一种提高肉鸡骨骼发育的饲料添加剂、混合饲料及应用的制作方法

1.本发明涉及一种改善鸡体骨骼发育的饲料，具体涉及一种提高肉鸡骨骼发育的饲料添加剂、混合饲料及应用，属于微生物应用于家禽饲养技术领域。


背景技术：

2.随着集约化养殖的加快和人类对肉蛋需求的不断增加，养殖者通过基因选择及营养调配等方式极大地提升了家禽的生长速度和生产性能。而家禽超负荷的生长、生产常常伴随着腿骨的代谢异常，随之而来的是腿部疾病的频发及参差不齐的蛋品。目前，禽类骨骼问题主要通过添加无机盐及植酸酶等方式解决，但其存在生物学效价低、拮抗竞争、易污染环境、影响营养吸收等局限性。
3.目前可知维生素d能促进骨骼钙磷的吸收，维生素d缺乏会导致明显的骨骼变形、胫骨和股骨的骨骺钙化不良。结合公开的相关发明专利：如授权公告号为cn101946865b、发明名称为一种防治肉鸡腿病的预混料的发明专利，和申请公布号为cn106721422a、发明名称为含羟基蛋氨酸钙和25-羟基维生素d3的鸡饲料、混合饲料及应用的发明专利，以及现有技术可得，作为维生素的一种激素形式，维生素d是最著名的骨骼稳态调节因子。1，25-(oh)2d3是一种维生素d 的代谢产物且是维生素d3的活性代谢物，研究表明肠道对1，25-(oh)2d3的吸收优于对维生素d3的吸收，因其不受胆酸和脂肪吸收不良的影响，可促进钙、磷的有效吸收和利用，对家禽的胫骨灰分、骨强度、血钙水平有改善作用。
4.但维生素d的代谢产物1，25-(oh)2d3或25-(oh)d3的适宜浓度与钙营养水平间存在很强互作，日粮中钙水平越低，则所需维生素d的代谢产物剂量越大，而代谢产物1，25-(oh)2d3或25-(oh)d3的剂量过大会导致高血钙而抑制生长，过量的维生素d还会使肉鸡产生降低骨钙化、高钙化血症和肾衰竭的风险。
5.根据我国农业农村部第194号公告，2020年我国迎来全面“禁抗”时代，丁酸梭菌作为一类潜在的抗生素替代物，在我国已被批准添加入饲料，具有调节肠道菌群、产生营养物质、提高机体免疫力以及对多种饲用抗生素具有较强的耐受性等多种优良特性，常与抗生素配合使用，可安全、健康地促进禽类生长。但目前对丁酸梭菌的研究主要是在临床应用上，作为饲料添加剂代替抗生素的应用研究甚少。
6.因此，亟需一种提高肉鸡骨骼发育的饲料添加剂或饲料配方，降低维生素d 或其代谢产物的使用量，在提高肉鸡骨骼发育的同时，从而避免因维生素d含量过高造成的疾病风险。


技术实现要素：

7.本发明的目的是：克服现有技术中存在的不足，提供一种提高肉鸡骨骼发育的饲料添加剂、混合饲料及应用，通过丁酸梭菌复配1,25-(oh)2d3制成一种特定的肉鸡饲料添加剂，应用在饲料中提高肉鸡骨骼发育，同时还能避免因维生素d 或1,25-(oh)2d3的含量过高造成的骨钙化降低、高钙化血症和肾衰竭的风险。
8.为实现上述目的，本发明采用了以下技术方案：一种提高肉鸡骨骼发育的饲料添加剂，所述饲料添加剂包括丁酸梭菌和1,25-(oh)2d3，所述丁酸梭菌的菌落数与1,25-(oh)2d3的重量的复配配比为丁酸梭菌：1,25-(oh)2d3＝108cfu：5μg。
9.所述丁酸梭菌的菌种为丁酸梭菌hjcb998，保藏于中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心，保藏编号为cgmcc no：9386。
10.一种提高肉鸡骨骼发育的混合饲料，将所述的饲料添加剂按复配配比混合到基础日粮中，均匀混合后制成混合饲料；所述混合饲料中的饲料添加剂按每千克基础日粮的重量比例配制，其中饲料添加剂中的丁酸梭菌含量为 1
×
108～2
×
109cfu/kg，1,25-(oh)2d3含量为5～100μg/kg，且丁酸梭菌： 1,25-(oh)2d3＝108cfu：5μg。
11.按重量百分比计，所述基础日粮包括56.40％～67.20％的玉米，18.00％～26.50％的豆粕，5.45％～11.90％的膨化大豆，1.00％～5.50％的鱼粉，1.16％～2.12％的磷酸氢钙，0.12％～0.61％的氯化钠，0.60％～1.60％的石粉，0.06％～0.26％的dl-蛋氨酸， 0.01％～0.06％的l-赖氨酸和0.50％～1.50％的预混料。
12.按重量含量计，每千克的基础日粮中，所述预混料包括1200～1800iu的维生素a，1.6～2.4mg的维生素b1，3.0～5.0mg的维生素b6，0.01～0.03mg的维生素 b12，10.0～25.0iu的维生素e，0.4～1.0mg的维生素k，8.0～12.0mg的d-泛酸， 0.4～0.6mg的叶酸，30.0～48.0mg的烟酸，70.0～90.0mg的铁，40.0～70.0mg的锌， 60.0～90.0mg的锰，0.09～0.30mg的碘，6.0～9.0mg的铜，0.1～0.3mg的硒。
13.将上述的饲料添加剂以及含有饲料添加剂的混合饲料，应用在提高肉鸡骨骼发育方面上。
14.本发明的有益效果是：
15.1)本发明通过丁酸梭菌复配1,25-(oh)2d3制成一种特定的肉鸡饲料添加剂，应用在饲料中能够提高肉鸡骨骼发育，同时还能减少或避免抗生素的使用，以及减少1,25-(oh)2d3的使用量，避免因维生素d或1,25-(oh)2d3的含量过高造成的骨钙化降低、高钙化血症和肾衰竭的风险。
16.2)经实验研究表明，本发明丁酸梭菌复配1,25-(oh)2d3的饲料添加剂应用在改善早期肉鸡的生长性能、骨骼物理指标和站立能力上，均优于单独使用丁酸梭菌和1,25-(oh)2d3的效果，能够显著增加肉鸡的胫骨长度、增加钙磷比值以及增加趴卧潜伏期时长。
具体实施方式
17.下面结合具体实施例对本发明作进一步的解释说明。
18.本发明提供一种提高肉鸡骨骼发育的饲料添加剂，该饲料添加剂包括丁酸梭菌和1,25-(oh)2d3，所述丁酸梭菌的菌落数与1,25-(oh)2d3的重量的复配配比为丁酸梭菌：1,25-(oh)2d3＝108cfu：5μg。
19.按重量百分比计，基础日粮包括61.8％的玉米，22.50％的豆粕，8.45％的膨化大豆，3.00％的鱼粉，1.66％的磷酸氢钙，0.32％的氯化钠，1.10％的石粉，0.16％的dl-蛋氨酸，0.01％的l-赖氨酸和1.00％的预混料。
20.本发明的实验组包括对照组、抗生素组、丁酸梭菌复配1,25-(oh)2d3组、丁酸梭菌组、1,25-(oh)2d3组。
21.本发明以下实验组中提到的丁酸梭菌采用丁酸梭菌(clostridium butyricum)hjcb998，该菌种由浙江省湖州市安吉县培养，由动物肠道内分离得到；并于2014年6月25日，保藏于中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心，其保藏编号为cgmcc no： 9386，保藏地址：北京市朝阳区北辰西路1号院3号中国科学院微生物研究所。
22.实验组1为对照组：仅饲喂基础日粮的配方饲料，不添加任何添加剂；
23.以下为基础日粮的配方表1：
[0024][0025][0026]
上述配方表1中所含的营养指标包括12.45％的代谢能(mj/kg)、21.00％的粗蛋白、1.15％的赖氨酸、0.54％的蛋氨酸、0.99％的钙和0.53％的磷。
[0027]
按重量含量计，每千克基础日粮中提供的预混料由以下组分组成：1500iu 的维生素a，1.5mg的维生素b1，3.0的维生素b6，0.01的维生素b12，10.0iu 的维生素e，0.5mg的维生素k，10.0mg的d-泛酸，0.5mg的叶酸，30.0mg的烟酸，80.0mg的铁，40.0mg的锌，60.0～90.0mg的锰，0.18mg的碘，8.0mg的铜， 0.15mg的硒。
[0028]
实验组2为抗生素组：在基础日粮配方上添加75mg/kg金霉素；
[0029]
实验组3为丁酸梭菌复配1,25-(oh)2d3组：将饲料添加剂按复配配比混合到基础日粮中，均匀混合后制成混合饲料；混合饲料中的饲料添加剂按每千克基础日粮的重量比例配制，其中饲料添加剂中的丁酸梭菌含量为5
×
108cfu/kg， 1,25-(oh)2d3含量为25μg/kg。
[0030]
实验组4为丁酸梭菌组：在基础日粮配方上按每千克基础日粮的重量比例添加5
×
108cfu/kg的丁酸梭菌。
[0031]
实验组5为1,25-(oh)2d3组：在基础日粮配方上按每千克基础日粮的重量比例添加25μg/kg的1,25-(oh)2d3。
[0032]
对实验组1-5进行肉鸡养殖方案一的研究。
[0033]
肉鸡养殖：选取450只科宝(cobb)肉鸡，随机分为5个处理组，每组6个重复，每个重复15只鸡，在基础日粮中添加丁酸梭菌复配1,25-(oh)2d3的饲料添加剂至21天试验结束。试验结束后，每个重复取样1只鸡，每组屠宰取样6 只鸡。本实验严格按照中华人民共和国卫生部的规定进行，并经浙江农林科技大学动物护理与使用委员会批准。
[0034]
测定方法：在试验的第21天称重，结料，根据常规饲养过程中记录的数据及最终的
称重结果计算平均日增重(adg)，平均日采食量(adfi)和料重比 (f/g)。
[0035]
以下为实验组1-5的21日龄肉鸡生长性能的影响表2：
[0036][0037]
上表2中数据表示为平均值(n＝6)。
[0038]
由表2可知，丁酸梭菌复配1,25-(oh)2d3组的平均日增重高于对照组和抗生素组，但没有显著影响，表明丁酸梭菌复配1,25-(oh)2d3对早期肉鸡生长性能没有不良影响，可以进行进一步研究，且丁酸梭菌复配1,25-(oh)2d3比单独作用效果更好。
[0039]
对实验组1-5进行肉鸡养殖方案二的研究。
[0040]
测定方法：屠宰后的肉鸡，取出左胫骨，煮沸5min，以去除肌肉、结缔组织、骨骺和腓骨，并清除所有粘附的组织，骨头在室温下干燥一夜，然后用游标比例尺测量骨头的长度和宽度，骨骼重量用电子天平称重。
[0041]
采用实验组1-5中的各饲料配方，对肉鸡骨物理特征相关指标进行检测，检测结果如下表3所示：
[0042][0043][0044]
上表3中a、b、c同一行中不同小写字母上标者差异显著(p《0.05)。
[0045]
由表3可知，较对照组，丁酸梭菌复配1,25-(oh)2d3显著增加了肉鸡的胫骨长度，较抗生素组，丁酸梭菌复配1,25-(oh)2d3显著增加了肉鸡的胫骨宽度和重量，虽然胫骨重量与体重的比值没有显著差异，但丁酸梭菌复配1,25-(oh)2d3的比值仍然大于对照组、抗生素组、单独的1,25-(oh)2d3组及单独的丁酸梭菌组。表明丁酸梭菌复配1,25-(oh)2d3可改善肉鸡胫骨物理特征，有助于预防肉鸡腿病问题，且复配效果最理想。
[0046]
对实验组1-5进行肉鸡养殖方案三的研究。
[0047]
测定方法：将测定完长度、宽度、重量等物理指标的胫骨进一步烘干、炭化、灼烧，制成胫骨灰分裂解液后测定钙磷含量，具体方法参照张丽英第四版教材《饲料分析及饲料质量检测技术》。
[0048]
以下为实验组1-5对21日龄肉鸡胫骨灰分中钙磷含量的影响表4：
[0049][0050]
由表4可知，丁酸梭菌和1,25-(oh)2d3单独添加或复配均对肉鸡胫骨灰分中的钙磷含量没有显著影响，但丁酸梭菌复配1,25-(oh)2d3组的钙磷比值较其他各组均有上升，说明丁酸梭菌复配1,25-(oh)2d3对早期肉鸡骨骼矿化有潜在积极作用。
[0051]
对实验组1-5进行肉鸡养殖方案四的研究。
[0052]
测定方法：在肉鸡屠宰前5天，将每只鸡单独置于塑料盆内(50
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35
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50cm)，盆内提前注水(水深约3cm，水温约32℃)，鸡放入盆中站立不动开始计时，以鸡下蹲且腹部接触到水为止结束计时或计时5min结束，记录肉鸡在水中站立的时间，每组16个重复。
[0053]
以下为实验组1-5对21日龄肉鸡趴卧潜伏期的影响表5：
[0054][0055]
上表5中a、b、c同一行中不同小写字母上标者差异显著(p《0.05)。
[0056]
由表5可知，单独添加1,25-(oh)2d3及丁酸梭菌复配1,25-(oh)2d3显著增加了趴卧潜伏期时长，表明1,25-(oh)2d3或丁酸梭菌复配1,25-(oh)2d3对提高肉鸡站立能力有显著效果，侧面反映了1,25-(oh)2d3、丁酸梭菌与1,25-(oh)2d3的复合配方对早期肉鸡骨骼发育的积极影响，而复配组的时长比单独的1,25-(oh)2d3添加组更长，表明复配组的效果最佳。
[0057]
综上所述，丁酸梭菌与1,25-(oh)2d3的复合配方相较于普通1,25-(oh)2d3及丁酸梭菌单独添加，对生长早期的肉鸡骨骼发育有积极的促进作用。
[0058]
以上所述，仅用以说明本发明的技术方案而非限制，本领域普通技术人员对本发明的技术方案所做的其他修改或者等同替换，只要不脱离本发明技术方案的精神和范围，均应涵盖在本发明的权利要求范围当中。