分钟，收集沉淀，透析脱盐，再以5000转离心，取上清液，得到纳豆激酶粗提液，冷冻干燥，得到作为本产品原料的纳豆激酶粉末。
4、弹性蛋白酶按培养基配好培养液，1kg/cm灭菌后，按5-10％接种量接入种子液，20-45℃发酵，12-48小时，提取弹性蛋白酶组分，测定活性、作原料备用。
5、紫色红曲霉的生产方法取大米、精选、浸泡、蒸熟、灭菌、接入固体斜面菌种20-40℃培养发酵1～3天，烘干、粉碎，测定路伐它汀含量，作原料备用。
四、制备将用以上方法生产的三种生物物质的重量配比为纳豆激酶弹性蛋白酶紫色红曲酶(6000或9000或12000或18000)μ/日(500或1000或15000或20000或25000)μ/日(1或15或25或35或50)mg(以路伐西汀计)/日混合后制成日用量的注射液口服液，饮片或粉末状药品。
实施例2本产品可以用于制作治疗心血管栓塞、阻塞性疾病、血小板聚集、高血压、高血脂等心脑血管疾病的各种注射或口服制剂，其效果表述在本说明书的优点部分已经记载。本产品也可作为该群体的保健食品添加剂，根据患病情况和体质情况由医生或制药单位标定用量。
权利要求
1.一种防治心脑血管疾病的生物制剂，其组成包括路伐西汀，其特征是其中包含纳豆激酶和弹性蛋白酶，其重量配比为路伐西汀150mg；纳豆激酶6000-18000μ/日；弹性蛋白酶500-2500μ/日。
2.根据权利要求1所述的防治心脑血管疾病的生物制剂，其特征是所述的纳豆激酶是纳豆激酶芽孢杆菌Bacillus Subtilis/nattoHw9302CGMCC No 0718和/或者弹性蛋白酶是枯草杆菌异变体生产的弹性蛋白酶Bacillus subtilis Hw236-5 CGMCC No0652和/或者红曲异变体生产的路伐西汀Monascus purpureusWent。
3.一种权利要求1或2所述的生物制剂在制药和保健行业的应用，其特征是将上述产品应用于制作心脑血管并发症的药物或患心脑血管并发症高发人群的保健食品。
全文摘要
一种防治心脑血管疾病的生物制剂及其应用。已有产品需要与中药等复合才能产生效果，而中药的产地，采药时间都影响着中药的药性，所以质量不稳定。本产品是一种防治心脑血管疾病的生物制剂，其组成包括路伐西汀，其中包含纳豆激酶和弹性蛋白酶，其重量配比为路伐西汀150mg；纳豆激酶6000－18000μ/日弹性蛋白酶500－2500μ/日。本产品用于治疗和预防心脑血管疾病的药品和该类疾病高发和易发人群的食品添加剂。
文档编号C12N9/54GK1442202SQ0210427
公开日2003年9月17日 申请日期2002年3月4日 优先权日2002年3月4日
发明者刘宇峰, 孙建华, 奚新伟, 王金英 申请人:黑龙江省科学院应用微生物研究所