本发明属于饲料发酵
技术领域：
，具体涉及一种断奶仔猪用无抗发酵饲料、其制备方法及应用。
背景技术：
：仔猪水肿病是由溶血性大肠杆菌引起的仔猪的一种急性、高度致死性传染病。该病主要发生于断奶5～15天的仔猪，发病仔猪精神状况差，食欲减退或废绝，喜饮水，眼睑、头部水肿，惊厥寒颤，共济失调、后肢麻痹，病程快，死亡率高达90％以上，严重制约着养猪业的发展，给养殖场造成了巨大的经济损失。断奶应激、营养应激和环境因素是该病发生的主要原因。目前主要的解决方式有：1)采用母去仔留的断奶方式，减少环境变化引起的应激反应；2)在饲料中添加多维、微量元素和氨基酸，提高免疫力；3)抗生素治疗；4)中药治疗。营养物质的添加在一定程度上虽然能够预防水肿病的发生，但是并不能完全防治，营养成分调节可作为一种辅助的防治手段；抗生素的使用能够在短期内取得令人满意的成效，长此以往，病原微生物会对其产生抗药性，不符合的可持续发展战略；中药成分最早是发现用于人体疾病的治疗，动物与人体结构差别较大，动物机体的阴阳平衡、气津转化尚未被揭示，盲目的使用中药组分，也许能获得较好的效果，但也能扰乱动物机体平衡，此外，中药的特殊气味，降低了食物的诱食性，使断奶仔猪采食量减少。技术实现要素：针对现有技术中存在的问题，本发明的目的在于提供一种提高断奶仔猪免疫力、降低仔猪腹泻、防治水肿病发生且不添加抗生素、绿色安全的仔猪饲料，本发明另一个目的在于提供该饲料的制备方法。为了实现上述目的，本发明的技术方案为：一种断奶仔猪用无抗发酵饲料，由以下组分按重量份数组成：玉米粉40～50份、发酵茶籽粕15～25份、全脂奶粉15～25份、菊芋粉2～5份、酵母提取物2～5份、鱼粉2～5份、牡蛎粉0.5～1.5份、上水石粉0.2～1份、复合维生素0.05～0.1份。在上述方案的基础上，所述断奶仔猪用无抗发酵饲料，由以下组分按重量份数组成：玉米粉45份、发酵茶籽粕20份、全脂奶粉20份、菊芋粉3份、酵母提取物3份、鱼粉3份、牡蛎粉1份、上水石粉0.5份、复合维生素0.08份。在上述方案的基础上，所述发酵茶籽的制备方法为：(1)茶籽粕粉碎，过20目筛，高压蒸汽灭菌121℃30min，灭菌完成后，冷却至室温；(2)调节灭菌后茶籽粕粉的含水量90％，向茶籽粕粉中加入生物酶进行酶解处理；(3)向酶解后的茶籽粕粉中加入1.5～2.0％的复合微生物菌剂，32℃，发酵24～36h；(4)发酵完成后，向发酵物中加入总重5％的甘露醇，混合均匀后，真空冷冻干燥成粉末，即得发酵茶籽粕。在上述方案的基础上，所述生物酶酶解处理为：向含水量为90％的茶籽粕粉中加入脂肪酶和中性蛋白酶，其中脂肪酶的添加量为2u/g；中性蛋白酶的添加量为0.5u/g；混合均匀后，ph7.5、40℃条件下处理2.5～4h；再于50℃处理30min；酶解完成后，100℃，处理10min，冷却至室温。在上述方案的基础上，所述复合微生物菌剂，为：粪肠球菌、鼠李糖乳杆菌、凝结芽孢杆菌、青春双歧杆菌按2∶1.5∶2∶1的质量比混合而成。在上述方案的基础上，所述酵母提取物是由酵母细胞壁与酵母内容物按1∶2.5的重量比混合而成。在上述方案的基础上，所述酵母细胞壁的制备方法为：酵母发酵菌液离心收集湿菌体，无菌水清洗2次，加入湿菌体2倍重量的纯化水，超声破壁处理后，35℃孵育30min，离心收集酵母细胞壁，干燥成粉，即得；所述酵母内容物的制备方法为：上述去除酵母细胞壁的上清液冷冻干燥成粉，即得。在上述方案的基础上，酵母发酵菌液为产朊假丝酵母和酿酒酵母1∶1质量比的混合菌液。在上述方案的基础上，所述断奶仔猪用无抗发酵饲料的制备方法，步骤如下：(1)按量取菊芋粉、酵母提取物、鱼粉、牡蛎粉、上水石粉、复合维生素混合均匀后得混合物a；(2)按量取全脂奶粉、发酵茶籽粕和玉米粉混合均匀后得混合物b；(3)将a和b混合均匀后即得。上述方法制备的断奶仔猪用无抗发酵饲料在提高断奶仔猪免疫力、防治断奶仔猪水肿病中的应用。上水石购自滕州市墨滕商贸有限公司，机械磨粉后，过80目筛；菊芋粉购自西安沣禾生物科技有限公司；复合维生素为优补畜禽维生素预混合饲料b223，购自新乡市八牧科技有限公司；脂肪酶购自宁夏夏盛实业集团有限公司，酶活10000u/g；中性蛋白酶购自宁夏夏盛实业集团有限公司，酶活50000u/g；粪肠球菌(enterococcusfaecalis)编号：cicc23658，中国工业微生物菌种保藏管理中心；鼠李糖乳杆菌(lactobacillusrhamnosus)为鼠李糖乳杆菌w27，保藏编号为cgmccno.11387；凝结芽孢杆菌(bacilluscoagulans)编号：cicc21736，中国工业微生物菌种保藏管理中心；青春双歧杆菌bifidobacteriumadolensentiscicc6178，中国工业微生物菌种保藏管理中心；产朊假丝酵母(candidautilis)编号为as2.281，北纳创联生物技术有限公司；酿酒酵母(saccharomycescerevisiae)编号为accc20065，中国农业微生物菌种保藏管理中心。本发明技术方案的优点：本发明的断奶仔猪用无抗发酵饲料能够提高仔猪的生长性能，降低料重比，增加成活率，增强仔猪的消化吸收功能，降低腹泻率，提高成活率，减少水肿病的发生。本发明无抗发酵饲料中的茶籽粕是经酶解后微生物发酵而成，脂肪酶能够降解茶籽粕中残留的油脂成分，中性蛋白酶能够降解大分子蛋白成分，酶解后的茶籽粕更加有利于仔猪的消化吸收；此外经过酶解后的茶籽粕结构疏松，更加利于微生物发酵；复合微生物发酵能够增加茶籽粕中菌体蛋白的含量和有机酸的含量，使发酵后的茶籽粕酸甜适口，此外，复合微生物通过发酵繁殖产生大量的益生菌，经食物进入动物的肠道，能够调节肠道环境的稳定，抑制病原微生物的繁殖，此外，粪肠球菌能够产生天然抗生素，以维持机体健康，抑制病原大肠杆菌的生长。菊芋粉中含有大量的淀粉、菊糖、果糖和水溶性膳食纤维，促进益生菌的生长繁殖，增加胃肠的蠕动，促进毒素和粪便的排出；进一步增强益生菌抑制病原微生物生长的功效。酵母细胞内容物中含有大量的多肽、氨基酸、维生素和微量元素，营养丰富，酵母细胞壁富含β-葡聚糖和甘露聚糖，具有增强免疫、防治疾病、促进生长、缓解应激、吸附霉菌毒素、补充营养等多种生理功能。通常情况下，活性酵母外被坚实的细胞壁结构，内容物难以释放。本发明通过超声破壁技术，使酵母内容物完全释放，并在35℃下孵育，使其内容物在自身生物酶的作用下进行降解，形成已被生物体吸收的小分子活性物质。酵母内容物结合酵母细胞壁组分，起到促进生长，提高免疫力，吸附毒素和有害微生物的作用。上水石又称吸水石，是碳酸钙苔藓植物的化石，其具有天然多孔结构，并含有丰富的微量元素，上水石能够配合酵母细胞壁共同吸附毒素和有害微生物，促进胃肠蠕动，排出毒素。本发明的无抗发酵饲料中各组分间相互配合，相辅相成，共同促进益生菌繁殖，抑制病原微生物生长，吸附毒素和病原微生物，促进胃肠蠕动，加速毒素排出，提高免疫力，从而降低腹泻率，促进生长。具体实施方式在本发明中所使用的术语，除非有另外说明，一般具有本领域普通技术人员通常理解的含义。下面结合具体实施例，并参照数据进一步详细的描述本发明。以下实施例只是为了举例说明本发明，而非以任何方式限制本发明的范围。实施例1茶籽粕的发酵方法，步骤如下：(1)茶籽粕粉碎，过20目筛，高压蒸汽灭菌121℃30min，灭菌完成后，冷却至室温；(2)调节灭菌后茶籽粕粉的含水量90％，向茶籽粕粉中加入脂肪酶和中性蛋白酶，其中脂肪酶的添加量为2u/g；中性蛋白酶的添加量为0.5u/g；混合均匀后，ph7.5、40℃条件下处理2.5～4h；再于50℃处理30min；酶解完成后，100℃，处理10min，冷却至室温；(3)向酶解后的茶籽粕粉中加入1.5～2.0％的复合微生物菌剂，32℃～35℃，发酵24～36h；所述复合微生物菌剂为：粪肠球菌、鼠李糖乳杆菌、凝结芽孢杆菌、青春双歧杆菌按2∶1.5∶2∶1的质量比混合而成。(4)发酵完成后，向发酵物中加入总重5％的甘露醇，混合均匀后，真空冷冻干燥成粉末，即得发酵茶籽粕。所述粪肠球菌活菌数为1×109cfu/g；所述鼠李糖乳杆菌菌活菌数为1×109cfu/g；凝结芽孢杆菌活菌数为1×108cfu/g；青春双歧杆菌活菌数为1×109cfu/g。一、发酵对茶籽粕营养成分的影响试验分组实施例1组：实施例1方法发酵的茶籽粕；对照组1：实施例1未经酶解直接发酵的茶籽粕；对照组2：实施例1仅仅酶解，不经微生物发酵的茶籽粕；空白对照组：茶籽粕粉碎至20目的粉末；测定上述各组茶籽粕中茶皂素、粗蛋白、还原糖、有机质、有机酸、粗纤维的含量如表1所示：表1发酵对茶籽粕营养成分的影响(％)组别实施例1组对照组1对照组2空白对照组茶皂素1.384.057.1610.52粗蛋白20.6517.2713.1212.76还原糖0.981.181.241.48有机质70.1167.5866.8166.53有机酸1.270.840.330.35粗纤维11.4318.4717.8523.16由表1可知，经实施例1的酶解发酵制备的茶籽粕与对照组和空白对照组相比茶皂素的含量显著降低，粗蛋白、有机质、有机酸的含量显著增加，还原糖和粗纤维的含量显著降低。实施例2一种断奶仔猪用无抗发酵饲料，由以下组分按重量份数组成：玉米粉40份、发酵茶籽粕25份、全脂奶粉25份、菊芋粉2份、酵母提取物2份、鱼粉2份、牡蛎粉0.5份、上水石粉0.2份、复合维生素0.05份。所述发酵茶籽粕为实施例1方法制备的发酵茶籽粕；所述酵母提取物的制备方法为：产朊假丝酵母(candidautilis)编号为as2.281，北纳创联生物技术有限公司；酿酒酵母(saccharomycescerevisiae)编号为accc20065，中国农业微生物菌种保藏管理中心；a、将产朊假丝酵母和酿酒酵母分别接种于液体发酵培养基，30～35℃培养3d，分别离心收集产朊假丝酵母和酿酒酵母的湿菌体，并按1∶1的质量比混合；所述液体发酵培养基为：葡萄糖40g/l、蛋白胨10g/l、kh2po42g/l、mgso4·7h2o0.3g/l，加水定容至1l；121℃、高压蒸汽灭菌15min；b、向混合湿菌体中加无菌水清洗2次，加入湿菌体2倍重量的纯化水，超声破壁处理，超声功率500～600w，10～15min，辐射10s；将超声破壁处理后的液体于35℃孵育30min，离心收集酵母细胞壁，干燥成粉得酵母细胞壁；上清液冷冻干燥成粉，得酵母内容物。c、酵母细胞壁与酵母内容物按1∶2.5的重量比混合得所述酵母提取物。所述断奶仔猪用无抗发酵饲料的制备方法，步骤如下：(1)按量取菊芋粉、酵母提取物、鱼粉、牡蛎粉、上水石粉、复合维生素混合均匀后得混合物a；(2)按量取全脂奶粉、发酵茶籽粕和玉米粉混合均匀后得混合物b；(3)将a和b混合均匀后即得。实施例3一种断奶仔猪用无抗发酵饲料，由以下组分按重量份数组成：玉米粉45份、发酵茶籽粕20份、全脂奶粉20份、菊芋粉3份、酵母提取物3份、鱼粉3份、牡蛎粉1份、上水石粉0.5份、复合维生素0.08份。所述发酵茶籽粕为实施例1方法制备的发酵茶籽粕；所述酵母提取物同实施例2；所述断奶仔猪用无抗发酵饲料的制备方法同实施例2。实施例4一种断奶仔猪用无抗发酵饲料，由以下组分按重量份数组成：玉米粉50份、发酵茶籽粕15份、全脂奶粉15份、菊芋粉5份、酵母提取物5份、鱼粉5份、牡蛎粉1.5份、上水石粉1份、复合维生素0.1份。所述发酵茶籽粕为实施例1方法制备的发酵茶籽粕；所述酵母提取物同实施例2；所述断奶仔猪用无抗发酵饲料的制备方法同实施例2。对比例1一种断奶仔猪用无抗发酵饲料，由以下组分按重量份数组成：玉米粉45份、发酵茶籽粕20份、全脂奶粉20份、菊芋粉3份、酵母提取物3份、鱼粉3份、牡蛎粉1份、复合维生素0.08份。所述发酵茶籽粕为实施例1方法制备的发酵茶籽粕；所述酵母提取物同实施例2；所述断奶仔猪用无抗发酵饲料的制备方法同实施例2。对比例2一种断奶仔猪用无抗发酵饲料，由以下组分按重量份数组成：玉米粉45份、发酵茶籽粕20份、全脂奶粉20份、菊芋粉3份、酵母提取物3份、鱼粉3份、牡蛎粉1份、上水石粉0.5份、复合维生素0.08份。所述发酵茶籽粕为实施例1方法制备的发酵茶籽粕；所述酵母提取物为实施例2中单一酿酒酵母提取物；所述断奶仔猪用无抗发酵饲料的制备方法同实施例2。对比例3一种断奶仔猪用无抗发酵饲料，由以下组分按重量份数组成：玉米粉45份、发酵茶籽粕20份、全脂奶粉20份、菊芋粉3份、酵母3份、鱼粉3份、牡蛎粉1份、上水石粉0.5份、复合维生素0.08份。所述发酵茶籽粕为实施例1方法制备的发酵茶籽粕；所述酵母为酿酒酵母与产朊假丝酵母的湿菌体按1∶1质量比混合后干燥而成的酵母粉；所述断奶仔猪用无抗发酵饲料的制备方法同实施例2。二、无抗发酵饲料对断奶仔猪生长性能的影响试验分组实施例2～4和对比例1～3组；试验方法选用140头28日龄健康且体重接近的“杜×长×大”断奶仔猪，随机分成7组，每组4个重复，每个重复5头猪，其中：1～3组分别饲喂实施例1～3的无抗发酵饲料，第4～6组分别饲喂对比例1～3组的无抗发酵饲料；第7组饲喂常规断奶仔猪日粮(表2)，记为空白对照组。试验期30d，分别在试验开始和结束时称量猪的体重，试验全程采用盲测。试验全期采用栏养方式饲养，日喂3～4次。每天上午07:00清理料槽，统计采食量，自由饮水，上午和下午各清理1次圈舍。每日记录温度和湿度。日常管理及免疫程序按照常规进行。表2基础日粮原料组成及营养成分项目含量原料组成，％膨化玉米38.5碎米13.7膨化大豆10.0大豆粕10.8鱼粉8.3乳清粉12.7蔗糖2.0预混料①4.0营养指标干物质，％89.11消化能，mj/kg13.92粗蛋白，％19.66钙，％0.80总磷，％0.69有效磷，％0.51赖氨酸，％1.46蛋氨酸+胱氨酸，％0.72注：①预混料为每千克日粮提供：维生素a250000iu，维生素d31600iu，维生素e48.3mg，维生素k346.6mg，维生素b67.5mg，烟酸42mg，泛酸10mg，铁150mg，锌160mg，铜10mg，锰70mg。测定料重比、仔猪腹泻率、仔猪成活率、水肿病病害率结果如表3所示：表3无抗发酵饲料对断奶仔猪生长性能的影响组别平均日增重，g料重比腹泻率，％成活率，％水肿病病害率，％实施例2411.851.621.04955实施例3417.631.600.621000实施例4413.571.620.98950对比例1410.761.641.47955对比例2402.351.651.94955对比例3394.711.663.719010空白对照组347.661.706.458020由表3可知，实施例2～4组的仔猪平均日增重显著高于其他各组，料重比、腹泻率和水肿病害率显著低于其他各组，成活率也显著高于其他各组，由此可知，本发明的无抗发酵饲料能够显著增加仔猪的生长性能，降低水肿病害的发生，提高成活率。以上实施例仅用以说明本发明的技术方案，而非对其进行限制；尽管参照前述实施例对本发明进行了详细的说明，对于本领域的普通技术人员来说，依然可以对前述实施例所记载的技术方案进行修改，或者对其中部分技术特征进行等同替换；而这些修改或替换，并不使相应技术方案的本质脱离本发明所要求保护的技术方案的精神和范围。当前第1页12