专利名称：一种大豆转化辅助器的制作方法
技术领域：
本发明涉及一种大豆转化辅助器，具体是涉及农杆菌介导的纵切幼苗上胚轴顶端转化大豆的辅助器。
背景技术：
大豆是重要的的食用和油料作物。大豆含丰富的植物蛋白，营养价值极高。大豆油中不饱和脂肪酸和维生素E含量丰富，是世界上最重要的植物油。随着世界人口的增长及人们生活水平的提高，人们对大豆的需求量越来越大。常规育种已不能满足人们对大豆品种和品质的要求。随着现代分子生物学的发展和进步，利用转基因技术培育大豆新品种已经成为一种趋势。将人工分离和修饰过的基因导入到生物体基因组中，由于导入基因的表达，引起生物体的性状的可遗传的修饰，这一技术称之为转基因技术。目前用于大豆育种的转基因技术主要包括两大类，第一类是不需要经过组织培养的转基因技术，目前研究比较多的是花粉管通道法；另一类是需要经过组织培养的转基因技术，比较常用的有基因枪法和农杆菌介导法。(一)花粉管通道法花粉管通道法是在授粉后向子房注射含目的基因的DNA溶液，利用植物在开花、 受精过程中形成的花粉管通道，将外源DNA导入受精卵细胞，并进一步地被整合到受体细胞的基因组中，随着受精卵的发育而成为携带转基因的新个体。花粉管通道法不需要组织培养和仪器转化设备，简便易行，但需要育种工作者摸索具体的外源DNA导入时间与方法。(二)基因枪法基因枪法是将直径很小的钨粉或金粉粒子微粒浸泡在供体DNA中，使外源基因吸附在表面，然后用基因枪以很高的速度将金属微粒射入受体植物细胞内实施转化。该方法的主要优点是不受受体植物范围的限制，其载体质粒的构建也相对简单，因此也是目前转基因研究中应用较为广泛的一种方法。但是基因枪法需要经过组织培养阶段，受到组织培养条件的限制，转基因周期长，成本比较高。另一方面由于基因枪法的随机性，外源基因进入宿主基因组的整合位点相对不固定，拷贝数往往较多，这样转基因后代容易出现突变、 外源基因容易丢失，容易引起基因沉默等现象的发生，不利于外源基因在宿主植物的稳定表达。而且基因枪价格昂贵、运转费用高。这些都限制了基因枪作为产业化转基因技术的广泛使用。(三)农杆菌介导法农杆菌介导法是现代转基因领域广泛使用的一种技术，其优点是手段相对简单， 可靠性强，效率高。但在只有外植体能再生的双子叶植物中才能采用。目前，农杆菌介导法应用于大豆转化主要是以大豆的子叶、子叶节等为外植体，利用农杆菌侵染，然后经过组织培养再生器官，获得转基因苗。大豆转化的效率受到农杆菌菌株感染转化能力、大豆基因型、组织培养条件、T - DNA的转移效率和转化后的筛选模式的影响，很难大面积推广。本发明人经过长时间的摸索，发明了一种全新的、无需经过组织培养阶段的农杆菌介导的纵切大豆幼苗上胚轴顶端转化方法，该方法具转化效率高、周期短、操作简单等优点Q01010173914. X)。该方法中需要在渗透培养基中，用薄刀刃在大豆的上胚轴顶端纵切， 制造伤口，大豆伤口的深度是影响转化效率的关键，但是薄刃刀片不易操作，对转化人员的技术水平有比较高的要求，这限制了该方法的发展，本发明人经过反复的试验，发明了一种大豆转化的辅助器，大大简化了纵切大豆上胚轴的难度，降低了对转化人员的技术水平要求，为大豆纵切上胚轴转化方法的推广提供了基础，具有重要的意义。
发明内容为了解决农杆菌介导的纵切大豆幼苗上胚轴顶端转化方法中大豆的纵切伤口深度难确定的问题，本发明提供了转化的辅助器，利用该转化辅助器能够使转化操作人员轻松地掌握大豆上胚轴的致伤伤口的深度，提高大豆转化的效率和稳定性。具体地讲，本发明提供了一种转化辅助器，该辅助器包括固定盒、两个刀片固定块、刀片调节块、两个螺丝装置。所述的两个刀片固定块，一个刀片固定块固定在固定盒上， 另一个刀片固定块通过螺丝装置与固定器的侧面相连接，所述螺丝装置包括可以调节刀片固定块位置的滑竿和一个固定夹，两个刀片固定块的中轴线在一条直线上。所述刀片调节器通过螺丝装置与固定器的侧面相连接，所述螺丝装置包括可以调节刀片调节块位置的滑竿和一个固定夹。所述的刀片固定块的截面性状是T形。该转化辅助器是将刀片置于刀片调节器上，通过推动滑竿调节刀刃至适合的厚度，推动连接固定块的滑竿，将刀片固定。该转化辅助器通过推动与刀片调节器相连接的滑竿可以调整刀片的厚度，利用该转化辅助器可以使大豆转化过程中下胚轴的致伤深度处于基本一致，提高大豆的转化效率和稳定性。
图1为转化辅助器的结构示意图，其中A表示刀片固定块，B表示刀片调节块，C
表示固定盒。图2为刀片固定块的示意图。图3为刀片调节块的示意图。图4为固定盒的示意图。
具体实施方式
如图1所示，本发明提供的转化辅助器包括固定盒A、两个刀片固定块B、刀片调节块C、两个螺丝装置。所述的两个刀片固定块，一个刀片固定块固定在固定盒上，另一个刀片固定块通过螺丝装置与固定器的侧面相连接，所述螺丝装置包括可以调节刀片固定块位置的滑竿和一个固定夹，两个刀片固定块的中轴线在一条直线上。所述刀片调节器通过螺丝装置与固定器的侧面相连接，所述螺丝装置包括可以调节刀片调节块位置的滑竿和一个固定夹。所述的刀片固定块的截面性状是T形。该转化辅助器是将刀片置于刀片调节器上，通过推动滑竿调节刀刃至适合的厚度，推动连接固定块的滑竿，将刀片固定。该转化辅助器通过推动与刀片调节器相连接的滑竿可以调整刀片的厚度，利用该转化辅助器可以使大豆转化过程中下胚轴的致伤深度处于基本一致，提高大豆的转化效率和稳定性。
权利要求1.一种大豆转化辅助器，包括固定盒、两个刀片固定块、刀片调节块、两个螺丝装置， 其特征在于两个刀片固定块，一个刀片固定块固定在固定盒上，另一个刀片固定块通过螺丝装置与固定盒的侧面相连接，刀片调节块通过螺丝装置与固定器的另一个侧面相连接。
2.权利要求1所述的大豆转化辅助器，其特征在于所述的螺丝装置包括一个滑竿和一个固定夹。
3.权利要求1或2所述的大豆转化辅助器，其特征在于两个刀片固定块的中轴线在一条直线上。
4.权利要求1或2所述的刀片固定块的截面形状是T形。
专利摘要本实用新型提供了一种转化辅助器，该辅助器包括固定盒、两个刀片固定块、刀片调节块、两个螺丝装置。所述的两个刀片固定块，一个刀片固定块固定在固定盒上，另一个刀片固定块通过螺丝装置与固定器的侧面相连接，所述螺丝装置包括可以调节刀片固定块位置的滑竿和一个固定夹，两个刀片固定块的中轴线在一条直线上。所述刀片调节器通过螺丝装置与固定器的侧面相连接，所述螺丝装置包括可以调节刀片调节块位置的滑竿和一个固定夹。所述的刀片固定块的截面性状是T形。
文档编号C12M1/00GK202139221SQ201120117520
公开日2012年2月8日 申请日期2011年4月20日 优先权日2010年12月15日
发明者何峰, 刘军华, 夏勉, 张斌 申请人:北京未名凯拓作物设计中心有限公司