一种羊水蛋白粉及其制备方法和应用与流程

本发明属于食品加工技术领域，尤其涉及一种羊水蛋白粉及其制备方法和应用。

背景技术：

羊水是指胚胎发育过程中位于羊膜腔内的液体，是胚胎发育过程中维持胚胎生命不可或缺的重要成分，许多生命代谢活动都需要通过羊水进行，越来越多的证据表明羊水含有丰富的营养。

从禽胚孵化第13d开始，胚胎逐渐吸收羊水，当胚胎发育成熟时(约18d)，羊水几乎全部被吸收掉，在此期间，胚胎能通过吞咽羊水来摄取其中的活性因子、抗菌物质合成前体、氨基酸，葡萄糖及其他可溶性营养物质，来支持和促进自身的生长发育和肠道成熟。此外，羊水中含有免疫球蛋白(150kda-200kda)和β2-微球蛋白(包含母源抗体)还可以提高机体免疫力，增强机体自身抵抗力。

羊水中含有大量优质蛋白，长期食用有利健康。但羊水自身的形态及其腥味极大限制了其食用性和市场可接受度，这使羊水还未在食品保健中得到应用和发展。且羊水中含有大量水分，不利于食品的加工、保存及食用，普通的高温蒸发容易造成羊水成分的热分解及活性物质的失活。因此，解决羊水脱腥、改变其食用形态及保存其营养物质的生物活性是开发羊水蛋白粉的关键所在。

技术实现要素：

本发明的目的就在于为了解决上述问题，提供了一种羊水蛋白粉及其制备方法和应用。

本发明通过以下技术方案来实现上述目的：

本发明提供了一种羊水蛋白粉，按重量计，包括羊水、辅料、调味料和包埋剂。

作为本发明进一步的优化方案，所述辅料为水溶性纤维、抗性淀粉和酵母提取物中的一种或多种混合物。所述辅料中的水溶性蛋白、抗性淀粉和/或酵母提取物可以与羊水中的可溶性蛋白协同调节肠道菌群，改善肠道健康。

作为本发明进一步的优化方案，所述调味料为牛奶、食用玫瑰精油和木糖醇中的一种或多种混合物，添加牛奶、玫瑰精油和木糖醇等可赋予羊水蛋白粉香味，以缓解羊水自身腥味，更容易被消费者接受。

作为本发明进一步的优化方案，所述包埋剂为海藻酸钠、明胶和多孔淀粉中的一种或多种混合物，利用微胶囊包埋技术，通过海藻酸钠、明胶和多孔淀粉等壁材将羊水液中的蛋白等营养物质包埋，可形成一个稳定的微胶囊乳液体系，避免蛋白在胃中丧失活性。

作为本发明进一步的优化方案，所述羊水为鸟类羊水，例如鸡、鸭、鹅、鹌鹑等鸟类种中的一种或多种羊水混合物，但不限于此。

本发明还提供了上述羊水蛋白粉的制备方法，包括以下步骤：

(1)将羊水离心，取上清液，利用孔径大小为200kda分子量的滤膜对大分子活性蛋白进行富集浓缩，得过滤液，再利用孔径大小为5kda分子量的滤膜去除水、小分子盐、矿物质和脂类物质，得保留液；

(2)在步骤(1)的保留液中添加辅料和调味料，搅拌均匀后得预混液；

(3)微胶囊包埋：在步骤(2)的预混液中添加包埋剂进行包埋，得微胶囊乳液；

(4)冷冻干燥：将步骤(3)的微胶囊乳液冷冻干燥成粉末，获得所述羊水蛋白粉。

作为本发明进一步的优化方案，所述步骤(1)中，羊水离心的条件为4℃下10000-12000rpm/min离心5-15min。

作为本发明进一步的优化方案，所述步骤(2)中，辅料为质量百分比为1％-2％水溶性纤维、1％-1.5％抗性淀粉和2％-4％酵母提取物中的一种或多种混合物；调味料为5％-10％牛奶、1％-5％玫瑰精油和2％-4％木糖醇中的一种或多种混合物；所述步骤(3)中，包埋剂为0.1％-0.5％海藻酸钠、0.1％-0.3％明胶、0.5％-1.5％多孔淀粉中的一种或多种混合物。

作为本发明进一步的优化方案，所述步骤(3)中，包埋的方法为70-120mpa下高压均质1-3min，获得微胶囊乳液。

本发明还提供了上述羊水蛋白粉在作为提高生物体体质的功能食品中的应用。

本发明的有益效果在于：本发明提供了一种羊水蛋白粉及其制备方法和应用，本发明的羊水蛋白粉营养价值高、易于溶解，能够增强机体免疫力。本发明通过结合超滤、微胶囊包埋、冷冻干燥等多种工艺协同作用，脱除了羊水液中腥味物质，并利用天然香味物质使其产生浓郁的香味，进一步掩盖了羊水液中残留的腥味，彻底解决了羊水液的脱腥问题；利用分段式纯化技术，充分保留并浓缩了羊水中重要的营养物质；利用微胶囊包埋技术避免活性蛋白在运输、储存过程中丧失活性，延长了产品的货架期，拓展了羊水在食品工业中的应用。

附图说明

图1是羊水蛋白粉促进大鼠回肠段肠道微生物多样性检测结果。

具体实施方式

下面结合附图对本申请作进一步详细描述，有必要在此指出的是，以下具体实施方式只用于对本申请进行进一步的说明，不能理解为对本申请保护范围的限制，该领域的技术人员可以根据上述申请内容对本申请作出一些非本质的改进和调整。

实施例1

本实施例提供了一种鸟类羊水蛋白粉的制备方法，所述的鸟类包括鸡、鸭、鹅、鹌鹑等鸟类种，具体步骤包括：

(1)鸟类羊水的分段式纯化

用注射器抽取鸟类羊水后，置于4℃下10000rpm/min离心15min，取上清液备用；

将上清液过孔径大小为200kda分子量的滤膜进一步分离纯化，取过滤液备用，该步骤的分离纯化可对羊水中大分子活性蛋白进行富集浓缩。

将过滤液过孔径大小为5kda分子量的滤膜进一步分离纯化，取保留液备用，该步骤的分离纯化可去除羊水中的水、小分子盐、矿物质和脂类物质。

(2)辅料添加

在步骤(1)的保留液中添加辅料和调味料，以50rpm/min速率搅拌均匀，得预混液，其中，按重量计，辅料为终浓度为1％水溶性纤维、1％抗性淀粉和4％酵母粉提取物的混合物，所述调味料为终浓度为5％牛奶、5％食用级玫瑰精油和2％木糖醇的混合物。

(3)微胶囊包埋

在步骤(2)的预混液中添加包埋剂，然后高压均质1min，均质压力为120mpa，得微胶囊乳液，其中，按重量计，所述包埋剂为终浓度为0.1％海藻酸钠、0.1％明胶、1.5％多孔淀粉的混合物。

(4)冷冻干燥

将步骤(3)的微胶囊乳液放入-80℃冰箱冷冻保存2h，取出后放于冷冻真空干燥仪内冷冻干燥成粉末状，即得鸟类羊水蛋白粉。

实施例2

本实施例提供了一种鸟类羊水蛋白粉的制备方法，具体步骤包括：

(1)鸟类羊水的分段式纯化

用注射器抽取鸟类羊水后，置于4℃下11000rpm/min离心10min，取上清液备用；

将上清液过孔径大小为200kda分子量的滤膜进一步分离纯化，取过滤液备用，该步骤的分离纯化可对羊水中大分子活性蛋白进行富集浓缩。

将过滤液过孔径大小为5kda分子量的滤膜进一步分离纯化，取保留液备用，该步骤的分离纯化可去除羊水中的水、小分子盐、矿物质和脂类物质。

(2)辅料添加

在步骤(1)的保留液中添加辅料和调味料，以60rpm/min速率搅拌均匀，得预混液，其中，按重量计，辅料为终浓度为1.5％水溶性纤维、1.25％抗性淀粉和3％酵母粉提取物的混合物，所述调味料为终浓度为7％牛奶、8％食用级玫瑰精油和3％木糖醇的混合物。

(3)微胶囊包埋

在步骤(2)的预混液中添加包埋剂，然后高压均质2min，均质压力为90mpa，得微胶囊乳液，其中，按重量计，所述包埋剂为终浓度为0.3％海藻酸钠、0.2％明胶和1％多孔淀粉的混合物。

(4)冷冻干燥

将步骤(3)的微胶囊乳液放入-80℃冰箱冷冻保存3h，取出后放于冷冻真空干燥仪内冷冻干燥成粉末状，即得鸟类羊水蛋白粉。

实施例3

本实施例提供了一种鸟类羊水蛋白粉的制备方法，具体步骤包括：

(1)鸟类羊水的分段式纯化

用注射器抽取鸟类羊水后，置于4℃下12000rpm/min离心5min，取上清液备用；

将上清液过孔径大小为200kda分子量的滤膜进一步分离纯化，取过滤液备用，该步骤的分离纯化可对羊水中大分子活性蛋白进行富集浓缩。

将过滤液过孔径大小为5kda分子量的滤膜进一步分离纯化，取保留液备用，该步骤的分离纯化可去除羊水中的水、小分子盐、矿物质和脂类物质。

(2)辅料添加

在步骤(1)的保留液中添加辅料和调味料，以70rpm/min速率搅拌均匀，得预混液，其中，按重量计，辅料为终浓度为2％水溶性纤维、1.5％抗性淀粉和2％酵母提取物的混合物，所述调味料为终浓度为10％牛奶、1％玫瑰精油和4％木糖醇的混合物。

(3)微胶囊包埋

在步骤(2)的预混液中添加包埋剂，然后高压均质3min，均质压力为70mpa，得微胶囊乳液，其中，按重量计，所述包埋剂为终浓度为0.5％海藻酸钠、0.3％明胶、0.5％多孔淀粉的混合物。

(4)冷冻干燥

将步骤(3)的微胶囊乳液放入-80℃冰箱冷冻保存4h，取出后放于冷冻真空干燥仪内冷冻干燥成粉末状，即得鸟类羊水蛋白粉。

测定实施例1-3制备获得的鸟类羊水蛋白粉在水中的溶解度，结果如下表1所示：

表1羊水蛋白粉溶解性检测结果

表中可以看出，经冷冻干燥处理后，羊水蛋白粉更易于溶解。

为进一步验证本发明所提供的鸟类羊水蛋白粉的营养价值，本发明以实施例3制备方法为例，进行对比饲养和检测试验，过程如下：

试验分组：选取健康21日龄sd大鼠36只，适应性喂养一周后随机分为4组，每组3个重复，每个重复3只。其中组1为基础日粮对照组，组2、组3和组4分别为添加本发明制备鸟类羊水蛋白粉1％+基础日粮、2％+基础日粮和3％+基础日粮。

试验为期28天，每周称重1次，饲养期结束后抽取大鼠血液，用于血液生化指标分析，统计每组大鼠末体重和料重比等指标。

结果如表2表3所示：

表2：添加鸟类羊水蛋白粉对大鼠体重和料重比的影响

说明：同列上标不同字母表示组间差异显著(p<0.05)，下表同。

表3：添加鸟类羊水蛋白粉对大鼠血液指标影响

从上表结果可以看出：

①sd大鼠饲养期间，添加鸟类羊水蛋白粉组体重显著高于对照组，料重比显著低于对照组，饲料转化效率均优于对照组，且随浓度增加而体重增加，料重比下降，饲料转化率升高；

②本发明鸟类羊水蛋白粉饲喂后的sd大鼠总胆固醇、甘油三酯、低密度脂蛋白含量显著降低，高密度脂蛋白、白细胞介素-2和免疫球蛋白g含量显著升高，即利用该羊水蛋白粉饲喂sd大鼠可以增强sd大鼠机体体质。

同时,对羊水蛋白粉对大鼠回肠段肠道微生物多样性的影响进行检测，具体包括：于饲喂期结束后取大鼠回肠中段内容物，提取内容物微生物dna，采用miseq测序技术检测微生物16sdna遗传多样性，结果如图1所示，图中，g1、g2、g3和g4分别代表实施例3中的对照组、终浓度1％、2％和3％羊水蛋白粉添加组，图中可以看出，2％和3％质量百分比的添加组肠道微生物多样性较对照组明显增加。

实施例4

本实施例提供了一种鸟类羊水蛋白粉的制备方法，步骤包括：

(1)鸟类羊水的分段式纯化

用注射器抽取鸟类羊水后，置于4℃下10000rpm/min离心15min，取上清液备用；

将上清液过孔径大小为200kda分子量的滤膜进一步分离纯化，取过滤液备用，该步骤的分离纯化可对羊水中大分子活性蛋白进行富集浓缩。

将过滤液过孔径大小为5kda分子量的滤膜进一步分离纯化，取保留液备用，该步骤的分离纯化可去除羊水中的水、小分子盐、矿物质和脂类物质。

(2)辅料添加

设置三组实验，具体为，在步骤(1)的保留液中添加辅料和调味料，以50rpm/min速率搅拌均匀，得预混料，该三组实验的不同之处在于辅料添加，分别为终浓度为2％水溶性纤维、2％抗性淀粉和2％酵母提取物，同时用空白日粮代替辅料作为空白对照组，调味料为终浓度为2％木糖醇。

另设置三组实验，具体为，以水代替步骤(1)的保留液，添加辅料和调味料，以以50rpm/min速率搅拌均匀，得预混料，该三组实验的不同之处在于辅料添加，分别为终浓度为2％水溶性纤维、2％抗性淀粉和2％酵母提取物，同时用空白日粮代替辅料作为空白对照组，调味料为终浓度为2％木糖醇。

(3)微胶囊包埋

在步骤(2)的预混液中添加终浓度为0.1％的明胶包埋剂，然后高压均质1min，均质压力为120mpa，得微胶囊乳液。

(4)冷冻干燥

将步骤(3)的微胶囊乳液放入-80℃冰箱冷冻保存2h，取出后放于冷冻真空干燥仪内冷冻干燥成粉末状，得到8种饲料添加剂。

选取健康21日龄sd大鼠40只，适应性喂养一周后随机分成8组，每组5只，按重量计，分别在8组大鼠的日粮中添加终浓度为3％上述饲料添加剂。试验期为28天，每周称重1次，饲养期结束后，统计每组大鼠末体重和料重比等指标。

表4：不同饲料添加剂对大鼠体重和料重比的影响

上述结果表明：水溶性蛋白、抗性淀粉、酵母提取物单独作为饲料添加剂添加在基础日粮时，对大鼠的生长发育具有一定促进作用，但效果不显著。鸟类羊水由于本身含有大量优质蛋白，将其作为饲料添加剂加入基础日粮中，能够对大鼠的生长发育起到显著促进作用。当羊水与水溶性蛋白、抗性淀粉、酵母提取物共同添加时，尤其是抗性淀粉的添加，可以与羊水中的可溶性蛋白协同，调节肠道菌群，改善肠道健康，促进机体的生长。

以上所述实施例仅表达了本发明的几种实施方式，其描述较为具体和详细，但并不能因此而理解为对本发明专利范围的限制。应当指出的是，对于本领域的普通技术人员来说，在不脱离本发明构思的前提下，还可以做出若干变形和改进，这些都属于本发明的保护范围。