用具有低血糖指数的碳水化合物增加黄烷-3-醇的生物利用度的制作方法
【专利说明】用具有低血糖指数的碳水化合物増加黄烷-3-醇的生物利用度
[0001]概括而言，本发明涉及黄烷-3-醇领域。具体地，本发明提供了增加黄烷-3-醇的生物利用度的方法。本发明的实施方案涉及在包含至少一种黄烷-3-醇的组合物中的至少一种具有小于50的血糖指数的碳水化合物用于增加所述黄烷-3-醇的生物利用度的用途。
[0002]黄烷-3-醇(包括例如“儿茶素”)存在于多种食品来源例如可可、茶和苹果中。多种流行病学体外和体内研宄已经将这些化合物的存在与健康促进作用例如抗氧化和抗炎益处相关联(Aron, P.Μ.等人，2008，Molecular Nutrit1n&Food Research 52,79 - 104)。
[0003]一般而言，黄烷-3-醇经受几种II期酶的作用，从而导致与甲基(儿茶酚-O-甲基转移酶-C0MT)、硫酸醋基(磺基转移酶-SULT)和葡糖醛酸基(glucuronyl group)(尿苷-5’ - 二磷酸葡糖醛酸基转移酶(glucuronosyl transferase)-UDPGT)缀合。然而，已经报道EGCG(绿茶中存在的主要黄烷-3-醇)主要以其天然形式存在于人血浆中(Williamson 等人，2011，Mol Nutr Food Res 55,864 - 873)。
[0004]例如，绿茶黄烷-3-醇的口服生物利用度低，导致在人体中全身黄烷-3-醇水平低于在体外系统中测定的有效浓度许多倍(Lambert等人，2007, Mol.Pharmaceutics4，819 - 825)。文献中已经报道了增加来自绿茶的黄烷-3-醇的生物利用度的许多方法，例如与存在于黑胡椒中的生物碱胡椒碱组合施用茶和使EGCG过乙酰化(peracetylat1n)。另一种改善黄烷-3-醇吸收的策略是在禁食状态中施用，然而，重要的是要注意，一些人体研宄已经证实，高剂量的绿茶制品可能具有潜在毒性(Chow等人，2005, Clinical CancerResearch 11, 4627 - 4633 ；Bonkovsky, 2006, Ann Intern Med 144,68 - 71)。
[0005]因此，本领域中对于改善黄烷-3-醇的吸收、同时避免黄烷-3-醇的超剂量给予(overdosing)的可选方法存在需求。
[0006]本说明书中任何对现有技术的提及均不应理解为承认所述现有技术是广泛已知的或者形成本领域公知常识的一部分。
[0007]因此，本发明的目的是改善本领域的状态，特别是提供施用黄烷-3-醇、同时确保有效吸收和高生物利用度的方法，或至少提供本领域已知方法的有用的供替代选择的方法。
[0008]发明人令人惊讶地发现，本发明的目的能通过独立权利要求的主题来实现。从属权利要求进一步发展了本发明的理念。
[0009]因此，本发明提供了用于增加黄烷-3-醇的吸收的新方法。根据本发明，这通过共同施用这些化合物与具有小于50的血糖指数的碳水化合物得以实现。
[0010]本说明书中所用的措词“包含”、“含有”和类似措词不应被解释为排他性的或穷尽性的含义。换言之，它们用于意指“包括、但不限于”。
[0011]本发明的发明人已经使用Caco-2细胞模型进行了广泛的体外实验，并且能证实共同施用黄烷-3-醇与某些碳水化合物能增加黄烷-3-醇的吸收。
[0012]已经发现使用具有小于50的血糖指数的碳水化合物特别良好地起作用。
[0013]血糖指数(GI)是相对于消耗纯葡萄糖而言消耗特定类型的食物后血液中葡萄糖水平上升多快的量度。葡萄糖具有100的血糖指数。
[0014]血糖指数的测定对于本领域技术人员而言是众所周知的。例如，可以如下测定食物的血糖指数:在12小时禁食并摄入典型地具有50g可利用的碳水化合物的食物后测定2小时血糖响应曲线下增加面积(AUC)。将测试的食物的AUC除以葡萄糖的AUC并且乘以100 (例如，参见 Brouns F.等人，2005，Nutr Res Rev 18(1): 145 - 71) ο
[0015]因此，本发明部分涉及在包含至少一种黄烷-3-醇的组合物中的至少一种具有小于50的血糖指数的碳水化合物用于增加所述黄烷-3-醇的生物利用度的非治疗用途。
[0016]在另一个方面，本发明涉及包含至少一种具有小于50的血糖指数的碳水化合物和至少一种黄烷-3-醇的组合物，其用于治疗或预防能通过黄烷-3-醇施用被治疗或预防的障碍。
[0017]图1显示了可以形成本发明中所述的混合物的黄烷-3-醇(A)的通式和碳水化合物的通式。
[0018]图2显示了将250 μ M (-)-表JL茶素与100mg/ml不同的碳水化合物一起温育2h后基底室中的(-)_表儿茶素浓度(与对照相比)。数据以平均值土标准误差的形式给出。
[0019]因此，本发明部分涉及在包含至少一种黄烷-3-醇的组合物中的至少一种具有小于50的血糖指数的碳水化合物用于增加所述黄烷-3-醇的生物利用度的非治疗用途。
[0020]可以将生物利用度定义为能被吸收的且对于使用或贮存而言可利用的所施用物质的比例。
[0021]本发明还涉及包含至少一种黄烷-3-醇的组合物，其用于治疗或预防能通过黄烷-3-醇施用被治疗或预防的障碍，其中所述组合物还包含用于增加所述黄烷-3-醇的生物利用度的至少一种具有小于50的血糖指数的碳水化合物。
[0022]本发明还涉及至少一种黄烷-3-醇在制备用于治疗或预防能通过黄烷-3-醇施用被治疗或预防的障碍的组合物中的用途，其中所述组合物还包含用于增加所述黄烷-3-醇的生物利用度的至少一种具有小于50的血糖指数的碳水化合物。
[0023]能通过黄烷-3-醇施用被治疗或预防的障碍是本领域技术人员众所周知的。能通过黄烷-3-醇施用被治疗或预防的障碍的实例可以选自心血管疾病、2型糖尿病、超重、月巴胖、炎性障碍、认知功能损害(cognitive impairment)和氧化性皮肤损伤(oxidative skindamage)。
[0024]发明人已经使用Caco-2细胞模型研宄了如果将黄烷_3_醇与碳水化合物共同施用如何影响黄烷-3-醇吸收。
[0025]发明人发现，如果将黄烷-3-醇与至少一种具有小于50的血糖指数的碳水化合物共同施用，黄烷-3-醇的吸收能被显著提高。
[0026]具有小于50的血糖指数的碳水化合物的非限制性实例包括:乳糖、果糖、半乳糖、木糖醇、甘油、山梨醇、包括D-山梨醇、拉克替醇、异麦芽糖醇、甘露醇、赤藓糖醇、甘草甜素、罗汉果苷、甜菊糖苷(Stev1l glycoside) ο
[0027]在发明人进行的实验中，木糖醇、半乳糖、D-山梨醇或其组合产生了特别好的结果O
[0028]木糖醇具有的GI为7。半乳糖具有的GI为23。D-山梨醇具有的GI为4。
[0029]因此，至少一种碳水化合物可以具有小于25、例如小于10的血糖指数。
[0030]具有小于25的血糖指数的碳水化合物的非限制性实例包括:半乳糖、木糖醇、甘油、山梨醇、包括D-山梨醇、拉克替醇、异麦芽糖醇、甘露醇、赤藓糖醇、甘草甜素、罗汉果苷、甜菊糖苷。
[0031]所述碳水化合物可以是半乳糖。或者，所述碳水化合物可以是D-山梨醇。所述碳水化合物也可以是木糖醇。
[0032]这种吸收的增加清楚地表明，如果与测试的碳水化合物共同施用，黄烷-3-醇的生物利用度被改善。
[0033]通过经与多酚共同施用改善黄烷-3-醇的生物利用度，所述黄烷-3-醇干预的有益改变或治疗效果的能力被改善。
[0034]因此，本发明的黄烷-3-醇与至少一种具有小于50的血糖指数的碳水化合物的共同施用增加所述黄烧-3-醇的生物功效(b1efficacy)。
[0035]例如，非治疗用途可以是美容用途。
[0036]黄烷-3-醇也可以从天然来源提供。它们可以以来自这些天然来源的提取物的形式或者以作为食品成分的天然来源本身的形式(加工的或未加工的)被提供。
[0037]例如，黄烷-3-醇可以来源于绿茶、白茶(white tea)、野生植物果实，特别是浆果、苹果、可可豆或其它含有黄烷-3-醇的果实。
[0038]绿茶是全世界位于水之后最常消耗的饮料，其是黄烷-3-醇的非常好的来源。尽管绿茶中存在的黄烷-3-醇的量因影响植物代谢的因素例如光、降雨、温度、营养物可利用性、叶龄和遗传组成的不同而异，但是它们通常占新鲜绿茶叶的干物质的16-24%。由于黄烷-3-醇典型地在绿茶制备期间是稳定的，所以它们是商品绿茶提取物的主要部分。
[0039]主要的绿茶黄烷-3-醇是儿茶素，SP (+)_儿茶素(C)及其立体异构体和四种衍生物，即(-)_表儿茶素(EC)、(-)_表掊儿茶素(EGC)、(-)_表掊儿茶素-3-掊酸酯(EGCg)、(-)-表儿茶素-3-掊酸酯(ECg)。
[0040]黄烷-3-醇展现出多种健康益处，它们常与其抗氧化活性相关，包括清除活性氧和氮种类、游离金属螯合、抑制转录因子和抑制氧化酶例如脂氧化酶和环加氧酶(cycloxygenase)。
[0041]在一个实施方案中，黄烷-3-醇来自绿茶。或者，也可以使用黄烷-3-醇的其它来源。
[0042]绿茶或其它植物来源可以以新鲜的、浓缩的或干燥的物质形式、例如风干的或冻干的物质形式被使用。
[0043]例如，本发明中所用的黄烷-3-醇可以选自(+)_儿茶素(C)、(-)_表儿茶素(EC)、掊儿茶素(gallocatechin) (GC)、掊儿茶素掊酸酉旨(gallocatechin gal late) (GCG)、(-)-表掊儿茶素(EGC)、(-)_表掊儿茶素-3-掊酸酯(EGCg)、(-)_表儿茶素-3-掊酸酯(ECg)或其组合。
[0044]在一个实施方案中，本发明中所用的黄烧-3-醇是(-)_表儿茶素和/或(-)_表儿茶素-3-掊酸酯。
[0045]组合物中黄烷-3-醇的量取决于其预期的应用。
[0046]在治疗应用中，