α-乳糖在制备防治急性胰腺炎的保健食品中的应用
【技术领域】
[0001]本发明涉及α -乳糖在制备防治急性胰腺炎的保健食品中的应用，属医药和保健食品领域。
【背景技术】
[0002]乳糖是由一分子葡萄糖和一分子果糖通过糖苷键结合形成的一种二糖，其主要存在于哺乳动物乳汁当中，是维持婴幼儿营养健康的必要成分之一。研究表明，乳糖能够诱导上皮细胞抗菌肽LL-37的表达，揭示了乳糖的免疫调节功能。另外，低发酵寡聚糖、二糖、多元醇饮食可有效减少肠易激综合征患者功能性胃肠症状，这说明乳糖在提供营养的同时对炎症也具有一定的调节作用。
[0003]急性胰腺炎作为常见的消化疾病之一，其具体的发病机制尚未完全明确。为更有效地预防疾病的发生、开发在临床上能更有效地治疗急性胰腺炎的药物，使急性胰腺炎避免发展成重症急性胰腺炎甚至胰腺癌，从而减少胰腺炎的病死率以及并发症发生率，开发防治急性胰腺炎的新药物或保健食品显得尤为重要。
【发明内容】
[0004]本发明提供了防治急性胰腺炎的药物或保健食品，有效成分是α -乳糖。
[0005]在本发明的一种实施方式中，α -乳糖的质量分数为1_10%。
[0006]在本发明的一种实施方式中，α -乳糖的质量分数为10%。
[0007]在本发明的一种实施方式中，所述保健食品是一种五谷杂粮营养保健食品，由小米粉、玉米淀粉、水解蛋白粉、α-乳糖、蜂蜜、乳清蛋白混合得到，按质量比计，各组分含量为:小米粉20份、玉米淀粉10份、水解蛋白粉12份、α -乳糖2份、蜂蜜I份、乳清蛋白10份。食用时加开水冲泡即可。
[0008]所述药物的剂型可以是片剂、颗粒剂、胶囊剂、溶液剂、乳剂、混悬剂等。
[0009]所述α -乳糖通过降低胰腺组织水肿、血清淀粉酶、胰腺组织髓过氧化物酶的水平而降低急性胰腺炎的炎症反应。
[0010]所述α -乳糖通过抑制炎症介质，如MCP-1和TNF- α，的释放而发挥抗急性胰腺炎的作用。
[0011 ] 所述α -乳糖通过抑制ERK1/2-NF- κ B炎症信号通路相关信号通路的激活从而发挥抗急性胰腺炎的作用。
[0012]所述α -乳糖通过减少炎症细胞的浸润而发挥抗急性胰腺炎的作用。
[0013]所述α -乳糖通过调节免疫细胞如中性粒细胞、巨噬细胞在胰腺组织中浸润发挥抗急性胰腺炎的作用。
[0014]本发明中α -乳糖对雨蛙素诱导的急性胰腺炎小鼠发挥保护作用，降低雨蛙素诱导的小鼠胰腺炎症反应。该物质能够通过降低急性胰腺炎过程中胰腺组织水肿、血清淀粉酶、胰腺组织髓质过氧化物酶MPO水平从而降低炎症反应；同时，该物质可以降低胰腺组织和胰腺腺泡细胞中炎症介质，如MCP-1和TNF- α水平；此外，该物质具有抑制细胞外调节蛋白激酶(ERK1/2MAPK)及核因子kB(NF-kB)蛋白信号通路的激活，减少免疫细胞如中性粒细胞、巨噬细胞在胰腺组织中浸润，对急性胰腺炎具有显著的保护作用，该物质可用于制备保健食品用于急性胰腺炎的防治，降低临床急性胰腺炎的发生率和炎症程度。
【附图说明】
[0015]图1采用血清淀粉酶试剂盒和髓过物氧化酶试剂盒分别测定的小鼠血清中的淀粉酶(AMY)和胰腺组织中髓过物氧化酶(MPO)水平，比较α-乳糖处理组与炎症模型组的炎症程度。其中，AMY表示血清淀粉酶，MPO表示髓过物氧化酶，CON表示对照组，AP表示炎症模型组，Pro表示α-乳糖预防处理组，The表示α-乳糖治疗处理组。*:炎症模型组与对照组相比P < 0.05，#: α -乳糖处理组与炎症模型组相比P < 0.05。
[0016]图2采用HE染色的方法观察胰腺组织的病理变化。其中，CON表示对照组，AP表示炎症模型组，Pro表示α -乳糖预防处理组，The表示α -乳糖治疗处理组。
[0017]图3采用酶联免疫吸附法测定小鼠胰腺组织匀浆上清液中的炎症因子释放水平，比较α-乳糖处理组与炎症模型组的炎症程度。其中，MCP-1表示趋化蛋白，TNF-α表示肿瘤坏死因子，CON表示对照组，AP表示炎症模型组，Pro表示α -乳糖预防处理组，The表示α -乳糖治疗处理组。*:炎症模型组与对照组相比P < 0.05，#: α -乳糖处理组与炎症模型组相比P <0.05。
[0018]图4采用Western Blot方法检测α -乳糖抑制雨蛙素刺激的胰腺腺泡细胞中ERK1/2MAPK及NF- κ B的表达。其中，CON表示未经处理的细胞，Cae表示雨蛙素处理的细胞，Cae+lac表示同时用雨蛙素和α -乳糖处理细胞，Lac表示用α -乳糖单独处理细胞。
[0019]图5采用酶联免疫吸附法测定小鼠胰腺腺泡细胞，血液中提取的中性粒细胞及腹腔中提取的巨噬细胞中的炎症因子释放水平，比较α-乳糖处理组与炎症模型组的炎症程度。其中，MCP-1表示趋化蛋白，TNF-α表示肿瘤坏死因子，CON表示未经处理的细胞，Cae表不雨娃素处理的细胞，Cae+lac表不同时用雨娃素和α -乳糖处理的细胞；LPS表不LPS分别处理的中性粒细胞和巨噬细胞，LPS+Lac表示LPS与α -乳糖分别处理的细胞。*:炎症模型组与对照组相比P < 0.05，#: α -乳糖处理组与炎症模型组相比P < 0.05。
[0020]图6采用免疫组化方法检测小鼠胰腺组织中的中性粒细胞和巨噬细胞的浸润水平。其中，CON表示对照组，AP表示炎症模型组，Pro表示α -乳糖预防处理组，The表示α-乳糖治疗处理组。
【具体实施方式】
[0021]实施例1急性胰腺炎模型建立
[0022]将8周龄雌性BALB/C小鼠随机分成对照组(CON)、急性胰腺炎组(AP)、α -乳糖预防组(Pro)和α-乳糖治疗组(The)，采用腹腔注射的方式给对照组小鼠注射生理盐水(0.85%),注射量200 μ L/20g小鼠体重，采用腹腔注射的方式给急性胰腺炎组、α -乳糖预防组、α -乳糖治疗组小鼠注射雨蛙素，注射量50 μ g/kg ;生理盐水和雨蛙素都是每小时注射一次，连续注射10次。预防组在注射雨蛙素前三天饮用100mg/kg的α -乳糖水溶液并在第一次注射雨蛙素前0.5h腹腔注射100mg/kg的α -乳糖溶液，α -乳糖溶液浓度约为lOmg/mL ;治疗组在最后一次注射雨娃素后Ih腹腔注射100mg/kg的α -乳糖溶液。最后一次注射完成I小时后，将小鼠处死，快速提取胰腺组织并将其平均分成三份，一份包在锡纸中称量其湿重，另外两份分别置于灭菌的EP管中并置于液氮罐中，最后放置在-80°C冰箱保存。采用摘眼球的方式进行取血，室温下静置2h后3000g，4°C离心15min，小心吸取血清并保存至-80°C冰箱用于测血清淀粉酶。
[0023]实施例2 α -乳糖降低急性胰腺炎过程中血清淀粉酶(AMY)的水平
[0024]淀粉酶能水解淀粉生成葡萄糖、麦芽糖及糊精，在底物浓度已知并且过量的情况下，加入碘液与未水解的淀粉生成蓝