专利名称：对营养缺乏的肾病患者进行补充的方法和组合物的制作方法
技术领域：
本发明涉及一种包含多种维生素和矿物质的组合物，还涉及一种使用该组合物治疗肾脏病及其并发症的治疗方法。
背景技术：
肾脏具有三个主要的生理功能，即排泄、代谢和内分泌功能。然而，水分、矿物质和其他营养物质的调节与代谢是肾脏最重要的功能。代谢废物的排泄包括尿素、肌酐、尿酸、血红蛋白降解产物和激素代谢产物都是通过肾脏来完成的。肾脏还通过分泌血管活性物质如肾素，参与动脉血压的调节。另外，肾脏能够分泌促进红细胞产生的红细胞生成素，并能够产生1，25-二羟维生素D3，即维生素D的活性形式。患肾脏疾病时，上述任何一种功能都有可能受到损害，从而导致患者营养状态的失衡。医学生理学315(Guyton &Hall，第9版.1996)。
肾脏疾病是导致死亡的主要原因之一，每年有数百万人发病。一般情况下，肾脏疾病可以分为两种类型1)急性肾衰竭和2)慢性肾衰竭。急性肾衰竭的特征为肾脏功能突然降低或丧失。相反，慢性肾衰竭是指肾脏功能逐渐丧失，通常为潜在病理现象的结果。例如，免疫系统疾病如红斑狼疮；代谢疾病如糖尿病和高血压；和感染性疾病如结核都可以导致慢性肾衰竭。随着肾功能的逐步恶化，患者发展为终末期肾衰竭(ESRD)而最终需要进行透析治疗或移植。Id，431页。
患有典型的慢性肾衰竭的患者将发展为全身水肿、酸中毒、尿毒症和血液中氮代谢物产物堆积。为了减轻上述症状，患者需要进行饮食治疗或透析。对肾脏疾病患者采取的限制蛋白饮食通常将导致维生素如叶酸、B族维生素和维生素C的缺乏。营养和肾脏手册42(Mitch & Klahr，编著，第3版.1998)(以下称“手册”)。此外，透析过程本身也可除去维生素和营养物质。患有慢性肾衰竭的患者，其胃肠对维生素的吸收也发生改变。Makoff，25Miner.Electrolyte Metabol.349-351(1999)。
采用肾脏病的限制饮食将会导致微量元素如锌和硒的缺乏。在患有蛋白尿的患者体内，与蛋白质结合度较高的矿物质将大量的流失。Zima等等.，17Blood Purif.182-186(1999)。此外，已经证实患者在接受透析后，血浆中硒的浓度有所降低。手册，43页。较差的营养状况和维生素、矿物质水平的不足将导致肾脏疾病患者极易患有贫血、感染和心血管疾病；或使已有疾病如高血脂、骨质疏松和病毒性肝炎发生恶化。Modern Nutrition in Health andDisease，1447(Shils等，编著，第9版.1999)。
营养干预是慢性肾脏疾病和终末期肾脏疾病治疗的关键。饮食治疗应该维持或改善肾脏疾病患者的营养状况；和减少或防止由肾衰竭所引起的尿毒症和产生的代谢毒素。在提供有效营养治疗的同时，简化复杂的食物疗法是一项挑战。在此描述的营养组合物及相关治疗方法还包括对肾脏疾病患者进行限制饮食时所缺乏的多种维生素和矿物质。因此，本发明提供的组合物及治疗方法通过简单的方法满足了肾脏疾病患者的营养需求。
发明内容
本发明提供一种营养组合物和使用该组合物对患有肾脏疾病的患者进行治疗的方法。特别地，本发明公开了一种包含大量维生素和矿物质的新型组合物，该组合物能够用于对患有肾脏疾病、肾功能不全、终末期肾脏疾病的患者所具有的营养缺乏状况进行补充。本发明所述的组合物还可以用作接受透析或限制饮食治疗的患者的营养增补剂。此外，该组合物还能够用于治疗导致氧化应激增加、胆固醇水平提高或同型半胱氨酸水平提高的各种疾病状态的营养缺乏。
本发明所述组合物包含大量的维生素和矿物质，能够改善患者的营养状况。本发明所述组合物中含有的维生素包括维生素C、维生素E、维生素B1、维生素B2、维生素B3、维生素B5、维生素B6、维生素B12、生物素和维生素B9。本发明所述组合物中含有的矿物质包括硒和锌。
本发明一实施方式中，该组合物可以包含一种或多种抗坏血酸形式的维生素C；d-α-生育酚琥珀酸酯或d-α-生育酚醋酸酯形式的维生素E；硫胺一硝酸盐形式的维生素B1；核黄素形式的维生素B2；烟酰胺或烟酸形式的维生素B3；泛酸(右旋泛酸钙)形式的维生素B5；盐酸吡哆醇形式的维生素B6；氰钴胺素性质的维生素B12；生物素；叶片酸、叶酸、甲基叶酸、叶酸酯和/或一种或多种叶酸酯的天然异构体包括(6S)-四氢叶酸或其聚谷氨酰衍生物、5-甲基-(6S)-四氢叶酸或其聚谷氨酰衍生物、5-甲酰基-(6S)-四氢叶酸或其聚谷氨酰衍生物、10-甲酰基-(6S)-四氢叶酸或其聚谷氨酰衍生物、5，10-亚甲基-(6S)-四氢叶酸或其聚谷氨酰衍生物、5，10-亚甲基-(6S)-四氢叶酸或其聚谷氨酰衍生物和5-亚胺甲基-(6S)-四氢叶酸或其聚谷氨酰衍生物形式的维生素B9；L-硒代蛋氨酸形式的硒；和L-Optizinic Z M L-200 Interhelth9TM或氧化锌形式的锌。
本发明另一实施方式中，该组合物可基本上不含有其他未在以上段落中进行描述的添加的维生素和矿物质。例如，本发明所述组合物可基本上不含有添加的α-胡萝卜素；基本上不含有添加的β-胡萝卜素；基本上不含有添加的叶黄素；基本上不含有添加的番茄红素；基本上不含有添加的玉米黄素；基本上不含有添加的维生素B4；基本上不含有添加的维生素B7；基本上不含有添加的维生素B8；基本上不含有添加的维生素B10；基本上不含有添加的维生素B11；基本上不含有添加的维生素D；基本上不含有添加的钙；基本上不含有添加的铬；基本上不含有添加的铁；基本上不含有添加的镁；基本上不含有添加的铜；基本上不含有添加的锰；基本上不含有添加的硼；基本上不含有添加的无味大蒜；基本上不含有添加的辅酶Q-10；基本上不含有添加的L-肉碱；基本上不含有添加的葡萄籽提取物；基本上不含有添加的绿茶提取物；基本上不含有添加的栎精；基本上不含有添加的山楂果提取物；和/或基本上不含有添加的α-硫辛酸。
本发明另一具体实施方式
中，本发明所述组合物可以基本上不含有添加的维生素C；基本上不含有添加的维生素E；基本上不含有添加的维生素B1；基本上不含有添加的维生素B2；基本上不含有添加的维生素B3；基本上不含有添加的维生素B5；基本上不含有添加的维生素B6；基本上不含有添加的维生素B12；基本上不含有添加的生物素；基本上不含有添加的维生素B9；基本上不含有添加的硒；和/或基本上不含有添加的锌。
本发明另一具体实施方式
中，该组合物可以包含约60mg至约140mg的维生素C；约40IU至约80IU的维生素E；约1.5mg至约4.5mg的维生素B1；约1mg至约3mg的维生素B2；约10mg至约30mg的维生素B3；约5mg至约15mg的维生素B5；约18mg至约42mg的维生素B6；约500μg至约1500μg的维生素B12；约150μg至约450μg的生物素；约3mg至约8mg的维生素B9；约35μg至约105μg的硒；和约10mg至约30mg的锌的组合物。
另一优选实施方式中，本发明所述组合物可以包含约80mg至约120mg的维生素C；约48IU至约72IU的维生素E；约2.4mg至约3.6mg的维生素B1；约1.6mg至约2.4mg的维生素B2；约16mg至约24mg的维生素B3；约8mg至约12mg的维生素B5；约24mg至约36mg的维生素B6；约800μg至约1200μg的维生素B12；约240μg至约360μg的生物素；约4.4mg至约6.6mg的维生素B9；约56μg至约84μg的硒；和约16mg至约24mg的锌。
另一实施方式中，本发明所述组合物可以包含约90mg至约110mg的维生素C；约54IU至约66IU的维生素E；约2.7mg至约3.3mg的维生素B1；约1.8mg至约2.2mg的维生素B2；约18mg至约22mg的维生素B3；约9mg至约11mg的维生素B5；约27mg至约33mg的维生素B6；约900μg至约1100μg的维生素B12；约270μg至约330μg的生物素；约4.95mg至约6.05mg的维生素B9；约63μg至约77μg的硒；和约18mg至约22mg的锌。
本发明另一优选实施方式中，该组合物可以包含约100mg的维生素C；约60IU的维生素E；约3mg的维生素B1；约2mg的维生素B2；约20mg的维生素B3；约10mg的维生素B5；约30mg的维生素B6；约12μg的维生素B12；约300μg的生物素；约5.5mg的维生素B9；约70μg的硒；和约20mg的锌。
刚才所描述的本发明实施方式可以每日施用于患者。这些实施方式还可以为口服给药的方式，并且还可以包含药学上可接受的载体。可以考虑使用这些配方以治疗患者的营养缺乏，所述患者由于肾脏疾病、终末期肾脏疾病、肾功能不全、透析治疗、饮食限制或导致氧化应激增加、胆固醇水平提高和/或同型半胱氨酸水平提高的其他疾病状态而需要此类治疗。
本发明还包括对患有营养缺乏的患者的营养缺乏进行补充的方法，所述营养缺乏是由于患者患有肾脏疾病、终末期肾脏疾病、肾功能不全、透析治疗、饮食限制或导致氧化应激的增加、胆固醇水平的提高和/或同型半胱氨酸水平的提高的其他疾病状态所引起的。本发明所述的方法还可以使用能够用作对接受透析治疗或限制饮食的患者进行营养补充的组合物。在一实施方式中，本发明所述的方法可以使用包含维生素C、维生素E、复合维生素B、硒和锌的组合物。特别地，本发明所述的方法可以使用包含维生素C、维生素E、维生素B1、维生素B2、维生素B3、维生素B5、维生素B6、维生素B12、生物素、维生素B9、硒和锌的组合物。
在一实施方式中，本发明所述的方法可以使用包含一种或多种抗坏血酸形式的维生素C；d-α-生育酚琥珀酸酯或d-α-生育酚醋酸酯形式的维生素E；硫胺一硝酸盐素形式的维生素B1；核黄素形式的维生素B2；烟酰胺或烟酸形式的维生素B3；泛酸(右旋泛酸钙)形式的维生素B5；盐酸吡哆醇形式的维生素B6；氰钴胺素形式的维生素B12；生物素；叶片酸、叶酸、甲基叶酸、叶酸酯和/或一种或多种叶酸酯的天然异构体包括(6S)-四氢叶酸或其聚谷氨酰衍生物、5-甲基-(6S)-四氢叶酸或其聚谷氨酰衍生物、5-甲酰基-(6S)-四氢叶酸或其聚谷氨酰衍生物、10-甲酰基-(6S)-四氢叶酸或其聚谷氨酰衍生物、5，10-亚甲基-(6S)-四氢叶酸或其聚谷氨酰衍生物、5，10-亚甲基-(6S)-四氢叶酸或其聚谷氨酰衍生物和5-亚胺甲基-(6S)-四氢叶酸或其聚谷氨酰衍生物形式的维生素B9；L-硒代蛋氨酸形式的硒；和L-Optizinic Z M L-200 Interhelth9TM或氧化锌形式的锌的组合物。
本发明另一实施方式中，该方法可以使用基本上不含有任何未在以上段落中进行描述的添加的维生素和矿物质。例如，本发明所述的方法可以使用基本上不含有添加的α-胡萝卜素；基本上不含有添加的β-胡萝卜素；基本上不含有添加的叶黄素；基本上不含有添加的番茄红素；基本上不含有添加的玉米黄素；基本上不含有添加的维生素B4；基本上不含有添加的维生素B7；基本上不含有添加的维生素B8；基本上不含有添加的维生素B10；基本上不含有添加的维生素B11；基本上不含有添加的维生素D；基本上不含有添加的钙；基本上不含有添加的铬；基本上不含有添加的铁；基本上不含有添加的镁；基本上不含有添加的铜；基本上不含有添加的锰；基本上不含有添加的硼；基本上不含有添加的无味大蒜；基本上不含有添加的辅酶Q-10；基本上不含有添加的L-肉碱；基本上不含有添加的葡萄籽提取物；基本上不含有添加的绿茶提取物；基本上不含有添加的栎精；基本上不含有添加的山楂果提取物；和/或基本上不含有添加的α-硫辛酸的组合物。
另一
具体实施例方式
中，本发明所述的方法可以使用基本上不含有添加的维生素C；基本上不含有添加的维生素E；基本上不含有添加的维生素B1；基本上不含有添加的维生素B2；基本上不含有添加的维生素B3；基本上不含有添加的维生素B5；基本上不含有添加的维生素B6；基本上不含有添加的维生素B12；基本上不含有添加的生物素；基本上不含有添加的维生素B9；基本上不含有添加的硒；和/或基本上不含有添加的锌的组合物。
另一实施方式中，本发明所述的方法可以使用包含约60mg至约140mg的维生素C；约40IU至约80IU的维生素E；约1.5mg至约4.5mg的维生素B1；约1mg至约3mg的维生素B2；约10mg至约30mg的维生素B3；约5mg至约15mg的维生素B5；约18mg至约42mg的维生素B6；约500μg至约1500μg的维生素B12；约150μg至约450μg的生物素；约3mg至约8mg的维生素B9；约35μg至约105μg的硒；和约10mg至约30mg的锌的组合物。
另一
具体实施例方式
中，该方法可以使用包含约80mg至约120mg的维生素C；约48IU至约72IU的维生素E；约2.4mg至约3.6mg的维生素B1；约1.6mg至约2.4mg的维生素B2；约16mg至约24mg的维生素B3；约8mg至约12mg的维生素B5；约24mg至约36mg的维生素B6；约800μg至约1200μg的维生素B12；约240μg至约360μg的生物素；约4.4mg至约6.6mg的维生素B9；约56μg至约84μg的硒；和约16mg至约24mg的锌的组合物。
本发明另一实施方式中，该方法可以使用包含约90mg至约110mg的维生素C；约54IU至约66IU的维生素E；约2.7mg至约3.3mg的维生素B1；约1.8mg至约2.2mg的维生素B2；约18mg至约22mg的维生素B3；约9mg至约11mg的维生素B5；约27mg至约33mg的维生素B6；约900μg至约1100μg的维生素B12；约270μg至约330μg的生物素；约4.95mg至约6.05mg的维生素B9；约63μg至约77μg的硒；和约18mg至约22mg的锌的组合物。
在一特别优选实施方式中，该方法可以使用包含约100mg的维生素C；约60IU的维生素E；约3mg的维生素B1；约2mg的维生素B2；约20mg的维生素B3；约10mg的维生素B5；约30mg的维生素B6；约12μg的维生素B12；约300μg的生物素；约5.5mg的维生素B9；约70μg的硒；和约20mg锌的组合物。
本发明所述方法包括使用本发明所述组合物对患者进行每日给药。该方法可以考虑使用包含药学上可接受载体的口服给药组合物。可以考虑使用这些配方以治疗患者由于肾脏疾病、终末期肾脏疾病、肾功能不全、透析治疗、饮食限制或其他疾病状态引起的营养缺乏。该组合物还可以用于治疗导致氧化应激增加、胆固醇水平提高和/或同型半胱氨酸水平提高的任何疾病状态下的营养缺乏。
本发明的其他目的、特征和优点将通过以下详细描述进行说明。虽然已指出本发明的具体实施方式
，但本发明还提供了仅起到说明目的的详细描述和特殊实施例。因此，本发明还包括在本发明精神和范围内，本领域技术人员通过此详细的描述而进行的各种改变和修改。
具体实施例方式
应当理解为本发明不限制于在此描述的特殊方法、方案、填充剂、赋形剂等，因为其可以进行改变。还应当理解为在此所使用的术语仅起到说明具体实施方式
的目的，而不是用于限制本发明的范围。应注意的是，在此所用的和所附权利要求书中所用的单数形式“一”和“该”包括复数代词，除非文中另外明确指出。因此，例如一维生素应理解为一种或多种维生素，并且还包括本领域技术人员所公知的与其等效的维生素等。
除非另有定义，在此所用的所有技术和科学术语与属于本发明领域内的普通技术人员理解的含义相同。虽然任何与在此描述的方法和材料相似或等效的方法和材料都可以用于实施或检验本发明，但本发明仍对具体方法、设备和材料进行了描述。
由于复杂的代谢和生物化学的变化，除了饮食限制外个体肾脏疾病的营养治疗需要独特的配方。所述饮食限制通常导致生命所需的营养如维生素C、维生素E、复合维生素B和锌的浓度降低。Rocco等，7J.RenalNutr.17-24(1997)。此外，患有终末期肾脏疾病的患者通常患有尿毒症，尿毒症将导致氧化应激的增加、自由基的产生、影响食欲和改变机体利用营养的能力。Tetta等，17 Blood Purif.118-126(1999)。透析过程还将导致必要营养物的缺失。Stein等，3 Blood Purif.52-62(1985)。本发明提供的新型组合物及其相关方法含有独特的维生素和矿物质混合物，能够用于对患有肾脏疾病的患者进行营养补充。
术语“肾脏疾病”为一般性表述，其包括一系列影响肾脏的病症。术语“肾脏疾病患者”包括患有肾脏疾病的患者。一般而言，根据患病的形态学部位，肾脏疾病分为肾小球型、小管型和血管型。肾小球为分支和网结毛细管的网状结构，能够从血液中过滤蛋白质、毒素和其它物质。包括免疫、血管和代谢疾病的副作用在内的很多因素都能够导致肾小球的伤害。肾小球疾病包括肾小球肾炎、肾病综合征、脂性肾病(lipoid nephrosis)、肾小球硬化症、Berger肾病和遗传性肾炎，但并不限制于此。Robbins Pathologic Basis of Disease942(Cotran等，第6版.1999)。
肾脏的小管从肾小球过滤液中吸收养分并转至血液中。由于小管上皮细胞对局部缺血和毒素特别敏感，因此，小管极易遭受损伤。小管的患病状态包括急性肾小管坏死、小管间质性肾炎、肾盂肾炎、尿酸性肾病和肾钙沉着症，但并不限制于此。Id.968-980页。
充分血管化的肾脏接收约25％的心输出量，全身血管疾病如血管炎和高血压对肾脏血管产生副作用。其它肾脏血管疾病包括良性肾硬化、肾动脉狭窄、血栓性微血管病、溶血性尿毒症综合征和镰状细胞病，但并不限制于此。Id.981-987页。此外，肿瘤如嗜酸细胞瘤和肾细胞癌也能够对肾脏功能造成损伤。Id.991-994页。无论源自何种病因，以上所描述的多种疾病最终将转变为慢性肾脏疾病和终末期肾脏疾病。
慢性肾功能衰竭患者的血清维生素C水平明显降低。血清维生素C水平的降低正是由于低钾饮食和减少食物摄入量所引起的。Marumo等，Int.J.Artif.Organs 17-24(1986)。肾脏疾病的低钾饮食通常限制富含钾和维生素C的水果和蔬菜的摄入。维生素C主要的生化作用在于作为由金属催化的羟基化反应的协同底物，并且在与过氧化物羟基和单态氧的直接相互作用中起到抗氧化的作用。此外，维生素C能够对叶酸和维生素E起到抗氧化保护的作用。Recommended Dietary Allowances 115(National Reserch Council，第10版.，1989)(以下称为“RDA”)。本发明的一具体实施方式
中，所含有的维生素C可以为抗坏血酸的形式。另一具体实施方式
中，维生素C的含量可以为约60mg至约140mg。另一具体实施方式
中，维生素C的含量可以为约80mg至约120mg。另一具体实施方式
中，维生素C的含量可以为约90mg至约110mg。在一优选实施方式中，维生素C的含量可以为100mg。
维生素E为一种生物膜中的抗氧化剂，其可以保护磷脂膜免于氧化应激的损伤。RDA，99-101页。维生素E还可以作为抗动脉粥样硬化的制剂，研究表明增加维生素E的摄入量可以降低冠心病患病危险。Stampfer等.，328Engl.J.Med.1444-1449(1993)。在慢性肾衰竭患者和接受透析治疗的患者中，维生素E的水平较低。Taccone-Gallucci等.，27 Clin.Nephrol.238-241(1987)；Ito等.，217 JAMA 699(1971)。此外，业已证实典型的肾病饮食中缺乏维生素E。Ono，40 Nephron 440-445(1985)。此外，动脉粥样硬化性心血管疾病是导致患有终末期肾脏疾病患者死亡的根本原因。Maiorca，等.，43KidneyInt.S4-S10(1993)。本发明一具体实施方式
中，含有d-α-生育酚醋酸酯形式的维生素E。另一具体实施方式
中，含有相同摩尔数的d-α-生育酚琥珀酸酯形式的维生素E。另一具体实施方式
中，维生素E的含量为约40IU至约80IU。另一具体实施方式
中，维生素E的含量为约48IU至约72IU。另一具体实施方式
中，维生素E的含量为约54IU至约66IU。在一优选实施方式中，维生素E的含量为约60IU。
硫胺素(维生素B1)为α-酮酸氧化脱羧作用和酮糖移转酶的辅酶，并作为戊糖磷酸途径的组成部分。硫胺素的活性受到叶酸酯缺乏和营养不良的限制。RDA，123页。低蛋白饮食的慢性肾衰竭患者表现出硫胺素缺乏的情况。Porrini等.，59 Int.J.Vitam.Nutr.Res.304-308(1989)。此外，透析治疗患者的红细胞转酮醇酶的活性受到影响。Descombes等.，43 Kidney Int.1319-1328(1993)。因此，为了改善任何潜在的硫胺素缺乏的情况，本发明一具体实施方式
中，含有硫胺一硝酸盐形式的维生素B1。本发明另一具体实施方式
中，维生素B1的含量为约1.5mg至约4.5mg。本发明另一具体实施方式
中，维生素B1的含量为约2.4mg至约3.6mg。本发明另一具体实施方式
中，维生素B1的含量为约2.7mg至约3.3mg。本发明一优选实施方式中，维生素B1的含量为约3mg。
核黄素(维生素B2)为两种黄素辅酶，即黄素单核甘酸(FMN)和黄素腺嘌呤二核苷酸(FAD)的组成部分。包括烟酸及吡哆醇的转化在内的许多氧化还原反应都包括该黄素辅酶。RDA，132页。已证实低蛋白饮食的肾病患者存在核黄素缺乏的现象。Porrini等.，59 Int.J.Vitam.Nutr.Res.304-308(1989)；Stein等.，3 Blood Purif.52-62(1985)。发现患者还出现角膜的血管化和皮肤炎的症状，说明患者缺乏核黄素。手册，116页。因此，本发明一具体实施方式
中，含有核黄素形式的维生素B2。另一具体实施方式
中，维生素B2的含量为约1mg至约3mg。另一具体实施方式
中，维生素B2的含量为约1.6mg至约2.4mg。另一具体实施方式
中，维生素B2的含量为约1.8mg至约2.2mg。另一实施方式中，维生素B2的含量为约2mg。
烟酰胺腺嘌呤二核苷酸(NAD)和烟酰胺腺嘌呤二核苷酸磷酸(NADP)为烟酸(维生素B3)的活性辅酶。在大量的酶反应中都含有该辅酶，例如糖酵解、脂肪酸的代谢和类固醇的合成。吡哆醇、核黄素和叶酸的合成同样需要烟酸存在。RDA，137页。施用烟酸能够降低总胆固醇、低密度脂蛋白和极低密度脂蛋白水平，而提高高密度脂蛋白胆固醇水平。Henkin等.，Am.J.Med.239-246(1991)。透析患者存在烟酸缺乏的状况，并且业已证实肾脏疾病的低蛋白饮食将导致烟酸含量的降低。DeBari等.，39Am.J.Clin.Nutr.410-415(1984)；Mackenzie等.，5 Proc.Eur.Dial.Transplant.Assoc.172-178(1968)。为了使肾脏疾病患者能够维持适当的烟酸水平，本发明一具体实施方式
中，含有烟酸形式的维生素B3。本发明另一具体实施方式
中，含有相同摩尔数的烟酰胺形式的维生素B3。本发明另一具体实施方式
中，维生素B3的量为约10mg至约30mg。本发明另一具体实施方式
中，维生素B3的量为约16mg至约24mg。本发明另一具体实施方式
中，维生素B3的量为约18mg至约22mg。本发明另一实施方式中，维生素B3的量为约20mg。
泛酸(维生素B5)为脂肪酸、胆固醇、类固醇激素和神经传递介质合成所需的辅酶A大分子的组成部分。复合辅酶A还在膜蛋白的乙酰化和酰化过程中起作用。RDA，169页。肾脏疾病患者采取的典型低蛋白饮食仅能提供极少量的泛酸。此外，接受透析治疗的患者的泛酸血浆水平明显降低。Meckenzie等.，5 Proc.Eur.Dial.Transplant.Assoc.172-178(1968)。因此，为了改善肾脏疾病患者存在的泛酸缺乏的状况，本发明一具体实施方式
中含有右旋泛酸钙形式的维生素B5。另一具体实施方式
中，维生素B5的含量为约5mg至约15mg。另一具体实施方式
中，维生素B5的含量为约8mg至约12mg。另一具体实施方式
中，维生素B5的含量为约9mg至约11mg。另一实施方式中，维生素B5的含量为约10mg。
吡哆醇(维生素B6)、5-磷酸吡哆醛(PLP)和5-磷酸吡哆胺的活性形式为多种酶的辅酶，该活性形式对糖异生、烟酸的形成和红细胞的代谢是必需的。RDA.，142-143。与接受透析的患者一样，成人和儿童肾衰竭患者维生素B6缺乏的发病率极高。Stein等.，3 Blood Purif.52-62(1985)；Stockberger等.，7Nutr.Res.1021-1030(1987)；Descombes等.，43 Kidney Int.1319-1328(1993)。低蛋白饮食中通常仅含有极少量的吡哆醇。Kopple等.，19 KidneyInt.694-704(1981)。与肾衰竭表现出的血浆和组织中草酸浓度升高一样，泛酸的缺乏应归因于肾脏疾病患者的免疫功能被抑制。Dobblestein等.，5 Kiney Int.233-239(1974)；Morgan等.，46 Nephron 253-257(1987)。
此外，还暗示指出吡哆醇的缺乏对肾脏疾病患者体内的同型半胱氨酸起作用。吡哆醇为胱硫醚合成酶和胱硫醚酶的辅酶，这两种酶能够催化甲硫氨酸形成半胱氨酸。同型半胱氨酸在此过程中作为中间体，而升高的同型半胱氨酸血浆水平对血管疾病而言是一种危险因素。Robinson等.，94 Circulation2743-2748(1996)。然而，建议通过施用吡哆醇以降低同型半胱氨酸水平。Bostom等，49 Kidney Int.147-152(1996)。因此，本发明一具体实施方式
中，含有盐酸吡哆醇形式的维生素B6。另一具体实施方式
中，维生素B6的含量为约18mg至约42mg。另一具体实施方式
中，维生素B6的含量为约24mg至约36mg。另一具体实施方式
中，维生素B6的含量为约27mg至约33mg。然而另一实施方式中，维生素B6的含量为约30mg。
氰钴胺素(维生素B12)为可以转化成活性辅酶、甲基钴胺素和5’-脱氧腺苷钴胺素的钴胺素的药学形式。这些辅酶对叶酸的代谢、辅酶A的转化和髓磷脂的合成是必需的。例如，甲基钴胺素能够催化DNA合成过程中叶酸酯辅助因子的脱甲基作用。缺少脱甲基作用将导致叶酸的缺乏。RDA，159-160页。此外，维生素B12对叶酸在组织内的传输是必需的。RDA，150页。已发现慢性肾衰竭患者和接受透析的患者存在维生素B12缺乏的现象。此外，还发现接受透析患者的神经传导速率较慢。Rostand 29Am.J.Clin.Res.691-697(1976)。基于这些发现，维生素B12补充给药法可以作为对任何一种营养缺失进行补充的方法。此外，由于维生素B12在叶酸代谢中起作用，因此，补充给药法能够有效的调节肾脏疾病患者的同型半胱氨酸水平。因而，本发明一具体实施方式
中，含有氰钴胺素形式的维生素B12。另一具体实施方式
中，维生素B12的含量为约500μg至约1500μg。另一具体实施方式
中，维生素B12的含量为约800μg至约1200μg。另一具体实施方式
中，维生素B12的含量为约900μg至约1100μg。在一优选实施方式中，维生素B12的含量为约1000μg。
生物素可以作为多种羧化酶的辅酶，因此，在糖异生、脂肪酸代谢和氨基酸代谢中起重要的作用。RDA，166页。生物素能够抑制尿毒症毒素对微管蛋白聚合作用的影响。Braguer等，57 Nphron 192-196(1991)。此外，更多证据表明慢性肾衰竭患者和接受透析的患者存在生物素缺乏加重的危险。Mackenzie等，5 Proc.Eur.Dial.Transplant.Assoc.172-178(1968)。在众多诊断为尿毒症性脑病和尿毒症性神经病的透析患者中，可以通过生物素的给药以减缓上述疾病的症状。Yatzidis等，305 N.Engl.J.Med.764(1981)。本发明一具体实施方式
中，生物素的含量为约150μg至约450μg。本发明另一具体实施方式
中，生物素的含量为约240μg至约360μg。本发明一优选具体实施方式
中，生物素的含量为约270μg至约330μg。另一实施方式中，生物素的含量为约300μg。
活性形式为四氢叶酸酯的叶酸(维生素B9)为一种辅酶，该辅酶参与甲基集团的转移并且在DNA合成、嘌呤合成和氨基酸合成中起作用，如甘氨酸向丝氨酸的转化和同型半胱氨酸向甲硫氨酸的转化。慢性肾衰竭患者在四氢叶酸酯的吸收受到损害和患有尿毒症的情况下，叶酸的代谢将发生改变。Said等，6 Acta Vitaminol.Enzymol.339-346(1984)。进一步地说，肾脏疾病患者实施的饮食通常情况下为叶酸含量较低，并且对肾衰竭患者的给药也可以抑制叶酸的活性。Stein等，3 Blood Purif.52-62(1985)。Cunningham等，282 Br.Med.J1582(1981)。慢性肾衰竭患者中，与同型半胱胺酸有关的疾病的发病率很高，并且存在发展为动脉粥样硬化的危险，显示出叶酸的补充对上述情况的调节是一种有效的方法并且还能够提供心脏保护的作用。Robinson等，94Circulation 2743-2748(1996)。因此，本发明一具体实施方式
中，含有叶酸形式的维生素B9。另一实施方式中，含有叶片酸、叶酸、甲基叶酸、叶酸酯和/或一种或多种叶酸酯的天然异构体包括(6S)-四氢叶酸或其聚谷氨酰衍生物、5-甲基-(6S)-四氢叶酸或其聚谷氨酰衍生物、5-甲酰基-(6S)-四氢叶酸或其聚谷氨酰衍生物、10-甲酰基-(6S)-四氢叶酸或其聚谷氨酰衍生物、5，10-亚甲基-(6S)-四氢叶酸或其聚谷氨酰衍生物、5，10-亚甲基-(6S)-四氢叶酸或其聚谷氨酰衍生物和5-亚胺甲基-(6S)-四氢叶酸或其聚谷氨酰衍生物形式的维生素B9。另一具体实施方式
中，维生素B9的含量为约3mg至约8mg。另一具体实施方式
中，维生素B9的含量为约4.4mg至约6.6mg。另一具体实施方式
中，维生素B9的含量为约4.95mg至约6.05mg。另一实施方式中，维生素B9的含量为约5.5mg。
硒为抗氧化酶和谷胱甘肽过氧化物酶的一种组成部分，硒在控制氧代谢，特别在催化过氧化氢分解的过程起重要作用。Burk，3 Annu.Rev.Nutr.53-70(1983)。谷胱甘肽过氧化物酶能够抑制自由基的产生并且能够降低膜组织包括血管系统的氧化损伤危险。Holben，99 J.Am.Diet.Assoc.836-843(1999)。糖尿病患者的氧化应激水平高是由于糖尿病和肾脏疾病共同作用的结果。Kedziora-Kornatowska，等，11Nephrol.Dial.Transplant.2829-2832(1998)。在透析治疗过程中硒将流失，并且由于蛋白限制饮食，食入硒的量不能满足人体需求。许多研究表明，在透析患者中血浆硒、硒依赖性酶水平明显降低，并且脂质过氧化作用显著增加。Smith等，7 J.Renal Nutr.69-72(1997)；Zima等，16Blood Purif.253-260(1998)。业已证实通过口服和静脉进行硒的补充在降低氧化应激产物水平的同时，能够有效的提高肾脏疾病患者的硒水平和免疫功能。Temple等，10 J.Renal Nutr.16(2000)。因此，本发明一实施方式中，该组合物含有L-硒代蛋氨酸形式的硒。另一具体实施方式
中，硒的含量为约35μg至约105μg。另一具体实施方式
中，硒的含量为约56μg至约84μg。另一具体实施方式
中，硒的含量为约63μg至约77μg。另一实施方式中，硒的含量为约70μg。
存在有超过200种含锌金属酶，包括醛醇缩合酶、乙醇脱氢酶、RNA聚合酶和蛋白激酶C。因此，锌对多数代谢活性起重要的作用，例如核甘酸的生成、蛋白质的合成和免疫系统的改善。Zima等，17 Blood Purif.182-186(1999)。许多研究表明，在接受透析的患者和患有肾脏疾病的患者中，血浆锌的水平有明显降低。Thomson等，23 Kidney Int.9-14(1983)；Muirhead等，6 Am.J.Nephrol.422-426(1986)。已有研究表明，锌的补充能够显著缓解肾脏疾病患者的临床症状数量，如无味、神经传导速度和阳痿，并提出锌的营养补充能够修复细胞性免疫和淋巴细胞功能的损伤。Zima等，17 Blood Purif.182-186(1999)。本发明一具体实施方式
中，含有L-Optizinic Z M L-200Interhelth9TM形式的锌。另一具体实施方式
中，锌的含量为约10mg至约30mg。另一具体实施方式
中，锌的含量为约16mg至约24mg。另一具体实施方式
中，锌的含量为约18mg至约22mg。另一实施方式中，锌的含量为约20mg。
本发明所述组合物适合对患者进行给药，并且提供这种营养补充可以缓解肾脏疾病患者维生素和矿物质缺乏的状况。本发明所述组合物的优选剂量可以含有一种或多种囊片以用于人体口服给药。如使用多种囊片时，各囊片彼此可以相同，或每种囊片仅含有所述组合物的某些组分，以使各种不同的囊片相结合时含有本发明所述的组合物。
本发明所述的组合物是指作用于人体各种代谢系统和生物应答的多种必要的维生素和矿物质的联合体。本发明所述的组分优选合成在可以为固体粉末、囊片、片剂、锭剂、丸剂、胶囊或液体形式的组合物中，本发明所述的组分可以单独进行给药也可与其它适合的组合一起进行给药。例如，根据给药的实际情况，本发明所述的组合物可以以一种或多种囊片或锭剂的形式进行给药。各种维生素和矿物质都能够商业获得，可以形成单一组合物的形式或形成能够进行共同给药的多重组合物的形式。
为了制备本发明所述的组合物，可以根据现有制剂技术将各种活性组分通过合适的载体直接进行混合而形成。根据给药的所需制剂的不同如，口服、舌下、鼻腔、局部或肠外的给药，所述载体可以广泛的选自各种形式的载体。所述组合物可以含有1至3种囊片或锭剂，每种囊片或锭剂种所含的组合物彼此相同。
将所述组合物制备为能够通过口服给药形式的过程中，可以使用任何常规介质。例如，可以使用含有水、油、乙醇、芳香剂、防腐剂、着色剂等的液体制剂介质。载体如淀粉、蔗糖、稀释剂、粒化剂、润滑剂、粘合剂、崩裂剂等等都可以用于制备口服固体制剂(如，粉末、囊片、丸剂、片剂、胶囊和锭剂)。同时还可以使用控释剂型。由于其给药的方便性，使用具有方便特性载体的囊片、片剂、丸剂和胶囊为最适合口服给药的剂型。如果需要，可以通过标准法将片剂制备成糖衣片或肠溶片。
通过以下非限制性的实施例对本发明进行更加详细的说明。
实施例1采用本领域技术人员公知的标准方法制备含有下列组分的组合物囊片抗坏血酸 100mgd-α-生育酚琥珀酸酯60IU硫胺一硝酸盐 3mg核黄素 2mg烟酸 20mg右旋泛酸钙 10mg盐酸吡哆醇 30mg氰钴胺素 1000μg生物素 30μg叶酸 5.5mgL-硒代蛋氨酸 70μgL-Optizinic Z M L-200 Interhelth9TM20mg医师推荐剂量为每天1片。
实施例2检测本发明的组合物对患有终末期肾脏疾病(ESRD)患者的治疗效果。本检测的目的在于测定通过口服给药的该组合物是否改善了患者的营养缺乏状况。
进行超过20个月的双盲、安慰剂对照研究。选择总共60名，年龄为40-85岁，患有终末期肾脏疾病的患者(男30人，女30人)。进行初期营养状况的判定。通过分光光度计和比色法检测维生素C、硒和锌水平。通过免疫放射分析法检测维生素B9和维生素B12水平。通过高效液相色谱法检测生物素和维生素B6水平。通过检测尿液中的N’-甲基烟酰胺和吡啶来测定维生素B3水平。通过过氧化物溶血检测来测定维生素E水平，通过检测红细胞转酮酶的活性来测定维生素B1水平。通过检测红细胞谷胱甘肽还原酶的活性测定维生素B2水平，通过检测辅酶A的活性来测定维生素B5水平。
将60名患者分为两组，每组有15名男性患者，15名女性患者。第一组中，对每个患者施用实施例1所述的组合物，且给药量为每日1-2片。第二组中(对照)，对每个患者施用安慰剂，且给药量为每日1-2片。
在上述12个月期间内，每月对各个患者的营养状况进行评测，所得数据通过多元线性回归和标准Student氏t检验进行评价。在各分析中，输出变量的基线值在模型中作为共变量。通过Weigel & Narvaez，12对照临床试验378-94(1991)所述的方法检测共变量相互作用效应的处理效果。如无明显相互作用效应，该相互作用组将从模型中除去。通过观察具有假设值的剩余曲线，来评价常态回归模型假设和剩余变量共性回归模型假设。在给药18、12和6周时具有明显疗效，并仅在观察到明显疗效的情况下，依次向更早期的阶段进行初期效果检测。通过配对t检验来评价每组中基线的变化。此外，通过对基线测量和可测量患者的特征进行变量分析来评估两组患者间的共性。所有统计过程均采用统计分析系统来完成(SAS Institute Inc.，Cary，NC)。所有统计检测中α均为0.05。
在检测完成时，经治疗的患者的营养状况表现出明显的统计学改善，而在对照组患者中则未有改善。经治疗的患者和对照组患者间营养状况的差别十分显著。因此，本试验证明了本发明所述的组合物通过口服给药能够有效的用于对患有终末期肾脏疾病的患者进行治疗。
所有上述引用的参考文献和出版物的公开内容以全文的形式并入本发明作为参考，并且与其分别并入本发明作为参考的范围相同。在不背离本发明精神和范围的情况下，本领域技术人员可以对本发明所描述的方法和组合物进行各种修改和改变。虽然在优选的具体实施方式
中对本发明进行了描述，但不应理解为，如权利要求所述的本发明限制于此实施方式。实际上，对本领域技术人员是显而易见的各种对实施本发明方法的修改，都包括在以下权利要求的范围内。
权利要求
1.一种用于在有此需要的患者或人中对营养缺乏进行补充的组合物，该组合物包含约60mg至约140mg的维生素C；约40IU至约80IU的维生素E；约1.5mg至约4.5mg的维生素B1；约1mg至约3mg的维生素B2；约10mg至约30mg的维生素B3；约5mg至约15mg的维生素B5；约18mg至约42mg的维生素B6；约500μg至约1500μg的维生素B12；约150μg至约450μg的生物素；约3mg至约8mg的维生素B9；约35μg至约105μg的硒；和约10mg至约30mg的锌。
2.一种用于在有此需要的患者或人中对营养缺乏进行补充的组合物，该组合物包含约80mg至约120mg的维生素C；约48IU至约72IU的维生素E；约2.4mg至约3.6mg的维生素B1；约1.6mg至约2.4mg的维生素B2；约16mg至约24mg的维生素B3；约8mg至约12mg的维生素B5；约24mg至约36mg的维生素B6；约800μg至约1200μg的维生素B12；约240μg至约360μg的生物素；约4.4mg至约6.6mg的维生素B9；约56μg至约84μg的硒；和约16mg至约24mg的锌。
3.一种用于在有此需要的患者或人中对营养缺乏进行补充的组合物，该组合物包含约90mg至约110mg的维生素C；约54IU至约66IU的维生素E；约2.7mg至约3.3mg的维生素B1；约1.8mg至约2.2mg的维生素B2；约18mg至约22mg的维生素B3；约9mg至约11mg的维生素B5；约27mg至约33mg的维生素B6；约900μg至约1100μg的维生素B12；约270μg至约330μg的生物素；约4.95mg至约6.05mg的维生素B9；约63μg至约77μg的硒；和约18mg至约22mg的锌。
4.根据权利要求1所述的组合物，其中，所述组合物包含约100mg的维生素C。
5.根据权利要求1所述的组合物，其中，所述组合物包含约60IU的维生素E。
6.根据权利要求1所述的组合物，其中，所述组合物包含约3mg的维生素B1。
7.根据权利要求1所述的组合物，其中，所述组合物包含约2mg的维生素B2。
8.根据权利要求1所述的组合物，其中，所述组合物包含约20mg的维生素B3。
9.根据权利要求1所述的组合物，其中，所述组合物包含约10mg的维生素B5。
10.根据权利要求1所述的组合物，其中，所述组合物包含约30mg的维生素B6。
11.根据权利要求1所述的组合物，其中，所述组合物包含约1000μg的维生素B12。
12.根据权利要求1所述的组合物，其中，所述组合物包含约300μg的生物素。
13.根据权利要求1所述的组合物，其中，所述组合物包含约5.5mg的维生素B9。
14.根据权利要求1所述的组合物，其中，所述组合物包含约70μg的硒。
15.根据权利要求1所述的组合物，其中，所述组合物包含约20mg的锌。
16.根据权利要求1所述的组合物，其中，所述组合物包含约100mg的维生素C；约60IU的维生素E；约3mg的维生素B1；约2mg的维生素B2；约20mg的维生素B3；约10mg的维生素B5；约30mg的维生素B6；约1000μg的维生素B12；约300μg的生物素；约5.5mg的维生素B9；约70μg的硒；和约20mg的锌。
17.根据权利要求1所述的组合物，其中，所述组合物基本上不含其它添加的维生素和矿物质。
18.根据权利要求1所述的组合物，其中，所述组合物用于每日施用于所述患者。
19.根据权利要求1所述的组合物，其中，所述组合物用于口服施用于所述患者。
20.根据权利要求1所述的组合物，其中，所述组合物还包含药学上可接受的载体。
21.根据权利要求1所述的组合物，其中，所述组合物用于施用于患有肾脏疾病的患者。
22.根据权利要求21所述的组合物，其中，所述肾脏疾病为终末期肾脏疾病。
23.根据权利要求1所述的组合物，其中，所述组合物用于施用于肾功能不全的患者。
24.根据权利要求1所述的组合物，其中，所述组合物用于施用于接受透析治疗的患者。
25.根据权利要求1所述的组合物，其中，所述营养缺乏为饮食限制的结果。
26.根据权利要求1所述的组合物，其中，所述营养缺乏为疾病状态的结果。
27.根据权利要求26所述的组合物，其中，所述疾病状态为肾脏疾病。
28.根据权利要求27所述的组合物，其中，所述肾脏疾病为终末期肾脏疾病。
29.根据权利要求1所述的组合物，其中，所述营养缺乏为透析治疗的结果。
30.根据权利要求26所述的组合物，其中，所述疾病状态导致所述患者的氧化应激增加。
31.根据权利要求26所述的组合物，其中，所述疾病状态导致所述患者的胆固醇水平提高。
32.一种对患者的营养缺乏进行补充的方法，该方法包括给所述患者施用包含约60mg至约140mg的维生素C；约40IU至约80IU的维生素E；约1.5mg至约4.5mg的维生素B1；约1mg至约3mg的维生素B2；约10mg至约30mg的维生素B3；约5mg至约15mg的维生素B5；约18mg至约42mg的维生素B6；约500μg至约1500μg的维生素B12；约150μg至约450μg的生物素；约3mg至约8mg的维生素B9；约35μg至约105μg的硒；和约10mg至约30mg锌的组合物。
33.一种对患者的营养缺乏进行补充的方法，该方法包括给所述患者施用包含约80mg至约120mg的维生素C；约48IU至约72IU的维生素E；约2.4mg至约3.6mg的维生素B1；约1.6mg至约2.4mg的维生素B2；约16mg至约24mg的维生素B3；约8mg至约12mg的维生素B5；约24mg至约36mg的维生素B6；约800μg至约1200μg的维生素B12；约240μg至约360μg的生物素；约4.4mg至约6.6mg的维生素B9；约56μg至约84μg的硒；和约16mg至约24mg锌的组合物。
34.一种对患者的营养缺乏进行补充的方法，该方法包括给所述患者施用包含约90mg至约110mg的维生素C；约54IU至约66IU的维生素E；约2.7mg至约3.3mg的维生素B1；约1.8mg至约2.2mg的维生素B2；约18mg至约22mg的维生素B3；约9mg至约11mg的维生素B5；约27mg至约33mg的维生素B6；约900μg至约1100μg的维生素B12；约270μg至约330μg的生物素；约4.95mg至约6.05mg的维生素B9；约63μg至约77μg的硒；和约18mg至约22mg锌的组合物。
35.根据权利要求32所述的方法，其中，所述组合物包含约100mg的维生素C。
36.根据权利要求32所述的方法，其中，所述组合物包含约60IU的维生素E。
37.根据权利要求32所述的方法，其中，所述组合物包含约3mg的维生素B1。
38.根据权利要求32所述的方法，其中，所述组合物包含约2mg的维生素B2。
39.根据权利要求32所述的方法，其中，所述组合物包含约20mg的维生素B3。
40.根据权利要求32所述的方法，其中，所述组合物包含约10mg的维生素B5。
41.根据权利要求32所述的方法，其中，所述组合物包含约30mg的维生素B6。
42.根据权利要求32所述的方法，其中，所述组合物包含约1000μg的维生素B12。
43.根据权利要求32所述的方法，其中，所述组合物包含约300μg的生物素。
44.根据权利要求32所述的方法，其中，所述组合物包含约5.5mg的维生素B9。
45.根据权利要求32所述的方法，其中，所述组合物包含约70μg的硒。
46.根据权利要求32所述的方法，其中，所述组合物包含约20mg的锌。
47.根据权利要求32所述的方法，其中，所述组合物包含约100mg的维生素C；约60IU的维生素E；约3mg的维生素B1；约2mg的维生素B2；约20mg的维生素B3；约10mg的维生素B5；约30mg的维生素B6；约1000μg的维生素B12；约300μg的生物素；约5.5mg的维生素B9；约70μg的硒；和约20mg的锌。
48.根据权利要求32所述的方法，其中，所述组合物基本上不含其它添加的维生素和矿物质。
49.根据权利要求32所述的方法，其中，所述组合物用于每日施用于所述患者。
50.根据权利要求32所述的方法，其中，所述组合物用于口服施用于所述患者。
51.根据权利要求32所述的方法，其中，所述组合物还包含药学上可接受的载体。
52.根据权利要求32所述的方法，其中，所述组合物用于施用于患有肾脏疾病的患者。
53.根据权利要求52所述的方法，其中，所述肾脏疾病为终末期肾脏疾病。
54.根据权利要求32所述的方法，其中，所述组合物用于施用于肾功能不全的患者。
55.根据权利要求32所述的方法，其中，所述组合物用于施用于接受透析治疗的患者。
56.根据权利要求32所述的方法，其中，所述营养缺乏为饮食限制的结果。
57.根据权利要求32所述的方法，其中，所述营养缺乏为疾病状态的结果。
58.根据权利要求57所述的方法，其中，所述疾病状态为肾脏疾病。
59.根据权利要求58所述的方法，其中，所述肾脏疾病为终末期肾脏疾病。
60.根据权利要求32所述的方法，其中，所述营养缺乏为透析治疗的结果。
61.根据权利要求57所述的方法，其中，所述疾病状态导致所述患者的氧化应激增加。
62.根据权利要求57所述的方法，其中，所述疾病状态导致所述患者的胆固醇水平提高。
全文摘要
本发明涉及一种包含多种维生素和矿物质的组合物，还涉及一种使用该组合物治疗肾脏病及其并发症的治疗方法。特别地，该方法包括对肾脏疾病患者施用包含维生素C、维生素E、复合维生素B、硒和锌的组合物。
文档编号A23L1/304GK101072565SQ200580042187
公开日2007年11月14日 申请日期2005年9月22日 优先权日2004年10月15日
发明者J·乔达诺, C·鲍尔泽 申请人:埃弗雷特实验室有限公司