本发明属于饲料添加剂
技术领域：
，具体涉及一种含壳寡糖的无抗饲料功能产品、其制备方法及应用。
背景技术：
饲料中抗生素使用超标，造成养殖动物抗生素残留，从而严重威胁人类健康。农业连续3次出台抗生素“限/禁用”相关政策与计划，从四种沙星类药物的取缔到硫酸粘杆菌素的禁用，再到《全国遏制动物源细菌耐药行动计划》，国家政府解决畜牧业抗生素滥用问题的决心已经彰显无疑。因此研究新型的无抗生素高效的绿色添加剂是人们必须要解决的问题。市场上出现许多替抗/代抗饲料产品，鱼龙混杂，参差不齐。目前市场上大多采用单一益生元或者益生菌的方式代替抗生素，但是替抗效果不明显。含有壳寡糖的替抗产品中壳寡糖的制备多采用化学方法降解，通过化学方法降解壳聚糖制备壳寡糖的方法具有污染环境、产物不均一等缺点，间接导致含壳寡糖替抗产品性能不稳定。技术实现要素：针对现有技术中存在的问题，本发明的目的是提供一种不添加抗生素的饲料功能产品，该功能产品可用于替代抗生素发挥维护动物肠道正常环境的功效，进而促进动物生长；绿色安全，无毒副作用。为了达到上述目的，本发明的技术方案为：一种含壳寡糖的无抗饲料功能产品，由壳寡糖、屎肠球菌、丁酸梭菌、葡萄糖氧化酶按照重量比6∶0.8～1.2∶0.8～1.2∶0.8～1.2混合而成。在上述方案的基础上，所述含壳寡糖的无抗饲料功能产品由壳寡糖、屎肠球菌、丁酸梭菌、葡萄糖氧化酶按照重量比6∶1∶1∶1混合而成。在上述方案的基础上，所述壳寡糖为分子量在1000da～1400da之间的壳寡糖粉末，其中壳寡糖的含量≥80％；所述屎肠球菌活菌数为1×109cfu/g；所述丁酸梭菌活菌数为1×109cfu/g；所述葡萄糖氧化酶酶活力3000u/g。所述屎肠球菌购自潍坊康地恩生物科技有限公司，生产批号17071106；所述丁酸梭菌购自潍坊康地恩生物科技有限公司，生产批号17102107；所述葡萄糖氧化酶购自潍坊康地恩生物科技有限公司，生产批号17071105。在上述方案的基础上，所述壳寡糖是壳聚糖经酸解、酶解成1000da～1400da分子量后，经过陶瓷超滤膜、陶瓷纳滤膜浓缩提纯，喷雾干燥成粉。在上述方案的基础上，所述壳寡糖的制备方法为：a、将水与壳聚糖按照8∶1的重量比加入酶解罐，投料完毕后，加入适量浓盐酸溶解，并不断搅拌，溶解24h，得酸解壳聚糖；所述壳聚糖购自青岛云宙生物科技有限公司，生产批号170522；b、向酸解壳聚糖中加入壳聚糖酶，壳聚糖酶的添加量为5ku/kg壳聚糖；酶解温度为60℃，酶解时间为18h；c、酶解完成后，酶解液依次经过陶瓷超滤膜、陶瓷纳滤膜浓缩提纯，经过喷雾干燥器，干燥成粉，即得。在上述方案的基础上，所述含壳寡糖的无抗饲料功能产品的制备方法为：将壳寡糖、屎肠球菌、丁酸梭菌、葡萄糖氧化酶按照6∶0.8～1.2∶0.8～1.2∶0.8～1.2的重量比放入混合机中混合均匀，用纸塑及复合铝箔袋包装，储存温度需小于35℃，储存环境湿度小于60％。上述方法制备的含壳寡糖的无抗饲料功能产品在制备改善动物肠道环境、促进动物生长产品中的应用。一种改善动物肠道环境、促进动物生长的饲料，是在饲料中添加上述方法制备的含壳寡糖的无抗饲料功能产品，添加量为1g/kg。本发明技术方案的优点：本发明含壳寡糖的无抗饲料功能产品中的壳寡糖作为非常好的益生元，是肠道内有益微生物乳酸菌和丁酸梭菌的发酵底物，促进有益微生物的增殖，促进肠道健康。丁酸梭菌内生芽孢，抵抗力强，能够产生丁酸、乳酸、乙酸等，促进肠道有益菌，抑制肠道有害菌的生长；同时丁酸还可以提供能量，修复肠道粘膜，且能在肠道内产生b族维生素、淀粉酶等代谢产物。屎肠球菌作为肠道中的定植菌，抑制有害微生物的生长，且能够在肠道中定点释放，发挥抑菌性能。葡萄糖氧化酶除了消耗氧，产过氧化氢，为有益微生物提供厌氧环境之外，还有着非常好的抑制病原微生物的能力，恢复肠道菌群比例。以上四种功能成分，通过抑菌+耗氧+修复原理，让肠道更健康进而促生长，从而代替肠道抗生素。具体实施方式在本发明中所使用的术语，除非有另外说明，一般具有本领域普通技术人员通常理解的含义。下面结合具体实施例，并参照数据进一步详细的描述本发明。以下实施例只是为了举例说明本发明，而非以任何方式限制本发明的范围。实施例1壳寡糖的制备：a、将水与壳聚糖按照8∶1的重量比加入酶解罐，投料完毕后，加入适量浓盐酸溶解，并不断搅拌，溶解24h，得酸解壳聚糖；所述壳聚糖购自青岛云宙生物科技有限公司，生产批号170522；b、向酸解壳聚糖中加入壳聚糖酶，壳聚糖酶的添加量为5ku/kg壳聚糖；酶解温度为60℃，酶解时间为18h；c、酶解完成后，酶解液依次经过陶瓷超滤膜(25l/min流量，1.0mpa压力循环至清液无色为止)、陶瓷纳滤膜浓缩提纯(50l/min流量，1.0mpa压力循环至清液不流出为止)，经过喷雾干燥器(进风160℃，出风80℃，泵体压力5mpa)，干燥成粉，即得。经检测所得壳寡糖粉末分子量为1200da，壳寡糖含量高达80％、灰分低至1％；不同批次间分子量波动差值在200da以内。实施例2一种含壳寡糖的无抗饲料功能产品，由壳寡糖、屎肠球菌、丁酸梭菌、葡萄糖氧化酶按照重量比6∶0.8∶0.8∶1.2混合而成。所述壳寡糖为分子量在1000da～1400da之间的壳寡糖粉末，其中壳寡糖的含量≥80％；所述屎肠球菌活菌数为1×109cfu/g；所述丁酸梭菌活菌数为1×109cfu/g；所述葡萄糖氧化酶酶活力3000u/g。所述含壳寡糖的无抗饲料功能产品的制备方法，步骤为：将壳寡糖、屎肠球菌、丁酸梭菌、葡萄糖氧化酶按照6∶0.8∶0.8∶1.2的重量比放入混合机中混合均匀，用纸塑及复合铝箔袋包装，储存温度需小于35℃，储存环境湿度小于60％。实施例3一种含壳寡糖的无抗饲料功能产品，由壳寡糖、屎肠球菌、丁酸梭菌、葡萄糖氧化酶按照重量比6∶1∶1∶1混合而成。所述壳寡糖为分子量在1000da～1400da之间的壳寡糖粉末，其中壳寡糖的含量≥80％；所述屎肠球菌活菌数为1×109cfu/g；所述丁酸梭菌活菌数为1×109cfu/g；所述葡萄糖氧化酶酶活力3000u/g。制备方法同实施例2。实施例4一种含壳寡糖的无抗饲料功能产品，由壳寡糖、屎肠球菌、丁酸梭菌、葡萄糖氧化酶按照重量比6∶1.2∶1.2∶0.8混合而成。所述壳寡糖为分子量在1000da～1400da之间的壳寡糖粉末，其中壳寡糖的含量≥80％；所述屎肠球菌活菌数为1×109cfu/g；所述丁酸梭菌活菌数为1×109cfu/g；所述葡萄糖氧化酶酶活力3000u/g。制备方法同实施例2。一、本发明含壳寡糖的无抗饲料功能产品对断奶仔猪生长性能的影响1.1试验分组1.1.1实施例2的无抗饲料功能产品；1.1.2实施例3的无抗饲料功能产品；1.1.3实施例4的无抗饲料功能产品；1.1.4实施例3的不添加壳寡糖的无抗饲料功能产品；1.1.5实施例3的不添加屎肠球菌的无抗饲料功能产品；1.1.6实施例3的不添加丁酸梭菌的无抗饲料功能产品；1.1.7实施例3的不添加葡萄糖氧化酶的无抗饲料功能产品；1.1.8实施例3的用粪肠球菌(购自宜春强微生物科技有限公司)替代屎肠球菌的无抗饲料功能产品；1.1.9抗生素组(不添加无抗饲料功能产品，单硫酸卡那霉素，购自古田福兴医药有限公司)；1.1.10空白对照组(基础日粮中不添加任何添加剂)。1.2试验方法试验选用600头体重相近(7.51±0.15kg)三元(杜×长×大)健康的30日龄断奶仔猪，随机分为10个处理，每处理设6个重复，每个重复10头猪，各处理组间起始体质量差异不显著。仔猪自由采食和饮水，其中，1～8组按照1g/kg的比例在基础日粮中分别添加1.1.1～1.1.8的无抗饲料功能产品，1～3组分别记为实施例2～4组，4～8组分别记为对照组1～5；第9组为抗生素组，按照0.2g/kg的比例在基础日粮中添加单硫酸卡那霉素；第10组基础日粮中不添加任何添加剂，记为空白对照组；试验进行30天。所述断奶仔猪基础日粮与营养水平如表1所示：表1基础日粮与营养水平日粮组成含量，％营养水平含量玉米57.00猪消化能/(mj·kg-1)14.06次粉1.00粗蛋白/％20.34大豆油2.50钙/％0.88大豆粕14.00总磷/％0.64大豆分离蛋白3.60有效磷/％0.46膨化大豆6.00赖氨酸/％1.22玉米蛋白粉3.00蛋氨酸/％0.41进口鱼粉3.00苏氨酸/％0.81乳清粉3.00葡萄糖2.00盐0.30石粉1.00磷酸氢钙1.20酸化剂0.40预混料2.00注：预混料为每kg基础日粮提供fe100mg(feso4)；cu150mg(cuso4·5h2o)；mn20mg(mnso4·h2o)；zn100mg(znso4·h2o)；i0.3mg(ki)；se0.3mg(na2seo3)。1.3试验指标测定1.3.1生长性能测定生长性能指标包括平均日增重、平均日采食量、仔猪腹泻率、仔猪成活率、料重比。其中，平均日增重＝(结束日体重－开始日体重)/试验天数；平均日采食量＝总采食量/(试验天数×头数)；仔猪腹泻率(％)＝(试验期腹泻仔猪头数×腹泻天数)/(试验仔猪头数×试验天数)×100％；仔猪成活率(％)＝仔猪成活数/仔猪总数×100％。料重比＝平均日采食量/平均日增量结果如表2所示，表2本发明含壳寡糖的无抗饲料功能产品对断奶仔猪生长性能的影响由表2可知，与空白对照组比较，实施例2、实施例3、实施例4平均日增重、平均日采食量、成活率显著增加，料重比、腹泻率显著降低；与抗生素组比较，实施例2、实施例3、实施例4平均日增重、平均日采食量、成活率显著增加，腹泻率显著降低；与对照组比较，实施例3平均日增重显著增加，实施例2、实施例3、实施例4成活率显著增加，实施例2、实施例3、实施例4腹泻率显著降低；实施例3与实施例2、实施例4比较，平均日增重、平均日采食量、成活率显著增加，腹泻率显著降低。由上述可知，实施例可以代替抗生素，促进肠道健康，减少腹泻率，提高成活率。1.3.2肠道微生物菌群试验结束后，每组随机选取仔猪5头，打开腹腔，结扎盲肠两端，切下盲肠。在无菌操作台中，准确称取盲肠内容物1g放于盛有99ml灭菌生理盐水的三角瓶中，充分振荡，梯度稀释，吸取0.1ml稀释液接种于选择性培养基上。其中，大肠杆菌用伊红美蓝琼脂培养基37℃培养24h后进行菌落计数；乳酸杆菌用lrs培养基37℃厌氧培养48h后进行菌落计数；双歧杆菌用bs培养基37℃厌氧培养72h后进行菌落计数。肠道菌群数量用肠道内容物中细菌个数的对数表示。结果如表3所示：表3本发明含壳寡糖的无抗饲料功能产品对断奶仔猪肠道菌群的影响大肠杆菌乳酸杆菌双歧杆菌实施例27.98±0.0210.56±0.198.81±0.11实施例37.85±0.1610.72±0.029.00±0.07实施例47.88±0.0310.68±0.228.91±0.12对照组18.03±0.0510.62±0.158.79±0.05对照组28.04±0.0710.61±0.038.74±0.06对照组38.02±0.0510.58±0.018.68±0.04对照组48.05±0.1210.63±0.048.61±0.13对照组58.00±0.1510.63±0.098.80±0.08抗生素组8.00±0.0410.41±0.198.49±0.06空白对照组8.13±0.1310.33±0.088.36±0.09由表3可知，与空白对照组比较，实施例2、实施例3、实施例4大肠杆菌数量显著降低，与抗生素组比较，实施例2、实施例3、实施例4大肠杆菌数量有显著降低；与各对照组比较，实施例2、实施例3、实施例4大肠杆菌数量有显著降低；与空白对照组比较，实施例2、实施例3、实施例4乳酸杆菌数量有显著增加；与抗生素组比较，实施例2、实施例3、实施例4乳酸杆菌数量有显著增加；与各对照组比较，实施例2、实施例3、实施例4乳酸杆菌数量有显著增加；与空白对照组比较，实施例2、实施例3、实施例4双歧杆菌数量有显著增加；与抗生素组比较，实施例2、实施例3、实施例4双歧杆菌数量有显著增加，与各对照组比较，实施例3、实施例4双歧杆菌数量有显著增加；实施例3与实施例2、实施例4比较，大肠杆菌数量有显著降低，乳酸杆菌、双歧杆菌数量有显著增加。由上述可知，实施例能够显著降低大肠杆菌致病菌的含量，同时也能增加有益菌乳酸杆菌和双歧杆菌的数量，利于维持肠道内环境的平衡。以上所述，仅是本发明的较佳实施例而已，并非是对本发明作其它形式的限制，任何熟悉本专业的技术人员可能利用上述揭示的技术内容加以变更或改型为等同变化的等效实施例。但是凡是未脱离本发明技术方案内容，依据本发明的技术实质对以上实施例所作的任何简单修改、等同变化与改型，仍属于本发明技术方案的保护范围。当前第1页12