专利名称：一种骆驼蓬药酒的发酵生产方法
技术领域：
本发明涉及一种药酒的发酵生产方法，具体地涉及一种基于骆驼蓬药理功效、通过对骆驼蓬全草的前处理、骆驼蓬原汁的制备和酿酒酵母的活化、经过主发酵、后发酵及后处理发酵生产骆驼蓬药酒的方法。
背景技术：
骆驼蓬(Peganum harmala L.)又叫骆驼蒿、苦苦菜、臭草、臭牡丹，为蒺藜科(Zygophyllaceae)植物骆骑蓬属(Peganum)多年生草本植物的全草,因能够散发出一种类似于骆驼体的特殊气味而得名。本品性平，味苦，辛，有毒，它具有坚固筋脉、助阳暖阴、消除黏稠体液、消散寒湿之气等功能。主治筋脉软弱、关节骨痛、咳嗽痰多、偏瘫健忘、神昏头痛、月经不调等症。近年来的研究还发现它有以下药理功效。I)防辐射作用:利国威等采用纯系NIH雄性小鼠进行试验，用Co6tl照射小鼠后，给予一定剂量的几种骆驼蓬生物碱，与对照组相比给药组动物存活率高，比有关文献报道的人参提取物的抗辐射效力强，说明骆驼蓬生物碱具有抗辐射功能。2)抗包虫作用:杨文光等用含骆驼蓬籽提取液5%的药食喂养人工接种继发性腹腔棘球蝴和泡球蝴小鼠60 120d后发现该药对腹腔棘球蝴和泡球蝴(简称包虫病)均具有抑制生长的作用，并证实其生物碱可以通过棘球蝴囊壁进入囊液而发挥药效。3)抗炎、镇痛及止痒作用:陈蔚如等用二甲苯和角叉菜胶使老鼠耳和足致肿，生理盐水致痒，醋酸致小鼠扭体反应等试验，观察去氢骆驼蓬碱(HM)注入后对老鼠的影响，结果显示只有25mg/kg 剂量具有显著的抗炎、镇痛和止痒作用。4)对免疫功能的影响:有文献报道去氢骆驼蓬碱(HM)和其他骆驼蓬生物碱是单胺氧化酶抑制剂，具有抑制细胞免疫和体液免疫的作用。5)抗银屑病:李宇晶等采用制备雌激素周期小鼠阴道上皮模型及鼠尾鳞片表皮模型的方法，用光学显微镜观察分析基底细胞中有丝分裂数及颗粒层鳞片数。与对照组相t匕，去氢骆驼蓬碱(HM)软膏组对两个实验模型的作用均存在显著差异(P < 0.01)。表明去氢骆驼蓬碱(HM)软膏能抑制活跃的上皮细胞并促使表皮角化完全，起到治疗银屑病的作用。6)抗肿瘤作用:自从上世纪70年代报道骆驼蓬生物碱提取物有抑制肿瘤的作用以来，国内用骆驼蓬种子及其生物碱治疗消化道肿瘤及中、晚期肝癌的结果表明，均具有明显的疗效。冯官光等将SO-RB5tl细胞接种于裸小鼠颈背皮下形成移植瘤，用50mg/(kg.(!)及70mg/(kg.d)骆驼蓬总碱每天腹膜腔内注射I次，连续9d共注射9次，停药后作光镜和电镜检查，结果50mg/ (kg.d)组骆马它蓬总碱抑瘤率为32%, 70mg/ (kg.d)组为89%,并且肿瘤细胞大量坏死并崩解，说明骆驼蓬总碱对肿瘤细胞有明显的抑杀作用。王晓华等用该药的醇提取物和水提取物进行了体外抑癌试验，结果表明，醇提取物和水提取物对肿瘤细胞L-1210和K-562均有一定的抑制作用，其中醇提取物的抗肿瘤作用最强。杨小平等用1: 3的肿瘤组织生理盐水将瘤株S-180、网状细胞肉瘤L1和肝癌等各瘤株制成混悬液，然后于每只小鼠腋窝皮下接种0、2mL，接种24h后，开始注入骆驼蓬总碱(TAH) +顺钼(DDP)或阿霉素(ADM)，结果TAH在20，40mg/(kg -d)剂量下对肝癌的平均抑瘤率(η = 2)分别为30.1%和33.4%，在20，40，6011^/(1^.(1)剂量下对 L1 的平均抑瘤率(η = 3)分别为 33.4%、43.4%和 48.9% (P 值均小于 0.05) ;ΤΑΗ 与 DDP 或 ADM联合应用时，TAH40mg/(kg.(!)和 DDP0.8mg/(kg.d)合用的平均抑瘤率(η = 2)由各自的26.0%和29.0%升高到联合用药的53.5%(P < 0.05)，显示THA与DDP或ADM合用有增效作用。段金廒等用不同浓度的去氢骆驼蓬碱(HM)对人白血病细胞作用72h，发现在较低浓度时(0.02 μ g/mL)HM就影响细胞增殖，随着药物浓度的增加，抑制作用也逐渐增强；当增殖抑制率50%的药物浓度(IC5tl)为3.40时，随着剂量的增加细胞的损伤也加重，表明HM对K562白血病细胞有明显的体外抑制和杀灭作用，其活性指标超过阳性对照组的环磷酰胺。谢燕等从细胞凋亡的角度研究了骆驼蓬总碱(TAH)的抗肿瘤的机制，先用TAH(不同剂量和作用时间)处理体外培养的人宫颈癌HeLa细胞，再用流式细胞仪、电子显微镜、DNA琼脂糖电泳检测TAH诱发HeLa细胞凋亡情况，结果表明，在一定剂量和作用时间范围内，TAH除了诱导HeLa细胞凋亡作用外，还存在细胞毒性等其他机制，抗肿瘤作用是多种机制共同作用的结果。李英辉等研究了骆驼蓬总碱(TAH)对小鼠移植性肿瘤体内及体外肿瘤细胞的作用，抑瘤试验采用S-180、肝癌H22及艾氏腹水癌等荷瘤小鼠，体外试验采用HeLa细胞和S-180细胞。结果TAH对小鼠移植性肿瘤的抑制率为28.94% 46.77%，对肿瘤细胞的平均生长抑制率为83.41% 92.30%。说明TAH对肿瘤细胞在体内和体外均有明显的抑制作用。本申请的发明人经过近两年对骆驼蓬药理功效的潜心调研，基于骆驼蓬水提物和醇提物业已明确的多种药理功效和药酒发酵工艺可以完美的融合骆驼蓬药物活性的双重考虑，在对骆驼蓬药酒发酵生产工艺全面总结的基础上，设计了一种基于骆驼蓬药理功效、通过骆驼蓬全草的前处理、骆驼蓬原汁的制备和酿酒酵母的活化、经过主发酵、后发酵及后处理发酵生产骆驼蓬药酒的方法，实验表明该方法是一种经济适用的骆驼蓬药酒生产方法
发明内容
本发明提供了一种骆驼蓬药酒的发酵生产方法，该方法包括骆驼蓬全草的前处理及骆驼蓬原汁的制备、酿酒酵母的活化、骆驼蓬原酒的生产和骆驼蓬药酒的生产等步骤。优选地，在骆驼蓬药酒发酵生产的步骤中还包括前处理中加入含有果胶酶、纤维素酶的复合酶酶解和后处理中加入新疆野生黑蜂蜂蜜改善风味、提升功效的步骤，经过上述处理可得到风味独特、功效显著的骆驼蓬药酒。鉴于骆驼蓬水提物和醇提物业已证实的多种药理功效和药酒发酵工艺可以完美的融合骆驼蓬药物活性的双重考虑，以骆驼蓬全草汁为主料配以蔗糖等辅料，采用微生物液体发酵法生产骆驼蓬药酒，既克服了传统药酒生产工艺活性成分提取工艺繁琐、稳定性控制困难的不足，又能使天然产物药物成分在发酵生产中得到充分释放发挥其作用，不失为两全其美之举。其中，骆驼蓬全草的前处理是影响发酵生产骆驼蓬药酒功效至关重要的因素，因此，包括原料的存放、酶的选择等前处理是骆驼蓬药酒发酵生产首先要解决的问题。骆驼蓬全草在使用前可以利用新疆得天独厚的光热资源自然风干存放，使用时选择专用设备机械破碎，浸泡，然后加入适量的含有果胶酶和纤维素酶的复合酶酶解后榨汁，在不破坏其营养、活性成分的前提下，利于后续酿酒酵母发酵时的吸收利用。骆驼蓬全草汁的添加量对骆驼蓬药酒的感官评价和功效有直接的影响。如果用量过多，会使产品的风味太浓，缺乏应有的清爽口感。另外，用量过多会使发酵酒中蛋白质含量过高，对骆驼蓬药酒酒质的稳定性造成危害。如果用量过少，则产品的功效不足。糖是发酵生成酒精的物质来源，是酵母生长繁殖的必需条件。糖度太大，发酵醪液有很高的渗透压，影响酵母的正常生长和代谢，发酵过程缓慢，易感染杂菌；如果糖度小，发酵又达不到所需的酒精度。接种量是影响骆驼蓬药酒风味和品质的关键因素。酵母用量对发酵有直接影响，关系到发酵能否正常进行和酒的品质。接种量增加，酒中酵母味较重；接种量过小，所需发酵时间较长。发酵温度是影响骆驼蓬药酒风味的重要因素。发酵温度提高，容易使酿酒酵母中的双乙酰含量提高，使酒带有一定的馊酸味，同时酵母容易衰老和自溶；发酵温度过低时发酵时间较长。此外，主发酵时间的控制对防止酵母菌体老化、自溶有影响，对保证骆驼蓬药酒的酒质也有重要影响。该方法已经在实验中得到反复验证，结果表明该方法是一种经济适用、适宜工业化大生产的骆驼蓬药酒发酵生产方法。
具体实施例方式实施例骆驼蓬药酒的发酵生产方法骆驼蓬药酒的发酵生产方法包括骆驼蓬全草的前处理、骆驼蓬原汁的制备、主发酵培养基的调配、主发 酵、后发酵和后处理几个阶段。将经过洗净、风干、破碎的骆驼蓬全草浸泡、酶解、榨汁后，按一定比例加入主发酵培养基，再经过主发酵和后发酵，得到骆驼蓬原酒，最后通过下胶澄清、调配、陈酿和装瓶，得到风味独特的骆驼蓬药酒。(I)、骆驼蓬全草的前处理及骆驼蓬原汁的制备中秋时节将特定产地收集的骆驼蓬全草剔除杂物，用质量体积比为0.1%的高锰酸钾溶液浸泡30min后，用清水洗净，然后利用新疆得天独厚的光热资源自然风干，装袋置于阴凉干燥处存放。用前选择专用设备机械破碎至2-3cm的短条,再用70°C热水浸泡2h，自然冷却至35°C后按0.6g/100g的比例加入比活力为40U/mL的复合酶酶解60min，按质量体积比1: 10加入饮用水，采用打浆机直接打浆，3000r/min离心收集上清液，得骆驼蓬原汁。其中，复合酶中果胶酶和纤维素酶的质量比为2: 1、pH值为5.2-5.6。(2)、酿酒酵母的活化将5g安琪酿酒高活性干酵母加入200mL质量体积百分浓度为2 %的无菌蔗糖溶液中，在37°C下活化15min，然后降温至32°C恒温培养2h即可备用。(3)、骆驼蓬原酒的生产在骆驼蓬原汁中按体积质量比4: I加入蔗糖制得主发酵培养基，加柠檬酸调整其pH值为5.0，在105°C下灭菌IOmin后，冷却至40°C通入SO2进行冷杀菌，静置12h后，将活化好的安琪酿酒酵母按体积比为2.0%的接种量接种到主发酵培养基中，装液量为95%，在22°C下发酵7d，每天取样测定酒精度和残还原糖浓度，直到酒精度为10度、残还原糖质量体积百分浓度降至I %以下，结束主发酵，主发酵结束后采用虹吸法引出清酒液进行后发酵，在20°C下密闭发酵15d，将后酵酒醪用120目的滤布进行过滤得原酒，接着对原酒进行酒精度、残还原糖、总酸指标测定，并检测原酒中骆驼蓬生物碱含量，评定感官指标。(4)、骆驼蓬药酒的生产在骆驼蓬原酒中添加质量体积比为0.015%的明胶进行澄清，增加酒的稳定性，下胶后在室温下贮存3d后过滤，即得到清澈酒液，将澄清后的酒液按体积比为3: I的比例加入70度的原浆白酒调整其酒精度为24度，同时加入体积比为10%的新疆野生黑蜂蜂蜜改善原酒风味、提升功效，调配好的酒液封存坛内陈酿90d，陈酿后的酒液取样进行香气成分测定，陈酿酒液经陶瓷膜过滤器精滤后装瓶，在80°C下灭菌lOmin，得到风味独特、功效显著的骆驼蓬药酒。通过上述具体的实施例，更容易理解本发明。上述实施例只是举例性的描述，而不应当被理解为用来限制本发明的范 围。
权利要求
1.一种骆驼蓬药酒的发酵生产方法，其特征在于:骆驼蓬全草的前处理及骆驼蓬原汁的制备:中秋时节将特定产地收集的骆驼蓬全草剔除杂物，用质量体积比为0.1%的高锰酸钾溶液浸泡30min后，用清水洗净，然后利用新疆得天独厚的光热资源自然风干，装袋置于阴凉干燥处存放，用前选择专用设备机械破碎至2-3cm的短条，再用70°C热水浸泡2h，自然冷却至35°C后按0.6g/100g的比例加入比活力为40U/mL的复合酶酶解60min，按质量体积比1: 10加入饮用水，采用打浆机直接打浆，3000r/min离心收集上清液，得骆驼蓬原汁；酿酒酵母的活化:将5g安琪酿酒高活性干酵母加入200mL质量体积百分浓度为2%的无菌蔗糖溶液中，在37°C下活化15min，然后降温至32°C恒温培养2h即可备用；骆驼蓬原酒的生产:在骆驼蓬原汁中按体积质量比4: I加入蔗糖制得主发酵培养基，加柠檬酸调整其pH值为5.0，在105°C下灭菌IOmin后，冷却至40°C通入SO2进行冷杀菌，静置12h后，将活化好的安琪酿酒酵母按体积比为2.0%的接种量接种到主发酵培养基中，装液量为95%，在22°C下发酵7d，每天取样测定酒精度和残还原糖浓度，直到酒精度为10度、残还原糖质量体积百分浓度降至I %以下，结束主发酵，主发酵结束后采用虹吸法引出清酒液进行后发酵，在20°C下密闭发酵15d，将后酵酒醪用120目的滤布进行过滤得原酒，接着对原酒进行酒精度、残还原糖、总酸指标测定，并检测原酒中骆驼蓬生物碱含量，评定感官指标；骆驼蓬药酒的生产:在骆驼蓬原酒中添加质量体积比为0.015%的明胶进行澄清，增加酒的稳定性，下胶后在室温下贮存3d后过滤，即得到清澈酒液，将澄清后的酒液按体积比为3: I的比例加入70度的原浆白酒调整其酒精度为24度，同时加入体积比为10%的新疆野生黑蜂蜂蜜改善原酒风味、提升功效，调配好的酒液封存坛内陈酿90d，陈酿后的酒液取样进行香气成分测定，陈酿酒液经陶瓷膜过滤器精滤后装瓶，在80°C下灭菌lOmin，得到风味独特、功效显著的骆驼蓬药酒， 其中，骆驼蓬原汁制备时使用的复合酶中果胶酶和纤维素酶的质量比为2: 1、pH值为5.2-5.6。
全文摘要
本发明提供了一种基于骆驼蓬药理功效发酵生产骆驼蓬药酒的方法，该方法包括骆驼蓬全草的前处理及骆驼蓬原汁的制备、酿酒酵母的活化、骆驼蓬原酒的生产和骆驼蓬药酒的后处理等步骤。优选地，在骆驼蓬药酒发酵生产的步骤中还包括前处理中加入含有果胶酶、纤维素酶的复合酶酶解和后处理中加入新疆野生黑蜂蜂蜜改善风味、提升功效的步骤，经过上述处理可得到风味独特、功效显著的骆驼蓬药酒。
文档编号C12G3/06GK103224867SQ20131017663
公开日2013年7月31日 申请日期2013年4月23日 优先权日2013年4月23日
发明者陈恒雷 申请人:新疆大学