本发明涉及饲料
技术领域：
，特别涉及一种甲鱼幼鱼饲料及其制备方法。
背景技术：
：甲鱼原名鳖，又叫脚鱼、团鱼、圆鱼、水鱼、清鱼、王八、神守，或称中华鳖、中国鳖。属于爬行纲，龟鳖目，鳖科，鳖属。甲鱼是一种古老的、次生性水生爬行动物，具有重要的营养价值和经济价值。近年来，国内外己经对甲鱼营养与饲料等方面进行较为广泛的研究，但受到养殖饲料成本、品质、安全及疾病等因素的影响，中华整产业的健康发展受到一定制约。近二十年来，随着我国水产养殖业的迅速发展，水产饲料工业飞速发展。与之相适应，对饲料原料的需求量也日益增长，尤其是对鱼粉等优质饲料蛋白源的需要更为突出。水产养殖动物的配合饲料对蛋白质要求较高，而鱼粉因营养丰富、氨基酸组成平衡、未知生长因子含量丰富及适口性佳，一直是水产饲料中不可或缺的优质蛋白源。水产饲料中鱼粉用量通常占配合饲料的10-40%，是其成本中最大的组成部分。随着世界水产动物养殖领域不断扩大，全球对鱼粉的需求量持续增长，但由于气候、捕猎等问题的影响，导致鱼粉求过于供价格上涨。因此，当务之急是寻找廉价而又来源丰宮的鱼粉替代蛋白源。我国植物蛋白源种类多，来源广，包括棉粕、菜粕、豆粕等。但是植物蛋白源纤维素含量较高，导致饲料的适口性降低，从而引起水产动物的采食量下降。同时，植物性蛋白源中存在多种抗营养因子，对水产动物健康生长和生产会产生负面影响。为了提高植物蛋白源替代鱼粉的效果，生产上经常会用各种加工方法开发植物蛋白源，如去皮豆粕、发酵豆粕、膨化豆粕等，改善其适口性，消除抗营养因子。然而植物蛋白源替代后常常会降低甲鱼的摄食和蛋白质的代谢，从而大大影响鱼粉替代效果。因此，需要寻求一种解决植物蛋白源的处理方法，提高蛋白利用率，提高磷的利用率，最大化减少营养物质，尤其是磷的排出，为促进水产养殖业的可持续发展，必须降低对水域环境的污染力以及养殖成本。技术实现要素：本发明的目的之一在于提供一种各原料配比合理，可提高颡鱼幼鱼的免疫机能，具有抗应激作用，能促进甲鱼幼鱼生长，改善肉质，饲料的保质期、利用率和安全性高的甲鱼幼鱼饲料。本发明的目的之二在于提供一种制备方法简单可行，制得的膨化饲料在水中的稳定性好，消化率高，饲料转化率高，降低饲料投资成本，保证养殖水质不被污染的甲鱼幼鱼饲料的制备方法。本发明针对上述技术中提到的问题，采取的技术方案为：一种甲鱼幼鱼饲料，包括以下成分及其重量份：发酵豆粕20-37份、鱼粉5-11份、骨粉8-16份、蚯蚓粉4-8份、贻贝粉4-8份、木薯粉5-15份、薄荷叶粉1-2份、植物油3-7份、柠檬酸0.2-0.4份、植酸酶0.1-0.3份、免疫增强剂0.08-0.2份。上述配合饲料各原料配比合理，可以提高甲鱼幼鱼的免疫机能，具有抗应激作用，能提高甲鱼幼鱼的生长性能、营养物表观消化率、矿质元素的沉积和抗氧化性能，有效阻止脂类过氧化，能抑制甲鱼肌肉的组织微粒体脂质氧化；该饲料中活性磷水平较高，使得营养物质释放为能被鱼体吸收的形式，降低了饵料系数，增加了鱼体对饲料中磷和蛋白质、氨基酸等营养物质的利用率；该饲料进入鱼体中，能够增加淀粉酶、脂肪酶和蛋白酶的活性，提高配合饲料的利用率，促进甲鱼幼鱼的生长。作为优选，免疫增强剂的成分及其重量份为：β-葡聚糖5-20份、果寡糖3-7份、维生素d32.2-3.2份、桉树叶提取物13-17份。该免疫增强剂能刺激甲鱼鱼体免疫功能，能够显著上调甲鱼肝脏中ap1m1基因的表达，小肠、肾脏中mhc-ii基因的表达，以及肾脏和肝脏中的ifp35基因表达，具有免疫调节效应，同时可以调节甲鱼机体的钙、磷平衡，此外，该免疫增强剂还可清除机体自由基发挥抗氧化的作用，可以降低一些炎症因子的表达且在不同组织器官出现不同的结果，具有提高促进甲鱼幼鱼生长性能和生理功能、增强免疫和抗氧化功能和抗感染和解毒能力的效果。一种甲鱼幼鱼饲料的制备方法，包括发酵豆粕制备、桉树叶提取物制备、免疫增强剂制备、饲料制备，其具体步骤为：发酵豆粕制备步骤为：将豆粕加水至含水量为47-55%，再加入蛋氨酸，搅拌均匀后高压灭菌20-30min，冷却室室温后按接种量为8-12%接种复合菌种，复合菌种中干酪乳杆菌:枯草芽孢杆菌:酵母菌的重量比为1:1.2-1.5:0.2-0.5，在27-33℃下发酵3-5d，冷冻干燥，粉碎过200-300目筛，即得发酵豆粕，上述蛋氨酸和复合菌种的重量比为1:300-500，微生物发酵过程中能够降解植酸和寡聚糖，降低豆粕中抗营养因子，使产品具有更好的风味和适口性，显著提高豆粕的利用率和营养价值，同时还能降解豆粕过敏原蛋白，并破坏其原有的过敏原线性表位和构象性表位，从而有效的降低其致敏性，提高甲鱼幼鱼对发酵豆粕的利用率，此外发酵还会产生蛋白酶，使得发酵豆粕蛋白在制备过程中还有进一步被降解为小分子的肽，更易于被甲鱼幼鱼吸收利用；桉树叶提取物制备：将桉树叶干燥后粉碎至40-60目，按料液比为1:6-10（g/ml）加入67-76%的乙醇溶液，其中乙醇溶液含有0.02-0.04mm的β-内酰胺和0.013-0.017mm的氧化三甲胺，在20-30℃的条件下浸提1-2h，再重复浸提一次，抽滤，然后在转速为3000-5000r/min的条件下离心15-25min，上清液干燥得桉树叶提取物，β-内酰胺和氧化三甲胺的加入能够可渗入至桉树叶的纤维结晶区，使纤维素发生产生无限溶胀，使纤维素溶解，进而改变细胞壁的通透性，使内化合物渗透出来，提高桉树叶提取物中月见草素b和鞣花酸的含量，而月见草素b和鞣花酸的存在能够刺激甲鱼幼鱼体内的酶活性，使得未被甲鱼幼鱼吸收消化的β-葡聚糖分解成溶于水的小分子寡糖或原糖，进而被甲鱼幼鱼吸收利用，能够避免过量免疫多糖β-葡聚糖与其他多种化合物结合产生可与dna共价结合或产生氧自由基或肿瘤等毒性代谢产物，进而避免对机体产生不利的影响，提高配合饲料的使用安全性，促进甲鱼幼鱼的生长；上述桉树叶提取物的制备方法简单可行，得到的桉树叶提取物不需要纯化即可使用，其中含有大量的食子酸、月见草素b、英国鞣花酸、鞣花酸、潘石榴苷等桉树叶多酚物质，对具有较强的抗氧化能力，能有有效提升甲鱼幼鱼的机体免疫能力、提高肉质中丝氨酸浓度、改善肉质、提高生产性能等，且能够提高配合饲料的保质期；免疫增强剂制备：按配方量取β-葡聚糖、果寡糖、维生素d3、桉树叶提取物，混合均匀，即得免疫增强剂；饲料制备：按配方量取发酵豆粕、鱼粉、骨粉、蚯蚓粉、贻贝粉、木薯粉、薄荷叶粉、植物油、柠檬酸、植酸酶、免疫增强剂，放入调质器中，通入温度为90-95℃、质量为各组份总质量的10-15%的水蒸气调质6-10min，然后使物料在90-100℃的温度下进入挤压膨化制粒机制粒，在95-103℃条件下将膨化后的饲料颗粒烘干，即得甲鱼幼鱼饲料，该制备方法简单可行，制得的膨化饲料在水中的稳定性好，消化率高，饲料转化率高，既减少了饲料的浪费，降低饲料投资成本，又保证养殖水质不被污染，具有极大的推广价值。作为优选，发酵豆粕制备步骤中蛋氨酸中l-蛋氨酸和d-蛋氨酸的比例为53-65:1。上述蛋氨酸的加入能够刺激过敏原蛋白，使包埋在过敏原蛋白内部的β-伴大豆球蛋白α亚基和大豆球蛋白碱性亚基暴露，进而被微生物代谢出的蛋白酶快速识别并降解形成了小分子多肽，降低发酵豆粕中具有耐胃消化性的β-伴大豆球蛋白α亚基和大豆球蛋白碱性亚基的含量，改变过敏原表位结构，降低发酵豆粕的致敏性，促进甲鱼幼鱼的生长；同时还能够在高压灭菌的条件下，促进豆粕蛋白发生变性并聚集，提高发酵效果，最终提高饲料的利用率。与现有技术相比，本发明的优点在于：1）本发明饲料各原料配比合理，可提高颡鱼幼鱼的免疫机能，具有抗应激作用，能促进甲鱼幼鱼生长，改善肉质，饲料的保质期、利用率和安全性高；2）本发明制备方法简单可行，制得的膨化饲料在水中的稳定性好，消化率高，饲料转化率高，既减少了饲料的浪费，降低饲料投资成本，又保证养殖水质不被污染，具有极大的推广价值；3）该制备方法得到的发酵豆粕的致敏性和抗营养因子低，能够促进甲鱼幼鱼的生长，且含有小分子的肽，具有更好的风味和适口性，更易于被甲鱼幼鱼吸收利用；4）该制备方法得到的免疫增强剂能刺激甲鱼鱼体免疫功能，具有提高促进甲鱼幼鱼生长性能和生理功能、增强免疫和抗氧化功能和抗感染和解毒能力和改善肉质的效果。具体实施方式下面通过实施例对本发明方案作进一步说明：实施例1：一种甲鱼幼鱼饲料，包括以下成分及其重量份：发酵豆粕37份、鱼粉5份、骨粉16份、蚯蚓粉4份、贻贝粉8份、木薯粉5份、薄荷叶粉2份、植物油3份、柠檬酸0.4份、植酸酶0.1份、免疫增强剂0.2份。上述配合饲料各原料配比合理，可以提高甲鱼幼鱼的免疫机能，具有抗应激作用，能提高甲鱼幼鱼的生长性能、营养物表观消化率、矿质元素的沉积和抗氧化性能，有效阻止脂类过氧化，能抑制甲鱼肌肉的组织微粒体脂质氧化；该饲料中活性磷水平较高，使得营养物质释放为能被鱼体吸收的形式，降低了饵料系数，增加了鱼体对饲料中磷和蛋白质、氨基酸等营养物质的利用率；该饲料进入鱼体中，能够增加淀粉酶、脂肪酶和蛋白酶的活性，提高配合饲料的利用率，促进甲鱼幼鱼的生长。免疫增强剂的成分及其重量份为：β-葡聚糖5份、果寡糖7份、维生素d32.2份、桉树叶提取物17份。该免疫增强剂能刺激甲鱼鱼体免疫功能，能够显著上调甲鱼肝脏中ap1m1基因的表达，小肠、肾脏中mhc-ii基因的表达，以及肾脏和肝脏中的ifp35基因表达，具有免疫调节效应，同时可以调节甲鱼机体的钙、磷平衡，此外，该免疫增强剂还可清除机体自由基发挥抗氧化的作用，可以降低一些炎症因子的表达且在不同组织器官出现不同的结果，具有提高促进甲鱼幼鱼生长性能和生理功能、增强免疫和抗氧化功能和抗感染和解毒能力的效果。一种甲鱼幼鱼饲料的制备方法，包括发酵豆粕制备、桉树叶提取物制备、免疫增强剂制备、饲料制备，其具体步骤为：1）发酵豆粕制备：将豆粕加水至含水量为47%，再加入蛋氨酸，搅拌均匀后高压灭菌30min，冷却室室温后按接种量为8%接种复合菌种，复合菌种中干酪乳杆菌:枯草芽孢杆菌:酵母菌的重量比为1:1.5:0.2，在33℃下发酵3d，冷冻干燥，粉碎过300目筛，即得发酵豆粕，上述蛋氨酸和复合菌种的重量比为1:300，微生物发酵过程中能够降解植酸和寡聚糖，降低豆粕中抗营养因子，使产品具有更好的风味和适口性，显著提高豆粕的利用率和营养价值，同时还能降解豆粕过敏原蛋白，并破坏其原有的过敏原线性表位和构象性表位，从而有效的降低其致敏性，提高甲鱼幼鱼对发酵豆粕的利用率，此外发酵还会产生蛋白酶，使得发酵豆粕蛋白在制备过程中还有进一步被降解为小分子的肽，更易于被甲鱼幼鱼吸收利用；2）桉树叶提取物制备：将桉树叶干燥后粉碎至60目，按料液比为1:6（g/ml）加入76%的乙醇溶液，其中乙醇溶液含有0.02mm的β-内酰胺和0.017mm的氧化三甲胺，在20℃的条件下浸提2h，再重复浸提一次，抽滤，然后在转速为3000r/min的条件下离心25min，上清液干燥得桉树叶提取物，β-内酰胺和氧化三甲胺的加入能够可渗入至桉树叶的纤维结晶区，使纤维素发生产生无限溶胀，使纤维素溶解，进而改变细胞壁的通透性，使内化合物渗透出来，提高桉树叶提取物中月见草素b和鞣花酸的含量，而月见草素b和鞣花酸的存在能够刺激甲鱼幼鱼体内的酶活性，使得未被甲鱼幼鱼吸收消化的β-葡聚糖分解成溶于水的小分子寡糖或原糖，进而被甲鱼幼鱼吸收利用，能够避免过量免疫多糖β-葡聚糖与其他多种化合物结合产生可与dna共价结合或产生氧自由基或肿瘤等毒性代谢产物，进而避免对机体产生不利的影响，提高配合饲料的使用安全性，促进甲鱼幼鱼的生长；上述桉树叶提取物的制备方法简单可行，得到的桉树叶提取物不需要纯化即可使用，其中含有大量的食子酸、月见草素b、英国鞣花酸、鞣花酸、潘石榴苷等桉树叶多酚物质，对具有较强的抗氧化能力，能有有效提升甲鱼幼鱼的机体免疫能力、提高肉质中丝氨酸浓度、改善肉质、提高生产性能等，且能够提高配合饲料的保质期；3）免疫增强剂制备：按配方量取β-葡聚糖、果寡糖、维生素d3、桉树叶提取物，混合均匀，即得免疫增强剂；4）饲料制备：按配方量取发酵豆粕、鱼粉、骨粉、蚯蚓粉、贻贝粉、木薯粉、薄荷叶粉、植物油、柠檬酸、植酸酶、免疫增强剂，放入调质器中，通入温度为90℃、质量为各组份总质量的15%的水蒸气调质6min，然后使物料在100℃的温度下进入挤压膨化制粒机制粒，在95℃条件下将膨化后的饲料颗粒烘干，即得甲鱼幼鱼饲料，该制备方法简单可行，制得的膨化饲料在水中的稳定性好，消化率高，饲料转化率高，既减少了饲料的浪费，降低饲料投资成本，又保证养殖水质不被污染，具有极大的推广价值。发酵豆粕制备步骤中蛋氨酸中l-蛋氨酸和d-蛋氨酸的比例为65:1。上述蛋氨酸的加入能够刺激过敏原蛋白，使包埋在过敏原蛋白内部的β-伴大豆球蛋白α亚基和大豆球蛋白碱性亚基暴露，进而被微生物代谢出的蛋白酶快速识别并降解形成了小分子多肽，降低发酵豆粕中具有耐胃消化性的β-伴大豆球蛋白α亚基和大豆球蛋白碱性亚基的含量，改变过敏原表位结构，降低发酵豆粕的致敏性，促进甲鱼幼鱼的生长；同时还能够在高压灭菌的条件下，促进豆粕蛋白发生变性并聚集，提高发酵效果，最终提高饲料的利用率。实施例2：一种甲鱼幼鱼饲料，包括以下成分及其重量份：发酵豆粕30份、鱼粉8份、骨粉12份、蚯蚓粉6份、贻贝粉6份、木薯粉10份、薄荷叶粉1.4份、植物油5份、柠檬酸0.33份、植酸酶0.21份、免疫增强剂0.11份。免疫增强剂的成分及其重量份为：β-葡聚糖14份、果寡糖5份、维生素d32.6份、桉树叶提取物15份。一种甲鱼幼鱼饲料的制备方法，包括发酵豆粕制备、桉树叶提取物制备、免疫增强剂制备、饲料制备，其具体步骤为：1）发酵豆粕制备：将豆粕加水至含水量为50%，再加入蛋氨酸，搅拌均匀后高压灭菌25min，冷却室室温后按接种量为10%接种复合菌种，复合菌种中干酪乳杆菌:枯草芽孢杆菌:酵母菌的重量比为1:1.4:0.4，在30℃下发酵44d，冷冻干燥，粉碎过250目筛，即得发酵豆粕，上述蛋氨酸和复合菌种的重量比为1:400；2）桉树叶提取物制备：将桉树叶干燥后粉碎至50目，按料液比为1:8（g/ml）加入70%的乙醇溶液，其中乙醇溶液含有0.03mm的β-内酰胺和0.015mm的氧化三甲胺，在25℃的条件下浸提1.5h，再重复浸提一次，抽滤，然后在转速为4000r/min的条件下离心20min，上清液干燥得桉树叶提取物；3）免疫增强剂制备：按配方量取β-葡聚糖、果寡糖、维生素d3、桉树叶提取物，混合均匀，即得免疫增强剂；4）饲料制备：按配方量取发酵豆粕、鱼粉、骨粉、蚯蚓粉、贻贝粉、木薯粉、薄荷叶粉、植物油、柠檬酸、植酸酶、免疫增强剂，放入调质器中，通入温度为92℃、质量为各组份总质量的12%的水蒸气调质8min，然后使物料在95℃的温度下进入挤压膨化制粒机制粒，在100℃条件下将膨化后的饲料颗粒烘干，即得甲鱼幼鱼饲料。发酵豆粕制备步骤中蛋氨酸中l-蛋氨酸和d-蛋氨酸的比例为60:1。实施例3：一种甲鱼幼鱼饲料，包括以下成分及其重量份：发酵豆粕30份、鱼粉8份、骨粉12份、蚯蚓粉6份、贻贝粉6份、木薯粉10份、薄荷叶粉1.4份、植物油5份、柠檬酸0.33份、植酸酶0.21份、免疫增强剂0.11份。免疫增强剂的成分及其重量份为：β-葡聚糖14份、果寡糖5份、维生素d32.6份、桉树叶提取物15份。一种甲鱼幼鱼饲料的制备方法，包括发酵豆粕制备、桉树叶提取物制备、免疫增强剂制备、饲料制备，其具体步骤为：1）发酵豆粕制备：将豆粕加水至含水量为50%，再加入蛋氨酸，搅拌均匀后高压灭菌25min，冷却室室温后按接种量为10%接种复合菌种，复合菌种中干酪乳杆菌:枯草芽孢杆菌:酵母菌的重量比为1:1.4:0.4，在30℃下发酵44d，冷冻干燥，粉碎过250目筛，即得发酵豆粕，上述蛋氨酸和复合菌种的重量比为1:400；2）桉树叶提取物制备：将桉树叶干燥后粉碎至50目，按料液比为1:8（g/ml）加入70%的乙醇溶液，其中乙醇溶液含有0.03mm的β-内酰胺和0.015mm的氧化三甲胺，在25℃的条件下浸提1.5h，再重复浸提一次，抽滤，然后在转速为4000r/min的条件下离心20min，上清液干燥得桉树叶提取物；3）免疫增强剂制备：按配方量取β-葡聚糖、果寡糖、维生素d3、桉树叶提取物，混合均匀，即得免疫增强剂；4）饲料制备：按配方量取发酵豆粕、鱼粉、骨粉、蚯蚓粉、贻贝粉、木薯粉、薄荷叶粉、植物油、柠檬酸、植酸酶、免疫增强剂，放入调质器中，通入温度为92℃、质量为各组份总质量的12%的水蒸气调质8min，然后使物料在95℃的温度下进入挤压膨化制粒机制粒，在100℃条件下将膨化后的饲料颗粒烘干，即得甲鱼幼鱼饲料。实施例4：一种甲鱼幼鱼饲料，包括以下成分及其重量份：发酵豆粕30份、鱼粉8份、骨粉12份、蚯蚓粉6份、贻贝粉6份、木薯粉10份、薄荷叶粉1.4份、植物油5份、柠檬酸0.33份、植酸酶0.21份、免疫增强剂0.11份。免疫增强剂的成分及其重量份为：β-葡聚糖14份、果寡糖5份、维生素d32.6份、桉树叶提取物15份。一种甲鱼幼鱼饲料的制备方法，包括发酵豆粕制备、桉树叶提取物制备、免疫增强剂制备、饲料制备，其具体步骤为：1）发酵豆粕制备：将豆粕加水至含水量为50%，再加入蛋氨酸，搅拌均匀后高压灭菌25min，冷却室室温后按接种量为10%接种复合菌种，复合菌种中干酪乳杆菌:枯草芽孢杆菌:酵母菌的重量比为1:1.4:0.4，在30℃下发酵44d，冷冻干燥，粉碎过250目筛，即得发酵豆粕，上述蛋氨酸和复合菌种的重量比为1:400；2）桉树叶提取物制备：将桉树叶干燥后粉碎至50目，按料液比为1:8（g/ml）加入70%的乙醇溶液，在25℃的条件下浸提1.5h，再重复浸提一次，抽滤，然后在转速为4000r/min的条件下离心20min，上清液干燥得桉树叶提取物；3）免疫增强剂制备：按配方量取β-葡聚糖、果寡糖、维生素d3、桉树叶提取物，混合均匀，即得免疫增强剂；4）饲料制备：按配方量取发酵豆粕、鱼粉、骨粉、蚯蚓粉、贻贝粉、木薯粉、薄荷叶粉、植物油、柠檬酸、植酸酶、免疫增强剂，放入调质器中，通入温度为92℃、质量为各组份总质量的12%的水蒸气调质8min，然后使物料在95℃的温度下进入挤压膨化制粒机制粒，在100℃条件下将膨化后的饲料颗粒烘干，即得甲鱼幼鱼饲料。发酵豆粕制备步骤中蛋氨酸中l-蛋氨酸和d-蛋氨酸的比例为60:1。实施例5：甲鱼幼鱼养殖养殖品种：120克左右的甲鱼幼鱼200只，随机分配为五组：网箱1、网箱2、网箱3、网箱4，各组总重相当，每组网箱总放养甲鱼幼鱼50只；养殖条件：环境因素、化学因素和生物因素基本相同的同一水域的网箱；养殖管理：其它条件基本相同，所不同的只是网箱1每天投喂实施例1产品；网箱2每天投喂实施例2产品；网箱3每天投喂实施例3产品；网箱4每天投喂实施例4产品；结果比较：养殖实验持续3个月，然后计算甲鱼的成活只数、成活率和末重，实验结果如表1所示。表1甲鱼幼鱼养殖效果类别成活只数（只）成活率（%）末重（g/尾）网箱14998338.22网箱250100345.47网箱34590260.35网箱44692267.18从表1中可以看出，网箱1、2中甲鱼幼鱼的成活率和末重均高于网箱3、4，说明蛋氨酸的加入能够提高饲料的利用率，促进甲鱼幼鱼的生长；β-内酰胺和氧化三甲胺的加入能够提高配合饲料的使用安全性，促进促进甲鱼幼鱼的生长。本发明的操作步骤中的常规操作为本领域技术人员所熟知，在此不进行赘述。以上所述的实施例对本发明的技术方案进行了详细说明，应理解的是以上所述仅为本发明的具体实施例，并不用于限制本发明，凡在本发明的原则范围内所做的任何修改、补充或类似方式替代等，均应包含在本发明的保护范围之内。当前第1页12