本发明属于水生实验动物饲料领域，特别涉及一种诸氏鲻虾虎鱼配合生长饲料及其制备方法。
背景技术：
诸氏鲻虾虎鱼(Mugilogobius chulae)，即朱拉氏鲻虾虎，属于鲈形目(Perciformes)、虾虎鱼亚目(Gobioide)、虾虎鱼科(Gobiidae)、鲻虾虎鱼属(Mugilogobius)；该鱼个体小，繁殖周期短，繁殖力强，是一种暖水性底层小型海水鱼类，广泛分布于香港、菲律宾、日本、泰国及西太平洋海域（伍汉霖等，2008）。已开展的遗传学、环境毒理学、分子发育生物学等一系列实验，结果表明其具备良好的鱼类实验动物开发潜力（李建军等，2012；李建军等，2013；蔡磊等，2015）。诸氏鲻虾虎鱼的生物饵料替代实验表明配合饲料部分替代卤虫无节幼体也能获得较好的生长效果（王颖等，2012），这为其配合饲料的开发提供了可能。
由于市场需求量和生产成本限制，国内市场的鱼饲料绝大多数针对某一特定的大型经济鱼类（如草鱼、罗非鱼等），极少有针对某一特定小型鱼类。绝大多数小型观赏鱼的饲料暂无专门的国标或行业标准，因此饲料较混乱：存在成份误差，且普遍有色素等添加剂，无法适应水生实验动物的需要。目前针对鱼类实验动物的配合饲料，仅国外适用于各个时期的斑马鱼商品化配合饲料；但国内暂无专门的配合饲料，此外也没有专门针对虾虎鱼的配合鱼饲料。
本实验室前期利用7种市售的商品化饲料对诸氏鲻虾虎鱼进行了饲喂实验（魏远征等，2016），结果发现大多数商品化饲料无法满足诸氏鲻虾虎鱼生长的营养需求，且粒径过大，无法直接投喂。同时个别观赏鱼饲料有饲料添加剂，且存在长期饲喂导致脂肪肝的情况。因此急需开发一种原料来源可控、适当考虑饲料成本，能满足诸氏鲻虾虎鱼生长需求且适合其口径的生长饲料。
鱼类由于其生活环境的特殊性，其代谢特点以及蛋白质、脂肪、糖类（碳水化合物）的需求与陆生动物存在显著差异。蛋白质是水生动物主要的能量来源，为鱼类提供能量，转化为脂肪和糖类；蛋白质的燃烧热值为5.654卡/克，生理热价为4.4卡/克左右。食性不同的鱼类对蛋白质的需求存在较大差异：一般肉食性鱼类要求饵料蛋白质含量在40 %以上；杂食性鱼类为30 %～40 %；草食性鱼类最低，在30 %以下（吴遵霖等，1996）。研究发现鱼类对脂肪有较高的消化率，尤其对低熔点脂肪，其消化率一般为90 %以上。其对脂肪需求的差异取决于其体内脂肪酶的种类与活力及其对碳水化合物的利用效率（张伟涛等，2009）。大西洋鲑(Salmo salar)、虹鳟、军曹鱼(Rachycentroncanadum)的研究证实适量提高饲料中脂肪含量可节约蛋白质使用、提高饲料利用率、减少含氮废物的排放，同时，饲料中缺乏脂肪还会引起鱼体代谢紊乱缺乏必需脂肪酸和脂溶性维生素（Bell等，2001；刘兴旺等，2007）。但长期摄入脂肪含量过高的饲料会导致鱼体代谢紊乱降低抗病能力。研究显示集约化养殖的海水鱼脂肪肝的发病率较高（张海涛等，2004），当饲料中脂肪含量高于14 %时大西洋鳕肝体比和肝脏中的脂肪含量会显著升高（Nanton等，2001）。鱼类对碳水化合物需求量不高，可能与其消化利用率低有关（赵永志等，2009；蔡春芳等，2004）。淡水鱼饲料中适宜的纤维素含量为：草食性鱼为12 % - 20 %，杂食性鱼为8 % - 12 %，肉食性鱼为2 % - 8 %。海水鱼类对糖的利用能力更低。仅一些草食性鱼类（仅占海水养殖鱼类的很小比例），如遮目鱼、鲻鱼，可利用一定量的淀粉和纤维素外，大部分海水鱼类由于缺乏对糖的处理能力，且一般不能进行正常的血糖调节。有研究指出，暖水性鱼类配合饵料中碳水化合物（单糖、双糖及淀粉和纤维素）含量不宜超过30%，冷水性鱼类不宜超过20%，个别鱼类，如鲑鳟鱼等的饵料中，碳水化合物的含量则应控制在10%以下（蔡春芳等，2006）。与其它动物一样，鱼类饲料除维持鱼体基础代谢外需要更多的能量用于生长，研究表明鱼类能量维持需要低，例如虹鳟和鲤维持能量的分别为摄入总代谢能的17～24%，14%～17%（Peffers，1977），低于哺乳动物的30%～50%，甚至50%以上（Kirchgessner et al., 1984）。同时鱼类摄入代谢能有76%～86%用于生长，而哺乳动物仅有50%～70%用于生长（Peffer，1977；Kirchgessner et al., 1984）。
实验动物是“活的精密仪器”，其区别于其他动物最显著的特征是实验动物实施标准化的质量控制（孙德明等，2012），其中实验用鱼饲料营养的质量是实验动物质量标准体系的重要组成部分，其标准的制定关系到实验动物研究的科学性和准确性。由于生物饵料营养成份存在差异，且存在携带病原等不可控因素，因此从质量可控的角度考虑，优质适宜的配合饲料饲喂实验动物更有优势。目前实验用鱼对蛋白质、脂肪、碳水化合物、维生素等的营养需求及饲料方面的研究十分有限。国内外关于虾虎鱼营养需求的研究数据，不足以支持诸氏鲻虾虎鱼专用配合饲料的开发。因此，开发出一种符合实验动物饲料标准，有利于诸氏鲻虾虎鱼生长发育的配合饲料，对实验室条件下的实验动物质量控制具有重要意义。
技术实现要素：
本发明的目的在于提供一种用于水生实验动物诸氏鲻虾虎鱼幼鱼阶段（35-80日龄）和过渡阶段（80-120日龄）的配合饲料，保证其符合实验动物无饲料添加剂等要求；同时保证诸氏鲻虾虎鱼在实验室条件下较高的成活率、特定生长率、饲料利用率。
本发明所采取的技术方案是：
一种诸氏鲻虾虎鱼生长配合饲料，包括下列重量份数的组分：白鱼粉35-75份，豆粕5-20份，鱼油0-5份，大豆油0-8份，土豆淀粉0-35份，氯化胆碱0.2-1份，羧甲基纤维素1-3份，微晶纤维素1-8份。
优选的，所述的生长配合饲料包括下列重量份数的组分：白鱼粉45-75份，豆粕10-15份，鱼油0-5份，大豆油0-5份，土豆淀粉0-25份，氯化胆碱0.2-1份，羧甲基纤维素2-3份，微晶纤维素1-6份。
优选的，所述的生长配合饲料包括下列重量份数的组分：白鱼粉55-65份，豆粕12-15份，鱼油1-1.5份，大豆油0-5份，土豆淀粉6-22份，氯化胆碱0.2-0.6份，羧甲基纤维素2-3份，微晶纤维素2-5份。
优选的，所述的生长配合饲料包括下列重量份数的组分：白鱼粉65份，豆粕15份，鱼油1份，大豆油5份，土豆淀粉6份，羧甲基纤维素2份，微晶纤维素3.8份。
优选的，按照最后配制成的 1kg 的诸氏鲻虾虎鱼生长配合饲料计，还包括矿物盐预混料，其组分为：氯化钠450-550mg； 硫酸镁7000-8000mg； 磷酸二氢钠12000-13000mg；磷酸二氢钾 15000-17000mg； 磷酸二氢钙 9000-11000mg； 硫酸铁 1200-1300mg； 乳酸钙1700-1800mg；硫酸锌170-180mg； 硫酸锰75-85mg；硫酸铜15-16mg；硫酸钴0.4-0.6mg；碘化钾1.4-1.6mg。
优选的，按照最后配制成的 1kg 的诸氏鲻虾虎鱼生长配合饲料计，还包括矿物盐预混料，其组分为：氯化钠500mg； 硫酸镁 7500mg； 磷酸二氢钠 12500mg；磷酸二氢钾 16000mg； 磷酸二氢钙 10000mg； 硫酸铁 1250mg； 乳酸钙 1750mg；硫酸锌 176.5mg； 硫酸锰 81mg；硫酸铜 15.5mg；硫酸钴 0.5mg；碘化钾 1.5mg。
优选的，按照最后配制成的 1kg 的诸氏鲻虾虎鱼生长配合饲料计，还包括维生素预混料，其组分为：维生素A 1.8-1.9mg； 维生素D 0.4-0.6mg；维生素E 8-12mg；维生素K 8-12mg；烟酸90-110mg；核黄素18-22mg；吡哆醇 18-22mg；硫胺18-22mg；泛酸钙 45-55mg；生物素0.08-0.12mg； 叶酸 4.5-5.5mg；维生素 B12 18-22mg；抗坏血酸 90-110mg； 肌醇 90-110mg。
优选的，按照最后配制成的 1kg 的诸氏鲻虾虎鱼生长配合饲料计，还包括维生素预混料，其组分为：维生素A 1.83mg； 维生素D 0.5mg；维生素E 10mg；维生素K 10mg；烟酸 100mg；核黄素20mg；吡哆醇 20mg；硫胺20mg；泛酸钙 50mg；生物素 0.1mg； 叶酸 5mg；维生素 B12 20mg；抗坏血酸 100mg； 肌醇 100mg。
优选的，维生素预混料还添加有枯草芽孢杆菌活性成份。
本发明配方中所用组分具体分析如下：
白鱼粉是指用鳕鱼（Pollock、Cod、Hake、Hokki）、蝶鱼等白肉鱼种的全鱼或下脚料加工制成含脂低之鱼粉。其中，美国海鲜白鱼粉是指美国工船在阿拉斯加海区、白令海和鄂霍茨克海加工的白鱼粉。它的品质具有以下特点：
1）色淡、蓬松、鱼肉多、粘弹性好、易与各种α淀粉及其它鱼粉搭配；
2）粗蛋白高，均在60%以上，高的可达72%。氨基酸含量平衡，胃蛋白酶消化率均在90%以上，易消化吸收，营养价值高；
3）新鲜度好易保存：挥发性盐基氮低于40ml/100g；组胺低于50ppm，酸价低于1KOHml/g鱼粉。
美国海鲜白鱼粉具有以上优良品质，因此它是中高档水产饲料必不可少的原料，且在配制同等蛋白水平的水产饲料时使用美国海洋白鱼粉可适当降低白鱼粉用量而达到降低配方成本的目的。
本发明优选美国海鲜白鱼粉。
鱼油有强烈的鱼腥味，具有较强的诱食性，其所含的磷脂是鱼类脑、神经组织、骨髓、心、肝、卵和脾中不可缺少的组成部分，所含亚油酸影响到肝脏中脂肪水平及组成。同时鱼油提供鱼类必需的ω-3长链多聚不饱和脂酸外，还作为脂溶性维生素A、D和类胡萝卜素等的载体促进维生素以脂溶性的物质吸收利用。
发明人研究发现只要鱼油保证充足且不过量即可。优选为本发明配方的添加量。
鱼油的添加，一方面可以提供优质的脂类物质，均衡营养，另一方面可以提高蛋白利用率。
大豆油为食品级压榨油，富含大豆磷脂，可有效促进鱼油的吸收利用：鱼油在调节血脂时的代谢产物要经过肝脏代谢，会加重肝脏负担；卵磷脂与鱼油配合使用，不但对调脂有协助作用，而且大豆磷脂能增强肝的排泄功能，从而保护肝脏不受损害。
矿物盐预混料为鱼类专用矿物盐预混料，能促进鱼体消化吸收，且不产生抗药性。其中，某些微量元素是蛋白质代谢酶系的辅助因子，缺乏这些元素将影响蛋白质代谢：硫、磷、铁等元素作为蛋白质的组成成分，直接参与蛋白质代谢；锌参与细胞分裂以及蛋白质的合成过程，给动物补锌有助于促进蛋白质的合成。
维生素预混料为添加枯草芽孢杆菌活性成份的复合维生素，可有效提高饲料消化率，同时提高非特异性免疫。具体的，B族维生素，主要是维生素B1和B2作为辅酶可促进鱼体的脂代谢；B族维生素可促进对胆碱的吸收；维生素D及其激素代谢物作用于肠粘膜细胞，形成钙结合蛋白，可促进钙、镁、磷的吸收。
氯化胆碱为添加B族维生素的食品级氯化胆碱，其中B族维生素可促进胆碱的吸收，氯化胆碱可有效控制胆固醇的积蓄，促进肝脏机能，帮助鱼体排素，防止虾虎鱼肝脏出现大量脂质（主要为甘油三酯）积累。
羧甲基纤维素和微晶纤维素均为食品级。本发明中，适量微晶纤维素可以促进鱼体肠胃蠕动，有利于消化，进而促进其生长，但是过高微晶纤维素反而不利于消化，抑制生长。羧甲基纤维素可增强配合饲料原料的粘黏，有效促进饲料成型。最佳添加量如专利配方所述。
一种诸氏鲻虾虎鱼生长配合饲料的制备方法，包括下列步骤：
1)按照上述配比称取各组分；
2)将白鱼粉、豆粕粉碎过 70-90目筛；
3)将矿物盐预混料、维生素预混料粉碎过 90-110 目筛；
4)将鱼油、大豆油以外的组分混合均匀，再加入鱼油、大豆油混合均匀；
5)制粒，粒径控制在0.7-0.9 mm，制粒温度为75℃- 85℃，使其糊化度达到 90% 以上；
6)将制粒后得到的湿颗粒饲料烘干，制备得到诸氏鲻虾虎鱼饲料。
优选的，制备得到的诸氏鲻虾虎鱼饲料用于80-120日龄诸氏鲻虾虎鱼的投喂。
优选的，制备得到的诸氏鲻虾虎鱼饲料，还需要粉碎后过40-60目筛，用于35-80日龄诸氏鲻虾虎鱼的投喂。
本发明的有益效果是：
（1）与投喂生物饵料相比，使用本发明的诸氏鲻虾虎鱼配合饲料投喂方便，便于存放，不必单独培养卤虫等生物饵料；
（2）本发明的配合饲料原料的混合和制作过程均在实验室内无菌或无特定病原菌条件下完成，不会携带大量的细菌和真菌，特别是致病菌，从而降低了诸氏鲻虾虎鱼的发病率，能最大程度保证实验动物的饲养要求；
（3）相比于现有的市售小型鱼配合饲料，本发明的诸氏鲻虾虎鱼配合饲料原料来源可控，成份清楚，便于标准化质量控制；
（4）本发明的配合饲料与现有的商品化饲料和其它配方相比，避免了色素等饲料添加剂，以及茵陈、金钱草、紫苏等药用植物成份的出现，最大程度避免饲料对水生实验动物的影响，保证了实验动物的要求（因为药用植物一般含有植物碱等增加免疫作用的成份；实验动物需要保持物种原有的属性：比如虾虎鱼对石油污染物敏感等；一些动物模型可能本身有免疫缺陷；如果食物中添加增强免疫作用的成份，可能会增强实验动物的免疫作用，造成对污染物的敏感性降低或者抗药性）；
（5）本发明与常见的维生素预混料相比，维生素预混料为添加枯草芽孢杆菌活性成份的复合维生素，可有效提高饲料消化率；
（6）相比于现有的配合饲料，本发明饲料利用率高 (即饵料系数低)、特定生长率显著提高，且生长健康；
（7）与市售的优质观赏鱼饲料相比，本发明的配合饲料制作简单，实验室条件下就可方便小批量生产，可为实验室节约饲料成本50%以上，有效推动诸氏鲻虾虎鱼的规模化培育；
（8）针对不同发育阶段诸氏鲻虾虎鱼的口径，制备的诸氏鲻虾虎鱼配合饲料分粉状饲料（≤0.3mm）和0.8mm颗粒饲料，可分别用于幼鱼阶段（35-80日龄）和过渡阶段（80-120日龄）诸氏鲻虾虎鱼的投喂；
（9）粉状诸氏鲻虾虎鱼饲料还可以加水揉搓成团状，35-80日龄虾虎鱼更喜摄食，且饲料利用率更高。
具体实施方式
本发明所用的美国海鲜白鱼粉为Ensor品牌，为美国工船在阿拉斯加海区、白令海和鄂霍茨克海加工的优质鳕鱼粉，其含脂低，粗蛋白62%-64%。其气味极淡，色淡、蓬松、鱼肉多、粘弹性好、易与各种α淀粉以及其它鱼粉搭配；氨基酸含量平衡，胃蛋白酶消化率均在90%以上，易消化吸收，营养价值高；挥发性盐基氮低于50ml/100g；组胺低于50ppm，酸价低于1KOHml/g。
鱼油为挪威品牌peter moller's，为冷水鱼类鳕鱼鱼油，每5毫升的含量如下：Omega-3多元不饱和脂肪酸1.2g；DHA 0.6g；EPA 0.4g；维生素A 250ug (830国际标准单位）；维生素D 10ug（400国际标准单位）；维生素E 10mg（14国际标准单位）。所用鱼油：1）与白鱼粉来源相同（都为鳕鱼），能更好的保证各种营养成份的均衡；2）保证鱼类必需的ω-3长链多聚不饱和脂酸；3)高含量的脂溶性维生素A、D、E能更好的促进鱼类的发育与代谢。
大豆油为食品级压榨油，富含大豆磷脂，可有效促进鱼油的吸收利用：鱼油在调节血脂时的代谢产物要经过肝脏代谢，会加重肝脏负担；卵磷脂与鱼油配合使用，不但对调脂有协助作用，而且大豆磷脂能增强肝的排泄功能，从而保护肝脏不受损害。
矿物盐预混料为自配的的化合物，能促进鱼体消化吸收，且不产生抗药性，具体成份(mg/kg 饲料)如下：氯化钠500； 硫酸镁 7500； 磷酸二氢钠12500；磷酸二氢钾 16000； 磷酸二氢钙 10000； 硫酸铁 1250； 乳酸钙 1750；硫酸锌176.5； 硫酸锰81；硫酸铜15.5；硫酸钴 0.5；碘化钾1.5 。
维生素预混料为自配的添加枯草芽孢杆菌活性成份的复合维生素，可有效提高饲料消化率，同时提高非特异性免疫，具体成份(mg/kg 饲料)如下：维生素A 1.83； 维生素D 0.5；维生素E 10；维生素K 10；烟酸 100；核黄素 20；吡哆醇 20；硫胺 20；泛酸钙 50；生物素 0.1； 叶酸 5；维生素 B12 20；抗坏血酸 100；肌醇 100。可以保证充足而均衡的维生素比例；促进鱼体对维生素的吸收。
氯化胆碱为巧手食品添加剂公司生产的添加B族维生素的食品级氯化胆碱，B族维生素可促进鱼体对氯化胆碱的吸收效果，氯化胆碱可有效控制胆固醇的积蓄，促进肝脏机能，帮助鱼体排素，防止虾虎鱼肝脏出现大量脂质（主要为甘油三酯）积累。
羧甲基纤维素和微晶纤维素分别为南京泰利达和湖州市菱湖新望生产的食品级添加剂，可增强配合饲料原料的粘黏，有效促进饲料成型，同时提高肠道蠕动，促进鱼体消化。
下面结合具体实施例对本发明作进一步的说明，但并不局限于此。
本发明的配合饲料原料的混合和制作过程均在无菌或无特定病原菌条件下完成。
实施例1
一种用于诸氏鲻虾虎鱼生长的配合饲料，包括下列组分：白鱼粉55g，豆粕15g，鱼油1.5g，大豆油0g，土豆淀粉22g，矿物盐预混料1g，维生素预混料1g，氯化胆碱0.2g，羧甲基纤维素2g，微晶纤维素2.3g。
其制备方法包括下列步骤：
(1)分别将白鱼粉、豆粕用粉碎机粉碎后过 80 目筛；
(2)分别将矿物盐预混料、维生素预混原料粉碎机粉碎后过 100 目筛；
(3)按照上述配比称取白鱼粉、豆粕、土豆淀粉、矿物盐预混料、维生素预混料、羧甲基纤维素、微晶纤维素、氯化胆碱；放入容器中搅拌均匀，再倒入鱼油、大豆油并混合均匀；
(4)将步骤(3)所得混合原料使用小型制粒机进行制粒，粒径为0.8 mm，制粒温度为 85℃，使其糊化度达到 90% 以上；
(5)将步骤(4)制粒后得到的湿颗粒饲料置于烘箱中70℃烘干（制备的饲料粒径本身0.8mm），使用密封袋分装后置于4 ℃冰箱中保存备用，可用于饲喂过渡阶段（80-120日龄）的诸氏鲻虾虎鱼。
或将烘干后的饲料利用粉碎机粉碎后过50目过筛，密封袋分装后于4℃冰箱保存备用，可用于饲喂幼鱼阶段（35-80日龄）的诸氏鲻虾虎鱼，粉碎后的饲料呈粉末状，可直接投喂或加水揉成团装投喂。
实施例2
一种用于诸氏鲻虾虎鱼生长的配合饲料，包括下列组分：白鱼粉65g，豆粕15g，鱼油1g，大豆油0g，土豆淀粉12g，矿物盐预混料1g，维生素预混料1g，氯化胆碱0.2g，羧甲基纤维素2g，微晶纤维素2.8g。
其制备方法同实施例1。
实施例3
一种用于诸氏鲻虾虎鱼生长的配合饲料，包括下列组分：白鱼粉65g，豆粕15g，鱼油1g，大豆油5g，土豆淀粉6g，矿物盐预混料1g，维生素预混料1g，氯化胆碱0.2g，羧甲基纤维素2g，微晶纤维素3.8g。
其制备方法同实施例1。
配合饲料成份测定实验
将市售配合饲料1和市售配合饲料2 (即本实验前期7种配合饲料对比实验中效果较好的国内某品牌小型鱼专用粮P35L8和日本某品牌海水鱼专用粮P50L8)，以及上述实施例1-实施例3配合饲料的成品分别机械碾磨后混匀，取样称重150g进行检测。饲料样品中粗蛋白、粗脂肪、水分和灰分的测定方法参照国标方法(GB 5009.3-2010、GB 5009.4-2010、GB 5009.5-2010和GB 5009.6-2003)进行。结果见表1。
表1 配合饲料成分测定结果
由表1可知：本发明的饲料粗蛋白含量适中，实施例的粗脂肪含量与市售鱼粮的粗脂肪含量相比，均相差不超过3%。水份含量均符合经济鱼类饲料要求7%左右，可较长时间保存。同时有效降低了饲料粗纤维的含量，更适用与早期虾虎鱼的生长。亚油酸含量可充分满足虾虎鱼生长的需求。饲料粒径可控，粉碎后的粉状饲料直径＜0.3mm，可更好的保证35-80日龄虾虎鱼的摄食；0.8mm的饲料用于＞80日龄虾虎鱼的饲喂，可减少饲料的溶失。
对比实验
将市售配合饲料1和市售配饲料2 (即本实验室前期7种配合饲料对比实验中效果较好的国内某品牌小型鱼专用粮P35L8和日本某品牌海水鱼专用粮P50L8)、卤虫以及本发明实施例1～实施例3的虾虎鱼配合饲料进行对比实验。
诸氏鲻虾虎鱼为本实验室引种驯化（原种群来自深圳大鹏湾沿岸），分别选用35和90日龄幼鱼进行实验。实验开始前将暂养鱼集中禁食24 h，选择体质健壮、规格均匀的虾虎鱼随机分为8组，每组3个重复，每缸35尾，平均体重(0.010±0.0035) g。在实验条件下集中驯养1周，每天投喂等量的上述实验饲料。饲喂实验在室内加装循环水系统的塑料水族箱( 90 cm×45 cm×15 cm)中进行，水温为24-26℃、盐度22‰-28‰，pH 7.5左右，氨氮≤0.5 mg/L，余氯≤0.05 mg/ L，光照周期为12 L：12 D。
初始和实验结束时，实验数据的测定均为饥饿24h后的体重，实验过程中进行日常饲养管理。
增重率、特定生长率和饲料系数的计算公式如下：增重率(%) =(终体重-初体重)/初体重；特定生长率(%) =(ln终体重 - ln初体重)/投喂天数；饲料系数(%) = 摄食量/(终体重 - 初体重)
结果见表2和表3。
表2. 摄食不同配合饲料对35日龄虾虎鱼生长的影响(平均值±标准误)
注：以市售鱼粮组1为对照进行显著性分析，同一列上不同字母表示差异显著：ab代表差异显著(P < 0.05)，b表示差异极其显著(P < 0.01)。
由表2可见，经过8周实验，本发明的配合饲料与现有的配合饲料相比，35日龄的诸氏鲻虾虎鱼的存活率均有大幅提高，较市售小型鱼饲料，升幅均超过24.8%，接近卤虫水平。实施例1～实施例3的增重率、特定生长率均显著优于市售小型鱼饲料，且达到极显著 (p<0.01)。本发明实施例3配合饲料的增重率和特定生长率均优于投喂卤虫组，但无差异显著 (p>0.05)。此外实施例1～实施例3的饲料系数均优于市售饲料1(p<0.05)。
表3. 摄食不同配合饲料对90日龄虾虎鱼生长的影响(平均值±标准误)
注：以市售鱼粮组1为对照进行显著性分析，同一列上不同字母表示差异显著：ab代表差异显著(P < 0.05)，b表示差异极其显著(P < 0.01)。
由表3可见，经过8周实验，本发明的配合饲料与现有的配合饲料相比，90日龄的诸氏鲻虾虎鱼的存活率均有大幅提高，实施例3的存活率显著优于市售饲料组(p<0.05)，与投喂卤虫无显著差异（p>0.05）。实施例1～实施例3的增重率与市售小型鱼饲料、卤虫均无显著差异(p>0.05)。本发明实施例2和实施例3的配合饲料的特定生长率均显著优于市售鱼饲料（包括市售鱼粮1和2）(p<0.05)。此外实施例1～实施例3的饲料系数均优于市售饲料（包括市售鱼粮1和2）(p<0.05)。
因为鱼类作为水生动物营养需求与哺乳动物存在较大差异，每种鱼（特别是草食和肉食种类）对于饲料蛋白、脂肪的需求均存在较大差异，因此未有统一通用标准；迄今仅有个别鱼的行业标准（如草鱼、罗非鱼等）；每种饲料配方均需考虑蛋白和脂肪的共同影响；不同饲料配方中，饲料蛋白水平和脂肪水平存在交互作用（相互影响），如饲料粗脂肪可部分替代饲料中的粗蛋白，因此单因素实验设计往往不能反映真实的营养需求。
本发明的实施例以及对照的市售配合饲料相比，交互实验结果显示：饲料的脂肪含量5%-10%，饲料蛋白含量41%-45%时，虾虎鱼的生长效果较好；市售饲料1蛋白含量过低，虽然增加了脂肪含量，但是依然达不到要求；市售饲料2蛋白含量过高反而对生长不利。
成本核算：
购买价格如下：
1）国内某品牌小型鱼专用粮P35L8（市售饲料1）价格：471元/kg（131元/500ML，每罐约279g）。
2）日本某品牌海水鱼专用粮P50L8（市售饲料2）价格：590.9元/kg（商品化+关税65元/110g）。
3）实验室常用日本进口饲料日清丸，货源不稳定，价格加上关税：251元/kg。
4) 国内的小型鱼饲料基本上都是小袋装（每袋不超过200g），使用成本很高；国外的有用于小型观赏鱼的大批量（2kg/袋）的商品化饲料，成本基本上在180元/kg左右，加上关税大约为200多元/kg，但经常存在断货的风险。
自配价格：不计算人力成本，加上制粒机器损耗，水电费，约62.38元/kg。
所以得出结论：与市售的优质观赏鱼饲料相比，本发明的配合饲料制作简单，实验室条件下就可方便地小批量生产，可为实验室节约饲料成本50%以上，有效推动诸氏鲻虾虎鱼的规模化培育。
综上所述，与投喂生物饵料相比，使用本发明的诸氏鲻虾虎鱼配合饲料投喂方便，便于存放，不必单独培养卤虫等生物饵料；本发明的配合饲料原料混合和制作过程均在实验室内无菌或无特定病原菌条件下完成，不会携带大量的细菌和真菌，特别是致病菌，从而降低了诸氏鲻虾虎鱼的发病率，能最大程度保证实验动物的饲养要求；相比于现有的市售小型鱼配合饲料，本发明的诸氏鲻虾虎鱼配合饲料原料来源可控，成份清楚，便于标准化质量控制；本发明的配合饲料与现有的商品化饲料和其它配方相比，避免了色素等饲料添加剂，以及茵陈、金钱草、紫苏等药用植物成份的出现，最大程度避免饲料对水生实验动物的影响，保证了实验动物的要求；本发明与常见的维生素预混料相比，维生素预混料为添加枯草芽孢杆菌活性成份的复合维生素，可有效提高饲料消化率；相比于现有的配合饲料，本发明饲料利用率高 (即饵料系数低)、特定生长率显著提高，且生长健康；此外针对不同发育阶段诸氏鲻虾虎鱼的口径，制备的诸氏鲻虾虎鱼配合饲料分粉状饲料（≤0.3mm）和0.8mm颗粒饲料，可分别用于幼鱼阶段（35-80日龄）和过渡阶段（80-120日龄）诸氏鲻虾虎鱼的投喂；与市售的优质观赏鱼饲料相比，本发明的配合饲料制作简单，实验室条件下就可方便地小批量生产，可为实验室节约饲料成本50%以上，有效推动诸氏鲻虾虎鱼的规模化培育；粉状诸氏鲻虾虎鱼饲料还可以加水揉搓成团状，35-70日龄虾虎鱼更喜摄食。
上述实施例为本发明较佳的实施方式，但本发明的实施方式并不受上述实施例的限制，其他的任何未背离本发明的精神实质与原理下所作的改变、修饰、替代、组合、简化，均应为等效的置换方式，都包含在本发明的保护范围之内。