一种具有降血糖作用的发酵柚皮口含片及其制备方法与流程

本发明属于食品加工技术领域，具体涉及一种具有降血糖作用的发酵柚皮口含片及其制备方法。

背景技术：

与过去农产品副产物处理不当的情况相反，今天的农作物副产品的最小化、回收和再利用的概念正受到广泛关注。在国内，甘蔗渣、麸皮、果皮、种子等农业或食品工业副产品的数量逐渐增加。在过去的十年中，柑橘属水果加工业的残渣产量呈迅速增长的趋势，这主要是由于柑橘属植物种植业和饮料加工业的快速发展。2016年，国内种植柚子面积约为105640公顷，柚子水果产量约为4800000吨，其中30-40％为柚子皮，并且柚子类食品加工业产生的废弃物量在最初水果的49-69％之间。而这些副产物(果皮、种子、残渣等)富含功效因子(多酚、黄酮、柠檬烯类成分等)、纤维素、半纤维素和木质素等膳食纤维多糖，国内外研究发现，富含多酚、黄酮、膳食纤维的膳食能够改善胃肠道健康、抗氧化、延缓衰老、预防癌症、心脏病、中风、肥胖及其相关并发症的发生。因此，将“废物”转化为“黄金”或“健康有益产品”已成为趋势，且近年来富含抗氧化剂酚类化合物的原料已经广泛应用于食品、化妆品和医药行业。

技术实现要素：

有鉴于此，本发明的目的之一在于提供一种具有降血糖作用的发酵柚皮口含片；目的之二在于提供一种具有降血糖作用的发酵柚皮口含片的制备方法。

为达到上述目的，本发明提供如下技术方案：

1、一种具有降血糖作用的发酵柚皮口含片，按重量份计，所述口含片包括如下组分：发酵柚皮40-60份，生姜、山银花和花椒叶混合物浸膏1-7份，佛手5-15份，拐枣5-15份，淀粉5-10份，甘露醇2-5份；所述发酵柚皮由酵母菌、黑曲霉和棘孢曲霉对柚皮进行联合固态发酵而得。

优选的，按重量份计，所述口含片包括如下组分：发酵柚皮58.75份，生姜、山银花和花椒叶混合物浸膏6.25份，佛手10份，拐枣10份，淀粉10份，甘露醇5份。

优选的，所述发酵柚皮的制备方法如下：首选按1ml/100g柚皮的用量取有效活菌数为5×10⁵-6×10⁸个/ml的酵母菌悬浮液，按1ml/100g柚皮的用量取有效活菌数为1.5×10⁶-3.6×10⁸个/ml的黑曲霉孢子悬浮液，按1.5ml/100g柚皮的用量取有效活菌数为1.2×10⁶-3.7×10⁸个/ml的棘孢曲霉孢子悬浮液，然后将三种菌液混匀后均匀喷洒于水分含量为12-28％的柚皮内层瓤表面，最后在湿度为75-80％，温度为28-32℃的条件下发酵32-40h，即可。

优选的，首选按1ml/100g柚皮的用量取有效活菌数为5.5×10⁷个/ml的酵母菌悬浮液，按1ml/100g柚皮的用量取有效活菌数为2.7×10⁷个/ml的黑曲霉孢子悬浮液，按1.5ml/100g柚皮的用量取有效活菌数为5.8×10⁷个/ml的棘孢曲霉孢子悬浮液，然后将三种菌液混匀后均匀喷洒于水分含量为26％的柚皮内层瓤表面，最后在湿度为78％，温度为28℃的条件下发酵38h，即可。

优选的，所述生姜、山银花和花椒叶混合物浸膏的制备方法如下：将生姜、山银花和花椒叶按重量比10:2:1混合后粉碎获得混合物，向所述混合物中加入25-35倍重量的水，然后在超声功率为100-200w，温度为75-95℃的条件下超声35-45min，最后经浓缩制得生姜、山银花和花椒叶混合物浸膏。

优选的，所述浓缩后，1g浸膏相当于2.0-4.0g生药。

2、所述的一种具有降血糖作用的发酵柚皮口含片的制备方法，所述方法如下：首先将发酵柚皮粉碎获得发酵柚皮粉，然后将所述发酵柚皮粉与生姜、山银花和花椒叶混合物浸膏，佛手，拐枣，淀粉和甘露醇混匀后直接压片，即可。

本发明的有益效果在于：本发明提供了一种具有降血糖作用的发酵柚皮口含片及其制备方法，该口含片中的发酵柚皮由酵母菌、黑曲霉和棘孢曲霉对柚皮进行联合固态发酵而得，通过联合固态发酵，可以有效提高柚皮精油保留率、释放更多的柚皮苷并防止其降解，同时还可以提高可溶性膳食纤维、香气成分、多酚及还原糖等活性成分的含量，防止柚皮中原有的生物活性成分的降解，溶出的可溶性膳食纤维和柚皮苷能够较好地调节血糖。另外，将生姜、山银花和花椒叶混合后制备浸膏，三种原料混合粉碎后进行超声辅助加热提取，能够使其中的活性成分充分释放，如多糖、姜酚、姜醇、绿原酸、槲皮苷和金丝桃苷等，这些成分在高温提取的过程中更易形成稳定的复合物或者糖苷等，更好的发挥协同降糖作用。“精油、柚皮苷和大分子果胶和多糖”(来自于发酵柚皮)、“姜酚、姜醇和复合物糖苷”(来自于混合物浸膏)、“柠檬烯、萜类化合物、佛手黄酮”(来自于佛手)、“三萜皂苷、活性多糖和生物碱”(来自于拐枣)具有协同作用，提高终产品的降低血糖作用，以致最终制备的口含片具有明显的降血糖的作用。该口含片清新爽口，富含柚皮功效成分，营养丰富，具有明显的降血糖效果且无毒副作用。其制作方法简单，绿色环保，有利于食品工业上的推广使用。

本发明的其他优点、目标和特征在某种程度上将在随后的说明书中进行阐述，并且在某种程度上，基于对下文的考察研究对本领域技术人员而言将是显而易见的，或者可以从本发明的实践中得到教导。本发明的目标和其他优点可以通过下面的说明书来实现和获得。

附图说明

为了使本发明的目的、技术方案和优点更加清楚，下面将结合附图对本发明作优选的详细描述，其中：

图1为实施例4中酵母菌发酵柚皮、黑曲霉发酵柚皮、棘孢曲霉发酵柚皮、实施例1中制备的发酵柚皮及未发酵水分含量为26％的柚皮中的可溶性膳食纤维、还原糖、柚皮苷的含量测试结果图。

具体实施方式

以下通过特定的具体实例说明本发明的实施方式，本领域技术人员可由本说明书所揭露的内容轻易地了解本发明的其他优点与功效。本发明还可以通过另外不同的具体实施方式加以实施或应用，本说明书中的各项细节也可以基于不同观点与应用，在没有背离本发明的精神下进行各种修饰或改变。

实施例1

一种具有降血糖作用的发酵柚皮口含片，按重量份计，该口含片包括如下组分：发酵柚皮58.75份，生姜、山银花和花椒叶混合物浸膏6.25份，佛手10份，拐枣10份，淀粉10份，甘露醇5份。

该口含片按如下方法制备：首先将发酵柚皮在4℃下粉碎获得发酵柚皮粉，然后将所述发酵柚皮粉与生姜、山银花和花椒叶混合物浸膏，佛手，拐枣，淀粉和甘露醇混匀后直接压片，片重0.5克/片，即可。

其中，发酵柚皮的制备方法如下：首选按1ml/100g柚皮的用量取有效活菌数为5.5×10⁷个/ml的酵母菌悬浮液，按1ml/100g柚皮的用量取有效活菌数为2.7×10⁷个/ml的黑曲霉孢子悬浮液，按1.5ml/100g柚皮的用量取有效活菌数为5.8×10⁷个/ml的棘孢曲霉孢子悬浮液，然后将三种菌液混匀后均匀喷洒于水分含量为26％的柚皮内层瓤表面，最后在湿度为78％，温度为28℃的条件下发酵38h，即可。

生姜、山银花和花椒叶混合物浸膏的制备方法如下：将生姜、山银花和花椒叶按重量比10:2:1混合后在4℃下粉碎获得混合物，向所述混合物中加入25倍重量的水，然后在超声功率为160w，温度为85℃的条件下超声40min，最后经浓缩至1g浸膏相当于2.0g生药时，制得生姜、山银花和花椒叶混合物浸膏。

实施例2

一种具有降血糖作用的发酵柚皮口含片，按重量份计，该口含片包括如下组分：发酵柚皮50份，生姜、山银花和花椒叶混合物浸膏7份，佛手5份，拐枣5份，淀粉10份，甘露醇5份。

该口含片按如下方法制备：首先将发酵柚皮在4℃下粉碎获得发酵柚皮粉，然后将所述发酵柚皮粉与生姜、山银花和花椒叶混合物浸膏，佛手，拐枣，淀粉和甘露醇混匀后直接压片，片重0.5克/片，即可。

其中，发酵柚皮的制备方法如下：首选按1ml/100g柚皮的用量取有效活菌数为5×10⁵个/ml的酵母菌悬浮液，按1ml/100g柚皮的用量取有效活菌数为1.5×10⁶个/ml的黑曲霉孢子悬浮液，按1.5ml/100g柚皮的用量取有效活菌数为1.2×10⁶个/ml的棘孢曲霉孢子悬浮液，然后将三种菌液混匀后均匀喷洒于水分含量为12％的柚皮内层瓤表面，最后在湿度为75％，温度为30℃的条件下发酵32h，即可。

生姜、山银花和花椒叶混合物浸膏的制备方法如下：将生姜、山银花和花椒叶按重量比10:2:1混合后在4℃下粉碎获得混合物，向所述混合物中加入30倍重量的水，然后在超声功率为100w，温度为95℃的条件下超声45min，最后经浓缩至1g浸膏相当于4.0g生药时，制得生姜、山银花和花椒叶混合物浸膏。

实施例3

一种具有降血糖作用的发酵柚皮口含片，按重量份计，该口含片包括如下组分：发酵柚皮40份，生姜、山银花和花椒叶混合物浸膏1份，佛手15份，拐枣15份，淀粉5份，甘露醇2份。

该口含片按如下方法制备：首先将发酵柚皮在4℃下粉碎获得发酵柚皮粉，然后将所述发酵柚皮粉与生姜、山银花和花椒叶混合物浸膏，佛手，拐枣，淀粉和甘露醇混匀后直接压片，片重0.5克/片，即可。

其中，发酵柚皮的制备方法如下：首选按1ml/100g柚皮的用量取有效活菌数为6×10⁸个/ml的酵母菌悬浮液，按1ml/100g柚皮的用量取有效活菌数为3.6×10⁸个/ml的黑曲霉孢子悬浮液，按1.5ml/100g柚皮的用量取有效活菌数为3.7×10⁸个/ml的棘孢曲霉孢子悬浮液，然后将三种菌液混匀后均匀喷洒于水分含量为28％的柚皮内层瓤表面，最后在湿度为80％，温度为32℃的条件下发酵40h，即可。

生姜、山银花和花椒叶混合物浸膏的制备方法如下：将生姜、山银花和花椒叶按重量比10:2:1混合后在4℃下粉碎获得混合物，向所述混合物中加入35倍重量的水，然后在超声功率为200w，温度为75℃的条件下超声35min，最后经浓缩至1g浸膏相当于3.0g生药时，制得生姜、山银花和花椒叶混合物浸膏。

实施例4

按1ml/100g柚皮的用量取有效活菌数为5.5×10⁷个/ml的酵母菌悬浮液，均匀喷洒于水分含量为26％的柚皮内层瓤表面，在湿度为78％，温度为28℃的条件下发酵38h，制得酵母菌发酵柚皮。

按1ml/100g柚皮的用量取有效活菌数为2.7×10⁷个/ml的黑曲霉孢子悬浮液，均匀喷洒于水分含量为26％的柚皮内层瓤表面，在湿度为78％，温度为28℃的条件下发酵38h，制得黑曲霉发酵柚皮。

按1.5ml/100g柚皮的用量取有效活菌数为5.8×10⁷个/ml的棘孢曲霉孢子悬浮液，均匀喷洒于水分含量为26％的柚皮内层瓤表面，在湿度为78％，温度为28℃的条件下发酵38h，制得棘孢曲霉发酵柚皮。

然后分别测试上述制备的酵母菌发酵柚皮、黑曲霉发酵柚皮、棘孢曲霉发酵柚皮、实施例1中制备的发酵柚皮及未发酵水分含量为26％的柚皮中的可溶性膳食纤维、还原糖、柚皮苷的含量，测试结果如图1所示，由图1可知，柚皮经酵母菌、黑曲霉和棘孢曲霉联合固态发酵后，其可溶性膳食纤维、还原糖和柚皮苷含量均显著增加；酵母菌发酵效果很差，基本未增加柚皮中可溶性膳食纤维、还原糖和柚皮苷含量；黑曲霉或棘孢曲霉发酵是生产柚苷酶的有效方法，会显著降低柚皮中柚皮苷的含量，使柚皮的功效大打折扣。因为采用酵母菌、黑曲霉和棘孢曲霉联合固态发酵，酵母菌的快速繁殖和发酵，会限制和抑制黑曲霉和棘孢曲霉产生的柚苷酶对柚皮苷的分解作用，同时黑曲霉和棘孢曲霉产生的纤维素酶会使柚皮中的纤维素降解，给酵母菌发酵提供丰富的培养养料，二者相互促进，另外，柚皮由两部分组成：外皮层(外层为绿色)和内层瓤(白色)，其中内层瓤质地松软，具有网状孔隙结构，充分利用柚皮内层瓤的强烈吸附特性，酵母菌、黑曲霉和棘孢曲霉不但吸附在内层瓤表面，而且会吸附到内层瓤的网状孔隙之中，从而提高发酵效率。

实施例5

58.75份水分含量为26％的柚皮，6.25份生姜、山银花和花椒叶混合物浸膏，10份佛手，10份拐枣，10份淀粉和5份甘露醇混匀后直接压片，片重0.5克/片，制得含未发酵柚皮的口含片。

6.25份生姜、山银花和花椒叶混合物浸膏，10份佛手，10份拐枣，10份淀粉和5份甘露醇混匀后直接压片，片重0.5克/片，制得不含柚皮的口含片。

140只小鼠禁食14h后，首先随机取其中120只，每只按200mg/kgbw·d的注射量腹腔注射四氧嘧啶，作为实验组；剩下20只每只按200mg/kgbw·d的注射量腹腔注射生理盐水，作为空白对照组。造模3d后，实验组中各小鼠禁食12h后测空腹血糖，血糖值≥11.1mmol/l即为造模成功。将造模成功后的实验组中各小鼠随机分为6组，每组20只，其中第1组中各小鼠每只按500mg/kgbw·d的灌喂量灌喂消渴丸，作为模型药物组；第2组中各小鼠每只按200mg/kgbw·d的灌喂量灌喂实施例1中制备的柚皮口含片，作为含发酵柚皮口含片低剂量组；第3组中各小鼠每只按500mg/kgbw·d的灌喂量灌喂实施例1中制备的柚皮口含片，作为含发酵柚皮口含片高剂量组；第4组中各小鼠每只按500mg/kgbw·d的灌喂量灌喂含未发酵柚皮的口含片，作为含未发酵柚皮的口含片组；第5组中各小鼠每只按500mg/kgbw·d的灌喂量灌喂不含柚皮的口含片，作为不含柚皮的口含片组；第6组中各小鼠每只按500mg/kgbw·d的灌喂量灌喂生理盐水，作为模型对照组；空白对照组中各小鼠每只按500mg/kgbw·d的灌喂量灌喂生理盐水。各组处理后按照常规方式饲养，饲养期间自由饮水和进食，到第28天，各组小鼠禁食10h，均摘除眼球取血，分离血清，采用快速试剂盒测定血糖、总胆固醇、甘油三酯、血清谷胱甘肽过氧化物酶和血清超氧化物歧化酶各项指标，测试结果见表1。

表1

注：ns表示与模型药物组相比差异不显著(p＞0.05)，*表示与模型药物组相比差异显著(p＜0.05)。

由表1可知，所有糖尿病模型小鼠的血糖水平都明显高于空白对照组。含未发酵柚皮的口含片组和不含柚皮的口含片组的小鼠血糖水平与模型对照组接近，含未发酵柚皮的口含片组表现出一定的降低血糖作用，但是效果不佳；含发酵柚皮口含片低剂量组和含发酵柚皮口含片高剂量组的小鼠血糖水平与模型药物组接近，与模型药物组相比没有显著性差异，并且高剂量组效果更佳。

与模型对照组相比，含发酵柚皮口含片低剂量组和含发酵柚皮口含片高剂量组小鼠的总胆固醇和甘油三酯水平明显降低，与模型药物组小鼠的总胆固醇和甘油三酯水平接近。固态发酵口柚皮含片口低剂量组和高剂量组的血清谷胱甘肽过氧化物酶和血清超氧化物歧化酶活性显著提高。

含发酵柚皮口含片低剂量组和含发酵柚皮口含片高剂量组小鼠的血清谷胱甘肽过氧化物酶和血清超氧化物歧化酶活性与空白对照组相比没有显著差异，含发酵柚皮口含片高剂量组对血清谷胱甘肽过氧化物酶和超氧化物歧化酶活性增强效果优于模型药物组。

以上结果说明含有由酵母菌、黑曲霉和棘孢曲霉联合固态发酵柚皮的口含片对糖尿病模型小鼠血糖水平有明显的降低作用，同时能够明显调节血清脂质过氧化水平和血清抗氧化状态，这主要归因于酵母菌、黑曲霉和棘孢曲霉联合固态发酵作用，柚皮经过酵母菌、黑曲霉和棘孢曲霉联合固态发酵后，提高了可溶性膳食纤维、还原糖、柚皮苷的含量，其中溶出的可溶性膳食纤维和柚皮苷能够较好地调节血糖。

实施例6

试验糖尿病患者30例，其中男性18人，女性12人，平均年龄48岁，随机均分为a、b两组，每组15人，a、b组均服用盐酸二甲双胍片，每次0.25g，3次/日；但b组同时服用实施例1制备的柚皮口含片，每次5粒，3次/日。b组糖尿病患者连续服用口含片30天后停用，再观察20天。分别在服用口含片前1天、服用口含片后第30天、服用口含片后第50天进行抽血分析，测定空腹血糖水平。结果用平均值±标准差表示，应用t检验的统计方法对结果进行分析，p＜0.05表示差异显著。两组患者空腹血糖(mmol/l)检测结果见表2。

表2

注：*表示与服用前比较差异显著(p＜0.05)。

由表2可知，糖尿病人在服用其它降糖药物的情况下，还服用本发明降低血糖的柚皮口含片，降糖效果更好、更稳定。

最后说明的是，以上实施例仅用以说明本发明的技术方案而非限制，尽管参照较佳实施例对本发明进行了详细说明，本领域的普通技术人员应当理解，可以对本发明的技术方案进行修改或者等同替换，而不脱离本技术方案的宗旨和范围，其均应涵盖在本发明的权利要求范围当中。