专利名称：医院感染利用枸橼酸盐致病菌鉴别诊断剂的制作方法
技术领域：
本发明涉及一种医院感染利用枸橼酸盐致病菌鉴别诊断剂，其主要成分是枸橼酸钠、氯化钠、硫酸镁、磷酸二氢钾、磷酸二氢铵、溴麝香草酚蓝、酵母浸膏、琼脂， 经一定的工艺制成。用以鉴别细菌能否利用枸橼酸盐。利用生化反应试验鉴别细菌的种类， 其关键在于准确、快速、简便。由于不同细菌具有其各自的独特酶系统，因而在代谢过程中所产生的分解和合成的代谢产物也不同，这些分解或合成的代谢产物又各具有不同的生化特点，再利用其不同生化特点在相应的培养条件下所产生的生化反应，来进行细菌种类的鉴别，这是目前微生物实验室最常用的手段。由于目前培养条件及指示剂的应用范围所限， 生化反应试验中观察细菌对有机酸盐及铵盐利用的鉴别鉴别诊断剂存在所需接种量大、培养时间长、指示剂变色不明显、易出现假阳性或假阴性等问题。医院感染利用枸橼酸盐致病菌鉴别诊断剂是观察细菌对有机酸盐及铵盐利用的一综合性鉴别诊断剂，用以鉴别细菌能否利用枸橼酸盐，从而进一步判断细菌的种类及生化特点。随着生物研究的进展，国内外对细菌鉴别的研究也在不断的发展中。生物工作者一直希望能有一种能克服上述不足的鉴别诊断剂一医院感染利用枸橼酸盐致病菌鉴别诊断剂。
技术背景本发明的目的在于提供一种能克服已有鉴别诊断剂不足的医院感染利用枸橼酸盐致病菌鉴别诊断剂。与其它同类鉴别诊断剂相比具备下列特点所需接种量小， 少量细菌即可出现产碱变色；指示剂变色快速明显，24小时即可观察结果；不易出现假阳性，仅限能利用枸橼酸钠的细菌能生长、变色；不易出现假阴性，能破坏标本中存在的抑菌物质，使细菌生长不受抑制；试验阳性对照菌在该固体鉴别诊断剂中增菌繁殖迅速，并且产碱使鉴别诊断剂变色
发明内容
本发明的要点在于选择合适的组分，并进行合理混配，经加温、溶解、混合、冷却、分装、高温灭菌等工艺而成一种医院感染利用枸橼酸盐致病菌鉴别诊断剂。
本发明选择的配方如下(组分及其重量百分比％ ):枸橼酸钠O. 8-0. 9 ;氯化钠 O. 8-0. 85 ;硫酸镁O. 01-0. 03 ;磷酸二氢钾O. 08-0. 12 ;磷酸二氢铵O. 13-0. 15 ;溴麝香草酚蓝O. 3-0. 5 ;酵母浸膏3. 5-4. O ;琼脂1. 5-2. 5 ;蒸馏水加至100。
枸橼酸钠是鉴别诊断剂中碳的唯一来源，而磷酸二氢铵是鉴别诊断剂中氮的唯一来源。能利用枸橼酸钠为碳源的细菌在鉴别诊断剂上能生长，并且分解枸橼酸盐最后产生碳酸盐，使鉴别诊断剂变为碱性，此时鉴别诊断剂中的溴麝香草酚蓝指示剂由绿色变为深监色。硫Ife续能破坏标本中存在的四环素、金霉素、土霉素、新霉素、多粘囷素及链霉素的抑菌作用；氯化钠用于调整渗透压；磷酸二氢钾用于调节pH。酵母浸膏、琼脂是鉴别诊断剂中的营养和支持成分；试验阳性对照菌在该固体鉴别诊断剂中增菌繁殖，并且产碱使鉴别诊断剂变色。
本发明产品的制备方法是
I)、将枸橼酸钠、氯化钠、硫酸镁、磷酸二氢钾、磷酸二氢铵、琼脂按比例加入蒸馏水中，再加热溶解，矫正pH至6. 8，以绒布过滤；
2)、再加入溴麝香草酚蓝混匀，压力蒸汽灭菌1. 05kgl5分钟；
3)、无菌条件下，加入无菌酵母浸膏，分装试管，每管约2ml，趁热将含有鉴别诊断剂的灭菌试管倾斜一定角度，冷凝后制成斜面，待用。
本发明具有以下优点(I)所需接种量小，少量细菌即可出现产碱变色；(2)指示剂变色快速明显，24小时即可观察结果；(3)不易出现假阳性，仅限能利用枸橼酸钠的细菌能生长、变色；(4)不易出现假阴性，硫酸镁能破坏标本中存在的四环素、金霉素、土霉素、 新霉素、多粘菌素及链霉素的抑菌作用；(5)试验阳性对照菌在该鉴别诊断剂中增菌繁殖迅速，并且产碱使鉴别诊断剂变色。
具体实施方式
下面结合实施例对本发明作进一步的详细说明按照下表所列数据(重量百分比％)及其所述步骤进行配置 配方一枸橼酸钠氯化钠硫酸镁磷酸二氢钾磷酸二氢铵溴麝香草酚蓝酵母浸膏琼脂蒸馏水配方二 枸橼酸钠氯化钠硫酸镁磷酸二氢钾磷酸二氢铵溴麝香草酚蓝酵母浸膏琼脂蒸馏水
权利要求
1.本发明涉及一种医院感染利用枸橼酸盐致病菌鉴别诊断剂，其特征在于具有如下的配方(组分及其重量百分比％ ):枸橼酸钠O. 8-0. 9 ;氯化钠O. 8-0. 85 ;硫酸镁O. 01-0. 03 ； 磷酸二氢钾O. 08-0. 12 ;磷酸二氢铵O. 13-0. 15 ;溴麝香草酚蓝O. 3-0. 5 ;酵母浸膏3.5-4. O ;琼脂1. 5-2. 5 ;蒸馏水加至100。
2.—种权利要求1所述医院感染利用枸橼酸盐致病菌鉴别诊断剂，其特征在于具有如下制备方法1)、将枸橼酸钠、氯化钠、硫酸镁、磷酸二氢钾、磷酸二氢铵、琼脂按比例加入蒸馏水中， 再加热溶解，矫正pH至6. 8，以绒布过滤；2)、再加入溴麝香草酚蓝混匀，压力蒸汽灭菌1.05kgl5分钟；3)、无菌条件下，加入无菌酵母浸膏，分装试管，每管约2ml，趁热将含有鉴别诊断剂的灭菌试管倾斜一定角度，冷凝后制成斜面，待用。
全文摘要
本发明涉及一种医院感染利用枸橼酸盐致病菌鉴别诊断剂，其主要成分是枸橼酸钠等，经一定的工艺制成。用以鉴别细菌能否利用枸橼酸盐。利用该生化反应试验鉴别医院感染利用枸橼酸盐致病菌的种类，其关键性能是准确、快速、简便。
文档编号C12Q1/04GK102994608SQ20111027704
公开日2013年3月27日 申请日期2011年9月19日 优先权日2011年9月19日
发明者蒋欣, 崔瑛 申请人:蒋欣, 崔瑛