专利名称：：经修饰的钠碘共同转运蛋白质及其应用的制作方法
技术领域：
：本发明关于一种经修饰的钠碘共同转运蛋白质(sodiumiodidesymporterprotein)及其应用，尤其关于使用该经修饰的钠碘共同转运蛋白质以增加活体内或活体外的细胞中的钠碘共同转运蛋白质的受质的应用。
背景技术：
：于人体中，甲状腺激素的主要功能为调控生理机能及促进代谢作用，例如调控细胞耗氧量、呼吸速率、体温、心跳及血液流量等，以及促进脂肪、蛋白质和碳水化合物等成分的代谢。碘元素(I)甲状腺激素中的必要元素，于甲状腺制造甲状腺激素的过程中，需借助甲状腺细胞膜上的钠碘共同转运蛋白质(sodiumiodidesymporterprotein，NIS)，以主动运输的方式，将血液中的碘离子转运至甲状腺细胞中，以进行甲状腺激素的合成。甲状腺癌是头颈部位常见的恶性肿瘤，潜伏期长且转移速度快，于近几年来，成为我国女性罹患癌症的主要类型之一。于甲状腺癌的治疗中，常使用放射性碘疗法，其是利用钠碘共同转运蛋白质专一性运送碘离子的特性，将放射性碘-131同位素(1-131)运送至甲状腺癌细胞中，达到毒杀癌细胞的效果。因此，于放射性碘疗法中，甲状腺癌患者体内的钠碘共同转运蛋白质对于放射性碘离子的运送能力便成为影响治疗效果的重要因素，因此，若钠碘共同转运蛋白质无法即时地运送足够浓度的放射性碘离子至甲状腺癌细胞中，则无法有效地杀死癌细胞而进行治疗。于美国公开专利申请案US2006/0004191Al中，揭露一种经修饰的钠碘共同转运蛋白质，其经由增加野生型(wild-type)钠碘共同转运蛋白质的正电荷数量的方式，提升钠碘共同转运蛋白质对碘离子的运送能力。此专利虽提及可以取代方式(即，以带正电荷的氨基酸取代野生型钠碘共同转运蛋白质中的中性不带电荷或带负电荷的氨基酸)或者采用加入手段(即，将带正电荷的氨基酸加入至野生型钠碘共同转运蛋白质中)，以修饰钠碘共同转运蛋白质，增加野生型钠碘共同转运蛋白质的正电荷数，然根据其实施例，是将十个带正电荷的氨基酸加入至野生型钠碘共同转运蛋白质中，以达成提升转运能力的效果。事实上，并非简单地以带正电荷的氨基酸针对钠碘共同转运蛋白质中任何中性或带负电的氨基酸进行取代，即可达成US2006/0004191Al所称的改良效果。此外，基于US2006/0004191Al的教示，若欲将多个带正电荷的氨基酸加入至野生型钠碘共同转运蛋白质中，以增加蛋白质的正电荷数，则必须使用足够多的带正电荷氨基酸，方能达到所欲的改良效果，此将增加钠碘共同转运蛋白质的制造成本。因此，对于提升钠碘共同转运蛋白质的转运能力而言，仍亟须一种精确且有效的修饰方法。本发明即针对上述需求所为的研究成果，本案发明人发现，经由修饰钠碘共同转运蛋白质内部的单一或多个氨基酸残基，即可大幅提升其转运碘离子的能力。
发明内容本发明的一目的在于提供一种经修饰的钠碘共同转运蛋白质(sodiumiodidesymporterprotein)，其是在钠碘共同转运蛋白质的氨基酸序列(如SEQIDNO1)的内部改变单一或多个氨基酸残基。本发明的又一目的在于提供一种包含编码上述蛋白质的核苷酸分子的表达载体。本发明的再一目的在于提供一种增加活体外的细胞中的钠碘共同转运蛋白质的受质的方法，包含a)将上述钠碘共同转运蛋白质引入至一活体外的细胞中；以及b)使该细胞与该钠碘共同转运蛋白质的一或种多种受质接触。本发明的另一目的在于提供一种增加活体内的细胞中的钠碘共同转运蛋白质的受质的方法，包含1)将上述钠碘共同转运蛋白质引入至一活体外的细胞中；II)将该细胞移植至一动物体内；以及III)使该位于该动物体内的细胞与该钠碘共同转运蛋白质的一种或多种受质接触。本发明的详细技术及较佳实施方式，将描述于以下内容中，以供本发明所属领域具通常知识者据以明了本发明的特征。图1所示为野生型钠碘共同转运蛋白质(NIS-Wt)或突变型钠碘共同转运蛋白质的碘运送能力的统计直条图；以及图2所示为小鼠体内碘-131的活体分子造影分析图。具体实施例方式除非文中有另外说明，于本说明书中(尤其是在权利要求书中)所使用的「一」、「该」及类似用语应理解为包含单数及复数形式。如上述，在临床医学上，已利用放射性碘疗法治疗甲状腺癌，其是借助钠碘共同转运蛋白质(sodiumiodidesymporterprotein,NIS)可专一性地运送放射性碘离子的特性，来毒杀甲状腺癌细胞。由于放射性碘疗法对于甲状腺癌细胞具有高度专一性，故成为治疗甲状腺癌的有效方法之一。惟，此方法需依赖甲状腺癌病患本身钠碘共同转运蛋白质的运送能力，若其钠碘共同转运蛋白质无法有效地运送碘离子，则将相当程度地局限治疗效果。尽管已有文献建议一种修饰钠碘共同转运蛋白质以提升其运送能力的方法，然而，该方法仍无法精确且有效地对钠碘共同转运蛋白质进行改良。钠碘共同转运蛋白质由约650个氨基酸(氨基酸序列如SEQIDN0:1所示)所组成的内在膜蛋白(intrinsicmembraneprotein)，其具有13个穿膜区域(transmembranedomain)，且可作为一种离子泵(ionpump)，同时转运一个碘离子(Γ)与两个钠离子(Na+)进入甲状腺细胞内。本案发明人发现，对钠碘共同转运蛋白质中的氨基酸进行修饰，可增强其转运功能。本发明提供一种经修饰的钠碘共同转运蛋白质，其具增强的转运功能。本发明钠碘共同转运蛋白质是在野生型(wild-type)钠碘共同转运蛋白质的氨基酸序列(如SEQIDNO1)的内部改变单一或多个氨基酸残基，以增强其转运受质的功能，而可用于增加细胞中钠碘共同转运蛋白质的受质的量。根据本发明，对钠碘共同转运蛋白质所为的修饰，可包括以一带负电荷的氨基酸残基，取代蛋白质中的一带正电荷或中性的氨基酸残基，从而增加钠碘共同转运蛋白质的负电荷数，以提升其转运能力。举例言之，可以天门冬胺酸(带负电荷)，取代钠碘共同转运蛋白质中的残基319丝胺酸(中性)。因此，于本发明中，经修饰的钠碘共同转运蛋白质可包含一如SEQIDNO:1所示的氨基酸序列，且于其内部的氨基酸序列的单一或多个氨基酸残基经改变为带负电荷的氨基酸。根据本发明，对钠碘共同转运蛋白质所为的修饰，亦可包括以一带正电荷的氨基酸残基，取代蛋白质中的一带负电荷或中性的氨基酸残基，从而增加钠碘共同转运蛋白质的正电荷数，以提升其转运能力。举例言之，可以精胺酸(带正电荷)取代残基218麸酰胺酸(中性)，或者，以离胺酸(带正电荷)取代残基308苏胺酸(中性)。于本发明的一实施方式中，是将钠碘共同转运蛋白质的残基218麸酰胺酸以精胺酸取代。较佳地，本发明钠碘共同转运蛋白质包含一如SEQIDNO:1所示的氨基酸序列且符合以下一种或多种条件(1)残基(residue)218麸酰胺酸(glutamine，Q)经取代为精胺酸(arginine,R)；(2)残基308苏胺酸(threonine^)经取代为离胺酸(lysine,K)；以及(3)残基319丝胺酸(serines)经取代为天门冬胺酸(asparticacid，D)。于不受理论限制下，本案发明人相信，经由修饰上述三个残基氨基酸中的任一者，可改变钠碘共同转运蛋白质于细胞膜上的立体结构，从而增强其转运能力。于本发明的一实施方式中，以定点突变的方式，将钠碘共同转运蛋白质中第218个残基麸酰胺酸取代为精胺酸(下文简称为NIS-Q218R)、第308个残基苏胺酸取代为离胺酸(下文简称为NIS-T308K)、及/或第319个残基丝胺酸取代为天门冬胺酸(下文简称为OTS-S319D)，可大幅增强其转运功能。就钠碘共同转运蛋白质在细胞中的结构而言，前述三个残基氨基酸于细胞膜上皆呈现在细胞外的位置。如后附实施例所示，相较于野生型钠碘共同转运蛋白质(下文简称为NIS-wt)，本发明的钠碘共同转运蛋白质可提升转运能力达约200%。可以任何合宜的手段对钠碘共同转运蛋白质进行所欲的修饰，以提供本发明的经修饰钠碘共同转运蛋白质。举例言之，可利用氨基酸合成仪来合成本发明的钠碘共同转运蛋白质，其中，仅须于合成第218、308及/或319个氨基酸时进行置换即可。或者，可利用分子生物技术，设计一组供定点突变用的引子，并参考密码子转换表(codontable)修饰第218,308及/或319个氨基酸的核苷酸分子，并于宿主细胞中进行表达，即可获得本发明的钠碘共同转运蛋白质。如所周知，钠碘共同转运蛋白质除可运送钠离子及碘离子至细胞内以外，亦可运送其他受质，例如过锝酸离子(TcO4-)、过铼酸离子(ReO4-)、砹离子(At-)等。因此，本发明的钠碘共同转运蛋白质对选自以下群组的受质具有增强转运的功能钠离子(Na+)、碘离子(Γ)、过锝酸离子(TcO4-)、过铼酸离子(ReO4-)、砹离子(At—)、及其组合。较佳地，该钠碘共同转运蛋白质具有增强转运碘离子的功能。如前述，放射性碘疗法需借助钠碘共同转运蛋白质可运送放射性碘离子的特性，以毒杀甲状腺癌细胞，进而治疗甲状腺癌。鉴于本发明的钠碘共同转运蛋白质具有增强的碘离子转运功能，故当将其运用于转运放射性碘离子时，可加强甲状腺癌的治疗效果。此外，钠碘共同转运蛋白质除存在于甲状腺外，亦存在于其他组织(例如鼻黏膜、胃及唾腺等)中，惟其在非甲状腺组织中的量相当低。于此，当身体内其他具有钠碘共同转运蛋白质的组织中出现癌细胞时，亦可借助本发明钠碘共同转运蛋白质的增强的转运能力，对那些等组织进行治疗，而不限于甲状腺组织。放射性碘离子除可应用于癌症治疗外，亦可应用于分子造影(molecularimaging)。其中，借助放射性碘离子的放射性，可使用单光子射出电脑断层扫描仪(singlephotonemissioncomputedtomography，SPECT)或伽玛身寸线扫描仪(Gamma-rayscanner)来检测或追踪放射性碘离子于活体内的活动与状态，借此达到即时性(real-time)监测癌症治疗的效果。由于本发明钠碘共同转运蛋白质可有效率地将放射性碘离子运送至癌细胞内，故可借此观察放射性碘离子毒杀癌细胞的过程，因此，本发明钠碘共同转运蛋白质特别有利于分子造影的应用。本发明亦提供一种编码本发明的钠碘共同转运蛋白质的核苷酸分子，其包含一由SEQIDNO:2、SEQIDNO:3、SEQIDNO:4、SEQIDNO:5、SEQIDNO:6、SEQIDNO:7、或SEQIDNO:8所示的核苷酸序列。较佳地，该核苷酸分子包含一由SEQIDNO:2所示的核苷酸序列。本发明另提供一种包含上述核苷酸分子的表达载体(expressionvector)。该表达载体于宿主细胞内进行表达后，可生成本发明的钠碘共同转运蛋白质，故可应用于治疗癌症、分子造影、或前述的组合，这些应用如上文中所描述。可使用任何现有或市面上可取得的载体来建构本发明表达载体，只要其可复制的，且可在宿主细胞中发挥功能即可。举例言之，当利用原核生物作为宿主细胞时，可选择的载体为例如美国Stratagene公司的pBluescriptIIKS(+/-)phagemidvector、或PUC18等；当利用真核生物作为宿主细胞时，可选择的载体为例如pcDNA3.1、pSV40/neO、或病毒载体等。由于本发明经修饰的钠碘共同转运蛋白质具有增强的转运功能，故可用于增加细胞中钠碘共同转运蛋白质的受质的量。因此，本发明又提供一种增加在活体内或活体外细胞中的钠碘共同转运蛋白质的受质的方法。本发明的增加活体外细胞中的钠碘共同转运蛋白质的受质的方法包含以下步骤a)将本发明钠碘共同转运蛋白质引入至一活体外的细胞中；以及b)使该细胞与该钠碘共同转运蛋白质的一种或多种受质接触。至于增加活体内细胞中的钠碘共同转运蛋白质的受质的方法，则包含以下步骤1)将本发明钠碘共同转运蛋白质引入至一活体外的细胞中；II)将该细胞移植至一动物体内；以及III)使该位于该动物体内的细胞与钠碘共同转运蛋白质的一种或多种受质接触。本发明方法可增加细胞中钠碘共同转运蛋白质的受质的含量，该受质为例如钠离子、碘离子、过锝酸离子、过铼酸离子、或砹离子；较佳地，其可用于增加细胞中的碘离子含量。于上述本发明方法的步骤a)或步骤I)中，可以任何合宜的方式将本发明钠碘共同转运蛋白质引入至一活体外的细胞中，举例言之，但不限于此，可经由以下步骤进行al)将一包含一编码本发明钠碘共同转运蛋白质的核苷酸分子的表达载体(即，本发明的表达载体)置入该活体外细胞中；以及培养该细胞，以表达该钠碘共同转运蛋白质。可于步骤al)中，利用现有的转染(transfection)方法，将表达载体置入细胞中。举例言之，可利用原生质体聚乙二醇法、化学法、电穿孔法(electroporation)、或基因枪转殖法等。于一实施例中，是利用电穿孔法进行转形，其是利用细胞受电流刺激时，细胞膜的可通性(permeability)会突然增加的特性，使异源性基因(例如表达载体)得以进入细胞内。电穿孔法具备操作简单方便、适用于各种细胞，且转形成功率高等优点。此外，于步骤al)中，该核苷酸分子包含一由SEQIDNO:2、SEQIDNO:3、SEQIDNO:4、SEQIDNO:5、SEQIDNO:6、SEQIDNO:7、或SEQIDNO8所示的核苷酸序列。较佳地，该核苷酸分子包含一由SEQIDNO2所示的核苷酸序列。于步骤a2)中，进行细胞培养，使其表达本发明的钠碘共同转运蛋白质。此后，钠碘共同转运蛋白质会通过细胞的生理机制被运送至细胞膜上，以实行其转运功能。至此，本发明的钠碘共同转运蛋白质即引入至细胞中。将本发明钠碘共同转运蛋白质引入至一活体外的细胞中后，即可进行步骤b)，使该细胞与钠碘共同转运蛋白质的一种或多种受质接触。或者，若欲于活体内增加细胞中的钠碘共同转运蛋白质的受质，则可先进行步骤II)，将该细胞移植至一动物体内，再进行步骤III)，使该位于该动物体内的细胞与钠碘共同转运蛋白质的一种或多种受质接触。于步骤II)中，可以任何合宜的方式将细胞移植至动物体内，例如可以腹腔注射或静脉注射等方式进行细胞接种。于步骤b)或步骤III)中，可以任何合宜的方式使该细胞与受质接触，举例言之，可简单地将受质添加至该细胞的培养液中，或者使经细胞移植的动物服食受质，即可使细胞与受质发生接触。由于该细胞的细胞膜上具有经增强转运功能的钠碘共同转运蛋白质，故其受质可轻易地被运送至该细胞内，从而增加细胞中的受质含量。由于本发明方法可增加活体内或活体外的细胞中的碘离子含量，故可应用于活体内/外的分子造影。举例言之，可将本发明方法运用于活体内/外的细胞或组织试验中，借助使用放射性碘离子，并以单光子射出电脑断层扫描仪或伽玛射线扫描仪来检测或追踪放射性碘离子于细胞或组织内的活动与状态，达成活体内/外分子造影的效果。兹以下列具体实施方式以进一步例示说明本发明。其中该些实施方式仅提供作为说明，而非用以限制本发明的范畴。[实施例1]制备突变型钠碘共同转运蛋白质实验A、制备单股噬菌体DNA(phagemidDNA)将含有质体pBluescriptIiKS(+)-5，hNIS(野生型钠碘共同转运蛋白质(NIS-wt)的核苷酸分子)的大肠杆菌(CJ236，购自美国NewEnglandBioLabs公司)置于含有15微克/毫升氯霉素(chloramphenicol)的培养液(每公升含有10克胰化蛋白(Tryptone)、5克酵母菌萃取物、及10克氯化钠)中，并于37°C的培养箱中摇晃培养。隔天，将菌液加入至含有50微克/毫升安比西林(ampicillin,Sigma-Aldrich，美国)及15微克/毫升氯霉素的^cYT培养液(每公升含有16克胰化蛋白、10克酵母菌萃取物、及5克氯化钠)中，并于37°C的培养箱中摇晃培养，直到菌液的0.D600值达到0.3为止。接着，添加辅助噬菌体Mi;3K07(购自美国NewEnglandBioLabs公司)至菌液中，并在37°C的培养箱中摇晃培养1小时之后，添加70微克/毫升康霉素(kanamycin)至菌液中，并于37°C的培养箱中摇晃培养6小时。之后，将菌液置入离心管中，并以12，000转/分钟的转速离心菌液15分钟，再取出上清液并置入另一离心管中，再离心一次。收集上清液，并添加10活性单位(U)/微升DNaseI(去氧核糖核酸酵素I，DeoxyribonucleaseI)及10微克/毫升RNaseA，在37°C下反应15分钟后，添加1/4体积的噬菌体沉淀液(phageprecipitationsolution,20%PEG_8000、3.75摩尔浓度的醋酸铵)，再将混合物置于冰上30分钟，并以16，000转/分钟的转速离心15分钟。离心后，移除上清液，并以三羟甲氨基甲烷缓冲液(Trisbuffer)溶解沉淀物，再以酚/氯仿进行萃取多次。收集上清液，并以酒精沉淀法沉淀出单股噬菌体DNA，最后以水溶解单股噬菌体DNA。实验B、定点突变基于钠碘共同转运蛋白质的构型及重要氨基酸功能区的位置，选取位于细胞膜外、不具高度保留性、且中性(不带电荷)的氨基酸，以定点突变的方法，制备突变株。首先，将实验A中所制备的单股噬体DNA(1微升)、包含由SEQIDNO9所示的核苷酸序列的引子(primer)(1.25微升)、以及10倍黏合缓冲液(1微升，含有500毫摩尔浓度氯化钠、200毫摩尔浓度Tris-氯化氢(pH8.0)、及20毫摩尔浓度氯化镁)加入6.75微升的二次水，并置入一试管中混合，并加入矿物油以防止水分蒸发。将混合物置于99°C的水中加热5分钟，再以每分钟降1°C的速率，慢慢降温至30°C，使该单股噬菌体DNA与该引子进行黏合(annealing)，再移至冰上冷却。接着，加入合成缓冲液、T4DNA黏合酶(Iigase)、T4DNA聚合酶(polymerase)、以及T4基因32蛋白质(购自美国hvitrogen公司)至该试管中，并将试管置于冰上5分钟，再于25°C下作用5分钟，最后在37°C下反应90分钟，以进行聚合酶连锁反应(PCR)。待反应结束后，以酚/氯仿萃取多次，再以酒精沉淀DNA，并以水溶解经沉淀的DNA后，借助电穿孔的方法将DNA转形至大肠杆菌(匪522)(购自Mratagene公司)中。将大肠杆菌(匪522)的菌液涂在含有安比西林的培养盘上，于37°C的培养箱中培养16至M小时后，进行筛选，即可获得含有突变型钠碘共同转运蛋白质NIS-Y81D(即，钠碘共同转运蛋白质的残基81酪胺酸(tyr0Sine，Y)经取代为天门冬胺酸(asparticacid,D))的核苷酸分子的质体DNA的大肠杆菌(匪522)。挑选单一菌落的大肠杆菌(匪522)，并将其放入含有50微克/毫升安比西林的LB培养液(每公升含有10克胰化蛋白、5克酵母菌萃取物、及10克氯化钠)，并于37°C的培养箱中摇晃培养M小时后，抽取其质体DNA，利用限制酶切割后，以DNA定序方式确认定点突变的结果。上述实验方法参考Kunkel，1985.Rapidandefficientsite-specificmutagenesiswithoutphenotypicselection.Proc.Natl.Acad.Sci.USA,82:488-492,该文献全文随本申请递交以供参考。重复上述步骤，其中，分别使用包含如SEQIDNO10,SEQIDNO=IUSEQIDN0:12,SEQIDNO13,SEQIDNO14,SEQIDNO15、SEQIDN0:16、或SEQIDN0:17所示的核苷酸序列的引子，制得包含突变型钠碘共同转运蛋白质NIS-Y81R、NIS-Q218R、NIS-T221R、NIS-S240R、NIS-T308D、NIS-T308K、NIS-L315D、或NIS-S319D的核苷酸分子的质体DNA的大肠杆菌(匪522)。本实验进行定点突变所使用的引子的序列如表1所示。表权利要求1.一种经修饰的钠碘共同转运蛋白质(sodiumiodidesymporterprotein)，其其特征在于所述蛋白质包含一如SEQIDNO:1所示的氨基酸序列且于其内部的氨基酸序列的单一或多个氨基酸残基经改变，以增强其转运受质的功能，而可用于增加细胞中钠碘共同转运蛋白质的受质的量。2.如权利要求1所述的经修饰的钠碘共同转运蛋白质，其特征在于所述蛋白质包含一如SEQIDNO:1所示的氨基酸序列且于其内部的氨基酸序列的单一或多个氨基酸残基经改变为带负电荷的氨基酸。3.如权利要求1所述的经修饰的钠碘共同转运蛋白质，其特征在于所述蛋白质包含一如SEQIDNO:1所示的氨基酸序列且符合以下一种或多种条件(1)残基218麸酰胺酸(glutamine,Q)经取代为精胺酸(arginine,R)；(2)残基308苏胺酸(threonine，！1)经取代为离胺酸(lysine，K)；以及(3)残基319丝胺酸(serine，S)经取代为天门冬胺酸(asparticacid,D)。4.如权利要求3所述的经修饰的钠碘共同转运蛋白质，其特征在于所述蛋白质包含一如SEQIDNO:1所示的氨基酸序列且其残基218麸酰胺酸经取代为精胺酸。5.如权利要求1至4中任一项所述的经修饰的钠碘共同转运蛋白质，其特征在于所述蛋白质能增强转运选自以下群组的受质钠离子(Na+)、碘离子(Γ)、过锝酸离子(TcO4-)、过铼酸离子(ReO4-)、砹离子(At—)或前述离子的组合。6.如权利要求5所述的经修饰的钠碘共同转运蛋白质，其特征在于所述蛋白质能增强转运碘离子。7.如权利要求1至4中任一项所述的经修饰的钠碘共同转运蛋白质，其特征在于所述蛋白质应用于治疗癌症或/和分子造影(molecularimaging)08.一种编码如权利要求1至7中任一项所述的钠碘共同转运蛋白质的核苷酸分子，其特征在于所述核苷酸分子包含如SEQIDNO2,SEQIDNO:3、SEQIDNO:4、SEQIDNO:5、SEQIDNO:6,SEQIDNO:7、或SEQIDNO:8所示的核苷酸序列的一种或几种。9.如权利要求8所述的核苷酸分子，其特征在于所述核苷酸分子包含一如SEQIDNO:2所示的核苷酸序列。10.一种包含如权利要求8所述的核苷酸分子的表达载体。11.如权利要求10所述的表达载体，其特征在于所述表达载体能应用于治疗癌症或/和分子造影。12.—种增加活体外的细胞中的钠碘共同转运蛋白质的受质的方法，其特征在于包含a)将如权利要求1至7中任一项所述的钠碘共同转运蛋白质引入至一活体外的细胞中；以及b)使该细胞与该钠碘共同转运蛋白质的一种或多种受质接触。13.如权利要求12所述的方法，其特征在于该钠碘共同转运蛋白质经由以下步骤而引入至该细胞中al)将一包含一编码该钠碘共同转运蛋白质的核苷酸分子的表达载体置入该细胞中；以及a2)培养该细胞，以表达该钠碘共同转运蛋白质；其中，该核苷酸分子包含一如SEQIDNO2,SEQIDNO:3、SEQIDNO:4、SEQIDNO:5、SEQIDNO6,SEQIDNO:7、或SEQIDNO:8所示的核苷酸序列。14.如权利要求13所述的方法，其特征在于该核苷酸分子包含一如SEQIDNO:2所示的核苷酸序列。15.如权利要求12所述的方法，其特征在于该受质为钠离子、碘离子、过锝酸离子、过铼酸离子或砹离子。16.如权利要求15所述的方法，其特征在于该受质为碘离子。全文摘要本发明公开了一种经修饰的钠碘共同转运蛋白质，通过在钠碘共同转运蛋白质内部的氨基酸序列中改变单一或多个氨基酸残基的方式，增强其转运功能，从而可用于增加细胞中钠碘共同转运蛋白质的受质的量。文档编号C12N5/10GK102344489SQ20101024585公开日2012年2月8日申请日期2010年8月5日优先权日2010年8月5日发明者侯庭镛,吴世禄,李佳橙,梁基安,罗欣宜,项千芸申请人:中国医药大学