本发明属于饲料组合物
技术领域：
，具体的涉及一种提高抗病力的蛋鸡产蛋期饲料，并涉及该饲料的制备方法。
背景技术：
：目前蛋鸡养殖中，蛋鸡产蛋期从5％产蛋率——72周龄淘汰，产蛋时间长，养殖过程中面临环境应激大、饲料中重金属、霉菌毒素污染等各种问题，造成肠道疾病、呼吸道疾病发生率高；并且鸡的亚健康状态严重，对禽流感、新城疫等疫病抵抗力降低，易感性增加。部分蛋鸡养殖场使用抗生素和抗病毒药物来降低疾病发生，这会导致鸡蛋中药物残留、鸡耐药性增强、蛋鸡慢性中毒等系列问题。现场养鸡成活率只有92％，疾病带来的危害是耗料多，产蛋少，严重影响养殖效益。随着养殖规模化程度提高，育种进程加快，养殖周期需要从72周龄延长到100周龄，甚至是110周龄。养殖时间延长，对蛋鸡体质强健程度要求会更加严格，需要打破传统阶段划分，将整个产蛋期细分为预产期5％产蛋率—28周龄、高峰前期28周龄—59周龄、高峰后期59—80周龄、80—100周龄阶段，每个阶段的营养素需求要与生理需要、产蛋各种指标相匹配。养殖周期延长，强健蛋鸡体质、提高抗病力成为鸡场是否盈利的必要前提。申请号为cn201310431300.0的中国发明《一种提高抗病能力的鸡饲料》，由玉米，小麦，豆饼，发酵苹果渣，蛋壳粉、青菜粉、月见草籽、白萝卜干、红薯干、玉米秸秆、紫苏油、蜂蜜、干辣椒粉、诱食剂等组成。强调干辣椒粉能减少鸡群发病概率，月见草籽和小球藻粉富含俗称“脑黄金”的dha和有“天然血管清道夫”之称的epa,小麦胚芽中也富含维生素e和多种不饱和脂肪酸，达到鸡食用后精神活跃，采食量增加，增重快，获得的产品食用价值极高的效果。该专利所采用的月见草籽、紫苏油、小球藻粉、蜂蜜等属于食品行业新贵，价格极高，并且基本没有货源，很难用于饲料来喂鸡；并且该专利能值极高，如果应用于蛋鸡，将会使蛋鸡大量沉积脂肪，降低产蛋性能，况且该专利中玉米秸秆中含有大量的黄曲霉毒素，会造成繁殖系统损伤。申请号201610331249.x的中国发明《一种提高蛋鸡产蛋性能的饲料添加剂及其制备方法》，为了解决蛋鸡养殖中的抗生素耐药性问题，采用中药组分制备得到饲料添加剂：子苏、虎杖、何首乌、山药、黄芪、大黄、炙甘草、大枣、黑芝麻等原料，以期达到能够提高产蛋率和鸡蛋重量、显著改善黄河口乌鸡的采食量和料蛋比的作用，且无任何的副作用或耐药性产生。但是该发明的添加剂作用有限，使用量大，基本没有推广应用价值，不能用于10万只以上蛋鸡规模化养殖。公开号:105614127a的中国发明《一种无抗生素的鸡饲料》公开的鸡饲料，按照重量单位组成，包括基本饲料和饲料添加剂混合物：陈皮、白芷、蒜粉、黄芪、维生素ad粉，该饲料添加剂的添加比例为1:3:2:3:1。本发明所述饲料添加剂可替代饲料中添加的抗生素，直接减少了抗生素的使用，减少了动物体内的药物残留。主要也是利用陈皮、白芷、蒜粉、黄芪等中药来代替抗生素，起效慢，且在较大用量时才可见效，另外目前中药原料价格一直走高，故推广应用的价值不大。公开号:106036180a的中国发明《一种新型产蛋鸡饲料》公开的饲料每吨中的各原料配比如下：玉米蛋白粉150-200kg、膨化大豆100-150kg、鱼粉80-100kg、石粉8-10kg、磷酸氢钙50-80kg、氯化钠8-10kg、复合酶1-2kg、蛋氨酸2-5kg、复合有机微量元素5-8kg、复合维生素1.5-2.5kg，余量为去皮豆粕。该饲料组分营养不均衡，特别是氨基酸组成不合理，不能满足蛋鸡产蛋期各阶段的营养需求，对养殖场期望提高蛋鸡免疫功能、促进肠道健康、加强繁殖机能、提高抗病力等需求更是无法满足。公开号:104256189a的中国发明《一种产蛋期蛋鸡饲料及使用方法》公开的产蛋期蛋鸡饲料，包括基础料和预混料组成；所述基础料包含以下重量份组分：玉米200-600份、小麦0-200份、豆粕50-130份、其它植物性蛋白原料100-300份、细石粉30-40份、粗石粉30-40份、肉骨粉8-12份、磷酸氢钙0-5份、茶粉1-5份、油脂1-5份、食盐1.5-3份和小苏打1-2份；所述预混料为1段预混料、2段预混料、3段预混料、4段预混料中的一种或其组合；所述1段预混料包含以下重量份组分：复合维生素0.8-1.2份、复合微量元素1-2份、复合氨基酸1-3份、复合酶制剂0.2-1份、益生素0.1-0.3份、中草药添加剂0.5-2份；所述2段预混料包含以下重量份组分：复合维生素1-1.2份、复合微量元素1.2-1.8份、复合氨基酸2-4份、复合酶制剂0.5-1份、益生素0.2-0.3份和中草药添加剂1-3份；所述3段预混料包含以下重量份组分：复合维生素1-1.5份、复合微量元素1.2-1.8份、复合氨基酸3-6份、复合酶制剂0.3-1.2份、益生素0.2-0.5份、中草药添加剂2-6份、蛋壳粉0.5-2份、虾壳粉1-4份和海藻粉1-3份；所述4段预混料包含以下重量份组分：复合维生素1-1.5份、复合微量元素1.2-1.8份、复合氨基酸2-4份、复合酶制剂0.5-2份、益生素0.3-1份、中草药添加剂2-6份、海藻粉2-5份和粗纤维填充料40-120份；其中：所述复合维生素包含以下重量份组分：维生素a0.2-1.0份、维生素d30.05-0.1份、泛酸钙1-4份、维生素c5-10份、维生素e0.5-3份、维生素k0.03-0.08份、维生素b21.2-3.5份、维生素b10.05-0.2份、维生素b60.15-2份、维生素b120.002-0.02份、烟酸0.5-3份、叶酸0.01-0.07份、生物素0.05-0.3份、胆碱0.4-0.8份和载体300-800份；所述复合微量元素包含以下重量份组分：一水硫酸亚铁7-20份、五水硫酸铜0.5-1.2份、一水硫酸锌4-12份、一水硫酸锰3-10份、一水硫酸镁0.8-1.2份、亚硒酸钠0.02-0.05份、碘酸钙0.02-0.05份和载体840-985份；所述复合氨基酸包含以下重量份组分：赖氨酸100-600份、蛋氨酸50-250份、苏氨酸20-180份、色氨酸0-150份和载体100-750份；所述复合酶制剂包含以下重量份组分：植酸酶50-100份、蛋白酶50-200份、木聚糖酶20-50份、纤维素酶20-50份、淀粉酶20-50份和载体500-850份；所述中草药添加剂包含以下重量份组分：陈皮5-15份、益母草5-15份、小茴香5-15份、黄芩5-15份、黄芪5-15份、当归5-15份、党参5-15份、甘草5-15份、板蓝根5-15份和桂皮5-15份。该发明起关键作用的益母草、党参、黄芪、黄芩等是价格贵医用药品，成本高，不利于蛋鸡规模养殖推广，并且中草药制剂见效慢，效果不明显，与本发明的研究机制完全不同。公开号:103704491a的中国发明《一种根据生长发育阶段配制的蛋鸡饲料》公开的蛋鸡饲料，主要由主料(原粮如玉米、小米、高梁等和饼类如花生饼、豆饼、棉籽饼等)、辅料(高蛋白原料如鱼粉、血粉、草粉、槐叶粉等和矿物原料，如骨粉、贝壳粉、石粉等)和添加剂(如生长素、多维素、食盐，蛋氨酸、磷酸钙等)按重量比配制而成。它是不断根据蛋鸡的生长发育阶段和产蛋期、休产期及时更换饲料配方，做到饲料配方与生长发育阶段一致，充分发挥蛋鸡本身的生产性能和饲料作用，促进蛋鸡的生长和产蛋。具体为：(1)0至3周龄蛋鸡的饲料配方按重量比：玉米70％，小米5％、高梁4％、麦麸5％，豆饼8％，鱼粉2％，骨肉粉2％，磷酸钙1.7％，石粉1.3％，食盐0.65％，蛋氨酸0.35％。(2)4至7周龄蛋鸡的饲料配方按重量比：玉米60％，高粱4％，麦麸6％，豆饼15％，大麦3％，槐叶粉2％，血粉3％，鱼粉5％，骨粉1.35％，食盐0.3％，蛋氨酸0.35％。(3)8至13周龄蛋鸡的饲料配方按重量比：玉米62％，麦麸5％，豆饼23％，鱼粉1％，花生饼3％，棉仔饼3％、磷酸钙1.46％，石粉0.54％，盐0.65％，蛋氨酸0.35％。(4)14至17周龄蛋鸡的饲料配方按重量比：玉米65％，高梁5％，麦麸10％，草粉7％，槐叶粉3％，鱼粉3％，贝壳粉3.5％，骨粉2.5％，食盐0.7％，蛋氨酸0.3％。(5)产蛋期蛋鸡的饲料配方按重量比：玉米40％，麦粉10％，谷粉15％，麸皮10％，豆饼13％，棉仔饼2％，鱼粉5％，草粉4％，食盐0.5％，蛋氨酸0.5％。(6)休产期蛋鸡的饲料配方按重量比：玉米粉35％，碎米30％，黄豆粉10％，花生麸12，麦麸3，鱼粉5％，矿粉3％，骨粉及生长素1.65％，多种维生素0.35％。该发明是正常产蛋和育成期的产品，没有考虑肠道健康的功能性对蛋鸡产蛋持久性的影响。公开号:102771666a的中国发明《开放散养产蛋期蛋鸡饲料配方》公开的饲料配方为：玉米粉60-65份、大麦粉15-18份、豆粕粉8-10份、棉籽粕粉1-3份、土霉素药渣1-3份、鱼粉0.8-1.2份、磷酸氢钙1.2-1.5份、预混料1-1.2份。预混料的成分是：多种维生素1份、微量元素1.5份；中草药添加剂3份。3份的中草药添加剂的组成为：板蓝根30份、淡竹叶25份、生黄芪25份、连翘20份、柴胡15份。该发明利用抗生素与中草药结合来预防蛋鸡产蛋期各种常见病，提高鸡群的免疫力。易产生耐药性，且存在抗生素残留的问题。综上所述，延长蛋鸡产蛋时间，提高蛋鸡养殖效益，需要解决肠道健康问题、呼吸道健康问题、输卵管健康问题，必须加强蛋鸡免疫功能、消化机能、肠道健康和输卵管卵巢健康状态，研制一种营养全、功能强、效果好、减少蛋鸡养殖用药，提供安全鸡蛋产品的蛋鸡抗病力饲料势在必行。技术实现要素：本发明主要解决的问题是霉菌毒素污染造成肠道损伤、环境应激造成的呼吸道粘膜损伤、危害免疫功能的各种应激因子造成的疾病易感性高等问题，以蛋鸡产蛋期各阶段的特殊生理需求为营养设计依据，主要目标一是增强免疫功能；二是促进肠道粘膜机能和避免肠道损伤；三是减少输卵管粘膜损伤和炎症修复，促进蛋鸡繁殖器官(输卵管、卵巢)发育。科学复配各种原料与营养素，制备蛋鸡产蛋期显著提高蛋鸡免疫功能、促进肠道健康、加强繁殖机能的一种提高抗病力、减少养殖用药、提供安全鸡蛋产品的蛋鸡产蛋期饲料。为了达到上述目的，本发明采用以下技术方案：一种提高抗病力的蛋鸡产蛋期饲料，由以下重量份数的原料制备：玉米35-50份，燕麦10-20份，豆粕8-20份，玉米蛋白粉2-6份，芝麻粕1-5份，小米糠1-8份，米糠粕1-5份，辣椒渣1-5份，米糠油0.5-1.5份，栀子渣1-5份，优可宝0.03-0.1份，福乐酸sr130为0.025-0.1份，β-胡萝卜素0.01-0.03份，天然叶黄素0.1-0.2份，石粉7-12份，磷酸氢钙0.3-1份，食盐0.3-0.4份，复合预混料0.5份，氨基酸0.4-0.65份，1万单位植酸酶0.01-0.02份，氯化胆碱0.05-0.12份，肉碱0.001-0.05份，甜菜碱0.03-0.08份，益生菌0.05-0.1份，复合酶制剂0.05-0.1份，霉菌毒素吸附剂0.01-0.12份，燕麦糠、小麦纤维混合发酵物1-2份。所述燕麦糠、小麦纤维混合发酵物由如下方法制备：将燕麦糠、小麦纤维按照1-2:1-3的质量比例混合后添加到可加热的混合机中，加入以混合物质量计，40-60％的水，3-5％葡萄糖，混合均匀后加热到80℃，30分钟，物料冷却至25-30℃后，加入0.2-0.5％的混合菌种，25-30℃培养48-72小时，搅拌转速为20-30r/min，培养到50-55小时添加混合物质量0.005-0.1％的l-半胱氨酸和0.05-0.1％的甘草超微粉，发酵结束后用流化床干燥至水分含量小于14％得到燕麦糠、小麦纤维混合发酵物。所述混合菌种含有如下有效活菌数：枯草芽孢杆菌≥100亿/g、地衣芽孢杆菌≥1000亿/g、酵母菌≥100亿/g、乳酸菌≥50亿/g；优选的，所述酵母菌为酿酒酵母；进一步的，所述酵母菌为保藏菌种酿酒酵母(saccharomycescerevisiae)tlj2016，保藏编号为cgmccno.12789；进一步的，所述益生菌为枯草芽孢杆菌、地衣芽孢杆菌、乳酸菌、粪链球菌、酵母菌中的至少一种；优选的，所述益生菌含有如下有效活菌数：枯草芽孢杆菌≥100亿/g、地衣芽孢杆菌≥1000亿/g、酵母菌≥100亿/g、乳酸菌≥50亿/g；优选的，所述益生菌含有如下有效活菌数：枯草芽孢杆菌≥100亿/g、地衣芽孢杆菌≥1000亿/g、酵母菌≥100亿/g、乳酸菌≥50亿/g、粪链球菌≥50亿/g；进一步的，所述酵母菌为保藏菌种酿酒酵母(saccharomycescerevisiae)tlj2016，保藏编号为cgmccno.12789；较佳的，所述酵母菌由如下方法培养制备：(1)摇瓶培养取tlj2016斜面菌种一环，接入装有30ml摇瓶培养基的250ml摇瓶中150rpm,30℃培养30h得种子液；摇瓶培养基(g/l)：(nh4)2so46、葡萄糖35、k2hpo4·3h2o3、kh2po40.5、酵母粉11、mnso40.1、kcl0.1、feso40.1、mgso4·7h2o0.1，ph6.0；(2)5l发酵罐培养将种子液按10％质量百分比的接种量，接入装有3l发酵培养基的发酵罐中，30℃,通气量6l/min,罐压0.03mpa，500rpm,恒ph6.0条件下进行发酵培养，发酵至30h时，一次性添加终浓度为25mmol/l的l-半胱氨酸，总发酵时间为50h；发酵完毕，调节ph至6.5，喷雾干燥得酵母菌粉剂；发酵培养基(g/l)：(nh4)2so410、葡萄糖100、k2hpo4·3h2o8、kh2po40.5、酵母粉11、mnso40.1、kcl0.1、feso40.1、mgso4·7h2o0.1,ph6.0；进一步地，所述氨基酸为赖氨酸、蛋氨酸、苏氨酸或色氨酸中至少两种；优选地，所述氨基酸为赖氨酸、蛋氨酸、苏氨酸和色氨酸按质量比，赖氨酸：蛋氨酸：苏氨酸：色氨酸＝1:0.43-0.56:0.31-0.56:0.11-0.13均匀混合。进一步，所述复合预混料：辽宁禾丰牧业股份有限公司生产，q/hfj02.03-2012，产品批准文号为辽饲预字(2013)003024；产品组成为复合维生素和微量元素，商标为禾丰，市场有售。复合预混料组成如下：铁15000mg/kg，铜3000mg/kg，锌20000mg/kg，锰24000mg/kg，硒60mg/kg，碘100mg/kg，维生素a1600kiu，维生素d600kiu，维生素e320mg/kg，维生素k3200mg/kg，维生素b1200mg/kg，维生素b2880mg/kg，维生素b6600mg/kg，维生素b122.0mg/kg，烟酸6000mg/kg，泛酸800mg/kg，叶酸100.0mg/kg，生物素5.5mg/kg；进一步，所述1万单位植酸酶：北京昕大洋科技发展有限公司生产，生产许可证号为饲添(2012)0017，批准文号：京饲(添)字(2012)403711；主要成分为植酸酶；市场有售；进一步，所述复合酶制剂：沈阳丰美生物技术有限公司生产，生产许可证号为饲添(2011)1986，批准文号：辽饲(添)字(2011)040008；主要成分含量如下：木聚糖酶3000u/g,甘露聚糖酶800u/g，酸性蛋白酶u/g，脂肪酶800u/g，淀粉酶300u/g，葡聚糖酶400u/g。市场有售；进一步，所述福乐酸sr130：瑞典柏斯托集团生产，有效成分丁酸甘油酯65％；酯化产品；作用：修复肠道损伤，促进肠绒毛发育，促进肠道健康。进一步，所述优可宝：意大利施华公司，(2011)外饲准字328号；产品有效成分：水解单宁酸75％；主要作用：收敛控制腹泻，选择性抑菌，抗病毒，天然抗氧化；提高蛋壳颜色、降低死亡率，改善鸡舍空气质量。本发明同时提供一种提高抗病力的蛋鸡产蛋期饲料的制备方法，包括以下步骤：按照配方准确称取各组分原料，均按照常规蛋鸡加工方法粉碎，然后按重量份数自大至小依次加入各种原料，混合均匀，加工，即得一种提高抗病力的蛋鸡产蛋期饲料。有益效果本发明解决了霉菌毒素污染造成肠道损伤、环境应激造成的呼吸道粘膜损伤、危害免疫功能的各种应激因子造成的疾病易感性高等问题，家禽肠黏膜屏障由肠黏膜上皮、肠道内正常菌群、肠道内分泌物和肠相关免疫细胞组成，肠黏膜表面生长着大量的厌氧菌；肠黏膜细胞主要是柱状上皮细胞及少量的杯状细胞，内分泌细胞及细胞肠屏障功能的维持依赖于由胃肠相关淋巴组织产生的特异性的分泌型免疫球蛋白iga，以及非特异性的机械和化学屏障，如胃酸、蠕动、肠上皮紧密连接、黏液、消化酶和正常菌群等。肠内营养与肠粘膜的屏障功能对机体健康和免疫功能发挥着的大约70％的作用。根据蛋鸡产蛋期各阶段的特殊生理需求，在为机体提供基础营养的前提下，科学复配各种原料与营养素，各组分平衡作用于机体的各个器官，协同一致，互相支持，在增强免疫功能同时，促进肠道粘膜机能和避免肠道损伤，减少输卵管粘膜损伤和炎症修复，促进蛋鸡繁殖器官(输卵管、卵巢)发育。具有显著提高蛋鸡免疫功能、促进肠道健康、增强抗病力的作用，减少蛋鸡养殖用药，提供安全鸡蛋产品。添加益生素能够抑制有害细菌的增殖，促进有益菌的增殖，改善蛋鸡小肠绒毛发育，降低腹泻率，提高动物免疫力；特别是添加高产谷胱苷肽的保藏菌种tlj2016，谷胱苷肽作为体内重要的抗氧化剂和自由基清除剂，如与自由基、重金属等结合，从而把机体内有害的毒物转化为无害的物质，排泄出体外，对改善蛋鸡的身体机能，很有益处。水解单宁酸、丁酸甘油酯、天然β-胡萝卜素、天然叶黄素具有增强免疫功能和抗氧化功能。辣椒粕含有多种抗自由基的物质，具有抗氧化能力,且含有多量的维生素c和维生素e；栀子渣具有健脾养脾、养胃健胃、养肾补肾、补气益气、调理肠胃、提高免疫力的功效。单宁酸是一种多酚类化合物，分为水解单宁酸和缩合单宁酸，水解单宁酸(优可宝)的功效：一是具有很强的收敛作用，可降低肠道蠕动、减缓食糜在肠道中的流通速度，促进水分和营养在物质的吸收；二是选择性抑菌，提高乳酸菌等有益菌的生长繁殖，抑制革兰氏阴性菌及其他病原菌的繁殖，有效解决蛋鸡腹泻问题；三是抗病毒作用。具有抑制流感等呼吸道病毒复制的作用，能够抑制病毒糖蛋白的合成，从而达到抗病毒的效果。四是具有天然抗氧化功能，清除自由基，对生物组织具有保护作用。具体实施方式下面通过具体的实施方案叙述本发明。除非特别说明，本发明中所用的技术手段均为本领域技术人员所公知的方法。另外，实施方案应理解为说明性的，而非限制本发明的范围，本发明的实质和范围仅由权利要求书所限定。对于本领域技术人员而言，在不背离本发明实质和范围的前提下，对这些实施方案中的物料成分和用量进行的各种改变或改动也属于本发明的保护范围。所述酿酒酵母菌株具体为酿酒酵母(saccharomycescerevisiae)tlj2016，该菌株已于2016年7月15日保藏于中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心，保藏编号为cgmccno.12789，保藏地址：北京市朝阳区北辰西路1号院3号，中国科学院微生物研究所，邮编100101。所述酿酒酵母tlj2016的最适生长ph为6.0-6.5，最适生长温度为28-35℃；所述酿酒酵母tlj2016是从一株宁夏果园中分离得到的酿酒酵母出发菌株经以下步骤得到：原始出发菌种→试管活化→硫酸二乙酯(des)诱变→高渗平板筛选→亚硝基胍(ntg)诱变筛选→高渗平板初筛→摇瓶筛选→发酵复筛(产谷胱苷肽gsh能力)→传代稳定性试验。经过诱变后获得的菌株tlj2016，其葡萄糖耐受能力以及l-半胱氨酸耐受能力均得到提高，一方面在高浓度葡萄糖培养下能够提高细胞密度，另一方面l-半胱氨酸耐受能力的提高将有利于gsh在胞内大量合成，从而提高菌株大规模生产gsh的能力。本发明所采用的酿酒酵母对葡萄糖的耐受能力达到300g/l，利于其在高浓度葡萄糖条件下生产gsh；在5l发酵罐中发酵生产gsh终浓度达到3308mg/l；耐受l-半胱氨酸的能力远高于出发菌株，在5mmol/ll-半胱氨酸作用下仍能缓慢生长，在40mmol/ll-半胱氨酸作用下仍能保持gsh大量合成；耐盐能力达到18％，有利于扩展其应用领域。1.des诱变选育1)在超净台上取试管斜面上的出发菌株1一环，接入装有50ml麦芽汁培养基的250ml三角瓶中，200rpm，30℃培养10h左右，使菌体处于对数生长前期。2)取5ml菌液，5000rpm离心10min收集菌体，用生理盐水洗涤2次。3)用ph7.0磷酸缓冲液稀释成107个/ml菌悬液。4)取32mlph7.0的磷酸钾缓冲液、8ml菌悬液、0.4mldes在预先放入转子的150ml三角瓶中充分混合，使des最终浓度为1％(v/v)。5)在30℃摇床中150rpm反应30min，取1ml混合液，加入0.5ml25％na2s2o3溶液中止反应。6)稀释涂布于含150g/lkcl的麦芽汁培养基平皿中，在30℃培养2-3天后挑取菌落最大的菌株1。2.亚硝基胍诱变1)在超净台上取试管斜面上的酿酒酵母菌菌株1一环，接入装有50ml麦芽汁培养基的250ml三角瓶中，200rpm，30℃培养10h左右，使菌体处于对数生长前期。2)取5ml菌液5000rpm离心10min收集菌体，用生理盐水洗涤2次。3)用ph6.0磷酸缓冲液稀释成107个/ml菌悬液。4)取10ml菌悬液转移至100ml三角瓶中，加入10mg的ntg，配制成终浓度为10mg/ml的ntg溶液，并加入4-5滴丙酮，以利于ntg溶解。5)在30℃下200rpm振荡反应30min，5000rpm离心10min收集菌体，用无菌生理盐水洗涤数次，中止反应。6)适当稀释涂布，取最后稀释度的菌液0.2ml，涂布于含200g/lkcl的麦芽汁培养基平皿中。在30℃培养2-3天后挑取菌落20支。3.摇瓶初筛1)在超净台上分别取上述20支酿酒酵母菌各一环，分别接入装有50ml麦芽汁培养基的250ml三角瓶中，200rpm，30℃培养12h左右，使菌体处于对数生长中期。2)取5ml菌液，接入装有50ml高渗麦芽汁培养基(葡萄糖浓度为300g/l)中的250ml三角瓶中，200rpm，30℃培养3-4天，每天检测葡萄糖浓度和乙醇浓度变化。发酵结束后，比较20株菌种的葡萄糖和乙醇消耗速率、最终残糖浓度和乙醇浓度、葡萄糖对乙醇的转化率以及杂酸含量。3)选择葡萄糖消耗速率快、最终残糖浓度低和乙醇浓度高的5株菌命名为y-1，y-2，y-3，y-4，y-5。4.发酵复筛将步骤3中所得的5株菌y-1，y-2，y-3，y-4，y-5以及出发菌株，分别按照10％接种量，在装有30ml液体培养基的250ml摇瓶中150rpm,30℃培养30h，取发酵液测定gsh浓度；液体培养基(g/l)：(nh4)2so46、葡萄糖35、k2hpo4·3h2o3、kh2po40.5、酵母粉11、mnso40.1、kcl0.1、feso40.1、mgso4·7h2o0.1；gsh测定方法：发酵液离心洗涤后得新鲜酵母，30℃下，40％乙醇处理3h，离心取上清液做gsh测定样品；采用四氧嘧啶法进行gsh测定：其原理为gsh上的-sh与四氧嘧啶反应，生成的物质在305nm处有吸收峰，且与谷胱甘肽浓度成线性关系，故可用紫外分光光度计进行定量测定gsh含量。表1：gsh检测结果菌株出发菌株y-1y-2y-3y-4y-5gsh浓度(mg/l)127.9195.7172.3263.2216.5185.2由表1结果可知，菌株y-3具有最高的gsh发酵能力，因此确定y-3为最终的生产菌株，并将其命名为tlj2016。5.遗传稳定性试验将tlj2016菌在斜面上连续十次传代，并用摇瓶复筛的方法检测每次传代后的发酵情况。实验发现，在斜面上连续十次传代，该菌种性状没有明显变化，各项性能指标都正常，说明该菌种的遗传稳定性较强。酿酒酵母tlj2016高糖条件下发酵产gsh能力实验(1)摇瓶培养取tlj2016斜面菌种一环，接入装有30ml摇瓶培养基的250ml摇瓶中150rpm,30℃培养30h得种子液；摇瓶培养基(g/l)：(nh4)2so46、葡萄糖35、k2hpo4·3h2o3、kh2po40.5、酵母粉11、mnso40.1、kcl0.1、feso40.1、mgso4·7h2o0.1，ph6.0；(2)5l发酵罐培养将种子液按10％质量百分比的接种量，接入装有3l发酵培养基的发酵罐中，30℃,通气量6l/min,罐压0.03mpa，500rpm,恒ph6.0条件下进行发酵培养，发酵至30h时，一次性添加终浓度为25mmol/l的l-半胱氨酸，总发酵时间为50h；发酵培养基(g/l)：(nh4)2so410、葡萄糖100、k2hpo4·3h2o8、kh2po40.5、酵母粉11、mnso40.1、kcl0.1、feso40.1、mgso4·7h2o0.1,ph6.0；发酵结束后，测定发酵液中gsh的含量为3308mg/l。酿酒酵母tlj2016l-半胱氨酸耐受力实验将出发菌株以及tlj2016斜面菌种各一环，分别接入装有30ml摇瓶培养基的250ml摇瓶中150rpm,30℃培养进行培养，在培养至12h时，向摇瓶中加入不同终浓度的l-半胱氨酸，再培养10h，测定细胞干重，结果表2、3；摇瓶培养基(g/l)：(nh4)2so46、葡萄糖20、k2hpo4·3h2o3、kh2po40.5、酵母粉11、mnso40.1、kcl0.1、feso40.1、mgso4·7h2o0.1，ph6.0；表2：出发菌株l-半胱氨酸耐受力l-半胱氨酸浓度mmol/l0510152040出发菌株干重g/l22.615.710.24.32.20.8gsh浓度(mg/l)35.646.743.240.737.925.3表3：tlj2016l-半胱氨酸耐受力l-半胱氨酸浓度mmol/l0510152040tlj2016干重g/l25.728.523.621.220.618.7gsh浓度(mg/l)73.298.3113.5121.7127.5135.8从表2的结果可以看出，对于出发菌株，培养基中添加l-半胱氨酸，细胞停止生长，并且开始自溶，导致gsh增长率随着l-半胱氨酸浓度的升高而降低；从表3的结果可以看出，低浓度l-半胱氨酸下，tlj2016仍能够缓慢生长，随着l-半胱氨酸浓度的提高，tlj2016菌株的细胞干重缓慢下降，而gsh浓度持续增长，这一结果将有利于gsh生产过程中通过添加前体氨基酸-l-半胱氨酸促进gsh的生产。酿酒酵母tlj2016耐盐能力实验取tlj2016菌液1ml接种菌种于含有不同nacl浓度的(含量梯度为0％、2％、5％、10％、15％、18％)的10mlypd液体培养基(ph＝6.5)，置于30℃下分别培养24h，每个处理3个重复。各取1ml样品菌液于9ml生理盐水中混匀，制备稀释度溶液，取0.1ml稀释液于ypd固体平板中涂布，于30℃生化培养箱中倒置培养36小时(每个稀释度做3个平行)记录计算平板上的菌数个数。结果见表4，可知该菌的耐盐浓度为18％，说明tlj2016不仅可以在常规环境中生存，在高盐条件下依然具有活力，可应用于酱油、腌制品等高盐食品加工过程中耗糖产谷胱甘肽。表4：耐盐能力检测(×107cfu/ml)nacl含量0％2％5％10％15％18％原始菌株5.16±0.424.38±0.422.15±0.210.12±0.1100tlj20165.33±0.285.10±0.714.83±0.423.98±0.332.57±0.480.83±0.15实施例1一种提高抗病力的蛋鸡产蛋期饲料，由以下重量份数的原料制备：玉米45份，燕麦15份，豆粕18份，玉米蛋白粉2份，芝麻粕2份，小米糠4份，辣椒渣2份，栀子渣2份，优可宝0.03份，石粉9份，磷酸氢钙0.5份，食盐0.35份，复合预混料0.5份，米糠油0.8份，70％赖氨酸0.18份，dl-蛋氨酸0.1份，苏氨酸0.1份，色氨酸0.02份，1万单位植酸酶0.015份，氯化胆碱0.12份，甜菜碱0.08份，益生菌0.1份，复合酶制剂0.05，霉菌毒素吸附剂0.1份，β-胡萝卜素0.01份，米糠粕3份，福乐酸sr1300.5份，天然叶黄素0.1，肉碱0.025份燕麦糠、小麦纤维混合发酵物2份；所述燕麦糠、小麦纤维混合发酵物由如下方法制备：将燕麦糠、小麦纤维按照2:3的质量比例混合后添加到可加热的混合机中，加入以混合物质量计，50％的水，4％的葡萄糖，混合均匀后加热到80℃，30分钟，物料冷却至28℃后，加入0.3％的混合菌种，28℃培养60小时，搅拌转速为26r/min，培养到53小时添加混合物质量0.05％的l-半胱氨酸和0.1％的甘草超微粉，发酵结束后用流化床干燥至水分含量小于14％得到燕麦糠、小麦纤维混合发酵物。所述混合菌种含有如下有效活菌数：枯草芽孢杆菌≥100亿/g、地衣芽孢杆菌≥1000亿/g、酵母菌≥100亿/g、乳酸菌≥50亿/g；所述酵母菌为保藏菌种酿酒酵母(saccharomycescerevisiae)tlj2016，保藏编号为cgmccno.12789；所述益生菌含有如下有效活菌数：枯草芽孢杆菌≥100亿/g、地衣芽孢杆菌≥1000亿/g、酵母菌≥100亿/g、乳酸菌≥50亿/g、粪链球菌≥50亿/g；所述酵母菌为保藏菌种酿酒酵母(saccharomycescerevisiae)tlj2016，保藏编号为cgmccno.12789；所述酵母菌由如下方法培养制备：(1)摇瓶培养取tlj2016斜面菌种一环，接入装有30ml摇瓶培养基的250ml摇瓶中150rpm,30℃培养30h得种子液；摇瓶培养基(g/l)：(nh4)2so46、葡萄糖35、k2hpo4·3h2o3、kh2po40.5、酵母粉11、mnso40.1、kcl0.1、feso40.1、mgso4·7h2o0.1，ph6.0；(2)5l发酵罐培养将种子液按10％质量百分比的接种量，接入装有3l发酵培养基的发酵罐中，30℃,通气量6l/min,罐压0.03mpa，500rpm,恒ph6.0条件下进行发酵培养，发酵至30h时，一次性添加终浓度为25mmol/l的l-半胱氨酸，总发酵时间为50h；发酵完毕，调节ph至6.5，喷雾干燥得酵母菌粉剂；发酵培养基(g/l)：(nh4)2so410、葡萄糖100、k2hpo4·3h2o8、kh2po40.5、酵母粉11、mnso40.1、kcl0.1、feso40.1、mgso4·7h2o0.1,ph6.0。一种提高抗病力的蛋鸡产蛋期饲料的制备方法，包括以下步骤：按照配方准确称取各组分原料，均按照常规蛋鸡加工方法粉碎，然后按重量份数自大至小依次加入各种原料，混合均匀，加工，即得一种提高抗病力的蛋鸡产蛋期饲料。实施例2一种提高抗病力的蛋鸡产蛋期饲料，由以下重量份数的原料制备：玉米50份，燕麦10份，豆粕15份，玉米蛋白粉5份，米糠粕5份，辣椒渣3份，栀子渣3份，福乐酸sr130为0.04份，石粉9份，磷酸氢钙0.5份，食盐0.3份，复合预混料0.5份，70％赖氨酸0.25份，dl-蛋氨酸0.12份，苏氨酸0.1份，色氨酸0.02份，天然叶黄素0.1份，1万单位植酸酶0.015份，氯化胆碱0.05份，肉碱0.03份，益生菌0.1份，复合酶制剂0.05份，霉菌毒素吸附剂0.1份，芝麻粕1份，小米糠8份，米糠油1.5份，优可宝0.03份，β-胡萝卜素0.03，甜菜碱0.08份燕麦糠、小麦纤维混合发酵物1份；所述燕麦糠、小麦纤维混合发酵物由如下方法制备：将燕麦糠、小麦纤维按照1:3的质量比例混合后添加到可加热的混合机中，加入以混合物质量计，40％的水，3％的葡萄糖，混合均匀后加热到80℃，30分钟，物料冷却至25℃后，加入0.5％的混合菌种，25℃培养72小时，搅拌转速为20r/min，培养到55小时添加混合物质量0.1％的l-半胱氨酸和0.1％的甘草超微粉，发酵结束后用流化床干燥至水分含量小于14％得到燕麦糠、小麦纤维混合发酵物。所述混合菌种含有如下有效活菌数：枯草芽孢杆菌≥100亿/g、地衣芽孢杆菌≥1000亿/g、酵母菌≥100亿/g、乳酸菌≥50亿/g；所述酵母菌为保藏菌种酿酒酵母(saccharomycescerevisiae)tlj2016，保藏编号为cgmccno.12789；所述益生菌含有如下有效活菌数：枯草芽孢杆菌≥100亿/g、地衣芽孢杆菌≥1000亿/g、酵母菌≥100亿/g、乳酸菌≥50亿/g；所述酵母菌为保藏菌种酿酒酵母(saccharomycescerevisiae)tlj2016，保藏编号为cgmccno.12789；所述酵母菌培养制备方法同实施例1；一种提高抗病力的蛋鸡产蛋期饲料的制备方法同实施例1。实施例3一种提高抗病力的蛋鸡产蛋期饲料，由以下重量份数的原料制备：玉米48份，燕麦12份，豆粕20份，芝麻粕2份，小米糠8份，辣椒渣4份，米糠油1.0份，优可宝0.03份，福乐酸sr130为0.04份，石粉9份，磷酸氢钙0.6份，食盐0.35份，复合预混料0.5份，70％赖氨酸0.3份，dl-蛋氨酸0.13份，苏氨酸0.1份，色氨酸0.03份，1万单位植酸酶0.02份，氯化胆碱0.12份，甜菜碱0.08份，益生菌0.1份，复合酶制剂0.05份，霉菌毒素吸附剂0.1份，玉米蛋白粉4份，米糠粕3份，，栀子渣2份，β-胡萝卜素0.02份，天然叶黄素0.2，肉碱0.003份燕麦糠、小麦纤维混合发酵物2份；所述燕麦糠、小麦纤维混合发酵物由如下方法制备：将燕麦糠、小麦纤维按照1:3的质量比例混合后添加到可加热的混合机中，加入以混合物质量计，60％的水，5％葡萄糖，混合均匀后加热到80℃，30分钟，物料冷却至30℃后，加入0.2％的混合菌种，30℃培养48小时，搅拌转速为30r/min，培养到50小时添加混合物质量0.005％的l-半胱氨酸和0.05％的甘草超微粉，发酵结束后用流化床干燥至水分含量小于14％得到燕麦糠、小麦纤维混合发酵物。所述混合菌种含有如下有效活菌数：枯草芽孢杆菌≥100亿/g、地衣芽孢杆菌≥1000亿/g、酵母菌≥100亿/g、乳酸菌≥50亿/g；所述酵母菌为保藏菌种酿酒酵母(saccharomycescerevisiae)tlj2016，保藏编号为cgmccno.12789；所述益生菌含有如下有效活菌数：枯草芽孢杆菌≥100亿/g、地衣芽孢杆菌≥1000亿/g、酵母菌≥100亿/g、乳酸菌≥50亿/g；所述酵母菌为保藏菌种酿酒酵母(saccharomycescerevisiae)tlj2016，保藏编号为cgmccno.12789；所述酵母菌培养制备方法同实施例1；一种提高抗病力的蛋鸡产蛋期饲料的制备方法同实施例1。实施例4一种提高抗病力的蛋鸡产蛋期饲料，由以下重量份数的原料制备：玉米48份，燕麦10份，豆粕8份，芝麻粕5份，小米糠8份，辣椒渣1份，米糠油0.5份，优可宝0.1份，石粉12份，磷酸氢钙1份，食盐0.3份，复合预混料0.5份，70％赖氨酸0.32份，dl-蛋氨酸0.15份，苏氨酸0.1份，色氨酸0.04份，1万单位植酸酶0.01份，氯化胆碱0.05份，甜菜碱0.03份，益生菌0.05份，复合酶制剂0.1份，霉菌毒素吸附剂0.01份，玉米蛋白粉6份，米糠粕5份，栀子渣1份，福乐酸sr1300.025份，β-胡萝卜素0.01份，天然叶黄素0.1份，肉碱0.001份，燕麦糠、小麦纤维混合发酵物1份；所述燕麦糠、小麦纤维混合发酵物由如下方法制备：将燕麦糠、小麦纤维按照1:1的质量比例混合后添加到可加热的混合机中，加入以混合物质量计，45％的水，4％的葡萄糖，混合均匀后加热到80℃，30分钟，物料冷却至28℃后，加入0.4％的混合菌种，28℃培养55小时，搅拌转速为30r/min，培养到55小时添加混合物质量0.1％的l-半胱氨酸和0.05％的甘草超微粉，发酵结束后用流化床干燥至水分含量小于14％得到燕麦糠、小麦纤维混合发酵物。所述混合菌种含有如下有效活菌数：枯草芽孢杆菌≥100亿/g、地衣芽孢杆菌≥1000亿/g、酵母菌≥100亿/g、乳酸菌≥50亿/g；所述酵母菌为保藏菌种酿酒酵母(saccharomycescerevisiae)tlj2016，保藏编号为cgmccno.12789；所述益生菌含有如下有效活菌数：枯草芽孢杆菌≥100亿/g、地衣芽孢杆菌≥1000亿/g、酵母菌≥100亿/g、乳酸菌≥50亿/g、粪链球菌≥50亿/g；所述酵母菌为保藏菌种酿酒酵母(saccharomycescerevisiae)tlj2016，保藏编号为cgmccno.12789；所述酵母菌由本领域常规方法培养制备；一种提高抗病力的蛋鸡产蛋期饲料的制备方法同实施例1。实施例5一种提高抗病力的蛋鸡产蛋期饲料，由以下重量份数的原料制备：玉米35份，燕麦20份，豆粕14份，玉米蛋白粉2份，芝麻粕2份，小米糠5份，辣椒渣5份，栀子渣5份，米糠油1.5份，福乐酸sr130为0.1份，石粉7份，磷酸氢钙0.3份，食盐0.4份，复合预混料0.5份，70％赖氨酸0.35份，dl-蛋氨酸0.16份，苏氨酸0.1份，色氨酸0.04份，1万单位植酸酶0.02份，氯化胆碱0.12份，甜菜碱0.08份，益生菌0.1份，复合酶制剂0.05份，霉菌毒素吸附剂0.12份，米糠粕1份，优可宝0.03份，β-胡萝卜素0.03份，天然叶黄素0.2，肉碱0.05份，燕麦糠、小麦纤维混合发酵物2份；所述燕麦糠、小麦纤维混合发酵物由如下方法制备：将燕麦糠、小麦纤维按照2:1的质量比例混合后添加到可加热的混合机中，加入以混合物质量计，50％的水，5的％葡萄糖，混合均匀后加热到80℃，30分钟，物料冷却至30℃后，加入0.5％的混合菌种，30℃培养72小时，搅拌转速为30r/min，培养到50小时添加混合物质量0.005％的l-半胱氨酸和0.05％的甘草超微粉，发酵结束后用流化床干燥至水分含量小于14％得到燕麦糠、小麦纤维混合发酵物。所述混合菌种含有如下有效活菌数：枯草芽孢杆菌≥100亿/g、地衣芽孢杆菌≥1000亿/g、酵母菌≥100亿/g、乳酸菌≥50亿/g；所述益生菌含有如下有效活菌数：枯草芽孢杆菌≥100亿/g、地衣芽孢杆菌≥1000亿/g、酵母菌≥100亿/g、乳酸菌≥50亿/g、粪链球菌≥50亿/g；一种提高抗病力的蛋鸡产蛋期饲料的制备方法同实施例1。上述实施例1-5中所述复合预混料：辽宁禾丰牧业股份有限公司生产，q/hfj02.03-2012，产品批准文号为辽饲预字(2013)003024；产品组成为复合维生素和微量元素，商标为禾丰，市场有售。复合预混料组成如下：铁15000mg/kg，铜3000mg/kg，锌20000mg/kg，锰24000mg/kg，硒60mg/kg，碘100mg/kg，维生素a1600kiu，维生素d600kiu，维生素e320mg/kg，维生素k3200mg/kg，维生素b1200mg/kg，维生素b2880mg/kg，维生素b6600mg/kg，维生素b122.0mg/kg，烟酸6000mg/kg，泛酸800mg/kg，叶酸100.0mg/kg，生物素5.5mg/kg；所述1万单位植酸酶：北京昕大洋科技发展有限公司生产，生产许可证号为饲添(2012)0017，批准文号：京饲(添)字(2012)403711；主要成分为植酸酶；市场有售；所述复合酶制剂：沈阳丰美生物技术有限公司生产，生产许可证号为饲添(2011)1986，批准文号：辽饲(添)字(2011)040008；主要成分含量如下：木聚糖酶3000u/g,甘露聚糖酶800u/g，酸性蛋白酶u/g，脂肪酶800u/g，淀粉酶300u/g，葡聚糖酶400u/g。市场有售；所述福乐酸sr130：瑞典柏斯托集团生产，有效成分丁酸甘油酯65％；酯化产品；作用：修复肠道损伤，促进肠绒毛发育，促进肠道健康。所述优可宝：意大利施华公司，(2011)外饲准字328号；产品有效成分：水解单宁酸75％；主要作用：收敛控制腹泻，选择性抑菌，抗病毒，天然抗氧化；提高蛋壳颜色、降低死亡率，改善鸡舍空气质量。试验例：以本发明提高抗病力的蛋鸡产蛋期饲料与市售类似饲料做对照试验，比较各饲料对蛋鸡免疫功能、肠道健康、抗氧化功能和产蛋性能的影响1实验材料和方法1.1试验时间：试验于2015年5月22日-2015年10月22日，共计150天，其中预试期7天。1.2试验地点：试验在桓仁新华鸡场实验场实施。1.3试验组设计：试验组分为对照组和本发明饲料组；试验组分别饲喂本发明实施例1-5的饲料。试验采用单因子实验设计，随机选择1536只海兰褐182日龄蛋鸡，分为6组，每组设8个重复，每个重复32只鸡。1.4喂料方法：手动上料，每天3次，自由采食；自由饮水，自来水，水温15-21℃。1.5鸡舍温度：采用纵向通风，鸡舍温度控制在20-22℃。按照海兰褐饲养管理严格控制。1.6试验检测指标：1)称重：初始体重，结束体重。每个重复称量1笼鸡，逐只称量。采食量：自由采食，按周清算耗料量；期间累计死亡鸡只数。2)产蛋枚数、蛋重、破蛋和软皮蛋；3)血液免疫指标：iga,igg,igm；抗氧化指标：谷胱甘肽过氧化物酶gsh-px、超氧化物岐化酶t-sod、丙二醛mda和总抗氧化能力t-aoc。采血方法采用心脏采血。1.7数据处理与分析所有实验数据采用excel表格进行整理，然后用spss17.0软件进行统计分析，结果采用平均数±标准差(x±sd)表示。2试验结果将6栋鸡舍8个批次试验指标检测结果统计，将实施例1-5结果取平均值,统计结果如表5、6和7：表5：本发明对蛋鸡生产性能的影响由表5可见，本发明组在182日龄到332日龄期间体增重达标，且超过品种体重标准20克-30克，蛋鸡在此期间体重达标说明产蛋持久性强，多产蛋；而对照组体重没有达标；体增重达标，表明没有动用体储备进行产蛋，机体健康状态良好，抗病力增强。体重不达标，说明蛋鸡为了产蛋动用了体储备，以健康为代价满足最大产蛋需求，会降低抗病力。死亡率比对照降低1.6％，1万只鸡少死亡160只鸡，减少经济损失6720元。表6：本发明对蛋鸡产蛋性能的影响本发明组对照组采食量(克)114.9±0.12116.36±0.14产蛋率(％)96.81±1.13a93.53±1.27b蛋重(克)62.26±0.13a60.15±0.43b料蛋比1.91±0.062.07±0.09产蛋量(克/只/日)60.27±1.29a56.26±1.86b只盈利(元/只)26.2122.37由表6可见，本发明与对照组相比，产蛋率分别提高3.28％。产蛋量提高4.01克，每只鸡多赚钱3.84元。表7：本发明对蛋鸡免疫机能和抗氧化功能的影响本发明组对照组免疫球蛋白gigg8.565.24免疫球蛋白aiga1.250.81免疫球蛋白migm0.920.73谷胱甘肽过氧化物酶gsh-px911.31864.58超氧化物岐化酶t-sod149.87138.22丙二醛mda3.622.56总抗氧化能力t-aoc9.446.23由表7可见，本发明组蛋鸡免疫功能指标iga、igg、igm均比对照组大幅度提高，说明采用增强肠道免疫功能苏氨酸、蛋氨酸、复合维生素、单宁酸、丁酸甘油酯等系列综合的系统的免疫营养管理，有效的增强了免疫细胞的免疫活性，有利于维持高水平的健康状态，提高抗病力。本发明组谷胱甘肽过氧化物酶gsh-px、超氧化物岐化酶t-sod、丙二醛mda和总抗氧化能力t-aoc等抗氧化指标也明显增强，说明饲料中的β-胡萝卜素、天然叶黄素、霉菌毒素吸附剂、优可宝、混合发酵纤维饲料等相关营养以及理想氨基酸平衡配方设计，直接影响蛋鸡血液的抗氧化指标，蛋鸡抗氧化能力增强，健康水平提高。当前第1页12