本发明涉及一种柚子饮料及其制备方法，属于发酵食品技术领域。
背景技术：
便秘不仅痛苦，而且对身体也有很多危害。便秘可使腹部胀满，产生恶心、厌食、食而无味，便秘病人有烦燥不安、心神不安、失眠等症状。便秘病人会并发肛肠病，如痔疮、肛裂、直肠脱垂和结肠憩室。
人们通常使用一些泻药、开塞露、顺益舒等来帮助排便，虽然这能起到一时通便的作用，但是长期使用这些药物，就会对药物产生依赖，肠道的蠕动会变得无力，肠道的敏感性也会大大降低，便秘就会随之变重，反复发作。因此，一种无副作用、健康并能促进肠道蠕动的饮品对于倡导健康饮食、提升生活品质是十分必要的。
技术实现要素：
本发明的第一个目的是提供一种柚子饮料的制备方法，是按质量份数计，以柚子100～200份、菊芋50～100份、白砂糖200～250份、低聚果糖80～120份、低聚半乳糖40～60份为原料进行分阶段发酵；所述分阶段发酵是分别接种不同的微生物进行发酵。
在本发明的一种实施方式中，所述微生物包括酒药、酿酒酵母、植物乳杆菌、嗜酸乳杆菌、醋酸杆菌中的至少一种；所述酒药为商业化的酵母混合菌。
在本发明的一种实施方式中，所述原料是以下述质量份的原料组成：柚子100～200份、菊芋50～100份、白砂糖200～250份、低聚果糖80～120份、低聚半乳糖40～60份、水800～1000份。
在本发明的一种实施方式中，所述发酵分为三个发酵阶段，第一阶段接种酒药3～5g/100ml、酿酒酵母10～15ml/100ml，并于28～30℃发酵2～3d；第二阶段接种植物乳杆菌5～10ml/100ml、嗜酸乳杆菌5～10ml/100ml，并于30～37℃发酵2～3d；第三阶段接种醋酸杆菌10～15ml/100ml，于28～30℃发酵2～3d；所述酿酒酵母、植物乳杆菌、嗜酸乳杆菌、醋酸杆菌是分别培养至菌浓达1×106～1×107cfu/ml的菌液。
在本发明的一种实施方式中，发酵过程中每12～24h将发酵液混匀。
在本发明的一种实施方式中，所述方法包括以下步骤：
1)原材料选择：选择新鲜成熟的柚子和菊芋，去皮打浆；
2)一阶段发酵：向步骤1制备的浆液中按3～5：10～15的比例加如酒药、酿酒酵母，并加入水，28～30℃静置发酵2～3天，摇匀；
3)二阶段发酵：向步骤2的发酵液中按1～2:1～2的比例添加植物乳杆菌和嗜酸杆菌，30～37℃静置发酵2～3天，摇匀；
4)三阶段发酵：向步骤3的发酵液中添加醋酸杆菌，28～30℃静止发酵2～3天，摇匀；
5)调配：向步骤4的发酵液中加入质量比为20～25：8～12:4～6的白砂糖、低聚果糖、低聚半乳糖；
6)过滤，灭菌：将步骤5调配后的发酵液过滤，先用120目过滤筛过滤，再用200目过滤筛过滤。采用高温灭菌，灭菌条件为121℃，15分钟。
在本发明的一种实施方式中，所述方法具体包括以下步骤：
1)原材料选择：选择100～200份新鲜成熟的柚子和50～100份菊芋，去皮打浆；
2)一阶段发酵：向步骤1制备的浆液中按3～5：10～15的比例加入酒药、酿酒酵母和水，28℃静置发酵3天，每天摇匀一次；
3)二阶段发酵：向步骤2的发酵液中添加植物乳杆菌和嗜酸杆菌，37℃静置发酵2天，每隔12小时摇匀一次；
4)三阶段发酵：向步骤3的发酵液中添加醋酸杆菌，30℃静止发酵2天，每6小时摇匀1次；
5)调配：向步骤4的发酵液中加入白砂糖、低聚果糖、低聚半乳糖；
6)过滤，灭菌：将步骤5调配后的发酵液过滤，先用120目过滤筛过滤，再用200目过滤筛过滤。采用高温灭菌，灭菌条件为121℃，15分钟。
本发明还提供所述方法制备的柚子饮料。
本发明还提供所述方法在制备含柚子成分的饮品中的应用。
有益效果：本发明将柚子、菊芋、低聚果糖、低聚半乳糖等原料混合，根据不同发酵时间，经酒药、酿酒酵母、植物乳杆菌、嗜酸乳杆菌、醋酸杆菌混合发酵，可得到润肠通便的果蔬发酵饮料。通过小鼠实验可知，首次排黑便时间为244.7±60.6min，粪便粒数(粒)为115.63±11.14，24h粪便总质量达3.39±0.19g，能提高小鼠的通便能力和抗氧化活性，具有润肠效果。本发明制备的柚子饮料dpph清除率可达95.34％，高于0.1mg/ml的vc的抗氧化性，并且本产品酸甜可口，香味浓郁，口感极佳，减少了用药的苦感。
具体实施方式
食物对小鼠通便效果的检测：选择清洁级雄性icr小鼠30只，体重18～22g。以基础饲料适应性喂养3天后，按体重随机分为3组：空白组、麻仁软胶囊组、实施例组，每组10只。小鼠置于塑料笼喂养，每笼5只，自由饮水和摄食。动物房室温20℃一25℃，相对湿℃60％一80％。空白组：按0.2ml/l0g体重日一次灌胃蒸馏水。麻仁软胶囊组：用蒸馏水将麻仁软胶囊配制成3.0g/ml的混悬液，按0.2ml/l0g体重日一次灌胃给药。实例组：按0.2ml/l0g体重日一次灌胃果蔬饮料。
各组均连续8天灌胃。在给药期间，给予所有小鼠自由饮水与摄食，隔日称重一次，灌胃剂量根据体重变化调整。在第九天给药前各组小鼠均禁食12h而不禁水。第九天灌胃30min后，每组小鼠按0.2m1/l0g给予配好的墨汁灌胃，操作结束同时开始计时。恢复正常进食进水，并将滤纸铺于饲养笼中进行观察，记录各组实验小鼠第一次排出黑色粪便的时间和每只实验小鼠在24h内排出的粪便总质量。
对二苯代苦味酰基自由基(dpph)清除能力的测定：将2ml待测液及2ml20mmol/ldpph溶液加入试管中，摇匀，放置30min后用溶剂作参比测定其吸光度ai，同时测定20mmol/ldpph溶液与2ml溶剂混合后的吸光度ac，以及2ml提取物与2ml溶剂混合后的吸光度aj。按照下列公式计算清除率，清除率越抗氧化能力越强。dpph抑制率(％)＝[1-(ai-aj)/ac]*100％。
还原能力的测定：取2.5ml待测液于10ml试管中,分别加入2.5ml1％铁氰化钾溶液,混合均匀,于50℃浴中反应20min。取出,再加入2.5ml10％三氯酸tca,混合后以8000r/min离心10min。取上清液2.5ml,加蒸馏水2.5ml、0.1％fecl30.5ml,混合均匀,静置10min后,测定700nm的吸光值a700,吸光度越大抗氧化能力越强，所有测定值均为三次平均值。
酿酒酵母液体培养基及培养条件：酵母提取物10g,蛋白陈20g,葡萄糖20g,定容至1l，121℃高压灭菌15min，于28度200r/min摇床培养24h。
植物乳杆菌、嗜酸乳杆菌液体培养基及培养条件：mrs培养基，115℃高温灭菌30min，于37℃静置培养24h
醋酸杆菌液体培养基及培养条件：酵母膏1g，葡萄糖1g，定容至100ml，121℃高压灭菌15min，于30度170r/min摇床培养48h。
具体实施方式中的酿酒酵母、植物乳杆菌、嗜酸乳杆菌、醋酸杆菌是分别培养至菌浓达1×106～1×107cfu/ml的菌液。
实施例1
按以下质量份数的原料和辅料进行柚子饮料的制备：柚子100～200份、菊芋50～100份、白砂糖200～250份、低聚果糖80～120份、低聚半乳糖40～60份、水800～1000份。
操作步骤如下：
(1)原材料选择：选择新鲜成熟的柚子和菊芋，按质量份数比柚子：菊芋＝100：100，去皮打浆；
(2)一阶段发酵：在步骤1的浆液中加酒药、酿酒酵母和水，质量份数比为3：10：800，28℃静止发酵3天，每天摇匀一次；
(3)二阶段发酵：在步骤2的发酵液中加植物乳杆菌和嗜酸乳杆菌，质量份数比为10：5，37℃静止发酵2天，每隔12小时摇匀一次；
(4)三阶段发酵：在步骤3的发酵液中加醋酸杆菌，质量份数为10，30℃静止发酵2天，每6小时摇匀1次；
(5)调配：向步骤4的发酵液中加入白砂糖、低聚果糖、低聚半乳糖，质量份数比：200：100：40；
(6)过滤：将步骤5的溶液先用120目过滤筛过滤，再用200目过滤筛过滤；
(7)灭菌：采用高温高压灭菌，灭菌条件为121℃，15min，0.1mpa。即得润肠通便的柚子饮料。
实施例2
(1)原材料选择：选择新鲜成熟的柚子和菊芋，按质量份数比柚子：菊芋＝200：100，去皮打浆；
(2)一阶段发酵：在步骤1的浆液中加酒药、酿酒酵母和水，质量份数比：5：15：1000，28℃静止发酵3天，每天摇匀一次；
(3)二阶段发酵：在步骤2的发酵液中加植物乳杆菌和嗜酸乳杆菌，质量份数比：10：10，37℃静止发酵2天，每隔12小时摇匀一次，所得溶液为组3
(4)三阶段发酵：在步骤3的发酵液中加醋酸杆菌，质量份数为15，30℃静止发酵2天，每6小时摇匀1次；
(5)调配：在步骤4的发酵液中加入白砂糖、低聚果糖、低聚半乳糖，质量份数比：250：120：60，所得溶液为组5。
(6)过滤：将步骤5的发酵液先用120目过滤筛过滤，再用200目过滤筛过滤。
(7)灭菌：采用高温灭菌，灭菌条件为121℃，15分钟。即得润肠通便的柚子饮料。
实施例3
(1)原材料选择：选择新鲜成熟的柚子和菊芋，质量份数比：柚子：菊芋＝200：50，去皮打浆；
(2)一阶段发酵：在步骤1的浆液中加酒药、酿酒酵母和水，质量份数比：3：15：900，28℃静止发酵3天，每天摇匀一次；
(3)二阶段发酵：在步骤2的发酵液中加植物乳杆菌和嗜酸乳杆菌，质量份数比：5：10，37℃静止发酵2天，每隔12小时摇匀一次；
(4)三步发酵：在步骤3的发酵液中加醋酸杆菌，质量份数为10，30℃静止发酵2天，每6小时摇匀1次；
(5)调配：在步骤4的发酵液中加入白砂糖、低聚果糖、低聚半乳糖，质量份数比：220：120：40；
(6)过滤：将步骤5的溶液过滤，先用120目过滤筛过滤，在用200目过滤筛过滤。
(7)灭菌：采用高温灭菌，灭菌条件为121℃，15分钟。即得润肠通便的柚子饮料。
对实施例1～3制备的柚子饮料润肠效果进行检测，结果表明：与空白组比较，麻仁软胶囊组及实例组小鼠首次排黑便时间均缩短，24h内粪便粒数均有提高，24h内各组小鼠排出粪便质量均增加，有显著性差异。
表1不同组别的饮料对小鼠的排便效果的影响
对照例1
具体实施方式同实施例1，区别在于，仅采用酿酒酵母、植物乳杆菌、醋酸杆菌发酵。对照例2
具体实施方式同实施例1，区别在于，仅采用酒药、嗜酸乳杆菌发酵。
对照例3
具体实施方式同实施例1，区别在于，仅采用酒药、植物乳杆菌发酵。
对照例4
具体实施方式同实施例1，区别在于，调整了发酵过程中的接种顺序，具体如下：
(1)二阶段发酵：在步骤2的发酵液中加醋酸杆菌，质量份数为10，30℃静止发酵2天，每6小时摇匀1次；
(2)三阶段发酵：在步骤3的发酵液中加植物乳杆菌和嗜酸乳杆菌，质量份数比为10：5，37℃静止发酵2天，每隔12小时摇匀一次；
与实例组相比，对照组的首次排便缩短1～3min，24h内粪便粒数最高仅106粒，24h内粪便总质量与实施例相比有较大差异。
表2不同组别的食物对小鼠的排便效果的影响
表3不同组别的饮料对体外抗氧化活性的研究
虽然本发明已以较佳实施例公开如上，但其并非用以限定本发明，任何熟悉此技术的人，在不脱离本发明的精神和范围内，都可做各种的改动与修饰，因此本发明的保护范围应该以权利要求书所界定的为准。