一株桑黄菌株及其应用的制作方法
【专利摘要】本发明属于生物【技术领域】，特别涉及一株桑黄菌株及其应用。该桑黄菌株栽培相对简单，管理相对容易，出芝相对高产、可进行大面积大棚栽培。该菌株于2014年3月07日在中国普通微生物菌种保藏管理中心保藏，编号为CGMCCNo.8854。本发明的桑黄菌株采用人工袋栽工艺经大量的培养实践证明，可实现真正桑黄的人工培养，并且单个子实体大小可以根据开口大小人为控制，桑黄人工袋栽，把野生稀缺资源、再生漫长的资源，人工短期再生。
CGMCC No. 8854
2014.03.07
【专利说明】一株桑黄菌株及其应用
【技术领域】
[0001] 本发明属于生物【技术领域】，特别涉及一株桑黄菌株及其应用。
【背景技术】
[0002] 桑黄，中药名，见《中药大辞典》。分类上属于真菌界（Fungi)、担子菌门 (Basigiomycota)、刺革菌目（Hymenochaxtales)刺革菌目（Hymenochaxtaceae)，是硬质的 多孔菌，为中、日、韩等地著名的药用真菌。现代研究证实桑黄能够提高人体的免疫力，减轻 抗癌剂的副作用，所以可用来辅助肿瘤病人的放疗和化疗，另外，桑黄对女性月经不调等妇 科疾病也有疗效。现有的药用桑黄多为野生，这是由于真正的桑黄人工栽培方法出菇较难， 人工培育生长情况不好，产率低，而且有效成分并不高。
【发明内容】
[0003] 本发明提供一种栽培相对简单，管理相对容易，出芝相对高产、可进行大面积大棚 栽培的桑黄菌株。
[0004] 本发明还提供所述的桑黄菌株在制备保健食品中的应用。
[0005] 本发明解决其技术问题所采用的技术方案是：
[0006] 一株桑黄菌株桑都1号，该菌株于2014年3月07日在中国普通微生物菌种保藏 管理中心保藏，编号为CGMCC No. 8854。本发明的桑黄菌种可作为母种栽培生产桑黄子实 体，得到的产品有效成分含量高，水分含量低，个头比其他菌种得到的子实体较大。
[0007] 本发明的桑黄菌 Inonotus sanghuang Sheng H. Wu, T. Hatt. &Y. C. Dai 来自浙江省 淳安千岛湖桑都食用菌专业合作社，是从千岛湖桑树上寄生的野生桑黄子实体中经组织分 离、传代复壮获得。该菌属担子菌门（Basidiomycota)、刺革菌目（Hymenochaetales)、刺革 菌科（Hymenochaetaceae) 〇
[0008] 生物学特征为：桑黄菌丝生长最适温度为28°C，最适pH值为6. 5,母种生长最适培 养基为PDA培养基，菌丝最适生长袋料培养基是桑树木屑培养基。以该菌体接种于桑树木 屑培养基中栽培所得子实体形态为菌盖扇形、贝壳形、马蹄形，上表面无瘤状凸起和裂纹， 菌盖呈金黄色或棕黄色。其它生理生化特征为：水分不得过10. 0% ;总灰分不得过6% ;水 溶性浸出物含量不得少于15% ;多糖以无水葡萄糖（C6H12O6)计，不得少于2. 50%。该菌株 于2014年3月07日在中国普通微生物菌种保藏管理中心保藏，编号为CGMCC No. 8854。地 址：北京市朝阳区北辰西路1号院3号中国科学院微生物研究所邮编100101。本发明保藏 提供的生物材料为桑都1号，分类命名为：桑黄Inonotus sanghuang。
[0009] -种所述的桑黄菌株的培养方法，该方法包括如下步骤：
[0010] (1)将权利要求1所述的桑黄菌株作为桑黄母种接种到原种培养基上培养获得桑 黄原种；将桑黄原种接种到栽培种培养基上培养获得桑黄栽培种；原种培养基和栽培种培 养基主要是由桑枝木屑、麦皮、玉米粉和石膏粉混合而成；
[0011] (2)将桑黄栽培种接种到菌棒中进行出芝培养；
[0012] 菌棒的制备：菌棒的组成同原种培养基，将桑枝木屑进行全面喷水预湿，湿度控 制在60% -70%，充分预湿后加入麦皮、玉米粉和石膏粉进行拌料，混合均匀后装塑料袋， 袋体直径为15_17cm，长度< 35cm，得到用于培养桑黄的菌棒；菌棒经灭菌后采用桑黄栽 培种进行接种；接种后的菌棒放入培养室内避光培养，温度控制在20-30°C，湿度控制在 40-50%，培养2个月以上；
[0013] (3)出芝管理：
[0014] 当桑黄菌棒开始转色变成黄色或者棕黄色时，移入大棚栽培，进行散射光培养，大 棚温度控制在15_32°C，湿度控制在80-90% ;培养10天以上，待菌棒完全转色成黄色或者 棕黄色之后，将菌棒逐个进行封口切除工作，然后照原样直立放回土内；继续培养待菌棒 封口切口处的菌丝重新长满菌棒袋口，进行菌棒开口工作；首先，将菌棒封口朝下放置，每 个菌棒外壁面开口 3-4个，然后埋入土中，埋入深度3-4厘米；大棚每天通风2-3次，每次 30-40分钟；培养60-90天后得到桑黄子实体。
[0015] 一种所述的桑黄菌株在制备保健食品中的应用。本发明的桑黄菌种可作为母种栽 培生产桑黄子实体，得到的产品有效成分含量高，水分含量低，个头比其他菌种得到的子实 体较大。在制备保健食品方面，可以制成口服液，食品等等，功效显著。
[0016] 本发明的有益效果是：本发明的桑黄菌株采用人工袋栽工艺经大量的培养实践证 明，可实现真正桑黄的人工培养，并且单个子实体大小可以根据开口大小人为控制，桑黄人 工袋栽，把野生稀缺资源、再生漫长的资源，人工短期再生。而且人工袋栽子实体成分含量 跟野生桑黄成分含量相当。目前的培养规模约为35亩、25万袋，长成桑黄成扇形、马蹄形， 子实层（子实体腹面）具有孔状结构、表面呈金黄色或棕黄色，老时变为黄棕色。菌肉黄色、 棕色或具光泽的木色，在菌盖表面附近颜色较深。子实层为有光泽的木色至深棕色，常分为 两层或多层。
【专利附图】
【附图说明】
[0017] 图1是多糖含量分析的葡萄糖标准曲线；
[0018] 图2是12种不同来源桑黄的多糖的含量；
[0019] 图3是水浸出物分析的氨基酸标准曲线图；
[0020] 图4是各种来源桑黄的氨基酸含量图；
[0021] 图5是本发明的菌棒处理过程的示意图。
【具体实施方式】
[0022] 下面通过具体实施例，对本发明的技术方案作进一步的具体说明。应当理解，本发 明的实施并不局限于下面的实施例，对本发明所做的任何形式上的变通和/或改变都将落 入本发明保护范围。
[0023] 在本发明中，若非特指，所有的份、百分比均为重量单位，所有的设备和原料等均 可从市场购得或是本行业常用的。
[0024] 实施例1 :
[0025] a、菌种的制作：
[0026] (1)、桑黄菌种按使用目的可以分为生产用菌种和保藏用菌种；按生产繁殖程序可 分为母种（可称试管种、一级种）、原种（二级种）和栽培种（三级种）3个级别。
[0027] (2)、母种是指通过孢子分离、组织分离并经过纯化、培养获得的桑黄菌丝纯培养。 容器为试管，故又称为试管种或一级种。它既适于用试管斜面移植，再次扩大繁殖，供生产 上使用，又适于纯种保藏。
[0028] 采用本发明的桑黄菌株桑都1号作为母种进行培养，母种培养基配方（PDA培养 基）：马铃薯200克，蔗糖20克，琼脂20克，水1000毫升。
[0029] (3)、原种是由母种扩大培养而成的菌种，本发明的桑黄原种为固体原种。容器多 为无色的750毫升小口径的菌种瓶或者聚乙烯塑料袋。此菌种必须要严格检查，无杂菌污 染的纯菌种方可用于生产。
[0030] 菌种培养基各原料组分的重量百分比为：麦皮10%，玉米粉10% (粒度 0. 1-0. 5mm)，石膏粉1 %，余量为桑枝木屑（粒度0. 5-1. Ocm)。
[0031] (4)、栽培种是由原种扩大繁殖而成的菌种。培养基和容器与原种相同。
[0032] b、菌棒的制备：
[0033] 菌棒的组成同原种培养基，将桑枝木屑进行全面喷水预湿，湿度控制在 60%-70%;次日加入麦皮10%，玉米粉10% (粒度0.1-0. 5mm)，石膏粉1%，进行拌料。培 养基混合均匀后装聚乙烯袋（袋体直径为15-17cm，长度< 35cm)，得到用于培养桑黄的菌 棒。
[0034] c、菌棒灭菌：
[0035] 菌棒进行高压或常压灭菌，高压灭菌时压力为3-5个大气压，温度120°C，灭菌时 间为6-8小时；常压灭菌时压力为1个大气压，温度KKTC，灭菌时间为24-36小时；灭菌后 冷却18小时以上至室温。
[0036] d、接种：
[0037] (1)、在接种开始前，要对接种箱进行清洗，然后把气雾消毒剂按照每立方米8克 的点燃消毒。
[0038] (2)、将灭菌冷却后的菌棒、桑黄栽培种放置在已消毒过的接种箱内，接种箱内用 菌用气雾消毒剂8g进行消毒，半小时左右，气雾消失后进行接种。
[0039] (3)、接种人员准备接种前，双手用清洁的水洗净，伸入接种箱内，用70% -75%的 酒精棉擦洗双手，然后把医用不锈钢镊子进行酒精消毒灭菌。完毕后打开栽培种、菌棒袋 口，用镊子取栽培种直径3-4cm，厚度0. 5-lcm放入菌棒袋口，用手捏紧菌棒袋口，将栽培种 往菌棒袋中按结实，然后套上套环及套环盖封口，逐个接种。
[0040] (4)、接种后的菌棒放入培养室内避光培养，温度控制在20-30°C，湿度控制在 40-50%，培养 60-90 天。
[0041] e、出芝管理：
[0042] (1)、当接种了桑黄的菌棒开始转色变成黄色或者棕黄色时，移入大棚栽培，进行 散射光培养。在移入前对大棚内放置菌棒处进行松土，松土深度IOcm以上，松土后用石灰 水进行消毒。在摆放时，应把菌棒直立摆放，菌棒的封口朝上放置，间距在IOcmX 10cm。大 棚温度控制在15-32 °C，湿度控制在80-90%。
[0043] (2)、培养10天左右，待菌棒完全转色成黄色或者棕黄色之后，将菌棒逐个进行封 口切除工作，然后原样直立放回土上。即切除封口之后切除封口的部位朝上，见图5。
[0044] (3)、继续培养4天后，待菌棒切口处的菌丝重新长满菌棒袋口，进行菌棒开口工 作。首先，将菌棒切口朝下，每个菌棒开口 4个，将菌棒的柱面分成四边，在相对的两边各开 1个口，开口距地面6厘米，见图5。另外相对两边在距地面12厘米处开口，使4个开口呈 品字型交错。开口要求：对菌棒外塑料袋向上开弧形口，使子实体长成后成形美观。然后， 将菌棒直立，菌棒切口处埋入土中，埋入深度3-4厘米。
[0045] (4)、大棚必须每天通风2-3次，每次30-40分钟。培养60天以上得到桑黄子实体。
[0046] 根据本发明方法得到的桑黄子实体出现在桑黄培养口处，收货时横切面呈弧形 口，成型美观。单个子实体的重量较大。长6-12厘米，厚3-6厘米，单个子实体重15克-50 克。
[0047] 桑黄子实体的栽培结果：鲜品子实体颜色金黄色，干品子实体颜色棕黄色，子实体 无柄，形状呈扇形，少许呈马蹄形，每袋可产桑黄子实体干品15_30g。
[0048] 采收时，随机取3个子实体进行测量：
[0049] 子实体鲜品长为12cm，宽6cm，厚3cm，重量为30g。
[0050] 子实体鲜品长为9cm，宽5cm，厚2. 6cm，重量为24g。
[0051] 子实体鲜品长为6cm，宽3. 5cm，厚2cm，重量为15g。
[0052] 实施例2 :
[0053] 具体方法同实施例2,不同之处在于，采用的原种培养基和栽培种培养基的各原料 组分的重量百分比为：麦皮12%，玉米粉12%，石骨粉1%，余量为桑枝木屑。
[0054] 本发明的人工袋栽工艺经大量的培养实践证明，可实现真正桑黄的人工培养，并 且单个子实体大小可以根据开口大小人为控制，桑黄人工袋栽，把野生稀缺资源、再生漫长 的资源，人工短期再生。而且人工袋栽子实体成分含量跟野生桑黄成分含量相当。目前的 培养规模约为35亩、25万袋，长成桑黄成扇形、马蹄形，子实层（子实体腹面）具有孔状结 构、表面呈金黄色或棕黄色，老时变为黄棕色。菌肉黄色、棕色或具光泽的木色，在菌盖表面 附近颜色较深。子实层为有光泽的木色至深棕色，常分为两层或多层。
[0055] 不同来源的桑黄有效成分分析
[0056] 以下实验采用的是本发明栽培得到的桑黄子实体（简称为桑都1号），其他品种的 桑黄均购自市场，其中，金寨桑黄购自安徽省金寨县绍新食药用菌研究所，桑都2-4号为本 发明人从千岛湖桑树上采集。
[0057] -、水分分析
[0058] 样品预处理测定用的供试品，一般先破碎过80目筛。
[0059] 水分测定法取供试品2?5g，平铺于干燥至恒重的扁形称量瓶中，厚度不超过 5mm ;疏松供试品不超过IOmm ;精密称定，打开瓶盖在100?105°C干燥5小时，将瓶盖盖好， 移置干燥器中，冷却30分钟，精密称定，再在上述温度干燥1小时，冷却，称重，至连续两次 称重的差异不超过5mg为止。根据减失的重量，计算供试品中含水量（％)。结果如表1所 /Jn 〇
[0060] 表1五种不同来源桑黄中水分含量表
[0061]
[0062]
【权利要求】
1. 一株桑黄菌株桑都1号，该菌株于2014年3月07日在中国普通微生物菌种保藏管 理中心保藏，编号为CGMCC No. 8854。
2. -种权利要求1所述的桑黄菌株的培养方法，该方法包括如下步骤： (1) 将权利要求1所述的桑黄菌株作为桑黄母种接种到原种培养基上培养获得桑黄原 种；将桑黄原种接种到栽培种培养基上培养获得桑黄栽培种；原种培养基和栽培种培养基 主要是由桑枝木屑、麦皮、玉米粉和石膏粉混合而成； (2) 将桑黄栽培种接种到菌棒中进行出芝培养； 菌棒的制备：菌棒的组成同原种培养基，将桑枝木屑进行全面喷水预湿，湿度控制在 60%-70%，充分预湿后加入麦皮、玉米粉和石膏粉进行拌料，混合均匀后装塑料袋，袋体直径 为15-17cm，长度< 35cm，得到用于培养桑黄的菌棒；菌棒经灭菌后采用桑黄栽培种进行接 种；接种后的菌棒放入培养室内避光培养，温度控制在20_30°C，湿度控制在40-50%，培养2 个月以上； (3) 出芝管理： 当桑黄菌棒开始转色变成黄色或者棕黄色时，移入大棚栽培，进行散射光培养，大棚温 度控制在15-32°C，湿度控制在80-90% ;培养10天以上，待菌棒完全转色成黄色或者棕黄色 之后，将菌棒逐个进行封口切除工作，然后照原样直立放回土内； 继续培养待菌棒封口切口处的菌丝重新长满菌棒袋口，进行菌棒开口工作；首先，将菌 棒封口朝下放置，每个菌棒外壁面开口 3-4个，然后埋入土中，埋入深度3-4厘米；大棚每天 通风2-3次，每次30-40分钟；培养60-90天后得到桑黄子实体。
3. -种权利要求1所述的桑黄菌株在制备保健食品中的应用。
【文档编号】A23L1/29GK104285669SQ201410477690
【公开日】2015年1月21日 申请日期:2014年9月18日 优先权日:2014年9月18日
【发明者】王建功, 蔡为明, 金群力, 鲁浙安, 余建妹, 潘飞云, 王建立, 方锦棋, 童云山, 宋德富 申请人:淳安千岛湖桑都食用菌专业合作社