一种富含纤维素酶酒曲的制备技术的制作方法
【专利摘要】本发明属于废弃资源再生利用的【技术领域】，提供了一种以酒糟为原料接种里氏木霉进行制曲获得富含纤维素酶酒曲的制备技术。该酒曲可以对酒糟中纤维素进行水解，获得还原糖，提高酿酒原料利用率。
【专利说明】一种富含纤维素酶酒曲的制备技术
【技术领域】
[0001]本发明属于废弃资源再生利用的【技术领域】，特别设计固态发酵酿酒工业的废弃物酒糟资源化再生利用工艺，具体设计利用酒糟为原料接种里氏木霉制备富含纤维素酶的酒曲。
【背景技术】
[0002]白酒是我国传统的蒸馏酒，是世界六大蒸馏酒之一。酒糟是白酒生产的大宗副产物，通常每生产I吨白酒可产3吨酒糟，据不完全统计，2013年，全国白酒总产量达到1226万千升，折算酒糟量将几千万吨之多。我国白酒酒糟营养丰富、酸度高、易腐败，酒糟中富含蛋白质、淀粉、各种氨基酸、有机酸、微量元素等，其中纤维素的含量约为酒糟干重的50%以上。由此可见，酒糟有可预见的附加值，如果不及时加以处理，就会腐败变质。目前，除五粮液和茅台企业有部分酒糟被进一步循环利用外，其他大部分没有很好地利用，尤其部分具有发酵能力的中小企业，大量酒糟没有被进一步合理利用。因此，酒糟的综合开发利用技术也已成为酿酒工业亟待解决的问题。
[0003]白酒糟研究主要在国内，已有大量的研究报道。如生产蛋白饲料、培养食用菌、生产肥料、生产燃料乙醇及功能成分提取等方面，实际应用中以生产饲料为主。对于酒糟制曲研究多以酒糟为辅料，添加曲霉制曲。
[0004]酒糟中纤维素残留高达50% (干基)以上，有效利用酒糟中残留的纤维素，获得还原糖等可利用成分，不仅可提高原料的利用率，并且对酒糟做饲料的适口性有较大改善。酒糟中纤维素降解菌株的研究报道较少，所报道的菌株主要是真菌，如白腐真菌、绿色木霉、黑曲霉等，均对白酒糟中的残留纤维素表现出一定的降解效果，目前尚未见里氏木霉用于酒糟制曲的应用。上述研究中，通过调整培养基的PH值来提供霉菌及酵母菌的适宜生长产酶条件，达到利用纤维素的目的，这对于工厂中实际利用酒糟造成不便。
[0005]本发明的目的是为了更合理地最大资源化利用酒糟，变废为宝，提高酒糟的附加值，提供一种酒糟制曲的工艺。即以酒糟为主要原料，接种里氏木霉进行制曲，获得纤维素酶，对酒糟中残留的纤维素进行利用，获得还原糖，提高原料的利用率。
【发明内容】
[0006]针对现有技术存在的问题，本发明提供了一种以酒糟为主要原料，控制培养基内初始水分含量、培养温度、培养时间、酒糟与麸皮的比例、菌种添加量、酒糟处理温度等，获得高产纤维素酶酒曲的方法。对获得的纤维素酶进行测定，羧甲基纤维素酶活力(CMCA)和滤纸酶活力(FPA)均达到较高的值，对酒糟中纤维素的酶解达到20%以上。
[0007]为实现上述目的，本发明为一种产纤维素酶酒曲的方法。本发明的具体方案如下:
一级囷种:里氏木霉囷种。
[0008]二级菌种:采用马铃薯-葡萄糖琼脂(PDA)培养基，灭菌后于无菌条件下接入里氏木霉菌种一级菌种，28 ± I °C培养5天。
[0009]三级菌种:固体培养原料配比:酒糟:麸皮=8: 2，培养基含水量60%，121°C灭菌15min，原料灭菌后，冷至室温，按原料量接入5%。的二级菌种，混匀，入曲盒，30 土 1°C条件下培养7天后大量孢子生成，用于酒曲的制备。
[0010]本发明所述酒曲的制备方法是将里氏木霉三级菌种以占发酵培养基质量的1-3 %接种于发酵培养基中，在温度28-35°C、40-60% RH条件下培养4_6 d，然后干燥至发酵培养基含水量为5-12%，所得发酵培养基和菌株的混合物即为酒曲。
[0011]作为优选，所述接种菌体量为占发酵培养基质量的2.5%，所述培养温度为30°C，所述培养相对湿度为60%,所述培养时间为5 d,所述干燥后的发酵培养基含水量为8%。
[0012]由以上技术方案可知，本发明用里氏木霉发酵酒糟制备富含纤维素酶的酒曲，酒曲CMCA酶活与FPA酶活分别达到了 50-75U和35-50U，该酒曲更适用于高酸性酒糟的发酵。
[0013]现有研究及专利以粮食或麸皮为原料进行制曲，然后用于白酒的酿造；制曲所用菌种以曲霉为主，或者是曲霉与各种酶制剂复合制曲，以获得比较丰富的酶系，水解酿酒原料中的淀粉，得到可利用的糖类。本发明涉及的酒曲采用的原料为酒糟辅以麸皮，制曲用菌种为里氏木霉，可有效发酵酒糟中富含的纤维素，一方面可将酒糟中纤维素转化为可利用糖，提高原料的利用率；另一方面，通过纤维素的降解，可释放出包裹的淀粉，提高淀粉的利用效果，并且该酒曲更适用于高酸性酒糟的发酵。
[0014]具体实施方法:
实施案例1:
一级囷种:里氏木霉囷种。
[0015]二级菌种:采用PDA培养基，灭菌后于无菌条件下接入里氏木霉菌种一级菌种，28±1°C培养5天。
[0016]三级菌种:固体培养基原料配比:酒糟:麸皮=8: 2，培养基含水量60%，121°C灭菌15min，原料灭菌后，冷至室温，按原料量接入5%。的二级菌种，混匀，入曲盒，30 土 1°C条件下培养7天后大量孢子生成，用于酒曲的制备。
[0017]酒曲原料组成为酒糟和麸皮，其中，酒糟与麸皮比例为8:2，含水量75%，拌匀，105°C灭菌15min，冷却至室温后接种，拌匀，于30°C、40_60% RH下培养8 d，曲料中CMCA和FPA酶活力分别达到50-75U和35-50U。
[0018]实施案例2:
一级囷种里氏木霉囷种；
二级菌种采用PDA培养基，灭菌后于无菌条件下接入里氏木霉菌种一级菌种，28±1°C培养5天；
三级菌种:固体培养基原料配比:酒糟:麸皮=8: 2，培养基含水量60%，121°C灭菌15min,原料灭菌后，冷至室温，按原料量接入5%。的二级菌种，混匀，入曲盒，30± 1°C温度条件下培养7天后大量孢子生成，用于酒曲的制备。
[0019]酒曲原料组成为酒糟和麸皮，将酒糟与麸皮按:酒糟:麸皮=6:4，含水量75%，拌匀，105°C灭菌15min，冷却至室温后接种，接种量为发酵培养基质量的2%，拌匀，于30°C、40-60 % RH下培养5 d，然后干燥至发酵培养基含水量为5-12 %，所得发酵产物即为富含纤维素酶酒曲，曲料中CMCA和FPA酶活力分别为50-75U和35-50U。
[0020]实施案例3:
一级囷种:里氏木霉囷种。
[0021]二级菌种:采用PDA培养基，灭菌后于无菌条件下接入里氏木霉菌种一级菌种，28±1°C培养5天。
[0022]三级菌种:固体培养基原料配比:酒糟:麸皮=8: 2，培养基含水量60%，121°C灭菌15min，原料灭菌后冷至室温，按原料量接入5%。的二级菌种，混匀，入曲盒，30 土 1°C条件下培养7天后大量孢子生成，用于酒曲的制备。
[0023]酒曲原料组成为酒糟和麸皮，将酒糟与麸皮按8:2，含水量为调整为40-80%，拌匀，105°C灭菌15min，冷却后接种，接种量为发酵培养基质量的2%，拌匀，于30°C、40_60%RH下培养5d，然后干燥至发酵培养基含水量为5-12%，所得发酵产物即为富含纤维素酶酒曲，测定曲料中CMCA和FPA酶活分别为50-75U和35-50U。
【权利要求】
1.一种酒糟酒曲的制备方法，其特征在于，将里氏木霉菌菌种以占发酵培养基质量的1-3%接种于发酵培养基中，在28-35°C、40-60%相对湿度下培养4-6 d，然后干燥至发酵培养基含水量为5-12%，所得发酵培养基和菌株的混合物即为酒曲； 其中，所述发酵培养基为含水量为65-75%的酒糟、麸皮。
2.根据权利要求1所述制备方法，其特征在于，所述菌株里氏木霉为三级制备菌种，占发酵培养基质量的2%。
3.根据权利要求1所述制备方法，其特征在于，所述培养温度为28-35°C。
4.根据权利要求1所述制备方法，其特征在于，所述培养相对湿度为40-60%。
5.根据权利要求1所述制备方法，其特征在于，所述培养时间为4-6d。
6.根据权利要求1所述制备方法，其特征在于，所述干燥后的发酵培养基含水量为5-12%。
【文档编号】C12R1/885GK104232419SQ201410526925
【公开日】2014年12月24日 申请日期:2014年10月9日 优先权日:2014年10月9日
【发明者】纪凤娣, 赵爽, 宋昊, 杨林, 赵章林, 郑玉芝, 艾金忠 申请人:北京一轻研究院, 北京红星股份有限公司